AGENTES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA Las enzimas son moléculas de proteínas que tienen la capacidad de facilitar y acelerar las reacci reaccione oness químic químicas as que tienen tienen lugar lugar en tejido tejidoss vivos, vivos, dismin disminuye uyendo ndo el nivel nivel de la “Energía de Activación” propia de la eacción! "ueden presentar tama#os muy varia$les, desde %& amino'cidos (asta &,)** presentes en la sintasa de 'cidos grasos! +asi todas las enzimas son muc(o m's grandes que los sustratos so$re los que actan y solo una peque#a parte de la enzima est' directamente involucrada en la cat'lisis! Las enzimas se ven afectadas por factores de su actividad- +ofactores y coenzimas, las enzimas que requieren cofactores o coenzimas generalmente no se activan (asta que la molécula se une a una Apoenzima o .oloenzima! La temperatura su efecto so$re la veloci velocidad dad de una reacció reacción n enzim' enzim'tic tica a genera generalme lmente nte muestr muestra a dos etapas etapas-- Aumen Aumento to gradual de la velocidad de la reacción (asta alcanzar un m'/imo local, que se conoce como temperatura óptima0 y disminución progresiva de la velocidad de reacción de$ido a la inacti inactivac vación ión de la enzima enzima por desnat desnatura uraliz lizaci ación ón térmic térmica! a! Efecto Efecto del p., los p.s e/tremos tam$ién pueden inactivar a la enzima por desnaturalización, por lo que el efecto del p. es similar al efecto de la temperatura so$re la velocidad de reacción! Efecto de la concentración del 1ustrato, en la velocidad de una reacción muestra dos etapas- 2! La velocidad de la reacción aumenta gradualmente (asta acercarse a una velocidad m'/ima! &! La velocidad se mantiene constante pues todos los centros activos de la molécula de la enzi enzima ma (an (an sido sido ocup ocupad ados os por por el sust sustra rato to,, se dice dice ento entonc nces es que que se pres presen enta ta un compor comportam tamien iento to de satura saturació ción! n! Efecto Efecto de la concen concentra tració ción n de 1ustra 1ustrato, to, 3n(i$i 3n(i$ició ción n Enzim'tica, ocurre cuando una molécula diferente al sustrato interacta con la enzima, impidiendo el correcto funcionamiento de esta! Ejms 3n(i$idores competitivos 45ienen cierta afinidad con el centro activo6 e 3n(i$idores no competitivos 47eneralmente se unen a un sito diferente del centro activo6! 3n(i$idores como medicamentos, m's de la mitad de los medicamentos de consumo apro$ado y de venta en farmacias actuales son en realidad in(i$idores!
8ecanismos reguladores- la actividad de las enzimas in vivo est' regulada por mltiples mecanismos, que pueden tener un efecto positivo o negativo, segn las necesidades celulares! "rincipales mecanismos reguladores- +livaje proteolítico, alosterismo, modulación covalente, regulación de la e/presión y degradación!
MATERIALES Reactivos: 1ustrato- 1ol! Almidón 29 p. %!: Enzima- amilasa salival al 2*9
1ol! ;a+l &9 6
Materiales
7radillas con : tu$os de ensayo 2 pipeta de 2** ml 2 pipeta de )ml 2 vaso de precipitación de )** ml 5u$os de ensayo otulador de vidrio
PROCEDIMIENTO REACTIVO Sol$ De
1 2
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a%ilasa salival al 1&' ()**er *os*ato &$1M +,-4$. ()**er *os*ato &$1M +,-$". ()**er *os*ato &$1M +,-#$& NaCl &$2' /e0ol Cloro*or%o A)a estilaa
1e dejó incu$ar por ) min, se continuó con el incu$ado por 2* minutos con $a#o maría FG+ los primeros F tu$os el octavo a 2**G+ y el noveno a *G+, lo mismo para los tiempos &*H y =*H! "ara realizar la parte & se requieren los tiempos 2*, &* y =*!
"ara el control a los 2*, &*, =* minutos de incu$ación
Reactivo I0c)ao
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oaa +ontrol de la actividad enzim'tica de los productos formados
Reactivos 1 *!) Sol
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estilaa RES6LTADOS +uadro 2! Actividad enzim'tica segn sustrato residual
T6(O TIEMPO DE INC6(ACI7N
CONCENTRACI7N DE S6STRATO +ALMID7N.
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+uadro&! Actividad enzim'tica segn productos formados
T)o I II III IV V VI VII VIII I9
Reacci0 /eli0
Oservaci0 Jerde semi oscuro @scuro @scuro 1emi oscuro 1emi oscuro 1emi oscuro 1emi oscuro 1emi oscuro 1emi oscuro
DISC6SI7N 1egn 1corpes, 2::%0 Kanson ydén 2:::, las temperaturas $ajas en la enzimas pueden lograr (acer perder la actividad enzim'tica, esto sería moment'neamente0 entonces a temperaturas altas, la enzima se desnaturaliza, pero, a un temperatura media 4entre unos * y =*G+6 la enzima funciona adecuadamente! El p. es otro factor que influye en la manera de accionar de la enzima, pues, como se menciona en teoría, cuando el p. es demasiado acido la enzima tra$ajaría menos, pero, a comparación de un p. demasiado alcalino, la enzima muestra actividad mayor! 1egn 1corpes, 2::%0 Kanson ydén, es muy importante en los procesos de purificación de enzimas mantener la temperatura $aja 4*D=G+6 en todo momento, con el fin de esta$ilizar a la enzima y conservar al m'/imo su actividad, adem's que tam$ién se in(i$e el desarrollo micro$iano el cual podría verse afectada!
CONCL6SION 5odos los factores resultos en pr'ctica, se compro$ó que afectan a la actividad enzim'tica, dícese de temperatura, p., temperatura de concentración entre otros! 1e compro$ó que las elevadas temperaturas desnaturalizan la actividad enzim'tica, la adecuada temperatura esta entre * y =*G+! 1e evidencio que el p. afecta a la actividad enzim'tica, es mejor y mas adecuado un p. alcalino!
RE/ERENCIAS (I(IO;RA/ICAS M8 Jasudevan 1reeNumari 1! Bannan Jaidyanat(an O“5e/to de
+uellar Ayala 1olariD “7enética .umana” ?undamentos y AplicacionesD Ged! Editorial 8edica "anamericana!
