Amilase

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA SEMESTER GENAP 2015– 2016 UJI AKTIVITAS AMILASE (METODE KOLORIMETRI DENGAN PEREAKSI LUGOL)

Hari / Jam Praktikum

: Selasa / 13.00-16.00

Tanggal Praktikum

: 17 Mei 2016

Kelomok

: !" #$nam%

&sisten

: 1. &li'ia "ma (ara 2. Hen)ita *ara)ina

LABORATORIUM BIOKIMIA FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS PADJADJARAN JATINANGOR 

2016 I. Tuju! u!

1. Mengeta+ui Mengeta+ui akti,itas akti,itas enim amilase menggu menggunakan nakan meto)e meto)e kolorim kolorimetri etri )engan ereaksi lugol II. P"#!$# P"#!$#% % "".1&soransi

&soransi a)ala+ suatu olarisasi 'a+aa ang tersera ole+ a+an # komonen kimia % tertentu a)a anang gelomang tertentu se+ingga akan memerikan arna tertentu ter+a)a a+an. Sinar ang )imaksu) akn aknii ers ersia iatt mono monokr krom omati atiss )an )an mem memun una aii an anan ang g gelom geloma ang ng tertentu. eeraa atom +ana )aat menera sinar )engan anang gelomang sesuai )engan unsur atom terseut. Se+ingga memiliki siat ang sesiik agi suatu unsur atom #asset )kk4 1551%. "".2"katan likosi)ik "katan glikosi)ik a)ala+ ikatan ang menematani antara 'in'in'in'in 'in'in unit unit monos monosaka akari) ri)aa ang ang erga ergaung ung mena) mena)ii )isaka )isakari) ri)aa atau  olisakari)a. Penggaungan )ua unit monosakari)a iasana )isertai )engan +ilangna molekul air mauun gugus ungsi #inarto4 2018%. "".3Meto)e Kolorimetri Meto) Meto)ee kolo kolorim rimet etri ri a)al a)ala+ a+ meng menguk ukur ur arn arnaa suat suatu u at seag seagai ai  eran)ingan. Meto)a ini )aat )iterakan untuk enentuan komonen at arna arna atauun atauun komon komonen en ang ang elum elum earn earna4 a4 namun namun )engan )engan menggunakan reagen earna ang sesuai )aat meng+asilkan senaa  earna ang meruakan ungsi )ari kan)ungan komonenna. komonenna. Jika tela+ ter'aai kesamaan arna erarti umla+ molekul at enera ang )ileati sinar a)a ke)ua sisi terseut tela+ sama )an ini )ia)ikan )asar   er+itungan #assett )kk4 1551%.

"".9Meto)e araa ; Somogi Penguian akti,itas amilase ini errinsi a)a meto)e araaSamog Samogii )engan )engan 'ara menguk mengukur ur asor asorasi asi ati ati ang ang tera) tera)ii karena karena akti,itas amilase ang men)egra)asi ati a)a ikatan gilosi)ik )engan  enama+an in)ikator Kalium "o)i)a. # Poe)ia)i4 Poe)ia)i4 1559%. III.

R&'$#

#inarno4 1558%. IV.

T&"# D$" $nim meruakan meruakan unit ungsional ungsional )ari metaolisme at4 ekera ekera )engan )engan

urut urutan an ang ang tera teratu turr. $ni $nim m meng mengka kata tali liss ratu ratusa san n reak reaksi si ta+a ta+a  ang ang meng mengur urai aika kan n

mole moleku kull

nukl nuklea eat. t.

Mela Melalu luii

akti akti,i ,ita tasn sn a4

sist sistem em

eni enim m

terkoor)inasi terkoor)inasi )engan aik meng+asilkan meng+asilkan suatu +uungan +uungan antara seumla+ akti, akti,ita itass meta metaol olik ik ang ang er ere) e)aa ang ang )ie )ierlu rluka kan n untu untuk k menu menun nan ang g ke+i)uan #
enim terseut. $nim )isini memunai eranan katalis )alam menurunkan akti,itas akti,itas )ari reaksi energi. energi. &kti,asi )aat )iartikan )iartikan seagai seagai seumla+ seumla+ energi energi atau kalori ang )iturunkan ole+ suatu mol at a)a temeratur tertentu untuk  memaa memaa molekul molekul ke)alam ke)alam aktina aktina atau kea)aan aktina4 aktina4 menurunkan menurunkan energ energii akti,a akti,asi4 si4 memer memer'ea 'eatt reaksi reaksi a)a a)a su+u su+u )an tekanan tekanan teta teta tana tana meng mengu ua+ a+ esar esarn naa teta tetaa an n seim seiman angn gna a44 )an )an meng mengen en)a )ali lika kan n reaks reaksii #ira+a)ikusuma+4 15=5%. Ke'eatan reaksi enim sangat )iengaru+i ole+ H larutan aik se'ara in ,i,o mauun se'ara in ,itro. Jenis +uungan antara ke'eatan reaksi )an  H )itunukkan )engan kur,a erentuk lon'eng. Setia enim memunai  H otimum ang ere)a;e)a ere)a;e)a #H4 *4 amonia4 urea4 urea4 komon komonen en non-im non-imuno unolog logii )an uga uga )aat )aat erun erunggi ggi seagai seagai uer  uer  #Ki))4 et all4 1552%. (i )alam )alam air lu)a+ lu)a+ uga uga ter)a ter)aat at suatu suatu enim enim ang ang erun erungsi gsi )alam )alam  roses en'ernaan4 aitu enim amilase #tialin%. $nim ini mamu mengua+ amilase mena)i maltosa #Ki))4 et all4 1552%. &milase a)ala+ segolongan enim ang meromak ati4 glikogen4 )an  olisakari)a. &milase memotong rantai olisakari)a ang anang )an akan meng+asilkan 'amuran glukosa )an maltosa #*o?4 1551%.

$nim amilase )aat )ierole+ )ari sekresi air liur atau sali,a. Sali,a a)ala+ suatu 'airan oral ang komleks )an ti)ak erarna ang ter)iri atas 'amuran sekresi )ari kelenar lu)a+ esar )an ke'il ang a)a a)a mukosa oral. Sali,a )iseut uga kelenar lu)a+ atau kelenar air liur. Semua kelenar  lu)a lu)a+ + mem memun unai ai ung ungsi si untu untuk k mem meman antu tu men' men'ern ernaa maka makana nan n )eng )engan an mengeluarkan suatu sekret ang )iseut sali,a. #Ki))4 et. al4 1552%. &kti,itas amilase )aat )itentukan )engan meto)e araa@Somogi ang menggunakan io)in / kalium io)i)a )an menggunakan sektrootometer  ang mengukur enurunan asoransi ati #&iuka4et. a l4 2005%. Meto)e araa-Somogi io)in/kalium io)i)a4 ta+a ertama meto)e ini a)ala+ gelatinisasi gelatinisasi atau likuiikasi likuiikasi ati se+ingga se+ingga meng+asilkan meng+asilkan larutan  starch ang aku.
meme' eme'a+ a+ ati ati

ang ang

meng+asilkan gula se)er+ana seerti ruktosa4 maltosa4 glokosa4 )an )ektrin. $nim amilase memungkinkan molekul-molekul untuk memutus )i titik-titik  tertentu. &milase )aat )iukur a)a a)a 'airan tuu+ seerti urin )an )ara+ ang )aat memerikan etunuk untuk kon)isi me)is ter tentu #*o?4 1551%.

$ni $nim m amil amilas asee terl terli iat at )ala )alam m reak reaksi si anti antiin inl lam amas asi4 i4 see seert rtii ang ang )iseakan )iseakan ole+ eleasan eleasan +istamin +istamin )an at-at serua. serua. Aesons Aesons inlamasi  iasana tera)i )i organ ang er+uungan )engan )unia luar4 aitu aru aru )an kulit #&iuka4et. al4 2005%. V. A* +! B,! B,! V.1 &lat 1. atang enga)uk

2. elas kimia

3. Mi'roiet

9. Mi'ro rolate

8. Piet tetes

6. Satel

Aea)er

7. Satel

8.2 a+an

VI.

1. &milum 2. &Cua)es 3.
=. aterat+

Sean Seanak ak 100 mg amilum amilum )ilaru )ilarutka tkan n )alam )alam 20 m< aCua)est4 aCua)est4 lalu )ianaskan +ingga larut semurna.
aCua aCua)e )est st +ingg +inggaa 20 m<. (iami (iamill 2 m<

larutan )an )ien'erkan )engan aCua)est )alam lau ukur 20 m<. 6.3
Enit/m< =

starch terpakai ( mg ) starch enzim m dala dalam m camp campur uran an x volu volume me tota totall x t  ( ml ) enzi

 Aktivitas Spesifik ( U / mg)

＝

(

U  ) × 1 / C  mL

VII. VII. D* D* P&!P&!- * *! ! +! +! P&" P&",# ,#*u *u!!-! ! VIII. II. P&/ /,$ ,$! I. S#%u!

D*" Pu$*'

&iuka4 et. al. 2005. (etermination o amlase a'ti,it o 'ru)e e?tra't rom  artiall germinate) mango see)s see )s #Mangiera ora+ila%. African ora+ila%.  African Journal  of Biotechnology Vol. 8 (14), pp. !"4#!"$, !% July, !%%" . "SSF 16=9;  8318. *o?4 P.*. 1551. 1551 . &ood 'nyology Vol !. ! . or  "n)onesia. J. assett4 A.. (enne4 (enne4 .H. Jeer4 Jeer4 )an J. Men)+am.1551. Men)+am.1551.  Bu+u Aar Vogel/  0iia Analisis 0uantitatif Anorgani+ Anorgani+ tereahan dari Vogel ogelss -e2t3oo+  -e2t3oo+  of uantitativ uantitativee 5norgan 5norganic ic Analysis Analysis 5ncluding 5ncluding 'leentary 'leentary 5nstruental  5nstruental   Analysis, penereah/ A. 6adyana 7. 7. dan 5r. 5r. . 9etiono. 9etiono . Jakarta: Penerit Ki))4

uku Ke)okteran $. $.&.M.4 et. al. 1552.

 asar#asar

0aries

7enya+it

dan

 7enanggulangannya  7enanggulangannya.. Jakarta: $.