Recuento De Coliformes En Alimentos. Count Of Coliform In Food.
Angarita Bautista Leidy Yudith Código: 02171043, Eulegelo Osorio Yulie Astrith Código: 03172027, Parada Cardenas Geisel Yelene Código: 04172026, Porras Manrique ana patricia Código: 03172011 RESUMEN Los jugos de frutas que se venden en las calles, poseen fuerte potencialidad para la tran transm smis isió ión n de enfe enferm rmed edad ades es gast gastro roin inte test stin inal ales es debi debido do a que que son son alim alimen entos tos extensamente manipulados. Los coliformes son microorganismos que se utilizan como índice de contaminación fecal al encontrarse principa principalmente lmente en el intestino del hombre y animales de sangre caliente. En algunos alimentos se requiere la investigación de la presenc presencia ia o ausencia ausencia de estos estos microorga microorganism nismos, os, por exigenc exigencias ias de disposici disposiciones ones legislativas porque en dichos productos la presencia es indicadora de mala calidad microbiológica. La metodología es basada en sembrar en el Agar Chromocult y caldo Lauryl Sulfato de la cantidad de muestra en la que se quiera conocer la presencia o ausencia de coliformes totales y fecales, y posterior incubación a 37 ºC durante 48 horas. Las colonias sospechosas se confirman con las pruebas IMVIC y emisión de fluorescencia. Coliformes, es, NMP (numero (numero más probabl probable), e), Recuen Recuento, to, Vertido ertido en Palabras Palabras Claves: Claves: Coliform placa, E. coli.
ABSTRACT The fruit juices sold on the streets are good vehicle to transmit gastrointestind gastrointestind diseases to consumers consumers because because they are highly highly manipulat manipulated. ed. The coliform coliform organisms organisms that are used as an indicator of fecal contamination to be found primarily in the intestines of human humans s and warm warm-bl -blood ooded ed animal animals. s. In some some foods foods is requi require red d invest investiga igatin ting g the pres presen ence ce or abse absenc nce e of thes these e micr microo oorg rgan anis isms ms,, eith either er beca becaus use e of legi legisl slat ativ ive e requi equirremen ements ts well well in thos those e produ product cts s that that the the pres presen ence ce is indi indica cati tive ve of poor poor microbiological quality. The methodology is based in sow in the Chromocult Agar and Lauryl Sulfate Broth of the amount of shows in which they want to know the presence or absence of fecal and total coliform, and after incubation at 37 °C for 48 hours. The suspect colonies are confirmed with evidence IMVIC and issuance of fluorescence.
Key Word: Coliform, MPN (most probable number), Count, Landfill plate, E. coli.
INTRODUCCION La vent venta a de alim alimen ento tos s en la call calle e constituye un factor positivo por su posi posibi bili lida dad d de gene genera rarr empl empleo eos, s, movilizar gran cantidad de recursos y satis satisfac facer er la obtenc obtención ión de obtene obtenerr comidas rapidas, entre otras ventajas; pero la frecuente presenta presentación ción de malas malas condicione condiciones s higi higien enic icas as en el proc proces esam amie ient nto o y ofer oferta ta seña señala lan n la impo import rtan anci cia a de mantener el control sanitario a esta actividad. Los microorganismos patógenos que se han han dete detect ctad ado o en alime imentos ntos vendidos en la calle no difieren de los los enco encont ntra rado dos s en las las comi comida das s preparadas y servidas en establec establecimie imientos ntos cerrado cerrados, s, aunque aunque los prob proble lema mas s pote potenc ncia ialles son mayores y más frecuentes. En este sentido se reconoce la necesidad de mejorar los programas de protección de los consum consumido idore res s de alime alimento ntos s que se venden en las calles.
MATERIALES * 4 cajas de petri estériles * 9 tubos estéries con campana de durman y caldo Lauryl Sulfato. * 2 pipetas estériles de 10ml * 2 pipetas estériles de 1ml * 1 pipeteador * 1 gradilla * 2 fiolas con caldo peptona estériles
METODO * Tipo de muestra: Jugo pasteurizado Fecha Fecha vencimiento: 18/03/09 Lote: 31701 Sabor: Fresa Fresa Marca: Alpina
* Tipo de muestras: Jugo casero Fecha de preparación: 19/08/08 Hora: 4:00 p. m. Sabor: Guayaba en agua. Procedimiento Procedimiento Salmonella spp.
1. Fase Fase PREPRE- enri enriqu quec ecim imie iento nto en ½ líquido no selectivo
Pesar 25 gr. De la carne asépticamente Adicionar y Homogenizar
cruda
25 gr. de carne cruda 255 ml Agua peptona Dilución 10-1 Incubar a 37ºC por 18-24 horas 2. Fase Enriquecimiento no selectivo
Adicionar 1ml Dilución 10-1 Selenito
caldo Cisteína Dilución
10-2
Incubar a 42ºC en Baño María, por 18 horas 3. Fase Aislamiento diferencial diferencial en ½ selectivos
Sembrar por Aislamiento Dilución 10-2 Caldo Selenito Cisteína salmonella-shigella
Agar S-S
Incubar a 37ºC, por 24 horas a 48 horas
Oxidasa a las colonias típicas Observ Observar ar la pres presenc encia ia de coloni colonias as negras negras con un alo alo rosa rosado, do, real realiza izarr Gram a las colonias típicas, Si hay baci bacilo los s Gram Gram Nega Negati tivo vos s reali ealiza zarr bioquímica Catalasa a las colonias típicas
A partir de las colonias del Gram. Que sean sean baci bacilo los s cort cortos os gram gram posi positi tivo vos, s, catalasa positiva oxidasa negativa
Procedimiento Listeria monocytogenes: 1. Fase PRE- enriquecimiento en ½ líquido no selectivo
Se les realiza identificación:
Tomar Tomar 25 ml. De la avena avena en leche leche caser casera, a, Ad Adici iciona onarr agua agua pepton peptona a y Homogenizar
Agar Sangre
25 ml. de avena en leche casera 255 ml Agua peptona Dilución 10 -1 Incubar a 37ºC por 18-24 horas en la incubadora 2 Fase siembra en medios diferenciales:
Dilución 10-1 Sembrar por Sangre Aislamiento
Glucosa sacarosa sacarosa VP-RM movilidad
TSI
Agar
Incubar a 37ºC, por 24 horas 3. Fase Identificación
Realiz ealizar ar colora coloració ción n de Gram. Gram. a las las colonias típicas
RESUMEN Todos odos los los col colifor formes son son lac lactosa tosa positiva, pero se diferencian en el agar chromocult por reacciones bioquímicas. Los Los coli colifo fome mes s tota totale les s tien tienen en la Bgalactosi galactosidasa dasa,, este complejo complejo activa activa el compue compuesto sto cromóg cromógeno eno alfa alfa –GAL –GAL que produce un color azul violeta. Los coliformes son habitantes de tracto gastrointestinal tanto del hombre como de los animales. El mas representativo
del grupo es la E. coli, La presencia de coliformes en cualquier alimento nos indica una mala calidad higiénica de los manipuladores. Estos son uno de los grupos indicadores dete deterrmina minado dos s en la indu indust stri ria a de alimentos para el control de calidad, mas que todo la importancia radica en la presencia de coliformes fecales que es indeseable por que no dice la mala mala mani manipu pula laci ción ón e higi higien ene e de quien procesa el alimento y también indi ndicánd cándon onos os con contam tamina inacion ciones es cruzadas El alimento analizado en esta prá prácti ctica fue fue el jugo ugo cas casero y el past pasteu euri riza zado do,, Resul esulta tand ndo o el jugo jugo casero con un recuento en la siembra NMP de 330 330 con 240 240 bac/1 c/100ml 00ml indicando la presencia de coliformes tota totale les, s, se reali ealizo zo la prue prueba ba de fluo fluorresce escenc ncia ia a cada cada tubo tubo dand dando o negativa. En la siembra en placa se encontraron 27 colonias de color rojo en la dilución 10 -3 y 7 colonias en la dilución 10-4, El en la siembra en placa del jugo pasteurizado, no hub hubo ningún crecimiento demostrando que en el proce procedim dimie iento nto se cumpli cumplió ó con las las normas normas exigi exigidas das para para el anális análisis is y que que cump cumple le con con los los pará paráme metr tros os admisibles para el consumo humano.
BIBLIOGRAFÍA http://www.javeriana.edu.co/biblos/te sis/ciencias/tesis105. sis/ciencias/tesis105. http://www.uprm.edu/biology/profs/m assol/manual/p4nmpenumeracion.pdf http://usuarios.lycos.es/zandoli/web3/ Tabla%20NMP.htm
http://www.ainia.es/pdf/laboratorios/fich as/ColiformesTotalesFecalesyE_coli(Inv)( 110086).pdf
