LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA No. 2 UBICUIDAD DE LOS MICROORGANISMOS, CARACTERISTICAS CULTURALES Y AISLAMIENTO Anderson Diaz Diaz Murangal Murangal (2120351077), (2120351077), Fernanda Fernanda Stephany Enríquez Enríquez Gómez (2120351078), María Fernanda Enríquez Gómez (2120351080), Karla Moreno Muñoz (2120351151). Universidad de Nariño, Facultad de Ingeniería Agroindustrial, Semestre 4
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[email protected] INTRODUCCIÓN Los microorganismos se encuentran en los más diversos ambientes y materiales cumpliendo funciones beneficiosas o perjudiciales. Esa ubicuidad de los microorganismos se debe tener en cuenta para tomar las precauciones pertinentes e impedir que éstos vayan a interferir en el trabajo que se esté realizando sea en una farmacia o en un laboratorio1. Aunque no puedan puedan verse los microorganismos a simple vista, cuando se cultivan en un medio adecuado, se observa manifestaciones de su crecimiento, por ejemplo, el crecimiento algodonoso y coloreado de mohos sobre alimentos, cueros, etc 1. Algunas de las características características de la ubicuidad de los microorganismos son: el pequeño tamaño, que les permite dispersarse fácilmente, su variabilidad y flexibilidad metabólica, que les permite tolerar y adaptarse a condiciones ambientales desfavorables, y su gran capacidad de transferencia horizontal de genes, que les permite recombinar y
recolectar los caracteres positivos y persistir durante largo tiempo adaptándose a condiciones ambientales cambiantes. Independientemente de la constante relación rechazo (enfermedad, degradación)-dependencia (utilización de microorganismos para fabricar productos, queso, cerveza, antibióticos, enzimas, etc.) entre los humanos y los microorganismos, este grupo de organismos "invisibles" representan un vasto terreno inexplorado de 2 conocimiento y diversidad biológicas . JUSTIFICACIÓN Esta práctica se la realizo con el objetivo de identificar microrganismos que se hallan en partes de nuestro cuerpo y lugares frecuentes, y de esta manera también aplicar las normas de bioseguridad necesarias para garantizar no solo la calidad de nuestros cultivos sino también para evitar posibles riesgos biológicos. PROCEDIMIENTO
Cada caja con los medios de cultivo se pasó con mucho cuidado sobre la flama del mechero. Para la siembra de las cajas de agar nutritivo se realizó lo siguiente: en la primera caja se humedeció un hisopo en solución salina, y se froto el piso del laboratorio, luego se froto suavemente sobre el agar haciendo estrías. En la segunda caja se seleccionó un billete y se realizó el procedimiento anteriormente descrito. Para sembrar las cajas de agar sangre en la primera caja se tomó un escobillón humedecido en solución salina, este se froto sobre el cuero cabelludo y se sembró en forma de estrías sobre el agar sangre. En la segunda caja, con un escobillón seco se froto dentro de la boca y se sembró en forma de estrías sobre el agar sangre. Cada caja fue marcada correctamente para identificación posterior. Por último, las cajas se llevaron a incubar a 37 °C por 24 horas. RESULTADOS Billete: 2 colonias Forma: redondeada Aspecto: aspero ahí le pusimos talvez anillos, para el grande Color azul verdoso y los puntico amarillos Consistencia algodonosa pero solo del grande delos amarillos no la tenemos Elevación papilada Borde entero Cabello: 3 colonia s y Anderson puso puntiformes Forma: redondeada
Aspecto : pulidas Color gris amariilo y blanco Consistencia mantecosa Elevación convexa y bordes enteros Y Anderson hizo lo de las blancas Puntiformes Redondeadas Bordes enteros Incontables de color blanco Garganta: 3 colonias Forma: irregular, puntiformes Aspecto: asperas Color: amarillas, blancas grisáceas y transparentes. Consistencia mantecosa Elevación convexa Borde ondulado Piso: colonias 5 (hongos) Forma: ramificada Aspecto algodonoso Color beige Consistencia fibrosa Elevación plana Borde filamentoso Como se sabe, el cuero cabelludo es tejido cutáneo, por lo que contiene glándulas sudoríparas y sebáceas que generan sudor y sebo respectivamente el cual promueve el crecimiento de microorganismos. Por lo tanto la caja que presento mayor desarrollo de colonias fue la que contenía esta muestra; además de los anteriores factores esto se podría contribuir a la exposición del medio ambiente. CUESTIONARIO 1. Que es una colonia bacteriana? Se entiende por colonia bacteriana la agrupación de bacterias originadas a
partir de una bacteria madre que se establecen y extienden por determinado medio3. 2. Por qué en nuestro cuerpo se presentan áreas colonizadas por bacterias, que representa esta situación? El cuerpo humano normalmente alberga varios cientos de especies bacterianas y un número más pequeño de virus, hongos y protozoos. La mayoría de ellos son comensales, ya que viven con nosotros sin causar daño. Su número, así como la variedad de especies, cambia permanentemente. En cada momento cada uno de nosotros posee un espectro particular e individualizado de microorganismos5. Los microorganismos se encuentran en aquellas partes del cuerpo expuestas al medio ambiente o que comunican con él como piel, nariz y boca, intestino y tracto urogenital. Los órganos y tejidos internos son habitualmente estériles 5. 3. Especifique por áreas corporales los tipos de microorganismos que normalmente se encuentran, microbiota. La flora normal o microbiota se refiere a aquellos microorganismos que habitualmente encontramos sobre la superficie o en el interior del cuerpo de las personas sanas. La flora normal se adquiere con rapidez durante y poco después del nacimiento y cambia de constitución en forma permanente a lo largo de la vida 4.
AREAS MAS COLONIZADAS DEL ORGANISMO Sitio anatómico Ubicación específico Áreas húmedas: región inguinal, Piel región axilar, espacio interdigital de los pies. fosas nasales, Tracto respiratorio faringe boca, intestino Tracto digestivo grueso Tracto tercio anterior, genitourinario uretra, vagina 4. Que precauciones se deben tener para evitar contaminaciones en microbiologíacultivos. Para impedir la contaminación de los cultivos, es necesario tener plena conciencia de la ubicuidad de los microorganismos, de este modo en la transferencia de una muestra microbiológica a otro recipiente, se deben tener una serie de cuidados que eliminen los riesgos de contaminación. Estos incluyen el área de trabajo, el lavado de las manos, la esterilización de todos los utensilios y medios de cultivo a emplear y realizar la transferencia del microorganismo en una zona estéril, la que se obtiene trabajando cerca de la flama del mechero 5. Trabajar siempre al lado de una llama. Esta llama crea a su alrededor una atmósfera estéril y además la utilizaremos para esterilizar o flamear parte del material que utilizamos durante la siembra. Las tapas de las placas de
Petri no deben colocarse nunca sobre la mesa de trabajo 6. Evitar hablar durante la siembra para así evitar la contaminación de bacterias provenientes de la boca. 5. Qué es un cultivo puro y como se obtiene? Se denomina cultivo puro (axénico) al que contiene sólo un tipo de microorganismos. Los cultivos puros se inician a partir de colonias aisladas, de manera que todos los individuos del mismo tengan la misma composición genética. Los cultivos puros son esenciales para poder estudiar las características de los microorganismos y para poder identificarlos con seguridad 7. La obtención de un cultivo puro se hace mediante una técnica de aislamiento. La técnica de aislamiento más utilizada consiste en sembrar en un medio de cultivo sólido en placa de tal manera que los microorganismos generen colonias separadas ("Aislamiento por agotamiento en estrías"). Se sabe que cada colonia procede de una sola célula. Por lo tanto el cultivo descendiente de una colonia es un cultivo puro 8. CONCLUSIONES - La caja que presento mayor desarrollo microbiano fue la de la muestra del cuero cabelludo debido al sudor, el sebo y la exposición del medio ambiente. - Para evitar que los medios de cultivo se contaminen en el momento de la siembra, se debe esterilizar el sitio de trabajo, no hablar durante la siembra y trabajar cerca del mechero.
- Las colonias bacterianas tienen una medida, forma, textura y en algunos casos color característicos, que aunque puede variar de acuerdo al medio en que se encuentren, es constante bajo condiciones controladas y depende de la especie bacteriana que la forme. - Una colonia es una agrupación de bacterias formada a partir de la reproducción de una unidad formadora de colonia sobre un medio sólido; aunque varía de tamaño generalmente es visible a simple vista. - Un cultivo puro es aquel que contiene una sola clase de microorganismos. BIBLIOGRAFÍA 1. Los microorganismos en el ambiente. Página web. En: http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/f acultad_farmacia/catedraMicro/10_Los_ microorganismos_en_el_ambiente.TPN_ 2.pdf. [Consulta: 29 de agosto de 2013]. 2. Importancia de la microbiología. Ubicuidad de la microbiología. Página web. En: http://inter-micro-uvm.overblog.es/article-33657810.html. [Consulta: 29 de agosto de 2013]. 3. Introducción a la Microbiología. Colonia bacteriana. Página web. En: http://www.monografias.com/trabajos16/ microbiologia/microbiologia.shtml. [Consulta: 29 de agosto de 2013]. 4. Boletín de la escuela de medicina. Flora bacteriana normal. Montiel, F. Página web. En: http://escuela.med.puc.cl/publ/boletin/lab
oratorio/florabacteriana.html. 29 de agosto de 2013].
[Consulta:
5. Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estudio de bacterias. Página web. En: http://es.scribd.com/doc/14173131/5Tecnicas-Basicas-Para-El-Cultivo-deMicroorganismos. [Consulta: 29 de agosto de 2013]. 6. Técnica aséptica. Página web. En: http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demo s/microbiologia/unidades/curso/UNI_02/u 2c5s1.htm. [Consulta: 29 de agosto de 2013]. 7. Microbiología General. Cultivo de microorganismos. Página web. En: http://www.unavarra.es/genmic/microgral/ Tema%2002.%20Cultivo%20de%20microorganismos. pdf. [Consulta: 29 de agosto de 2013]. 8. Obtención de cultivo puro. Página web. En: http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demo s/microbiologia/unidades/curso/UNI_02/u 2c5s2.htm. [Consulta: 29 de agosto de 2013].