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Bacillu s sp p .
C TEDRA DE MICROB IOL OG A II FA CUL CULT TA D CIENCIAS VETER VETERINA INARIAS RIAS
Género Bacillus: amplio y h r n r (más de 80 especies).
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La biodiversidad encontrada entre e as a eva o a que muc as se agrupen en la actualidad constituyendo otros géneros como Brevibacillus Geobacillus o Paenibacillus.
CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO Bacilos productores de endosporas Algunos móviles por flagelos perítricos Con capacidad de elaborar cápsula Gram positivos Aerobios o anaerobios facultativos.
Capacidad de esporular: * *amplia distribución en la naturaleza (suelo, vegetales y agua). Algunas especies intervienen en: *elaboran compuestos con actividad
,
*algunas pocas especies son agentes de enfermedades en el hombre y en los animales En el laboratorio se suelen aislar con frecuencia como .
B. subtilis pueden ocasionar infecciones como oportunista B. cereus elabora enterotoxinas causantes de B. alvei (Paenibacillus alvei) y B. thuringiensis son patógenos para insectos ( pesticidas en cultivos vegetales) B. stearothermophilus (Geobacillus de esterilización.
género descripto por Robert Koch y Luis
. Robert Koch
Luis Pasteur
B. anthracis afección mortal de los animales, particularmente particularmen te bovinos y ovinos ovinos
carbunclo o antrax distribución mundial y transmisible acc en a men e a om re.
Bacilo recto Grande: 1 a 3 μm por 5 a 8 μm, con extremos truncados.
inmóvil
Grram ositivo. G
En extendidos de sangre se pueden observar bacilos aislados o en pares rodeados por una cápsula.
CAPSULA capa polimerizada de ácido poliglutámico sólo se desarrolla en el hospedador n v ro: en me os con e agrega o e suero, bicarbonato y anhídrido carbónico, condiciones . Técnica de M’ Fadyean (coloración con azul de metileno).
ESPORAS
B. anthracis esporas elipsoidales centrales
infectado y desarrollan con facilidad en cultivo. protoplasma residual del bacilo se desintegra
Coloración de Gram
Formas vegetativas y esporuladas. Coloración de Gram
Tinción negativa de la cápsula
MEB
Formas vegetativas y esporas. MET
Formación de esporas MET
CARACTER STICAS DE CULTIVO *
.
* * 24 h a 37 ºC (12-44 ºC) *En medios sólidos forma colonias grandes, , , , blanco grisáceas de 2 a 3 mm de diámetro.
*Con lupa muestran el aspecto característico: ca e era e me usa . * virulentas. *En los extendidos realizados a partir de ellas se pueden observar largas cadenas de ac os, con esporas cen ra es no deformantes semejando una “caña de ”.
* (diferencial con otras especies de . *Produce catalasa y fermenta varios hidratos de carbono con roducción de ácido. *La identificación bioquímica rara vez .
* inducen la transformación de los bacilos , , semejando un “collar de perlas”. *Presenta sensibilidad a un bacteriófago .
*Las formas vegetativas poseen bacilos no esporulados. *Su unto térmico letal es de 60 ºC en 30 minutos.
*no tiene oportunidad de esporular *se establece una competencia con microor anismos de la utrefacción: clostridios, enterobacterias o Pseudomonas, cuyas acteriocinas act an so re B. ant racis.
*En contacto con el oxígeno esporula fácilmente dentro de los 60 min *altamente resistente a los agentes ambientales como calor, radiaciones y compuestos químicos. *Puede sobrevivir durante largos periodos contaminando el suelo (100 años).
*Esporas ingresan a través de heridas, inhalación. *De los macrófagos a los ganglios linfáticos *En los tejidos germinan y se multiplican, el hospedador. *Si se eliminan al exterior, esporulan y se
Factores de virulencia *Dos factores de virulencia
estructuras como son la cápsula y las proteins) (SAP y EA1).
CAPSULA
La cápsula se considera uno de sus mayores factores de virulencia. Contribuye a que la bacteria evada las defensas del una septicemia. Es una estructura delgada, no antigénica compuesta por un polímero de ácido d-glutámico. La cápsula de naturaleza peptídica no es común en
cápsula codificada por los genes capB presentes en el locus cap del
denominado dep, está asociado a la con control del tamaño de la cápsula.
Sobre la superficie de B. anthracis se denominadas ap y codificadas respectivamente por los genes sap y eag. Sap y EA1 constituyen los mayores .
Toxinas *papel clave en la patogénesis del carbunclo. res racc ones pro e cas secre a as separa amen e a medio.
antígeno protector (PA) factor letal (LF) factor edema (FE) inoculan por separado y su asociación de a dos, conduce a la formación de un complejo denominado toxina binaria -
*La inoculación de Antí eno Protector unto con Factor Letal (LeTx, toxina letal) por vía endovenosa produce la muerte *la inoculación de Antígeno Protector junto con , intradérmica, produce edema en la piel. El Factor Edema es una enzima que presenta actividad de adenilciclasa. La actividad de adenilciclasa conduce al aumento descontrolada de las quinasas dependientes de éste desencadenando el cuadro de edema tisular.
factores de virulencia la multiplicación de las formas vegetativas en . grandes plásmidos: pXO2 (cápsula)
DIAGNÓSTICO Bacteriológico *demostración de bacilos Gram ositivos ca sulados en extendidos de sangre o tejidos * *ausencia de hemólisis sobre agar sangre *características de las colonias ausenc a e mov
a .
*prueba del collar de perlas *sensibilidad al fago gamma completan la identificación.
Mediante una técnica de se pue e de los genes codificantes para la cá sula.
inmunofluorescencia, inmunodifusión, ELISA y aglutinación
Ascoli-Valente prueba de termoprecipitación en medio líquido salina y se calienta en baño de agua, a 100 ºC durante 5 min. Se filtra por una gasa. en un tubo de hemólisis con suero inmune anillo blanco en la zona de interfase 15 min El ácido glutámico de la cápsula y el polipéptido del citoplasma serían los antígenos presentes en los tejidos, responsables de la reacción.
Ex erimental Si bien en la actualidad existen metodologías de diagnóstico normatizadas internacionalmente no se aconseja el empleo de animales de laboratorio en
Prevención . anthracis contiene sólo el plásmido p .
B
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Colonias de Bacillus antrhacis (der.) y de Bacillus cereus (izq.) en una placa de agar sangre
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Colonias de Bacillus antrhacis (izq.) y de Bacillus subtilis ( der.) en una placa de agar sangre
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Colonias de Bacillus antrhacis en a ar san re. Note la ausencia de hemólisis.
B
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Colonias de Bacillus antrhacis en a ar san re. Miden 3-5 mm y son ligeramente convexas.
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. Atmósfera: 5% CO2
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Colonias de Bacillus antrhacis en a ar selectivo después de 42 hs a 37ºC.
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el crecimiento como una línea simple que crece sin desviarse de la línea de puntura. . de Bacillus móviles con crecimiento difuso
An envelope that was sent to NBC News anchor Tom Brokaw, which contained anthrax.
Coloración de Gram
B a cillu s ce r e u s
Es un bacilo con esporas subterminales móvil por flagelos de ubicación perítrica Gram positivo aerobio y anaerobio facultativo no exigente productor de catalasa.
Ampliamente distribuido en la naturaleza y se puede aislar como ató eno o ortunista de infecciones genitales y articulares y como alimentarias (ETA).
B. cereus ro uce que provocan a liberación de enzimas de los lisosomas de los neutrófilos e impiden la fagocitosis, hemolisinas detectables in vitro y proteasas que degradan el tejido colágeno. En toxinfecciones enterotoxinas y la toxina emética. aumen an a permea a cap ar y poseen efecto citotóxico sobre el epitelio intestinal provocando un cuadro de enteritis con diarrea.
toxina emética
termoestable, resiste la acción de la
produzca durante el proceso de esporulación.
DIAGNOSTICO
a s am en o e m croorgan smo y/o e ecc n e sus ox nas
Esporas y células de Bacillus cereus
Endosporas
MEB
Es ora
Formación de la pared (60000X) MET
Agar sangre
Beta he ólisis Agar sangre