UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA RECINTO UNIVERSITARIO SIMON BOLIVAR
Facultad de Ingeniería Química
Curso de Titulación
Métodos para determinar azucares reductores
Elaborado por: - Gómez María Lidia
Docente: - Soraya Pérez
Managua, 20 de Agosto del 2011
METODOS PARA DETERMINAR AZUCARES REDUTORES
Los carbohidratos son polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas derivados de alcoholes. Se clasifican de acuerdo al numero de carbonos que contiene la cadena (triosas, tetrosas, pentosas, etc...) y de acuerdo al numero de monómeros que posea la molécula (monosacáridos, disacáridos, polisacáridos, etc...). Los carbohidratos, conocidos generalmente como azucares, son de los compuestos orgánicos más abundantes en la naturaleza, la mayoría de ellos proceden de las plantas y solo unos cuantos son de origen animal. Las propiedades químicas y físicas de los carbohidratos varían de acuerdo a su composición, por lo que se han diseñado pruebas específicas para su detección y cuantificación. Los monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, poseen grupos funcionales hidroxi o ceto, los cuales son reactivos químicamente, lo que permite evidenciar el poder reductor de estos azucares.
Identificación de azúcares reductores
Pueden ser cualquiera de los siguientes: glucosa, galactosa, sacarosa, lactosa o fructosa. Para ello se utilizan diversas pruebas que reconocen determinadas propiedades de los azúcares. El que una prueba sea positiva o negativa nos informará acerca de las propiedades del azúcar.
1. Ensayo de Molisch : Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
2. Ensayo de Benedict : El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo hemiacetálico libre. 3. Ensayo de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos reductores, también contiene ion cúprico que se reduce hasta óxido cuproso más rápidamente con los monosacáridos que con los disacáridos.
4. Ensayo con Lugol : El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración azul-violeta intensa y el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
5. Ensayo de Seliwanoff : Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensación con resorcinol formando así complejos coloreados.
6. Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración sólo con las pentosas. De otro lado una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar el grado de pureza de los mismos, particularmente monosacáridos es la rotación óptica ocasionada por la presencia de centros asimétricos o quirales en la estructura molecular, los cuales desvían el plano de luz polarizada. +
7. Prueba de Tollen: los azucares se mezclan con Ag en solución acuosa de amoniaco, en donde se forma un brillante espejo de plata elemental (Agº). 8. Método de Lane- Eynon: es un método volumétrico cuya característica fundamental es la determinación del volumen de solución problema; requerido para reducir completamente el volumen conocido de solución alcalina de cobre.
Los azúcares que dan resultados positivos con las soluciones de Tollens, Benedict ó Fehling se conocen como azúcares reductores, y todos los carbohidratos que contienen un grupo hemiacetal o hemicetal dan pruebas positivas. Los carbohidratos que solo contienen grupos acetal o cetal no dan pruebas positivas con estas soluciones y se llaman azúcares no reductores.
ESQUEMA DE IDENTIFICACIÓN
PRUEBA DE FEHLING Fehling: En un erlenmeyer se agrega una solución de Fehling A (CuSO4) y Fehling B (Tartrato/NAOH), se agregue agua destilada y se lleva a ebullición y se titula con la solución problema. A medida que la coloración (azul) cúprica se debilita, indica que la titulación esta llegando a su fin. Continúe la titulación hasta que el líquido que se encuentra sobre el precipitado rojo sea incoloro. Anote el volumen de la muestra problema consumido en la titulación. % Azúcar Reductor = (f / vol. Solución gastados)*100
Donde f se calcula de la estandarización de la solución de fehling. f = (ml de sol. Gastados * % sol. Glucosa * 10 ml de sol. Fehling) / 1000
BIBLIOGRAFIA :
http://www.utu.edu.uy/Escuelas/departamentos/canelones/vitivinicultura/Laboratorio/Modu lo%20propedeutico%20Practico/Ferricianuro%20de%20potasio.pdf http://practicasintegrales.files.wordpress.com/2007/09/practica-10-carbohidratos .pdf
