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RECUENTO DE RETICUL RETICULOCITOS OCITOS INTRODUCCION Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros no nucleados que contiene RNA residual. En la secuencia de maduración del eritrocito, éste permanecerá dos días en la médula ósea y un día en al sangre periférica, al madurar el eritrocito disminuye la cantidad de RNA.
Con el uso del colorante supravital (nuevo azul de metileno) se precipita el RNA ribosómico residual dentro de los reticulocit reticulocitos. os. Se prepara un frotis frotis sanguíneo sanguíneo con la mezcla de sangre sangre anticoagulada anticoagulada y colorante colorante supravital supravital que se examina al microscopio microscopio con lente de inmersión inmersión en aceite con un ocular de capo restringido.
El número de reticulocitos se expresa como co mo porcentaje del número total de eritrocitos contados. Otras inclusiones del eritrocito (cuerpo de pappenheimer, cuerpos de Howell-jolly y cuerpos de heinz) también se tiñen con el nuevo azul de metileno y deben diferenciar4se de los reticulocitos. Los cuerpos de Heinz se presentan como inclusiones de color verde azul claro situados en al periferia periferia del eritrocito, eritrocito, los cuerpos de Howell-Jol Howell-Jolly ly suelen ser una o dos inclusiones inclusiones redondas
Elaboro: Q.C Willians Sánchez Rodríguez
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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com teñidas de color morado oscuro, los cuerpos de pappenheimer son indistinguibles del retículo de los reticulocitos. Si se sospecha de cuerpos de pappenheimer debe realizarse una tinción de hierro con azul de Prusia APRA verificar su presencia ya que el retículo no se tiñe con este colorante. Puede producirse interpretaciones erróneas cuando sólo se informa el porcentaje de reticulocitos presente en al sangre periférica, ya que los resultados dependen del número total de eritrocitos presentes en al sangre periférica. Si la cifra total de eritrocitos está disminuida, el porcentaje de reticulocitos no reflejan de manera precisa al producción de nuevos eritrocitos por al médula ósea. Puede usarse la cifra de reticulocitos para evitar errores de interpretación debido a las cifra total de eritrocitos y al aumento en al estimulación de la médula ósea. Con el advenimiento de la citometría de flujo y la función cada vez mayor que desempeña en el laboratorio, pueden ahora practicarse conteos automáticos de reticulocitos.
Método: coloración supravital (azul de metileno, azul brillante de cresil, nuevo azul de metileno); citometría de flujo: el contador hematológico ADVIA 120 realiza un análisis bidimensional.
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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com Muestra: sangre entera recolectada con EDTA. Estabilidad: la sangre entera con EDTA es estable a temperatura ambiente hasta 48 hrs y a 4ºC hasta 72 hrs.
VALORES NORMALES PORCENTUAL Varones
0.5-1.5 %
Mujeres
0.5-2.5 %
Niños.
0.5-4 %
Lactantes
2-5%
ABSOLUTOS: 20000-120000 / MM3 •
CCR : 1-2
Los reticulocitos se expresan como porcentaje relativo de hematíes y/o en valor absoluto. Se han propuesto varias correcciones para la expresión de los resultados. El Indice de reticulocitos corregidos (IRC) se determina cuando el recuento de hematíes es muy alto o cuando el número de células rojas maduras está disminuido, realizando la corrección por hematocrito que se requiera. IRC o CCR = recuento de reticulocitos siendo 45 % el valor normal de hematocrito.
(%)
x
hematocrito
/
45
%
El Indice de maduración de reticulocitos (IMR) o Indice de producción reticulocitaria (IPR) es una corrección adicional que considera el estímulo eritrocitario compensador que se produce en caso de anemias intensas. En estos casos el número de reticulocitos en sangre periférica es superior al que corresponde al grado de regeneración eritroblástica, debido a que la anemia provoca un estímulo eritropoyético adicional que facilita una salida precoz de reticulocitos desde la médula a la sangre y un acortamiento de su período de maduración intramedular y un aumento del período de maduración periférica.
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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com Este fenómeno conocido como “desviación reticulocitaria” o shift se caracteriza por la presencia de macrocitos policromatófilos. El período de maduración reticulocitario es un factor que se mide en días y está en relación inversa al hematocrito.
Esta corrección consiste en dividir el valor de reticulocitos corregidos por dicho factor dado en días que depende del tiempo de maduración:
Factor = 1.0 Factor = 1.5 Factor = 2.0 Factor = 3.0 si el hematocrito es de
si si si 15%
el el el
hematocrito hematocrito hematocrito
es es es
de de de
45% 35% 25%
Indice de maduración reticulocitario (IMR) = IRC / factor.
Si el índice es mayor o igual de 3 indica aumento de actividad eritropoyética medular (anemias regenerativa), mientras que un IMR menor de 2 indica escasa actividad eritropoyética.
INDICES RETICULOCITARIOS: Los métodos automatizados permiten la determinación de distintos parámetros reticulocitarios. El citómetro de flujo ADVIA 120 mide simultáneamente los índices eritrocitarios y reticulocitarios. Los reticulocitos son teñidos con un colorante de ácidos nucleicos y luego se miden la dispersión y absorción utilizando el canal láser de diodo. Los parámetros obtenidos son: el volumen reticulocitario (MCVr), la concentración corpuscular media de hemoglobina reticulocitaria (CHCMr) y el contenido de Hb de los reticulocitos (CHr), siendo este último el más importante. Contenido de hemoglobina de los reticulocitos (CHr) : es una medida directa de la hemoglobina (Hb) presente en los reticulocitos nuevos en sangre periférica. Valores de CHr menores a 26 pg indican una inadecuada disponibilidad de hierro (Fe) para una óptima eritropoyesis. Las principales aplicaciones clínicas de CHr son las siguientes:
· Identificación temprana de una deficiencia de hierro. La deficiencia de Fe es uno de los déficits nutricionales más comunes y la principal causa de anemia ferropénica en niños y mujeres adultas. Por consiguiente, es esencial el diagnóstico temprano de la deficiencia de Fe para evitar las complicaciones sistémicas de una anemia ferropénica.
El diagnóstico de deficiencia de Fe se basa en los siguientes indicadores bioquímicos: ferremia,
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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com transferrina, saturación y ferritina. Actualmente se adicionan: receptores de transferrina sérica circulante y el contenido de hemoglobina reticulocitaria CHr.
El diagnóstico de anemia ferropénica se basa en la presencia de anemia microcítica hipocrómica y eritrocitos con altos niveles de zinc-protoporfirina (ZPP) además de Fe, transferrina y ferritina. Se demostró que CHr y Hb (no así la ferritina) son los únicos parámetros significativos para predecir la deficiencia de Fe y la anemia ferropénica. Además, con cada incremento unitario en el CHr se reducen en 30% y 45% las probabilidades de deficiencia de Fe y anemia ferropénica respectivamente.
· Evaluación del status de Fe sérico en pacientes hemodializados: un valor de CHr menor de 26 pg es una medida precisa del status de Fe en dializados; un valor de CHr menor al contenido de hemoglobina de los eritrocitos maduros (CH) indica el inicio agudo de deficiencia de Fe; la CHr responde rápidamente (48 horas) al tratamiento con Fe su ministrado por vía intravenosa. · Monitoreo de la terapia con eritropoyetina recombinante humana (rHuEPO) en dializados: este test permite detectar la deficiencia funcional de Fe. Este fenómeno se produce durante la estimulación eritropoyética intensa de terapia con eritropoyetina, en la cual la cantidad de Fe disponible para la eritropoyesis resulta insuficiente, a pesar de tener niveles normales de ferritina y transferrina. · Detección de deficiencia funcional de Fe en pacientes con enfermedad renal terminal. · El CHr se utiliza conjuntamente con el porcentaje de células hipocrómicas (%H) para analizar los niveles funcionales de Fe disponibles para eritropoyesis. Estos valores son más relevantes que la medición de ferritina, cuyos valores pueden estar falsamente aumentados por procesos inflamatorios. Grado de absorbancia de los reticulocitos: se observa en el histograma de reticulocitos y es una medida de la madurez de los mismos. Los reticulocitos se clasifican en reticulocitos de alta, media o baja absorción. Los reticulocitos de alta absorción, con un alto contenido de ARN son las células más inmaduras. Volumen medio reticulocitario (MCVr): es un parámetro que aún tiene escasa utilidad clínica porque es poco estable.
UTILIDAD CLÍNICA: • • •
Evaluación de la función eritropoyética. Diagnóstico diferencial de anemias no regenerativas y formas hiperregenerativas. Monitoreo de la respuesta a terapias en caso de anemias por deficiencia de Fe, cobre, vitamina B12 y B6.
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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com •
• •
•
Monitoreo de eritropoyesis después de transplante de médula ósea en el caso de anemia aplásica. Evaluación de deficiencia funcional de Fe con la determinación del índice CHr. Evaluación y clasificación de anemias en base al índice IMR y el recuento de reticulocitos: Enfermedad
Recuento de reticulocitos
Anemia aplásica Crisis anémica Anemia no regenerativa Regeneración de MO Deficiencia crónica Deficiencia de Fe Talasemia Mielodisplasia Deficiencia Vit B12 Anemia Hemolítica Hemorragia
– / N – / N N / + N / + + N / +
IMR
-/N N / + N / + N + N / + N / + N / + + +
N: normal
•
+: aumentado •
- : disminuido.
SIGNIFICADO CLINICO El reticulcito es un eritrocito joven inmaduro y sin núcleo que contiene material reticular RNA que se tiñe de color gris azulado. Este retículo se observa en las células nuevas durante uno o dos días antes que la célula alcance su madurez completa.
Normalmente, se observa un pequeño número de estas células en la sangre circulante. Para que la cuenta de reticulocitos sea importante, debe compararse con la cuenta total de reticulocitos. La cuenta de reticulocitos se utiliza para diagnosticar las anemias producidas por insuficiencia de la médula ósea de las que son causadas por hemorragia o hemólisis, para vigilar el tratamiento de la médula ósea en al anemia aplástica y para determinar los efectos de las sustancias radiactivas en los individuos que están expuestos a este factor.
LA CUENTA DE RETICULOCITOS AUMENTADA
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http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com Indica que existe mayor proporción de glóbulos rojos conforme la médula ósea sustituye a las células que se pierden o se destruyen en forma precoz. Si se identifica reticulocitosis, puede haber alguna enfermedad oculta como hemorragia crónica o hemólisis (anemia de células falciformes y talasemia).
Existe reticulocitosis en: A. Anemia hemolítica:
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
Inmunológica Problemas primarios de la membrana eritrocitaria Hemoglobinopatía y anemia de células falciformes Deficiencia de enzimas eritrocitarias Contacto con toxinas Traumática o microorganiopática Hiperesplenismo Parasitosis
B. C. a) b)
Tres a cuatro días de una hemorragia. Después del tratamiento de la anemia La reticulocitosis se utiliza como índice de la efectividad del tratamiento Después de administrar una dosis adecuada de hierro en una anemia por deficiencia de hierro, la elevación de los reticulocitos es mayor al 20 por ciento. c) Se produce una elevación proporcional cuando la anemia perniciosa es tratada mediante una transfusión o con vitamina B 12.
La cuenta reticulocítica baja significa que la médula ósea no produce suficiente eritrocitos y ocurre en : A. Anemia por deficiencia de hierro. B. Anemia plástica C. Anemia perniciosa no tratada D. Infección crónica E. Radioterapia F. Endocrinopatías G. Tumor en al médula ósea H. Síndromes mielodisplásicos
INTERFERENCIAS: • •
•
Los reticulocitos normalmente aumentan en los lactantes y el embarazo El paciente que ha sido transfundido recientemente tiene una cuenta inferior por dilución La presencia de cuerpos de Howell-Jolly eleva en forma artificial la cuenta cuando se utiliza el método automatizado.
VARIABLES POR DROGAS :
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Aumentado: Allopurinol, aminopirina, antipiréticos, antipirina, arseniales, aspirina, corticotropina, plomo, levodopa, metil-dopa, naproxeno, nitrofuranos, penicilina, procainamida, quinidina, sulfonas. Disminuido: Cloramfenicol, clorpropamida, citaralina, datinomicina, metatrexato, rinblastina.
REFERENCIAS: •
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Fisbach, Talasanka, Frances, Manual de pruebas diagnosticas, 5ª Edición, 1997, Editorial McGraw Hill-Interamericana, México. Guerrero, García, Rafael, Manual de laboratorio de hematología,1997, Universidad Veracruzana, Xalapa, Ver. McDonald, A., George, Atlas de hematología, 4a Reimpresión, 2001, Editorial Medica Panamericana, México. McKenczie, B., Shirlyn, Hematología clínica, 2ª Edición, 2000, Editorial El Manual Moderno, México. http://www.farestaie.com.ar/te/bc/338.htm http://www.scribd.com/doc/2151012/etapa-maduracion-del-eritrocito
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