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INFORME N°4 ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA CATALAZ CATALAZA A
PROFESORA:
CARMEN TERRY BORGAS
CURSO:
BIOQUIMICA BIOQUI MICA AMBIENTAL
CARRERA:
INGENIERIA INGENI ERIA AMBIENTAL
CICLO:
V
INTEGRANTES: AZCONA AZCONA GUTIERREZ, GUTIERREZ, Dausca Dausca Wendy Wendy
2!"
2
I.
INTRODUCCIÓN
Las en#$%as s&n '(&)e*nas c&n ca'ac$dad de ca)a+$#a( (eacc$&nes $&+-.$cas/ I.ua+ 0ue +&s ca)a+$#ad&(es $n&(.1n$c&s, au%en)an +a e+&c$dad 'a(a a+can#a( e+ e0u$+$($& de +a (eacc$-n/ E+ %ecan$s%& '&( e+ cua+ +as en#$%as $nc(e%en)an +a e+&c$dad de +a (eacc$-n es (educ$end& +a ene(.*a +$(e de ac)$ac$-n (e0ue($da 'a(a +a )(ans3&(%a( un sus)(a)& a+ '(&duc)& c&((es'&nd$en)e, s$n a3ec)a( +a c&ns)an)e de e0u$+$($&/
La ac)$$dad de una en#$%a se ea+4a en 3unc$-n de +a e+&c$dad de +a (eacc$-n/ La c$n5)$ca en#$%1)$ca es)ud$a +a e+&c$dad de +a (eacc$-n, +&s 3ac)&(es 0ue +a %&d$3$can y e+ %ecan$s%& de +a %$s%a/ L&s 3ac)&(es 3$s$c&0u*%$c&s 0ue %&d$3$can +a ac)$$dad de +a en#$%a s&n6 c&ncen)(ac$-n de+ sus)(a)&, c&ncen)(ac$-n de +a en#$%a, '7, )e%'e(a)u(a, 3ue(#a $-n$ca, $n8$$d&(es/ Le&n&( M$c8ae+$s y Maud Men)en en !9!:, '(&'us$e(&n un %&de+& c+1s$c& 'a(a e+ es)ud$& de +a c$n5)$ca en#$%1)$ca/ Es)e %&de+& c&ns$s)e en .(a3$ca( +a e+&c$dad de +a ac)$$dad en#$%1)$ca y +a c&ncen)(ac$-n de+ sus)(a)&/ Es)a (e'(esen)ac$-n .(13$ca 'e(%$)e de)e(%$na( +a c&ns)an)e de M$c8ae+$s;Men)en < de +a e+&c$dad %1>$%a <
V max
K M
= a+ $n)e('&+a( +a %$)ad
=/
En es)a '(1c)$ca se e%'+ea(1 +a en#$%a ca)a+asa 'a(a ana+$#a( a+.un&s as'ec)&s de +a c$n5)$ca en#$%1)$ca/ La ca)a+asa u)$+$#a una %&+5cu+a de 'e(->$d& de 8$d(-.en& <
H 2 O 2
H 2 O 2
= c&%& sus)(a)& d&nad&( de e+ec)(&nes y &)(a %&+5cu+a de
c&%& &>$dan)e & ace')&( de e+ec)(&nes/
La ca)a+asa es)1 c&n)en$da en +&s 'e(&>$s&%as de e($)(&c$)&s, %5du+a -sea, %uc&sas, ($?-n e 8*.ad&/ Su 3unc$-n es +a desc&%'&s$c$-n de+ 72O2 3&(%ad& '&( acc$-n de +as &>$dasas/
II.
OBJETIVOS
3
•
• •
C&%'(&a( +a e>$s)enc$a de +a en#$%a ca)a+asa en +&s )e@$d&s an$%a+es y e.e)a+es/ C&%'(&a( +a acc$-n de+ '7 s&(e +a ac)$$dad de +a en#$%a/ C&%'(&a( +a acc$-n de +a )e%'e(a)u(a s&(e +a ac)$$dad de +a en#$%a/
III.
MARCO TEORICO
Las en#$%as se ca(ac)e($#an '&( : '(&'$edades 3unda%en)a+es6
ce'c$-n de a+.unas, c&%& +a )($'s$na, a%$+&'s$na, 0u$%$&)($'s$na, e)c/ 0ue '&( )(ad$c$-n s$.uen %an)en$end& su n&%enc+a)u(a/ Se 8an as$.nad&, '&( +a C&%$s$-n In)e(nac$&na+ de En#$%as, c+ases6 !/ O>$d&;(educ)asas6 'a()$c$'an en (eacc$&nes de ->$d&;(educc$-n/ En es)as (eacc$&nes se )(ans3$e(e un e+ec)(-n <& un 7= de un d&nan)e a un (ece')&(/ Cas& de+ NAD7 0ue en)(e.a e+ec)(&nes a c&%'+e@& I en +a %e%(ana $n)e(na de +a %$)&c&nd($a/ 2/ T(ans3e(asas6 )(ans3$e(en .(u'&s de un d&nan)e a un ace')&(/ L&s .(u'&s )(ans3e($d&s c&n %1s 3(ecuenc$a s&n e+ %e)$+&, .+uc&s*d$c& y 3&s3a)&/ Cas& de +a .+uc&s$+)(ans3e(asa <)(ans3$e(e un %&n&sac1($d&= y '(&)e*na 0u$nasa <)(ans3$e(e un 3&s3a)&=/ :/ 7$d(&+asas6 'a()$c$'an en (eacc$&nes de 8$d(-+$s$s, es dec$(, (&%'$%$en)& de en+aces c&%& C;O, C;N y C;C '&( ad$c$-n de a.ua/ Cas& de +&s en+aces .+uc&s*d$c&s
/ L$asas6 '(&ducen d&+es en+aces a+ (&%'e( un$&nes C;O, C;C y C;N/ Ta%$5n 'ueden (&%'e( d&+es en+aces a.(e.and& .(u'&s/ Cas& de +a '$(ua)& desca(&>$+asa 0ue e+$%$na un CO2 a+ '$(ua)&/ "/ Is&%e(asas6 ca)a+$#an una (ed$s)($uc$-n de 1)&%&s de +&s .(u'&s 0u*%$c&s den)(& de +a %$s%a %&+5cu+a/ Cas& de +a a+an$na (ace%asa 0ue c&n$e()e L; a+an$na en D;a+an$na/ A%&s s&n $s-%e(&s/
4
/ L$.asas6 ca)a+$#an +a un$-n de 2 %&+5cu+as '&( 8$d(-+$s$s de AT u &)(& )($3&s3a)&
⇒ CO2
2N7:
La 8$d(-+$s$s de +a u(ea 'uede &cu(($( es'&n)1nea%en)e en '(esenc$a & ausenc$a de un ca)a+$#ad&(, &($.$nand& +&s %$s%&s '(&duc)&s y +a %$s%a ene(.*a/ La e+&c$dad de (eacc$-n es'&n)1nea 'uede se( ace+e(ada s$ se a?aden $&nes 7 c&%& ca)a+$#ad&( y 'uede se( ace+e(ada a4n %1s cuand& se a?ade +a u(easa en +u.a( de +&s $&nes 7/
E+ .(13$c& %ues)(a +as (e+ac$&nes ene(.5)$cas de +a (eacc$-n en)(e u(ea y a.ua <(eac)an)es=, e+ +&.(& de+ es)ad& de )(ans$c$-n HES y +a &)enc$-n de +&s '(&duc)&s
5
a(a 0ue +a u(ea 'ueda (eacc$&na( c&n e+ a.ua dee 8ae( su3$c$en)e ene(.*a, 'a(a 0ue +a %&+5cu+a de u(ea y e+ a.ua ++e.uen a 3&(%a( un c&%'+e@& ac)$ad& y en)(en a un es)ad& de )(ans$c$-n
6
La %ay&( 'a()e de +as en#$%as &'e(a den)(& de un %a(.en es)(ec8& de '76 es e+ '7 -')$%&/ La .(an %ay&(*a de +as en#$%as )$ene su '7 -')$%& den)(& de+ (an.& 3$s$&+-.$c& de +a c5+u+a <'7 /" a J/2=/ A+.unas en#$%as, c&%& +a 'e's$na de+
es)-%a.&, '&seen un '7 -')$%& en e+ (an.& 1c$d& <'7 !/ a 2/=/ En#$%as $n)es)$na+es c&%& +a )($'s$na y +$'asas, '&seen un '7 -')$%& en (an.&s a+ca+$n&s, ce(can& a !/ C&%& en cua+0u$e( (eacc$-n 0u*%$ca, e+ au%en)& de )e%'e(a)u(a de +&s (eacc$&nan)es '(&duce un au%en)& en +a e+&c$dad de (eacc$-n, 'e(& en e+ cas& de +&s s$s)e%as ca)a+$#ad&s '&( en#$%as, es)& es 1+$d& 8as)a c$e()& .(ad& de )e%'e(a)u(a/ C&ns$de(and& 0ue +as en#$%as s&n '(&)e*nas, es)1n e>'ues)as a una desna)u(a+$#ac$-n
7
Es'ec$3$c$dad de+ sus)(a)& La es'ec$3$c$dad es)1 de)e(%$nada '&( e+ s$)$& ac)$& de +a en#$%a, es dec$(, un sec)&( de +a %&+5cu+a 0ue c&n)$ene +&s .(u'&s 3unc$&na+es 'a()$cu+a(es 0ue +e 'e(%$)en un$(se es'ec*3$ca%en)e c&n e+ sus)(a)&/ &( e@e%'+&, +a 0u$%$&)($'s$na '&see una cadena '&+$'e')*d$ca c&n3&(%ada '&( 2" a%$n&1c$d&s de +&s cua+es +&s n4%e(&s "J <8$s)$d$na=, !2 <1c$d& as'1()$c&= y !9"
IV.
MATERIALES Y METODOS
a'a 7*.ad&
8
Cuc8$++& $n#as Tu&s de ensay& G(ad$++as %ec8e(&
Reactivo: 7C+ /!M O
HNO3
NaO7 /!M 7IELO
S!t"ato:
H 2 O 2
V.
<'e(->$d& de 8$d(&.en&=
PROCEDIMIENTO
P"e#a"a" $a %io$!cio&e i'!ie&te:
!%+ de una s&+uc$-n /!M de NaO7, M.%&+/
!%+ de una s&+uc$-n /!M de 7C+ M :/9 .%&+
:/! .%&+/ C&()a( +a 'a'a y e+ 8*.ad& en c$nc& )(&#&s cada un& de $.ua+ )a%a?&
M
a'(&>$%ada%en)e=/ R&)u+a( ! )u&s de ensay& c&n +&s n4%e(&s !, 2, :, , ", , J, , 9 y !/ A+ )u& !, :, ", J y 9 a?ad$( un )(&#& de 'a'a y a+ 2, , , y ! un )(&#& de 8*.ad&/ A+ )u& ! y 2 a.(e.a( 2%+ de
H 2 O 2
a cada un& de e++&s, &se(a( e
$n)e('(e)a( +&s (esu+)ad&s/ En +&s )u&s : y a?ad$( 2 %+ de a.ua 'a(a 8e($( +a %ues)(a/ 7e($( du(an)e un&s " %$nu)&s, des'u5s de es)e )$e%'&, (e)$(a( e+ a.ua s&(an)e y a.(e.a( 2 %+ de
HNO3
H 2 O 2
, &se(a( e $n)e('(e)a( +&s (esu+)ad&s/
A +&s )u&s " y a.(e.a( 2%+ de +a s&+uc$-n de
HNO3
/!M, es'e(a( "
%$nu)&s, +ue.& (e)$(a( e+ 1c$d&, [email protected]( c&n a.ua des)$+ada y a.(e.a( 2 %+ de
H 2 O 2
&se(a( e $n)e('(e)a( +&s (esu+)ad&s/
A +&s )u&s 9 y ! 8ay 0ue $n)(&duc$(+&s en un 8&(n& 8e+ad& du(an)e : %$nu)&s, +ue.& a.(e.a( $n%ed$a)a%en)e 2 %+ de (esu+)ad&s/
H 2 O 2
, &se(a( e $n)e('(e)a( +&s
9
VI.
CALCULOS Y RESULTADOS
TUBOS !
a)a)a
2
7*.ad &
:
a)a)a
7*.ad &
OBSERVACION Se &se(- una .(an 2%+ can)$dad de u(u@as en H 2 O 2 a%&s cas&s 'e(& de %ay&( can)$dad en e+ 8*.ad&/ Se &se(a +a 2%+ +$e(ac$-n es'&n)1nea de H 2 O 2 &>*.en& en 3&(%a de 'e0ue?as u(u@as/ 2%+ En e+ cas& de +a 'a'a 8e($da n& se &se( H 2 O (eacc$-n a+ $.ua+ 0ue en 7e($( " e+ 8*.ad&/ %$nu)&s y (e)$(a( e+ +$0u$d& 2%+
E(PLICACION En e+ cas& de +a 'a'a c(uda 8ay una (1 (eacc$-n/ La en#$%a ac)4a n&(%a+%en)e/ S&(e )&d& en e+ )u& 0ue )$ene 8*. c(ud& %&+$d&, se da +a %1>$%a ac)$$ Es)& se dee a 0ue '(esen)a un '7 &')$ E+ ca+&( desna)u(a+$#a +as '(&)e*nas, y ' )an)&, +as en#$%as/ Es)& es de$d& a 0ue a+ s&%e)e( +a en#$ a+)as )e%'e(a)u(as, 5s)a se desna)u(a es dec$(, '$e(de su ac)$$dad en#$%1)$ca +a '5(d$da de su es)(uc)u(a )e(c$a($a/
H 2 O 2
"
a)a)a
7*.ad &
2%+ Ta%'&c& se &se(a una (eacc$-n )an 3ue()e c&%& HNO3 en e+ )u& un& y d&s Es'e(a( " %$nu)&s, +ue.& (e)$(a( e+ ac$d& 2%+
N& &se(a(1s (eacc$-n ya 0ue e+ 1 '(&&ca )a%$5n +a desna)u(a+$#ac$-n d en#$%a/L&s '7 e>)(e%&s )a%$5n'(&& +a '5(d$da de +a ac)$$dad en#$%1)$ca/
H 2 O 2
J
a)a)a
7*.ad &
2%+ NaO7 Es'e(a( " %$nu)&s, +ue.& (e)$(a( +a ase 2%+ H 2 O 2
La ac)$$dad en#$%1)$ca de +a 'a'a d$s%$nu$d& de$d& a+ '7 La ac)$$dad en#$%1)$ca de+ 8*.ad& d$s%$nu$d& 'e(& en %en&( %ed$da 0ue e 'a'a es)& se dee a 0ue es &)(& )e@$d&/
10
9
a)a)a
!
7*.ad &
VII. •
Re3($.e(ad& du(an)e : %$nu)&s
A+ e>'&ne( e+ 8*.ad& y +a 'a'a )e%'e(a)u(as e+eadas +a %ay&(*a de %&+5cu+as c&%'&nen)es <+*'$d&s, '(&)e* 7$d(a)&s de Ca(&n&, e)c/= se desna)u(a+$#ad&/ &( +& 0ue e+ a &>$.enada n& )$ene c&n 0ue (eacc$&na(/
CONCLUSIONES
C&%'(&a%&s +a e>$s)enc$a de es)a en#$%a ca)a+asa en +as c5+u+as de +&s an$%a+es y e.e)a+es, cu%'+e un $%'&()an)e 'a'e+ en e+ &(.an$s%&/ La 3unc$-n de es)a es desc&%'&ne( e+ 'e(->$d& de 8$d(&.en& <
H 2 O 2
=, 0ue
es )&>$c& y se .ene(a du(an)e e+ %e)a&+$s%& ce+u+a(, en a.ua y &>*.en&/ La e3$cac$a de es)a en#$%a 'a(a +a de.(adac$-n de+ 'e(->$d& de 8$d(-.en& de'ende de a($&s 3ac)&(es6 La d&s$s de +a ca)a+asa a usa(, +a c&ncen)(ac$-n $n$c$a+ de+ 'e(->$d& de 8$d(-.en&, e+ )$e%'& de c&n)ac)& en +a d$s'&s$c$-n de+ '(&ces&, en)(e &)(&s/ En +as (eacc$&nes +as u(u@as 0ue se &se(a(&n es '(&duc)& de +a +$e(ac$-n de •
O2
/
Se &se(- 0ue +as a+)as )e%'e(a)u(as y +&s ca%$&s de '7 n& neu)(&s 'ueden desna)u(a+$#a( +a en#$%a, ca%$and& su es)(uc)u(a, e $nac)$1nd&+a/ La en#$%a ca)a+asa en e+ &(.an$s%&, e$)a +a acu%u+ac$-n de 'e(->$d& de 8$d(&.en&, 0ue es )&>$c& 'a(a +as c5+u+as/
VIII.
CUESTIONARIO
A. De ac!e"%o a ! "e!$ta%o o)te&i%o *C!+$ e $a te,#e"at!"a - # /#ti,o %e $a cata$aa0 E1#$i2!e. Se.4n +&s (esu+)ad&s +a %1>$%a ac)$$dad se d$& cuand& se (ea+$#a(&n +as '(ueas c&n e+ )u& de ensay& ! y 2/'&( +& )an)& se 'uede deduc$( 0ue a )e%'e(a)u(a a%$en)e y a un '7 de en)(e y se da una +a (eacc$-n de %ay&( e+&c$dad/
B. G"a3ica" $a "e$aci/& te,#e"at!"a -
11
C. E1#$i2!e e$ 3!&%a,e&to %e $a #"!e)a %ea""o$$a%a Una en#$%a es una %&+5cu+a de ca(1c)e( '(&)e$c& <'(&)e*na= cuya 3unc$-n es ace+e(a( +as (eacc$&nes $&0u*%$cas $ca 0ue es e+ 'e(->$d& de 8$d(-.en&,
H 2 O 2
O>$.enada=/ La ca)a+asa ac)4a s&(e e+ a.ua &>$.enada desc&%'&n$5nd&+& en H 2 O 2
y
O2
, c&n des'(end$%$en)& de ene(.*a en 3&(%a de ca+&(/ La ac)$$dad
de +as en#$%as 'uede se( a3ec)ada '&( &)(as %&+5cu+as, '&( +a )e%'e(a)u(a, e+ '7 y +a c&ncen)(ac$-n de sus)(a)&, es '&( e++& 0ue +a (eacc$-n de +a en#$%a n& es -')$%a en )&d&s +&s cas&s e>'e($%en)ad&s/
12
D. *4!5 !ce%e c!a&%o e #o&e #e"/1i%o %e 6i%"o'e&o e& !&a 6e"i%a0 *4!5 !'ie"e $a evi%e&cia0 La (a#-n '&( +a 0ue +as es'u%as se dee a 0ue +a san.(e y +as c5+u+as c&n)$enen una en#$%a/ Nada %1s 8ace(n&s un c&()e, estas enzimas salen junto con la sangre/ Cuand& +a en#$%a en)(a en c&n)ac)& c&n e+ 'e(->$d& de 8$d(-.en&, c&n$e()e e+ 'e(->$d& de 8$d(-.en& < O2
2
H 2 O 2
= en a.ua <7 2O= y e+ .as &>*.en& <
=
H 2 O 2
2
H 2 O 2
O2
Es)a (eacc$-n es e>)(e%ada%en)e e3$c$en)e 8as)a 2/ (eacc$&nes '&( se.und&/ Las u(u@as 0ue se en en +a es'u%a de u(u@as de &>*.en& 'u(& se es)1n c(eand& '&( es)a en#$%a/ uedes 8ace( +a '(uea '&n$end& un '&c& de 'e(->$d& de 8$d(-.en& en un c&()e de 'a)a)a y 8a(1 +& %$s%&, '&( +a %$s%a (a#-n/ La en#$%a 0ue 8ay en +as c5+u+as da?adas de +a 'a)a)a, (eacc$&na c&n e+ 'e(->$d& de 8$d(-.en&/ E+ 'e(->$d& de 8$d(-.en& n& 8ace es'u%a en +a &)e++a & en su '$e+ $d& de 8$d(-.en& es es)a+e a )e%'e(a)u(a a%$en)e/
E. E1#$i2!e #o" 2!5 ta&ta e#ecie #"o%!ce& $a e&7i,a cata$aa &(0ue +a Ca)a+asa es una en#$%a cuya 3unc$-n es desc&%'&ne( e+ 72O2<e(->$d& de 7= en A.ua y O2 %&+ecu+a(/ E+ 72O2 es una sus)anc$a )->$ca 'a(a +a c5+u+a de )a+ %ane(a 0ue dee se( de.(adada 0u*%$ca%en)e/ G(ac$as a +&s e(&>$s&%as 0ue s$n)e)$#an es)e ca)a+$#ad&( e+ 72O2 es desc&%'ues)& e$)and& 0ue +a c5+u+a %ue(a '&( T&>$c$dad de es)e c&%'ues)& $n&(.1n$c&
F. E1#$i2!e $a ca"acte"8tica et"!ct!"a$e - 3!&cio&a$e %e $a cata$aa9 - ! i,#o"ta&cia e& $o e"e vivo Es)(uc)u(a de +a ca)a+asa Es un )e)(1%e(& de cua)(& cadenas '&+$'e')$d$cas, cada una +a(.a cadena c&n " a%$n&1c$d&s/ C&n)$ene cua)(& .(u'&s 8en& '&(3$($n$c&s <8$e((&= 0ue ++ean a +a
13
en#$%a a (eacc$&na( c&n e+ 'e(->$d& de 8$d(-.en&/ E+ '7 -')$%& 'a(a +a ca)a+asa es a'(&>$%ada%en)e de J, +a )e%'e(a)u(a a($a '&( es'ec$e/ Punc$-n de +a ca)a+asa La ca)a+asa cu%'+e una 3unc$-n '(&)ec)&(a c&n)(a de)e(%$nad&s %$c(&&(.an$s%&s 'a)-.en&s, s&(e )&d& anae(&$&s/ Las ac)e($as anae(&$as, %ue(en a+ es)a( en c&n)ac)& c&n &>*.en&, es '&( es)a (a#-n 0ue e+ &>*.en& '(&duc$d& '&( es)a en#$%a )$ene e3ec)& ac)e($c$da s&(e es)&s %$c(&&(.an$s%&s/ Tan)& es as*, 0ue +a ausenc$a de d$c8a en#$%a '&( de3ec)&s .en5)$c&s, ++a%ada aca)a+ase%$a & en3e(%edad de Taa8a(a, causa $%'&()an)es $n3ecc$&nes en +a %uc&sa uca+, 'ud$end& ++e.a( a causa( +a '5(d$da de d$en)es y .(aes +es$&nes en +&s %a>$+a(es y )e@$d&s +and&s de +a ca$dad uca+/ I%'&()anc$a De 8ec8& +a en#$%a ca)a+asa s$(e 'a(a '(&)e.e( nues)(as c5+u+as, c&n)(a((es)and& y e0u$+$(and& +a '(&ducc$-n c&n)$nua de 'e(->$d& de 8$d(-.en&/ De$d& a sus $nne.a+es, '&de(&sas y de%&s)(adas '(&'$edades an)$&>$dan)es, +a ca)a+asa es %uy en53$ca 'a(a +&s '(&ces&s de +&s -(.an&s y e+ cue('&/ Ade%1s de 3un.$( c&%& s4'e( an)$&>$dan)es, +a ca)a+asa )a%$5n )$ene +a 8a$+$dad de usa( e+ 'e(->$d& de 8$d(-.en& 'a(a &>$da( )&>$nas $nc+uyend& e+ %e)an&+, e)an&+, 1c$d& 3-(%$c&, 3&(%a+de8$d&, y n$)($)&/ Es)e )$'& de ac)$$dad dua+ +a c&n$e()e en una en#$%a ce+u+a( c(uc$a+/
I(.
ANE(OS
14
(.
BIBLIOGRAFIA
8))'6ede+'(&3es&(/u+a/e3a(%ac$a.%ende#%anua+es 2DPEERIMENTO2"2CATALASA2;/'d3 8))'6/a'ccc/esa(c8a'ccc3$c8as2!2+as$nas+as$nasac)en#$%a)$ca/'d3 8))'6/'ed(&'a+&%&(en&/c&%'ed(&'a+&%&(en&/c&%BIO2; (ac)$cas3$+es!;!"2;2En#$%as/'d3 8))'6se%/0/u/esB$&ROMc&n)en$d&'(&)e$nas:d'(ac)$caca)a+asa&)&n/8)%+/ : A($+ 2!! 8))'6a'+$cac$&nes/$()ua+/una+/edu/c&d(u'a+3$+es'$)aya2a%a($++a/'d3/ : A($+ 2!! 3$+e6C6Use(sLAB2;2:Des)&'en#$%as/'d3
15
8))'60u$%$ca/+a.u$a2/c&%c&nce')&s;as$c&sen#$%a;ca)a+asa
