el trabajo debe de ser redactado en pasado. ¡ATENTAS! longitud de onda
absorbancia
400
0,263
420
0,15
450
0,115
470
0,153
480
0,221
500
0,287
520
0,325
550
0,298
570
0,2
580
0,276
600
0,228
620
0,16
640
0,091
EXTRACCION DE ADN MEDIANTE EL USO DE KITS COMERCIALES MATERIALES ● ● ● ● ● ● ● ●
Guantes. Bata. Gafa Gafass de de lab labor orat ator orio io.. Guardia Guardianes nes para para desec desecho ho de cortocorto-pun punzan zantes tes.. Canecas Canecas de bolsa roja para para el desecho desecho de químicos químicos y biológicos. biológicos. Aguja Aguja sist sistem ema a vacu vacuta tain iner er.. Cami Camisa sa sist sistem ema a vac vacut utai aine ner. r. Tubo Tubo vacu vacuta tain iner er tapa tapa lila lila..
● ● ● ● ●
Toru Torund ndas as de Algo Algodó dón. n. Torniquete. Toal Toalla lass abs absor orbe bent ntes es.. Tubos de de 1,5 ml (micro (microtubos tubos)) para Microc Microcentrif entrifuga, uga, estérile estériless y libres libres de DNasa. DNasa. Punta ntas nuevas y estériles con capacidad para tomar micro-volúmenes entre 1 μl y 1000 μl. ● Column Columna a en tubos tubos de de recol recolecc ección ión PureLi PureLink. nk. ● Tubo Tuboss de reco recole lecc cció ión n Pure PureLi Link nk..
REACTIVOS ● ● ● ● ● ● ● ● ●
Desinfectante (Etanol al 70% o Alcohol Yodado) Etanol 96% - 100% Buffer de Lisis/Adsorción (Genomic Lysis/Binding Buffer) Buffer de Digestión (Genomic Digestion Buffer) Buffer de lavado 1 (Genomic Wash Buffer 1) Buffer de lavado 2 (Genomic Wash Buffer 2) Proteinasa K (20mg/ml) RNasa A diluida en Tris-HCl 50 mM, pH 8.0, EDTA 10 mM Buff Buffer er Genó Genóm mico ico de eluc elució ión n (10 (10 mM Tris Tris-H -HC Cl, pH 9.0, 9.0, 0.1 0.1 mM EDT EDTA) (Gen (Genom omic ic Elut Elutio ion n Buffer) ● Agua estéril con pH 7,0 – 8,5
PROCEDIMIENTO La mues muestr tra a de ADN ADN que que se util utiliz izo o dura durant nte e todo todo el proc proced edim imie ient nto o es sang sangre re huma humana na.. Lo prim primer ero o que se hizo fue adicionarle 20 microlitos (20μl) de proteinasa K a 200 μl de la muestra de sangre, para pod poder degradar los lipidos y las proteinas. Esta solucion se agito durante unos brev breves es minu minuto toss en en un NO ME ACUE ACUERD RDO O EL NO NOMB MBRE RE DEL DEL APA APARA RATO TO,, CREO CREO QU QUE E ES UN VORTEX . Luego a la mezcla ant anterior se le adiciono 20μl de RNasa A, la cual corta el RNA del DNA. La proteinasa K junto a la RNasa A, degradan la sangre. La solucion se mezclo en el vortex durante 10 segundos energicamente. Luego esta, se dejo en incubacion durante 2 minutos. Cumplido el tiemp empo, se adiciono 200μ 00μl del reactivo Lysis/binding buffer y se paso a mezclar en el vortex duran urantte 10 segundos, hasta que se obtuvo una solucion homoge ogenea. El buffer amortiguó el pH, permitiendo que la solucion se uniera a la columna(NO (NO ESTOY TOY MUY SEGURA URA DE ESTO). Luego de haber adicionado el buffer, se incubo la mezcla durante 10 minutos a una temper peratura de 55ºC par para promover la digestion. Una vez terminado el tiempo de incu incuba baci cion on se le adic adicio iono no 200μ 200μll de etan etanol ol puro puro (96(96-10 100% 0%), ), para para lueg luego o mezc mezcla larl rlo o en el vort vortex ex.. El etanol hace una lisis en el ADN, rompe los globuos rojos. Se incubo la solucion a 55ºC y se aplico vortex ocasionalmente hasta que se completo el lisado (1-4 h).
Para la separacion de los componentes celulares no deseados y purificaicon del ADN, el procedimiento fue:: En un tubo de recoleccion con la columna incluida en el Kit PureLink se adicioni toda la solucion que se preparo anteriormente. la columna se centrifugo a 10,000 x g durante un minu minuto to a temp temper erat atur ura a ambi ambien ente te.. El tubo tubo de reco recole lecc ccio ion n debi debio o de ser ser dese desech chad ado o y ser ser camb cambia iado do por por otro otro tubo ubo lim limpio pio de rec recolec olecccion ion sumin uminis istr trad ado o por por el kit kit. Despu espues es se proc proced edio io a adic adicio iona narl rle e 500μl de buffer de lavado (Washing buffer 1) a la columna, el buffer lo que va a hizo fue limpia piar los acidos nucleicos para que la columna no estuviera manchada ada de color rojo. Despues se centrifugaol a columna a una temperatura ambiente a 10,000 x g durante un minuto. Nuev Nuevam amen entte se desc descar arto to el tubo tubo de rec recolec olecccion ion y se coloc oloco o otro otro tubo tubo del del kit kit. Lueg Luego, o, se adic adicio iono no 500μl de buffer de lavado 2 (washing buffer 2) a la columna, se centrifugo durante 3 minutos a max maxima ima velo veloccidad idad a temp temper erat atur ura a ambi ambien ente te.. Se desc descar arto to nuev nuevam amen entte el tubo ubo de reco recole lecccion cion y luego se puso la columa sobre un nuevo microtubo de 1,5ml esteril (El microtubo no fue sumi sumini nist stra rado do por por el kit) kit).. Se proc proced edio io a dici dicion onar ar 100μ 100μll de buff buffer er Geno Genomi mico co de Eluc Elucio ion n Pure PureLi Link nk a la columna, el buffer permitio que el ADN se soltara de la columna. La solucion restante se debi debio o inc incubar ubar a tempe empera rattura ura ambi ambien ente te dura durant nte e un minu minutto y post poster erio iorm rmen entte ser ser centr entrif ifug ugad ada aa una velocidad maxima durante un minuto a la misma temperatura. En este momento el tubo cont conten enia ia ADN ADN genóm genómic ico o puri purififica cado do.. Se remo removi vio o y desc descar arto to la colu column mna. a. Post Poster erio iorm rmen ente te se debi debio o proceder a alicuotar y almacenar el ADN purificado a -20ºC, para luego ser utilizado en un gel de electroforesis.
ELECTROFORESIS
Materiales para las soluciones stock de la electoforesis Agua destilada EDTA dihidratado 3.72 g Ácido Bórico 2.5 g Tris Base 54 g SYBR GREEN I 1μl Dimetilsulfoxido anhidro (DMSO) 99μl
Materiales para la electroforesis
-Caja de Therazaki -Agarosa 2g -Solución de trabajo Buffer TBE 0.5X -ADN 10μl -Buffer de carga 5X Green GoTaq 2.5μl -SYBR GREEN I 1 μl -Marcador de peso molecular GeneRuler 100 bp Plus para ADN 2.5 μl
Equipos -Cámara electroforética -Microondas -Balanza Analítica -Fuente de poder 20-150V -Cámara electroforética -Transiluminador UV
Procedimiento inicialmente se preparó aró 1L de Solución Stock 5x Buf Buffer TBE con 3.72 g de EDTA dihidrata atado y disolviendolo en 20 ml de agua destilada después de est esto en un recipiente con capacidad de 1L se adiciono 2.5 g de Ácido Bórico y se mezcló con un poco de agua destilada ada para disolver parc parcia ialm lmen ente te..Des Después pués a est esta mez mezcla cla se le adic adicio iono no 54 g de Tris ris Base Base y los los 20 ml de la soluc olució ión n EDTA 0.5 M, finalmente se aforó con agua destilada hasta completar 1L de solución. para la Preparación de 1L de Solución de Trabajo TBE 0.5x se realizó una dilución 1:10 midiendo 100 ml de la solución stock en una probeta para Transferir los 100 ml de volumen a un balón volumétrico o beaker y aforar hasta 1L con agua destilada (900 ml agua destilada). para la Solución Stock SYBR GREEN I se realizó una solución 1:100 a partir del reactivo original 10.000X para preparar un volumen de 100 μL y se Adiciono 1 μL de SYBR GREEN I (Lozan) en un vial plástico de 1.5 ml para mezclarlo con 99 μL de DMSO DMSO al 100% (anhidro). para para la elec electtrofo rofore ressis se ret retiró iró la tapa tapa Supe SuperS rSaf afe e que que conti ontien ene e los los cone conect ctor ores es para para los los cabl cables es de los electrodos tipo barra.despues se Coloco la bandeja en la cámara electroforét orétiica en la posi posicción ión para para serv servir ir el gel gel como omo se mues muesttra en la Figur igura a 3, aseg asegur urán ándo dosse de que que los los empa empaqu ques es de presión naranja queden contra la pared de la cámara y en posición perpendicular a los electrodos. para la preparación se preparó 50 ml de aga agarosa al 2%, se pesa 1 g de agarosa se adiciono a un Erlenmeyer y se aforó con Buffer TBE 0.5X hasta completar un volumen de 50 ml. luego se Calentó o en el microondas durante 30 segundos y se repitio este ciclo 3 o 4 veces hasta que la mezcla se disolvió completamente, evitando la formación de burbujas, después se enfrió el gel de agarosa a 60ºC antes de servir en la bandeja, mientras que se enfríaba la agarosa osa se colocó el peine de 1 mm en la bandeja como se muestra en la Figura 2,
numeral 2. para mas tarde Vaciar aproximadamente 28 ml de la solución de agarosa en el molde para obtener un gel de 5 mm de espesor, si se usa la cámara Owl B1A. luego seSo seSolilidi difficóo icóo a tem tempera perattura ura ambi ambien ente te dura durant nte e 30-4 30-45 5 minu minuttos para para que que se forma ormara ran n ls poz pozos. os. Una vez se solidificado el gel se retiró la bandeja de la cámara para cambiar a posición de corrido como se muestra en la Figura 3, asegurándose que los empaques de presión queden en posi posici ción ón para parale lela la a los los elec electr trod odos os.. para para lueg luego o Llen Llenar ar la cáma cámara ra elec electr trof ofor orét étic ica a con con TBE TBE 0.5X 0.5X hasta cubrir el gel con apr aproximadamente un 1mm de solu olución arriba de la matriz de agarosa y lueg luego o se ret retiro iro cuid cuidad ados osam amen ente te el pein peine e de una una form forma a firme irme y rápi rápida da,, y leva levant ntan ando do lent lentam amen entte hacia arriba de la bandeja de gel para evitar daños a los pozos.
FIGURA 2 FIGURA 3
para la siembra de muestras, en una caja de Therazaki, se mezcló en un pozo 10 μL de muestra de ADN con 2 μL de Buffer de carga 5X y a esta mezcla se le adiciono 0.5 μL de Solución Stock SYBR GREEN I (1:100), mezclándolo bien y aspirando una y otra vez con la micropipeta, después se sembraron los 12.5 μL en el pozo del gel. para el Marcador de Peso Molecular, se mezcló 2.5 μL de marcador con 0.5 μL de buffer de carga 5X Green GoTaq Flexi Buffer, se Adiciono 0.5 μL de solución stock SYBR GREEN I (1:100) y se sembraron los 3.5 μL en el pozo del gel. En el primer carril se sembraron los 3.5μl la mezcla de Marcador-Buffer de carga- SYBR GREEN I, ubicando cuidadosamente la punta en medio del pozo sin romperlo, como se muestra en la figura 3. En los siguientes carriles sembrar los 12.5 μl de la mezcla ADN- Buffer de carga- SYBR GREEN I Figura 4. para las condiciones de corrido se colo olocó la tapa SuperS erSafe deslizándose sobre la cámara, esta tapa lleva los conectores a la fuente de poder y debe estar conectada a los cables de alimentación que tienen los electrodos tipo barra, se conecta el otro extremo de la fuente de alimentación y se llevó a una toma elé eléctrica adecuada, completando el circuito. despues se conecto la fuente de poder a 150 V, se monitorio cuidadosamente el gel para evitar que la muestra se desvíe a otro carril, Luego se dejo correr el gel durante aproximadamente una hora hora,, cuand uando o el gel gel haya haya term termin inad ado o de corr correr er y el azul azul de brom bromof ofen enol ol en el buff buffer er de carg carga a haya haya migr migran ando do la dis distanc tancia ia requ requer erid ida a o hast hasta a el fina finall del del gel, gel, se apag apaga a la fuen fuentte de pode poderr y se desl desliz izó ó la tapa tapa para para desc descon onec ecta tarr de la ener energí gía. a.pa para ra desp despué uéss remo remove verr cuid cuidad ados osam amen ente te la band bandej eja a que que
cont contie iene ne el gel, gel, esta esta band bandej eja a perm permititio io visu visual aliz izar ar perf perfec ecta tame ment nte e el gel gel en un tran transi silu lumi mina nado dorr UV sin necesidad de remover el gel de la bandeja. para para la vis visuali ualiza zacción ión de los los ampl amplif ific icad ados os se -Lev -Levan antó tó la tapa tapa ámba ámbarr y se coloc oloco o la band bandej eja a con el gel gel en el área área de filtr iltro, o, se ence encend ndió ió el trans ransililum umin inad ador or y se prog progra ram mó a una una inte intens nsid idad ad media edia,, para finalmente observar la formación de bandas discretas.
CUANTIFICACION CUANTIFICACION DE PROTEINAS LUEGO DE PURIFICACION Y SINTESIS DE PROTEINAS Elementos - Albumina a una concentracion de 8mg/ml - Agua destilada - 2 ml Reactivo Biuret - Espectrofotometro - Micropipetiador que se me olvida???jajajaja jum! adriana yo creo que aqui va los materiale ales: sln problema de ovoalbumia.. y todas las demas soluciones. Ximena
PROCEDIMIENTO Inic Inicia ialm lmen entte se prep prepar ara a una una muest uestra ra blan blanco co para para indi indica carr la abs absorba orbanc ncia ia real real de la prot protei eina na,, el blan blanco co esta esta compu ompues estto de 0.5 0.5 ml de agua agua,, util utiliz izad ado o com como solve olvent nte e y 2 ml de reac reacti tivvo biur biuret et,, en una cubeta con el fin de que sea la muestra control. Lueg uego la muestra tiene 0.5 ml de agua con la proteina (albumina en polvo) y 2 ml del reactivo biuret; se espera aproximadamente 20 minutos para que …....y se procede en el espectrofotometro, a mirar la absorbancia de la proteina a diferente ntes medidas de longitud de onda, con ello se mira a que longitud de onda se da la mayor absorbancia. TABLA …. Luego se hacen dilusiones - En la primera se utiliza 2 ml del reactivo biuret y 0.5 ml del albumina(BSA) - En la segunda se emplea 2 ml del reactivo y 1.5 ml del BSA - En la tercera muestra se agrega 2 ml del mismo reactivo y 2.5 ml del BSA. A las tres muestras se les mide la absorbancia a la longitud de onda mayor (550 l) hallada con la muestra inicial
va en resultados para la primera muestra se da una absorbancia de 0.41, para la segunda muestra se da una absorbacia de 0.087 y para la tercera de 0,175 para la muestra problema se debe considerar la concentracion, la cual se debe hallar, con una absorbacia de 0.039 a una longitud de onda de 550
no se para que nos dan 2 concentracioñnes mas . creo no estoy segura niveles de absorbancia ximena
x1 0,081 x2 0,004
X1= 0,081 X2= 0,004 X3= 0,039 ya toca hacer los calculos con v1c1=v2c2 y tambien la curva de calibracion y absorvancia vs concentracion
adriana tengo unos datos que no me acuerdo de que son, 0.41 0,087 0,175 al parecer absorbancia pero no estoy segura ADRIANA A SU SU CORREO LE ENVIE LAS FORMULAS FORMULAS DE LA C2 MIRE SI SI ESTAN BIEN BIEN HECHAS Y DE SER ASI, VERIFIQUE RESULTADOS. XIMENA
1. introduccion 2. materiales y procedimiento 2.1 extraccion de ADN 2.2 electroforesis 2.3 cuantificacion de proteinas 3. resultados
4. discucion (analisis) 5. conclusion 6.referencia bibliografica,
1.INTRODUCCION la extraccion de ADN, la elect ectroforesis en gel de agaros arosa a y la cuantificacion de proteinas son procesos que van ligad gados entre si, un ejemplo plo claro de ello seria para hacer un diagnostico de una enfermedad. aunque depende de un buen procedimiento en la extraccion y en la elec electtrofo rofore ressis un buen buen resu result ltad ado o para para busc buscar ar lo que que se nec necesit esita. a.pa para ra llev llevar ar a cabo abo cada cada una una de estas tecnicas se deben de tener conocimientos previos como por ejemplo la estructura ura del ADN, su polaridad y propiedades, tambien se debe de tener en cuenta como se elabora un gel de elec electr trof ofor ores esis is y la cant cantid idad ad de reac reactitivo voss y mate materi rial al gene genetitico co a util utilliliza zar, r, en la cuan cuantitififica caci cion on de prot protei eina nass es impo import rtan antte saber aber prep prepar arar ar la mues muestr tra a blan blanco co y la mues muestr tra a que que se esta esta anal analiz izan ando do,, lo mas importante en este paso es la secuencia que debe de tener cada una de las soluciones.
PALABRAS CLAVES: extraccion de ADN, electrforesis, cuantificacion de proteinas
3. RESULTADOS En la extraccion del ADN el resultado final es una solucion que contiene el ADN, esta solucion es la que se utilizo en el gel de electroforresis. En el gel de electrorforesis por medio de las bandas que fueron visibles a traves de luz ultravioleta, se pudo determinar la calidad y cantidad del ADN con el que estabamos trabajando. Este resultado se puede concluir a partir de que tan visible es la muestra en cada carril de electroforesis. en la cuantificacion de proteinas se se puede saber como el nombre del procedimiento especifica, especifica, la cantidad de proteina que hay en una solucion. EN ESTE PUNTO HAY QUE ANEXAR EL CALCULO DE LA CONCENTRACION QUE NO SE SABIA Y LAS GRAFICAS Q HAY Q HACER
4. DISCUSION Dependiendo de la nitidez y tamaño que tiene la banda de electroforesis podemos concluir el resultado de la extraccion de ADN y del gel de electroforesis. Es solo en este momento donde se puede empezar a comparar la muestra con una que se tiene de referencia, porque se puede medir peso molecular y comparar tamaño y forma de las muestras. Tambien se puede concluir si la extraccion fue o no fue suficiente.
En cuantificacion ---> curva de calibracion si permite detectar concentraciones mirar linea recta o otra cosa
5. CONCLUSIONES 6. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA BIBLIOGRAFICA
SOLUCION DE RESPUESTAS PROPUESTAS EN LAS GUIAS DE LABORATORIO LABORATORIO 1. EXTRACCIO EXTRACCION N DE ADN MEDIANTE MEDIANTE EL USO USO DE DE KITS KITS COMER COMERCIAL CIALES ES ● DESCRIBRIR QUE ACCION TIENE CADA UNO DE LOS COMPONENTES DEL BUFFER DE DIGESTION DURANTE LA FASE DE HOMOGENIZACION HOMOGENIZACION - PROTEINASA K: es una enzima que degrado lipidos y proteinas de las membranas celulares. -RNasa A: es una enzima que corta el RNA del ADN.
2. ¿POR QUÉ ES NECESARIO ADICIONAR RNASA DURANTE EL PASO DE LISAD SADO DE LA MUESTRA? Es impo import rtan antte porq porque ue el RNas Nasa sepa separa ra el RNA del del ADN, ADN, ent entonce oncess va a perm permit itir ir un mejor ejor lis lisado ado de la solcuion al estar esta dividida en fragamentos mas pequeños. La RNasa A ataca los especificamente los fosfatos unidos a nucleotidos de pirimidinas en presencia de iones monovalentes.
3. DESC DESCRI RIBI BIR R QUE QUE ACCI ACCION ON TIEN TIENE E CADA CADA UNO UNO DE LOS LOS COMP COMPON ONEN ENTE TES S DEL DEL BUFF BUFFER ER DE LISIS Y EL BUFFER DE ABSORCION
El buff buffer er Lysi Lysis/ s/Bi Bind ndin ing, g, amortigua el pH de la solucion y le da propiedades para que se una a la membrana de silica en la columna
4. ¿QUE FUNCION CUMPLE EL ETANOL AL FINAL DEL PROCESO DE LISADO DE LA MUESTRA? El etanol hace una lisis en los glóbulos rojos.
5. ENUNCIE LAS VENTAJAS QUE TIENE EL METODO DE SEPARACION DE ADN POR ABSO ABSORC RCIO ION N EN MA MATR TRIZ IZ DE SILI SILICA CA O COLU COLUMN MNA A DE FILT FILTRA RACI CION ON FREN FRENTE TE A METO METODO DOS S CONVENCIONALES DE EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS COMO TRIZOL, FENO FENOLL-CL CLOR OROF OFOR ORMO MO Y SALT SALTIN ING G OUT. OUT. DE UNA UNA BREV BREVE E FUND FUNDAM AMEN ENTA TACI CION ON DE ESTO ESTOS S
METODOS CONVENCIONALES. CONVENCIONALES. EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS CON TRIZOL: La extracción de ARN utilizando el reactivo Trizol se basa en la solubilidad diferencial de las moléculas (ácidos nucleicos y contaminantes) entre dos fases no miscibles. El Triz Trizol ol est está com compues puestto por por una una mez mezcla cla de fenol enol (don (donde de los los ácid ácidos os nucl nuclei eiccos son son inso insolu lubl bles es)) y tioc tiocia iana nato to de guan guanid idin inio io (age (agent nte e desn desnat atur ural aliz izan antte de prot proteí eína nass e inhi inhibi bido dorr de prot protea easa sass) a pH 4,5. Así la integridad del ARN se mantiene durante la extracción. La adición de cloroformo, seguida de una centrifugación permite separar la fase acuosa superior, que contiene el ARN, de la fase orgánica (proteínas y ADN). El ARN se recupera mediante una precipitación con isopropanol. [1]
Extraccion de acidos nucleicos con fenol-cloroformo: fenol-cloroformo: El feno fenoll-ccloro lorofo form rmo o es una una ext extracc raccio ion n liqu liquid idoo-liliqu quid ido. o. se util utiliz iza a en la biol biolog ogia ia mole molecu cula larr para para aisl aislar ar ADN, ADN, ARN ARN y prot protei eina nas. s. Esta Esta tecn tecnic ica a se basa basa en la sepa separa raci cion on de fase fasess por por cent centri rifu fuga gaci cion on de una mezcla acuosa y una solucion que que contiene agua saturada de fenol, cloroformo y una solucion con un agente caotropico desnaturalizante. Los reactivos que se usan en esta tecnica son: fenol, cloroformo y alcohol isoamílico. [2]
EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS CON SALTING OUT: En este este méto método do se util utiliz iza a un buff buffer er que que cont contie iene ne Prot Protei eina nasa sa K ( Tris Tris-H -HCl Cl,, pH 8.3, 8.3,Tw Twee een n 20, 20, Noni Nonide dett P40, P40, Prot Protei eina nasa sa K), K), la cual cual dest destru ruye ye las las memb membra rana nass nucl nuclea eare res, s, libe libera rand ndo o a la solu soluci ción ón los los ácid ácidos os nucl nuclei eico cos. s. El paso siguiente consiste en la precipitación de los ácidos nucleicos, ya que el DNA presente en solu soluci cion ones es con con alt alta conce oncent ntrració ación n de sale saless acet acetat ato o de sodi sodio o (AcO (AcONa Na)) pued puede e prec precip ipit itar arsse media ediant nte e la adición de alcohol etílico a dichas soluciones. [3]
Algunas de las ventajas que tiene el usar el metodo de separacion de ADN por absorcion en matriz de silíca o columna de filtracion, son: ● El procedimiento se realiza en un tiempo mas corto en comparacion con el metodo fenol-cloroformo. ● Trabajar con el fenol y el cloroformo puede resultar peligroso debido a sus propiedades, por ejemplo el fenol es inflamable, es mas segurao trabajar con los reactivos utilizados para el metodo a traves de columnas. ● La separacion usando matriz de silica no necesita que se repitan procedimientos para asegurar que la muestra quede pura, mientras que el salting out es necesario repetir
pasos para asegurar la pureza de la muestra. ● Los reactivos utilizados con matriz silíca permiten mayor seguridad en el laboratorio, debido que los reactivos utilizados no representan un gran riesgo para la salud de las personas. 6. ¿Cuál es el componente del ADN que absorbe a la longitud de 260nm? La absorbancia de los acidos nucleicos es maxima a 260nm. [1]http://www.google.com.co/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=web&cd=3&ved=0CFU [1]http://www.google.com.co/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=web&cd=3&ved=0CFU QFjAC&url=http%3A%2F%2Fiib.org.ar%2Fbajar_material.php%3Farchivo%3D120.doc&ei=E6n GT-T3C7CI6AG2_LXoBg&usg=AFQjCNH4qlbI0AOV41sC_1dupDBWCfSPrQ&sig2=_x_EG4d2 nawEMwOOUx0vbw [2] http://en.wikipedia.org/wiki/Phenol%E2%80%93chloroform_extraction [3] http://www.elportaldelasalud.com/index.php?option=com_content&task=view&id=127&Itemid=1 47
