INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DEPART DEPARTAMENTO MICROBIOLOGÍA MICROBIO LOGÍA Laboratorio De Microbiología Industrial
PRACTICA 1. AISLAMIENTO Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS DE INTERES INDUSTRIAL
Integrantes: Grupo:
Pro#esores: o
Sección:
E!uipo: "
Objetivo Ais$ar %icrorganis%os espec&'cos (e una #uente org)nica o inorg)nica con e$ 'n (e se$eccionar a!ue$$os !ue cu%p$an con $a presión (e se$ección * criterios (e se$ección para ca(a tipo (e %icrorganis%o+ Objetivos espe!"os • •
Ais$a%iento (e $e,a(uras Ais$a%iento (e -ongos pro(uctores (e )ci(os org)nicos Asi$a%iento (e %icrorganis%os -a$o#&$icos a%i$o $&ticos * proteo$&ticos
Di#$%#&# 'e p%oeso Ais(#&ie)to 'e (ev#'*%#s
Ais(#&ie)to 'e +i'os o%$+)ios
Ais(#&ie)to 'e ,#(-"(ios #&i(o(itios / p%oteo(!tios0
• • • • •
teo(!tios 0
Res*(t#'os
En $a ta.$a/+ Siguiente se %uestran $os resu$ta(os 'na$es o.teni(os (e $os ais$a%ientos (e $os %icrorganis%os 0$e,a(uras1 $e,a(uras #or%a(oras (e )ci(os org)nicos1 -a$o'$icos %o(era(os proteo$&ticos * a%i$o$iticos21 en (on(e se e,a$uó $a #uente (e ais$a%iento1 $a presión (e se$ección1 e$ criterio (e se$ección * a$gunas o.ser,aciones+ T#b(# 1. Res*(t#'os 'e #is(#&ie)to 'e &i%o%$#)is&os e) 'ive%s#s *e)tes Mi%o%$#)is &o Lev#'*%# Lev#'*%# p%o'*to%# +i'os o%$+)ios ,#(-"(ios
,#(-"(ios #&i(o(itio ,#(-"(ios p%oteo(!tio
3uente (e asi$a%iento Man4ana Papa*a Man4ana Papa*a
Presión (e se$ección 5" 6C Tie%po incu.ación 07 -rs2 86C Car.onato ca$cio a$ /+9 gL
Criterio (e se$ección Mor#o$og&a co$onia$ Mor#o$og&a %icroscópica ;a$os (e so$u.i$i4ación (e$ car.onato
5"6C Concentración (e sa$ => Tie%po incu.ación A(ición (e a$%i(ón /> a$ %e(io só$i(o para -a$ó'$icos Me(io $ec-e (escre%a(a 0case&na2 * %e(io só$i(o para -a$ó'$icos p; "+5
Mor#o$og&a %icroscópica Creci%iento
O.ser,aciones
Mor#o$og&a %icroscópica ;a$o -i(ro$isis
Si -u.o creci%iento en a%.as %uestras Si se presentaron ;a$os (e -i(ro$isis Se o.ser,aron cocos1 streptococcos * cocos en t?tra(as No #ueron pro(uctores (e a%i$asas
Mor#o$og&a %icroscópica ;a$o (e -i(ro$isis
No #ueron pro(uctores (e proteasas
AISLAMIENTO2 CARACTERI3ACIÓN PARCIAL Y PER4IL DE PRODUCCIÓN EN3IM5TICA DE BACTERIAS ,ALÓ4ILAS Y ,ALOTOLERANTES DE LA LAGUNA C,AIR6OTA2 POTOS7 8 BOLI9IA La $aguna C-airota1 se encuentra en $a #racción %ontaosa %)s a$ta (e $os An(es+ Esta )rea es inusua$ en ,arios aspectos: se encuentra en un $ugar )ri(o a se%i)ri(o1 es un )rea (e intensa e,aporación * acu%u$ación (e sa$1 e$ agua se caracteri4a por un p; re$ati,a%ente a$to1 tiene a$ta (ensi(a( (e (epósitos %et)$icos * %eta$oi(eos * por $ti%o es ,o$c)nica%ente acti,o1 contenien(o nu%erosos %anantia$es (e aguas ter%a$es *o sa$inas+ na ,arie(a( (e %icroorganis%os -a.itan a%.ientes etre%os1 estos %icroorganis%os $$a%a(os etre%ó'$os pro(ucen en4i%as 0etre%os4i%as2 !ue son (e gran i%portancia .iotecno$ógica+ E$ presente tra.aFo tu,o co%o o.Feti,o contri.uir a rea$i4ar un ais$a%iento * caracteri4ación (e .acterias (e una $aguna sa$a(a * a$ca$ina * a$ %is%o tie%po se o.tu,o un per'$ en4i%)tico para una posterior ap$icación en $as (istintas )reas in,estiga(as (e$ $ugar+ E$ ais$a%iento (e$ -a$o#&$icos %o(era(os * etre%os es i%portante *a !ue estos son capaces (e pro(ucir -i(ro$asas !ue proporcionar)n $a posi.i$i(a( (e tener acti,i(a(es ópti%as a (i#erentes concentraciones (e sa$ !ue po(r&an ser ti$es en a$gunos procesos in(ustria$es+ Las .acterias -a$ó'$as %o(era(as -an a$can4a(o reciente%ente un gran inter?s en e$ ca%po (e $a (egra(ación (e $os resi(uos tóicos+ Constitu*en una i%portante a$ternati,a a $os trata%ientos %icro.io$ógicos con,enciona$es en a!ue$$os casos en $os !ue ?stos sean ine'caces1 co%o son $os procesos in(ustria$es !ue generan aguas resi(ua$es -ipersa$inos+ Esto suce(e1 por eFe%p$o1 en $a pro(ucción (e (i,ersas sustancias !u&%icas co%o $os pestici(as1 (eter%ina(os pro(uctos #ar%ac?uticos * -er.ici(as1 * $os procesos (e etracción (e petró$eo * gas+ Para $a %eto(o$og&a e%p$ea(a en esta in,estigación (e %anera an)$oga a $a eperi%enta(a en c$ase se$ecciona(o $os puntos (e %uestro (e$ $ago * proce(ien(o a su reco$ección (e %anera as?ptica para su posterior inocu$ación %e(io $&!ui(o -eterotró'co 0;M2 o !ui%iorganotró'co 0M2 esteri$i4a(o a //H c * /9 $. (urante /9 %inutos1 (entro (e un %atr)4 (e 9= %$ con 8= %$ (e %e(io (e cu$ti,o+ Este pri%er inócu$o se (eno%ina pre inócu$o1 en e$ cua$ $os %icroorganis%os pue(en a%.ientarse * reacti,arse+ E$ %atr)4 #ue incu.a(o
(urante 7 -oras en un incu.a(or rotatorio 0s-aer2 a 5=Hc * == rp%+ A continuación se rea$i4ó un segun(o inócu$o igua$ a$ pri%ero1 uti$i4an(o e$
pre inócu$o co%o %uestra * se (eFó incu.ar en e$ s-aer a 5=H c * == rp%+ A (i#erencia (e nosotros !ue no e%p$ea%os un $a pre incu.a(ora $o cua$ -u.iese #aci$ita(o $a generación (e estas cepas+ A continuación Luego se rea$i4aron (i$uciones en serie /:/= * se se%.raron por super'cie $as (i$uciones /= * /=" en caFas petri con %e(io só$i(o M o ;M * se (eFó incu.ar (urante 7 a 78 -oras+ Esto segura%ente por $a gran canti(a( (e .io%asa encontra(a en prue.as pi$oto+
Despu?s se rea$i4ó $a caracteri4ación %or#o$ógica para (eter%inar e$ ais$a%iento (e $as cepas para o.tener cu$ti,os an?nicos1 a$ igua$ !ue nosotros %e(iante una tinción gra%J $a %or#o$og&a (e $a co$onia .acteriana se re'ere a $a apariencia (e $as co$onias ais$a(as+ Estas caracter&sticas #&sicas son co%n%ente espec&'cas para ca(a tipo (e .acteria * pue(e ser usa(a para reconocer$a+ Para $a caracteri4ación (e $a co$onia se to%aron en cuenta par)%etros (e co$or1 #or%a1 .or(e1 .ri$$o1 e$e,ación * consistencia+ A(e%)s se anotó en .it)cora to(o ca%.io u o.ser,ación !ue no se inc$u*era en $a $ista anterior+ 3ina$%ente para (eter%inar si $as .acterias son -a$ó'$as o -a$oto$erantes se rea$i4ó una ,ariación (e NaC$ para to(as $as .acterias1 se se%.raron to(as $as .acterias en caFas petri con %e(io (e cu$ti,o ;M o M con $a %is%a concentración (e NaC$1 * se repitió $a operación para ca(a una (e $as concentraciones (e NaC$ !ue #ueron =1 91 /=1 /91 =>+ Se (eFaron incu.an(o a 5=6 C (urante " (&as * se contro$ó e$ creci%iento ca(a 7 -oras+ Se anotaron $as .acterias !ue crecieron * $as !ue no para (eter%inar si son -a$ó'$as o -a$oto$erantes en ca(a concentraciónJ a (i#erencia (e nosotros !ue nica%ente se%.ra%os $as co$onias en %e(ios (e cu$ti,o con una concentración (e => para (espu?s proce(er a $a (eter%inación (e $a eistencia (e proteasas o a%i$asas+ En $os resu$ta(os registra(os1 (e $os "/ %icroorganis%os1 / cepas son -a$ó'$as1 * 9= son -a$oto$erantes1 9 cepas a$ca$ó'$as1 7 cepas neutró'$as * cepas a$ca$oto$erantes+ Por $ti%o se encontró /= cepas psicroto$erantes * / cepas %esó'$as+ Den(ro (e $as co$onias caracteri4a(as co%o -a$o#&$icas se co%pro.ó !ue estas cepas tienen %)s i$anasas1 proteasas * ce$u$asas+ En nuestro caso encontra%os !ue ninguna (e nuestras co$onias ten&a a$guna (e estas en4i%as1 esto pue(e (e.erse a !ue a (i#erencia (e $as tra.aFa(as en $a in,estigación1 nuestra %uestra se trató (e un pro(ucto (e gra(o a$i%enticio en (esco%posiciónJ o ta$ ,e4 a !ue e$ trata%iento para e$ acon(iciona%iento (e $as %uestras no #ue su'ciente para generar $as con(iciones a(ecua(as para $a generación (e estas .acterias+
