Reconocimiento de Biomoléculas orgánicas
Integrantes: Karina Espinoza Mariafernanda Espinoza Vanesa Maturana Viviana Marcos Paula Vera Carrera: Carrera : Enfermería Profesor : Fernando Tapia Alvarez Asignatura: Asignatura : Biología celular
Introducción La mayor parte del peso de la materia orgánica de la célula corresponde a macromoléculas pertenecientes a cuatro clases: ácidos nucleicos, proteínas, polisacáridos y lípidos complejos. Estás macromoléculas están formadas por compuestos orgánicos de menor peso molecular denominados elementos estructurales. Cada clase de macromolécula se define por el tipo químico de elemento estructural que se polimeriza para formarla: nucleótidos en el caso de los ácidos nucleicos, aminoácidos en el caso de las proteínas, y azucares simples monosacáridos! en el caso de los polisacáridos. Los lípidos complejos son más "ariados y #eterogéneos en su composición$ sus precursores incluyen ácidos grasos, polialco#oles, azucares simples, aminas y aminoácidos.
Síntesis de nucletidos Los nucleótidos son sustancias que están presentes en todas partes y participan en casi todos los procesos %ioquímicos: son las unidades monoméricas del &'( y &)(. La importancia de los nucleótidos en el meta%olismo celular se pone de manifiesto por la o%ser"ación de que casi todas las células pueden sintetizarlos de nue"o, como a partir de los productos de la degradación de ácidos nucleicos. Los precursores de los ácidos nucleicos son los nucleósidos trifosfato de purinas y pirimidinas, que tienen todos la misma estructura general. *na %ase purinica o pirimidinica se una a tra"és de átomos de nitrógeno a una pentosa$ está com%inación se llama nucleósido. +e unen luego grupos fosfato en la posición -del nucleósido. Esta com%inación es la que se denomina nucleótido.
Síntesis de amino!cidos Las proteínas, en particular, en forma de enzimas poseen funciones %ioquímicas importantísimas en los procesos %iológicos. Las unidades monoméricas de las proteínas, los aminoácidos, son meta%olitos energéticos y muc#os de ellos constituyen nutrientes esenciales en los animales. /ara la %iosíntesis de proteínas se requieren 01 aminoácidos. +olo la #istidina tiene un origen %iosintético aislado. Los otros 23 se forman a tra"és de rutas ramificadas, a partir de un n4mero relati"amente peque5o de meta%olitos precursores. En cuanto a su origen %iosintético, pueden agruparse en un total de cinco familias: la familia del glutamato$ del aspartato$ aminoácidos aromáticos, de la serina y del piru"ato.
Síntesis de monosac!ridos Los car%o#idratos o sacáridos son componentes esenciales de los organismos "i"os, y son de #ec#o, la clase más a%undante de células %iológicas en general, después de las proteínas. El nom%re de car%o#idrato, que significa literalmente #idrato de car%ono, pro"iene de su composición química. Los car%o#idratos son o se clasifican en poli#idro6ialde#idos o cetonas o sustancias que rinden tales compuestos por #idrolisis. Los azucares simples se denominan monosacáridos, cada molécula contiene de tres a
siete átomos de car%ono. La cantidad de átomos de car%ono en una molécula de az4car simple se indica por medio del prefijo en su nom%re. /or ejemplos, los azucares simples con tres car%onos se denominan triosas. & partir de los monosacáridos se forman los disacáridos dos monosacáridos unidos en una reacción de síntesis!, y los polisacáridos se forman por decenas o centenas de monosacáridos!.
Síntesis de lípidos Los lípidos constituyen el 4ltimo grupo fundamental de compuestos orgánicos encontrados en la materia "i"a. Como los #idratos de car%ono están compuestos de átomos de car%ono, #idrogeno y o6ígeno. &un cuando constituyen un grupo muy di"erso de compuestos, comparten una característica en com4n: son moléculas no polares de modo que, a diferencia del agua, no tienen un e6tremo positi"o y uno negati"o polo!. /or consiguientes, casi todos los lípidos son insolu%les en agua, pero se disuel"en con facilidad en sol"entes no polares, como el éter o cloroformo. Los lípidos funcionan como reser"a energética y proporcionan la estructura de las mem%ranas y de algunas paredes celulares. Entre los grupos de lípidos encontramos: lípidos simples, denominados grasas o triglicéridos, compuestos por un alco#ol glicerol! y un grupo de ácidos grasos$ lípidos complejos, que contienen elementos como fosforo, nitrógeno y azufre, además de los ya mencionados que se encuentran en los lípidos simples, denominados fosfolípidos, y están formados por glicerol, ácidos grasos y un grupo fosfato$ esteroides, que son constituyentes importante de las mem%ranas plasmáticas de células animales, #ongos y plantas.
Objetivos generales
)econocimiento de gl4cidos, proteínas, lípidos y nucleótidos en muestras %iológicas utilizando diferentes métodos y test.
Metodología, resultados y discusión "# $econocimiento de gl%cidos& "A# $econocimiento de glucosa&
Metodología Lec#e Liquida +ol. +acarosa u%os de ensayo
+ol. 9lucosa
&gregar gotas de )eacti"o ;e#ling &
&gregar gotas de )eacti"o ;e#ling <
+ol. &lmidón &plicar Calor 708 destilada
8%ser"ar 'escri%ir ;otografiar
8%ser"ar 'escri%ir ;otografiar
Reacción (+) Color Rojo
Reacción (-) Cualquier
$esultados $eaccin '(#
$eaccin ')#
*ec+e li,uida
)
Sol& Sacarosa
)
Sol& -lucosa
(
Sol& Almidn
)
./0 destilada
)
Tu2os con Fe+ling B
Tu2os con sus $eacciones
Tu2os con Fe+ling A
Fe+ling A
1iscusin
)
Fe+ling B
& partir de las muestras de lec#e líquida, sol. +acarosa, sol. 9lucosa, sol. &lmidón y 7 08 destilada, fuimos capaces de o%ser"ar diferentes reacciones producto de los )eacti"os ;e#ling & Cu+8=! y ;e#ling < +olución de tartrato de sodio y potasio en medio alcalino!. +olo una de las soluciones fue positi"a sol. 9lucosa!, en las demás no se detectó presencia de glucosa. &m%os reacti"os se de%en guardar separados #asta el momento de su uso, para e"itar la precipitación del #idró6ido de co%re >>!. El ;e#ling & y ;e#ling < son utilizados como reacti"os para la determinación de az4cares reductores, el poder reductor que presentan los az4cares pro"iene de su grupo car%onilo, que puede ser o6idado a grupo car%o6ilo con agentes o6idantes sua"es. +i el grupo car%onilo se encuentra com%inado no presenta este poder reductor.
/A# $econocimiento de almidn&
Metodología 2. /látano 0. ?anzana @. Aana#oria =. /apa
8%ser"ar
. /an B. &rroz ?uestras
. Cereal D. 9alleta 3. 7arina 21. &z4car 22. Lec#e en pol"o 20. ?aicena
&gregar 0 gotas de reacti"o lugol
;otografiar )egistrar resultados
10 1
!
2 1 3
7
4
12
6 5
$esultados Las muestras que contengan almidón reaccionaran con el reacti"o, adquiriendo una coloración "ioletaazulado.! Los resultados se muestran en la siguiente ta%la: $eaccin '(# "& Pl!tano /& Manzana
( (
3& 4ana+oria 5& Papa
( (
6& Pan
(
7& Arroz 8& 9ereal
( (
& -alleta ;& .arina
( (
10. Az%car 11. *ec+e en polvo 12. Maicena
$eaccin ')#
) ) (
D
21
B
5
3
2
20
12
= 22 0
@
3A# $econocimiento de almidn en tu2os de ensa
Metodología @ mL de solución @ tu%os de ensayo
@mL de 708 'estilada @mL de solución
$esultados
8%ser"ar &gregar 0 gotas de reacti"o lugol.
;otografiar )egistrar resultados
Las muestras que contengan almidón reaccionaran con el reacti"o, adquiriendo una coloración "ioletaazulado.! Los resultados se muestran en la siguiente ta%la: $eaccin '(#
$eaccin ')#
Solucin almidn
)
Solucin glucosa
)
. / 0 destilada
1iscusin
(
1
2
3
/or qué razón el Lugol identifica la presencia de almidónF La reacción del Lugol es un método que se usa para identificar polisacáridos. /or ejemplo, el almidón al entrar en con el reacti"o de Lugol disolución de yodo y yoduro potásico! toma una coloración azul"ioleta característica. Esta coloración producida por el reacti"o se de%e a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón, por lo tanto, no es una "erdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de la molécula, dando paso a la coloración azul"ioleta.
/# $econocimiento de proteínas&
Metodología
01 gotas @ml Clara de #ue"o
)eacti"o de
u%o de ensayo
/roteína &l%4mina
Coloración rosadoG"ioleta
$esultados +e e6trajeron @ ml de clara de #ue"o y se depositó en el tu%o de ensayo, a continuación, se a5adió 0 ml del reacti"o de
Agregando / ml de $eactivo Biuret
Proteínas: 9lara de +uevo ( 1iscusin$eactivo Biuret = color violeta
Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada
cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. Está #ec#o de #idró6ido potásico H87! y sulfato c4prico Cu+8=!, junto con tartrato de sodio y potasio H(aC=8BI=708!. El reacti"o, de color azul, cam%ia a "ioleta en presencia de proteínas, y a rosa cuando se com%ina con polipéptidos de cadena corta. La clara de #ue"o tiene una composición de: o"omucina que corresponde al 2,J de la al%4mina proteínica e6istente en el #ue"o y o"oal%4mina que es la más a%undante.
3# $econocimiento de lípidos&
Metodología @ml &ceite com4n u%o de ensayo
8%ser"ar
&gregar una pizca de
&ceite oli"a
;otografiar
Sudan III
708 destilada
'escri%ir
$esultados $eaccin '(# Aceite com%n
(
Aceite oliva
(
. /0 destilada
$eaccin ')#
)
Muestras
Muestras al reaccionar con ro>o sudan ???
1iscusin & partir de las muestras utilizadas de aceite com4n, aceite de oli"a y 7 08 destilada, fuimos capaces de reconocer lípidos en am%os aceites al a5adir rojo +udán >>>. El +udan >>> es un colorante usado para reconocer grasas neutras en técnicas #istológicas, por lo tanto, es solu%le en ellas.
5# E@traccin de A1&
Metodología @1 mL de &gua en la %oca.
Enjuagar durante @1 segundos.
Kaciar En
&gregar 0, mL de solución de
Kaso /recipitado
agua detergente.
&gitar
&gregar &lco#ol frio
&gregar
gotas de &zul de ?etileno 8%ser"ar 'escri%ir
;otografiar
$esultados
;otografiar
'espués de a5adir detergente, agitar y agregar alco#ol frio a la muestra, fuimos capaces de o%ser"ar peque5as %ur%ujas dentro del recipiente poco "isi%les!. & continuación, agregamos gotas de azul de metileno. La mezcla se con"irtió en una muestra #eterogénea, quedando en el fondo una solución transparente y en la superficie una solución de coloración azul.
1iscusin El &'( constituye el material #ereditario de cada ser "i"o. odas las células que forman a un indi"iduo contienen una copia idéntica de &'( conformada por 'eso6irri%onucleótidos: Citosina C!, 9uanina 9!, &denina &! y imina !, formados, cada uno de ellos, por deso6irri%osa y un ion de fosfato. La coloración azul que se o%ser"a en la superficie de la muestra corresponde al &'(. /ara lle"ar a ca%o la e6tracción de &'(, el detergente, que contiene Lauril sulfato de sodio, separa las grasas lípidos! y las proteínas que constituyen la mem%rana que rodea a la célula y el n4cleo. *na "ez que esta mem%rana se #a que%rado, el &'( es li%erado de la célula. El &'( se precipita en el alco#ol fuera de la solución, donde puede ser "isualizado. El alco#ol, además de permitirnos "er el &'(, es capaz de separar otros componentes celulares del material genético, dejándolos en la solución acuosa.
Conclusión
Los o%jeti"os del la%oratorio fueron lle"ados a ca%o con é6ito. Como resultado del tra%ajo practico, aprendimos a diferenciar distintos tipos de moléculas orgánicas presentes en las muestras utilizadas en el la%oratorio, la materia "i"a está organizada en ni"eles de complejidad cuya %ase la conforman moléculas de características y propiedades que determinan los fenómenos químicos que ocurren a ni"el celular y de organismo. En la primera y segunda acti"idad, al agregar dos gotas de lugol a cada muestra, algunas adquirieron una coloración "ioleta, de este modo, sa%emos que el lugol reacciona con las estructuras que forman el almidón, con la amilosa proporciona un color azul y cuando reacciona la amilopectina con lugol la coloración es rojiza, la com%inación de estos dos colores nos proporciona el color "ioleta característico del almidón. En la tercera muestra, se compro%ó la reacción de
En la cuarta acti"idad de reconocimiento de gl4cidos, se cumplió el o%jeti"o: reconocer la presencia de diferentes tipos de gl4cidos en distintas muestras y, además conocer las propiedades del ;e#ling & y <, que se utiliza para detectar la presencia de az4cares reductores. E6isten dos tipos de ;e#ling, el ;e#ling &, de color azul, y el ;e#ling <, de color rojo ladrillo. En la quinta acti"idad de reconocimientos de lípidos, aprendimos que el sudón >>> detecta las cadenas de #idrocar%onos y produce una reacción #idrofó%ica donde los grupos no polares los #idrocar%onos! se agrupan y son rodeados por moléculas del reacti"o. 9racias a esto se utiliza como método para demostrar la presencia de grasas mediante la tinción de triglicéridos, aunque tam%ién ti5e otro tipo de lípidos y, además, es capaz de te5ir los #idrocar%onos de rojo. ;inalmente, a partir de la 4ltima acti"idad de e6tracción de &'(, fuimos capaces de o%ser"ar como la capa que quedó en la superficie de la mezcla contenía células en forma de espirales que se separaron del agua gracias a los demás materiales agregados a la solución. El detergente es capaz de separar las células, porque disgrega las células de suciedad de la superficie en donde éstas se encuentren. &prendimos tam%ién que el alco#ol tiene la función de aislar las cadenas del &'(. 'e esta manera, todos estos procedimientos e6perimentales fueron realizados e6itosamente.
Cuestionario 1. Indica la forma en que reacciona el Lugol con el almidón. Fundamenta bioquímicamente.
La reacción de Lugol se usa para identificar polisacáridos. El almidón entra en contacto con unas gotas de reacti"o de Lugol disolución de yodo y yoduro potásico! adquiriendo un color azul"ioleta característico. Esta coloración se de%e a que el yodo se introduce entre las espiras de amilosa de la molécula de almidón. +e forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul "ioleta. 2. ¿Cules son las !ro!iedades del "eacti#o de Fe$ling al actuar en el reconocimiento de glucosa%
/one de manifiesto la presencia de azucares reductores aldosas: glucosa, ri%osa, eritrosa, etc.!. +e trata de una reacción redo6 en la que el grupo alde#ído reductor! de los az4cares es o6idado a grupo ácido por el Cu0 que se reduce a Cu. anto los monosacáridos como los disacáridos reductores reaccionan con el Cu0 dando un precipitado rojo de ó6ido cuproso. La reacción tiene lugar en
medio %ásico por lo que es necesario introducir en la reacción tartrato sódico potásico para e"itar la precipitación del #idró6ido c4prico. &. ¿Cómo act'a el "eacti#o de (iuret sobre las Proteínas%
La reacción de
). *ibu+a la estructura química , describe bre#emente la función de las siguientes (iomol-culas orgnicas.
a! lucosa/ Es el monosacárido más importante. Es la principal fuente de energía para todos los organismos "i"os.
%! Almidón/ Es la molécula de reser"a energética "egetal. Es muy a%undante en las semillas y los tu%érculos, como la papa.
c! Colesterol/ Es un componente muy importante de las mem%ranas plasmáticas de las células animales
Reerencias -
'onald Koet, Mudit# 9. Koet. 011B!
-
)oger O. +tanier. 233B! ?icro%iología. )e"erte. ?eta%olismo micro%iano: %iosíntesis, polimerización y ensam%le. /ágs. 22=, 22, 201.
-
9erard M. ortora, ntroducción a la micro%iología. Ed. ?édica /anamericana. Capítulo 0: /rincipios de la química. /ágs. @3=@.
-
(elson Q Co6 0113!. Le#ninger, /rincipios de
