FACULTAD DE SALUD Y NUTRICION ESCUELA DE MEDICINA HUMANA “AÑO DE LA CONSOLIDACION DEL MAR DE GRAU” II CICLO – AULA 13B BIOLOGIA LABORATORIO 5 CATALASA EN DIFERENTE MUESTRAS BIOLÓGICAS
ALUMNOS: JAQUE ALONSO, ALONSO, Marco OBREGÓN MUÑOZ, Go!a"a QUIS#E $ELARDE, S%!a REGALADO RAMIREZ, #r&%a SOLANO SANC'EZ, G(%%)r*o $EGA $IDAL, Mra* $ICEN+E BALCAZAR, S)"-a $ILCA#OMA MENDEZ, S.)/a"0
DOCEN+E: Bo%oa2 ROMA NORIEGA CORRALES CORRALES
415
Laboratorio de Biología Celular y Molecular PRACTICA 5: Actividad de Catalasa en diferentes muestras biológicas Introducción Las enzimas son un tipo de biomolecula catalizadora por ser proteínas de funcionalidad catalítica ue aceleran o retardan la velocidad a la cual las reacciones ocurren! "#iste una amplia clasificación de enzimas catalizadoras de las cuales es responsable de una reacción específica reconociendo un sustrato en particular el cual le da a la enzima un alta especificidad! L a catalasa es la enzima ue se encuentra en las c$lulas animales % vegetales& su función en este tipo de te'idos es mu% importante debido a ue durante el metabolismo celular se forma una sustancia to#ica para la c$lula ue es el peró#ido de (idrogeno! La catalasa descompone el ) *+* en sus dos productos& el agua % o#ígeno& sustancias no da,inas para las c$lulas de los te'idos 2
Objetivos Objetivos generales: -eterminar la presencia % actividad de las enzimas catalasas en las siguientes muestras: • • • • •
Tomate Palta Papa%a Lec(uga )ígado!
Objetivos específicos: +bservar la e#istencia ue se produce cuando la catalasa de los te'idos del tomate act.a sobre el agua o#igenada! +bservar la e#istencia ue se produce cuando la catalasa de los te'idos de la palta act.a sobre el agua o#igenada! +bservar la e#istencia ue se produce cuando la catalasa de los te'idos de la papa%a act.a sobre el agua o#igenada! +bservar la e#istencia ue se produce cuando la catalasa de los te'idos de la lec(uga act.a sobre el agua o#igenada! +bservar la e#istencia ue se produce cuando la catalasa de los te'idos del (ígado act.a sobre el agua o#igenada!
Materiales A. Materiales: / tubos de ensa%o 05 # 051mm 0 gradilla / pipetas pl2sticas de *ml 0 mortero 0 beac3er 0 plumon indeleble 0 bagueta • • • • • • •
B. Muestras biológicas: Trozos de: tomate& palta& papa%a& lec(uga e (ígado! •
C. eactivos: Agua o#igenada al *4 Agua destilada • •
!rocedi"iento
a6 Ro.(%) a7)c(a7a*)".) %o& .(8o& 7) )"&a0o: A, B, C, D, E 0 92 86 Co%o() *% 7) a(a )" ca7a .(8o2 c6 Co%o() %a& *()&.ra& .r.(ra7a& ;a
6 )" ca7a .(8o: +(8o B – .o*a.), +(8o C –
Tubo
A(a 7)&.%a7a M()&.ra = 4,> 'O $ELOCIDA D DE REACCION
A
B
C
D
E
F
*%
*%
*%
*%
*%
+o*a.)
%)c(a
3 *%
3 *%
3 *%
3 *%
3 *%
'?a7o 3 *%
4
1
3
3
F
*%
Cuestionario 0! "n u$ reacción participa la catalasa& escriba la reacción& se,ale el sustrato % productos de la reacción6 La CA# co"o parte del siste"a antio$idante esta involucrada en la destrucción del % &O& generado durante el "etabolis"o celular. 'sta en(i"a se caracteri(a por su alta capacidad de reacción pero relativa"ente poca afinidad por el sustrato. !resenta & funciones: la catalítica y la pero$idativa. A"bas se pueden representar por la ecuación: %&O& ) %& *** &%&O ) +ustrato donador CA# La reacion general entra,a la reducción del sustrato to"ando los ato"os de -idrogeno aportados por el donador y los productos finales serian el sustrato reducido y el donador o$idado. 'n la función catalítica el donador es otra "olecula de % &O&. 'sta función solo puede ser reali(ada por la en(i"a en su for"a tetra"erica. %&O& ) %&O& * &%&O ) O& 'n la reacción pero$idativa la en(i"a puede utili(ar co"o donadores de -idrogeno al "etanol. 'tanol /cido fór"ico fe"ol y for"alde-ido. 'sta función se puede reali(ar con "onó"eros dí"eros y tetr/"eros. La actividad de la CA# puede ser in-ibida por el cianuro la a(ida el sulfuro la -idro$ila"ina el paraceta"ol la bleo"icina la adria"icina la bencidina y el para0uat.
*! 7u$ función cumple el tubo A6 entonces& ue paso o etapa del m$todo científico est2 cumpliendo % poru$! #ubo patrón el cual se deja co"o guía no se le agrega ning1na proteína para poder ver los ca"bios producidos a diferencia de los otros 0ue tenían "uestras de tejidos de vegetales y ani"ales. 8! Compare las velocidades de reacción& graficando en un papel milimetrado& usa diferentes colores para cada velocidad de reacción! Mostrado en el ane$o 2 9! -etermine ue muestra biológica contiene m2s catalasa! 'l -ígado es un órgano 0ue lleva a cabo cientos de reacciones 0uí"icas. !ara poder co"prender el efecto del agua o$igenada al ponerse en contacto con el -ígado se debe saber 0ue este órgano est/ co"puesto por diferentes en(i"as 0ue lo ayudan a reali(ar todas las reacciones necesarias.
Observación y conclusiones
La catalasa es una enzima perteneciente a la categoría de las o#idorreductasas ue cataliza la descomposición del peró#ido de (idrógeno ) *1*; en o#ígeno % agua "n el laboratorio ue (emos realizado (emos observado distintas reacciones con las diferentes muestras biológicas Tomate& Palta& Papa%a& Lec(uga e )ígado;!
Primero separamos cada muestra en cinco tubos <& C& -& " % = el tubo A es un tubo "uestra;!
Tambi$n se trituro todas las muestras para poder colocarlas en los tubos!
"n el #ubo B se agregó el agua destilada con el tomate % por .ltimo el agua o#igenada& al colocarla comenzó a reaccionar de forma ue se presentaron pocas burbu'as! "sto es debido al tratamiento t$rmico realizado& el cual desnaturaliza la enzima catalasa ue& en consecuencia& no degrada el peró#ido de (idrógeno agua o#igenada;! #ubo C con muc(as burbu'as& en el #ubo 3 regular burbu'as& en el #ubo ' al igual ue en el Tubo C reacciono con muc(as burbu'as % en el
#ubo 4 ue era el tubo ue contenía el (ígado la reacción de burbu'as fue mu% abundante& %a ue e#isten bacterias patógenas anaeróbicas no pueden vivir con o#ígeno; en sus te'idos ue consecuentemente mueren con el agua o#igenada creando un desprendimiento de o#ígeno en abundancia lo ue crea la tantas burbu'as!
Conclusión general >e pudo observar la acción de las enzimas sobre las diferentes reacciones ue realizamos& % su acción tan específica!
>eg.n lo ue vimos se pudo constatar ue el ue tuvo m2s enzimas como es el de los te'idos animales reacciono m2s ue los vegetales! Las enzimas son mu% específicas& no todo los organismos pueden metabolizar los mismos nutrientes!
Aportes 0!? Con los resultados de la tabla % los e#perimentos realizados nos dimos cuenta ue la presencia de la catalasa solo se presenta en los te'idos animales % vegetales! *!? @na reacción para ver la presencia de catalasa en nuestro organismo es Cuando sufrimos una cortada % en ese momento le agregamos agua o#igenada muc(as personas solo saben ue es para matar a las bacterias& pero no porue (a% efervescencia % el motivo es por la presencia de catalasa en nuestros te'idos!
8!? )abr2 ma%or actividad catalítica en órganos animales& %a ue producen m2s to#inas para eliminar& con lo cual tendr2n ue actuar m2s catalasas! 9!? >i el órgano est2 m2s troceado& desmenuzado& la actividad catalasica ser2 ma%or %a ue la superficie de contacto es ma%or! 5!? "n órganos animales se desprender2 m2s calor& %a ue la reacción de la catalasa es e#ot$rmica!
5ocabulario
Ca.a%a&a: La catalasa )& ("a )"*a () se encuenta )" ora"&*o& !!o& 0 ca.a%a %a 7)&co*
#a.)"o& )& a()% )%)*)".o o *)7o ca
Bibliografía •
•
•
•
Go"a%)&, C22 ;4162 ANZIMA CA+ALASA2 NO$IEMBRE 4, 415, 7) SCRIBD S.o )8: ..<&:)&2&cr872co*7oc1FP411ENZIMACA+ALASA2 D)"co"ABC2 ;41562 D)"c" 7) 8ac.)ra&2 NO$IEMBRE 4P, 415, 7) D)"co" ABC S.o )8: 27)"co"a8c2co**)7oa*8)".)8ac.)ra&2<< Mara"a ED2 ;4162 CA+ALASA DEL 'GADO DE #OLLO2 NO$IEMBRE 4P, 415, 7) SCRIBD S.o )8: ..<&:)&2&cr872co*7oc(*)".1445Ca.A%a&A Ro7a&, A22 ;4462 CA+ALASA2 NO$IEMBRE 4P, 415, 7) SRIBD S.o )8: ..<&:)&2&cr872co*7oc4P45>
ANE!O
