Aislamiento y Selección de Microorganismos Productores de Enzimas

AISLAMIENTO AISLAMIENTO Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS MICROORGANISMOS PRODUCTORES DE ENZIMAS (AMILASAS)

INTRODUCCION Las enzimas son proteínas que actúan como aceleradores de las reacciones químicas, de síntesis y degradación de compuestos, estas se encuentran en todos los seres vivos y son piezas esenciales en su funcionamiento. Estas tienen muchas aplicaciones en diversos tipos de industrias, entre las que se destaca la alimenticia; por ejemplo en la obtención de yogurt, o la producción de cerveza o de vino, ya que el proceso de fermentación se debe a las enzimas presentes en los microorganismos microorganismos que que intervienen en su producción. Sin embargo, embargo, para mejorar los procesos de producción, pueden utilizarse enzimas aisladas, sin incluir a los microorganismos que las producen. Desde hace unas décadas se dispone de enzimas relativamente puras extraídas industrialmente de bacterias, hongos, plantas y animales, con una gran variedad de actividades. Las amilasas son enzimas que catalizan las reacciones hidrolíticas del alm idón, dando origen a diversos productos que poseen una gran relevancia para algunas operaciones y procesos industriales. Las amilasas ami lasas son comúnmente halladas en animales y plantas; sin embargo, para fines industriales, las más utilizadas son aquellas de origen bacteriano o fúngico. Las amilasas poseen una gran importancia en la producción de alimentos y de biocombustibles. También presentan gran utilidad en la industria textil. Se han utilizados amilasas para la obtención de jarabes fructosados. La producción de dichas enzimas enzimas se ha hecho a partir de  Bacillus sp.   Por lo aún se siguen buscando microorganismos específicos que reporten mejores rendimientos para optimizar los procesos industriales.

OBJETIVOS 

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Aislar y seleccionar microorganismos productores de amilasas a partir de de 2 muestras: suelo de cultivo y humus. Medir los halos generados generados por la degradación del almidón por efecto de las amilasas. Seleccionar la cepa con mayor halo producido.

MATERIALES 

       

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Solución Salina Fisiológica estéril PDA Cloranfenicol Tubos Placas Agar almidón 1% Muestra de suelo de cultivo Muestra de humus

PROCEDIMIENTO AISLAMIENTO: Se colocó 1g de suelo de cultivo y/o humus en una bolsa de primer uso que contenía SSF estéril. Se realizaron diluciones sucesivas hasta 10 -2 utilizando tubos con 9ml de SSF estéril. Se realizó la siembra de las dos últimas diluciones en agar Almidón al 1% por estría y agotamiento y se incubo a 37°C por 24 horas.

SELECCIÓN: Se sembró de manera ordenada y por puntura cada cepa desarrollada en placas con agar almidón 1% y en placas con agar nutritivo del mismo modo, de manera que se obtuvo una réplica de las cepas en agar nutritivo, codificando las cepas. Se incubo a 37°C durante 24 horas. Se adiciono lugol en la placa de agar almidón 1% y se observó las colonias con halos generados por la degradación del almidón por efecto de las amilasas. Se replicó las cepas que produjeron halos (presentes en agar nutritivo) en placas de agar almidón al 1% esta vez separadas para poder medir bien los halos producidos. Se adiciono lugol en la placa de agar almidón 1% y se seleccionaron las cepas con los halos de mayor tamaño.

RESULTADOS Se analizaron las medidas de los diámetros de los halos de degradación de almidón 1% de todas las mesas de trabajo.

Mesa

1

2

3

Cepas

Halo (mm)

 AI-E  AI-A HI-F HI-E G-3 G-6 G-1 H-3 H-I

8 5 2 3 12 5 2 2 2

S-9

8

Cepa con mayor producción de amilasa  AI-E

G-3

S-9

DISCUSIÓN Las cepas con mayor halo de producción de amilasas pertenecen a la mesa 2 fue de 12mm las cuales fueron aisladas de las muestras de humus. Ninguna de las cepas obtenidas fue considerada como buenas productoras de amilasas, puesto que las medidas de los halos debieron ser mayores para ser consideradas como tal.

ANEXOS 1- Aislamiento de microorganismos productores de amilasas a partir de suelo de cultivo y humus

2- Aislamiento de microorganismos productores de amilasas

3- Cepas en agar almidón con lugol adicionado y cepas en agar nutritivo

4- Selección de microorganismos productores de amilasas

BIBLIOGRAFIA:

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https://es.slideshare.net/LuzFernanda/amilasas-pracmindustrial

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https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/8262/tesis246.p df?sequence=1&isAllowed=y

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https://www.cosmos.com.mx/wiki/amilasas-cxhj.html