Bioquimica - Determinacion de La Actividad Enzimatica

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CINETICA ENZIMATICA

Cinetica Enzimatica 2 r

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1 TITULO:

DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

2 RESUMEN:

Se realizó el análisis análisis de La Actividad Enzimática de la reacción en función de

cantidad enzimática (composición), de la temperatura y del pH. Así mismo s

analizó la especificidad de la acción enzimática, empleando la solución d

almidón. Los resultados obtenidos demostraron que la actividad enzimática se v

influenciada por la cantidad de enzima presente en solución. La Activida Enzimática se ve reflejada con los factores físico-químicos (Temperatura,

concentración de enzima, concentración de sustrato), lo cual per mite pensar q

con la cantidad de concentración de la enzima el tiempo de que se necesita pa

transformar el sustrato en producto prod ucto es menor o mayor en la actividad enzimátic

Estos últimos resultados son consistentes por el hecho que las enzimas so

catalizadores biológicos de una reacción. Así mismo se demostró qu  Sign up to vote on this title

la temperatura tiene un efecto importante en Actividad enzimática. Si laUseful  Not useful temperatura aumenta considerablemente la reacción puede no producirse debid

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3 FUNDAMENTACION:

Se realizó este trabajo con la finalidad de poner en manifiesto la importancia de recocer, de productos que se pueden encontrar en las muestras, debido a la

actividad enzimática que ésta posee a su especificidad, una vez identificados, podremos saber la velocidad de reacción, si hay productos, degradaciones, cambios en su estructura, etc.

4 INTRODUCCION: La Actividad Enzimática, es decir, la función de una enzima se puede determinar midiendo la cantidad de sustrato que desaparece o la cantidad de

producto formado por unidad de tiempo, viéndolo de esta forma en realidad se

mide la velocidad de la reacción. Esta contiene factores que afectan la activida enzimática:

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Concentración de sustrato Unlock full access with a free trial.

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Concentración de Enzimas.

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Temperatura

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pH

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Presencia de inhibidores, etc.

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Tubos de Ensayo

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Incubadora para Baño María

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Cocina Eléctrica

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Pipetas

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Gradilla

-

Reactivos

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b) Métodos:

ETAPA A

SISTEMA COMPONENTES

I

II

Solución de

You're Reading 5ml a Preview

almidón al 1% pH

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6.6 Solución de

5ml


1ml

1ml

Cloruro de Sodio Sign up to vote on this title

0.1M Agua Destilada

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De cada uno de los tubos de incubación (de la etapa A) trasferir 0.1ml. De sus correspondientes del cuadro siguiente del cuadro siguiente (etapa B). Inmediatamente de cumplidos los 30 minutos de incubación.

ETAPA B SISTEMA COMPONENTES

I

II

De los tubos I y II:

01ml

01ml

5ml

5ml

0.5ml

0.5ml

De la Etapa A. Ácido Clorhídrico 0.05 N Solución Yodada

You're Reading a Preview

resultados de cada tubo de acuerdo a la intensida Mezclar: Observar y anotar los Unlock full access with a free trial. del color resultante. Download With Free Trial


ETAPA C

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7 RESULTADOS:

ETAPA A: En este sistema se determina la actividad enzimática, porque e

alterada por lo niveles de pH, en este caso, el pH es óptimo porque está en 6.6 La reacción se evidencia cuando cambia de color, de Blanco lechoso

transparente, porque se alteró su pH. Al ser almidón una proteína, uno esperar

que la proteinasa le haga perder su funcionalidad, sin embargo esto no ocurri

puesto que luego de un determinado periodo de tiempo se observó el efec acromático.

ETAPA B: En este sistema la alteración que sufre la actividad enzimática al s

sometida a T° alta produce que la enzima se pueda inhibir, reaccion adecuadamente o desnaturalizar.

La temperatura incrementa la cinética la reacción enzimática, es de You're Reading ade Preview

aumenta la velocidad de reacción Unlock fullpero accesssolo with ahasta free trial.el punto en el cual, por acció de la misma temperatura, se inactiva la enzima. Se evidencia por que cambia Download With Free Trial

color Blanco Lechoso a un color Mostaza oscuro, que indica que se ha alterad su estructura original y hay menos productos. Sign up to vote on this title

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ETAPA C: En este sistema identificamos que la alta concentración de sustrato

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8 DISCUSION: Al analizar los resultados, obtenemos que al utilizar un pH ácido, hay actividad enzimática, esto se debe a que la enzima al someterla a un pH muy básico (3.6)

se desnaturaliza; utilizando un medio de pH optimo (6.6) la enzima va a desarrolla una velocidad de reacción enzimática alta y al someterla a un medio de pH muy acido (10) al igual que con el pH básico la enzima se va a desnaturalizar. Doran, P. (1998)

En el caso de pH 6.6, al hacerlo reaccionar con los indicadores como el Benedict

la solución yodada en la etapa B y C, da un color azul que es la indicación de qu

no hay actividad enzimática por lo que no hay velocidad de reacción; lo contrar

sucede con la solución yodada, que muestra un color marrón oscuro. Segú

UNAMB, (2000). Indica que hay actividad enzimática (muy lenta en relación a lo resultados y muy rápida en relación a otro grupo de práctica).

You're Reading Al medir el efecto de la temperatura se mide alaPreview actividad enzimática en el almidón

Unlock full accesscambios with a free trial. temperatura normal y no se presentaron de color significativos, es dec

que el color nunca desapareció. Por lo tanto, se podría decir que el almidón n Download With Free Trial

actuó. A diferencia de las otras temperaturas, en la temperatura de 37°C sí s

presentaron cambios, porque el almidón al igual que las otras enzimas  tienen s Sign up to vote on this title

propio rango de temperatura optima, al encontrarse Useful en el cuerpo siempre tiene un Not useful 



temperatura de 37°C y en esta temperatura ocurre una velocidad alta en l reacciones

enzimática

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Analizando los colores de las reacciones obtenemos, que el color azul es dado p la solución yodada al interactuar con el almidón e indica que no hay activ

enzimática ya sea por inactivación, desnaturalización, concentración de la enzim Según José O. Valderrama, (2012). El color mostaza oscuro es producido por

solución de Benedict que reacciono con los azucares reductores (aquellos qu tienen su OH libre del C anomérico) como glucosa, maltosa, celobiosa y lactosa, cuales actúan sobre el cobre reduciéndolo

Estos resultados obtenidos nos muestran la estrecha relación que existe entre lo factores físico-químicos con la velocidad de reacción enzimática. Los

interpretación de los resultados obtenidos están dados en comparación de la

muestra de los otros grupos de practica ya que en nuestras reacciones hubo un

variación mínima debido al error humano (no siguiendo la secuencia de la práctic un mal manejo de los instrumentos, y reactivos). You're Reading a Preview Unlock full access with a free trial.

9 CONCLUSIONES -


El Almidón tiene un pH y una temperatura óptima notitle sufra  inhibició Sign uppara to voteque on this

Not useful enzimática  Useful desnaturalización o disminución en la velocidad de laactividad

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10 BIBLIOGRAFIA -

Doran, P. En: “principios de ingeniería de los bioprocesos”. Editorial acribia SA. Zaragoza. 1998; 126 – 130.

-

Colegio de Ciencias y Humanidades Plantel Sur UNAMB

-

Diccionario de medicina/Océano Mosby

-

www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz1.htm

-

José O. Valderrama. En: Información tecnológica, 2012, 16 - 17

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Universidad Nacional de Cajamarca Ingeniería en Industrias Alimentarias Facultad de Ciencias Agrarias Tema:

“DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA” Nombres: MontoyaYou're Viera, Walter Reading a Preview Curso:

Unlock full access with a free trial.


BIOQUÍMICA - Práctica


Profesor:

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