Guia de Practicas Bioquimica I-2009

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULT ACULTAD DE INGENIERIA I NGENIERIA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS ESCUELA PROFESIONAL PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

GUIA

DE PRÁCTICA DE LABORTORIO

Ing. GUILLERMO ALEXANDER CHUMBE GUTIERREZ

Lima, 2009

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INDICE INDICE........................................ ............................... .............................. .............................2 .............................2 REGLAMENTO DEL LABORATORIO LABORATORIO DE BIOQUÍMICA............................................ BIOQUÍMICA............. ............................... ......... .........3 3 PRÁCTICA Nº 1 SOLUCIONES...........................................................................................8 PRÁCTICA Nº 2 PROPIEDADES FISICO QUÍMICAS DEL AGUA................... AGUA........... ............... ............... .........1 .11 1







UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

GUÍA DE PRÁCTICAS – BIOQUÍMICA I

REGLAMENTO DEL LABORATORIO LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

El traba trabajo jo en el Labora Laborator torio io requie requiere re la observ observaci ación ón de una serie de norm normas as de seg segurid urida ad que que evit evite en posibl sible es acci accid dente entess debido bido a desconocimiento de lo que se está haciendo o a una posible negligencia de los alumnos y alumnas que estén en un momento dado, trabajando en el Laboratorio.

REGLAS PARA EL ALUMNO

I.

1. Cada grupo grupo de prácticas se responsabilizará responsabilizará de su zona de trabajo y de su material. 2. Es convenie conveniente nte la utiliz utilizaci ación ón de guarda guardapol polvo vo (bata (bata o mandil mandil)) blanco blanco,, largo, largo, ya que que evita que posibles derrames de sustancias químicas lleguen a la piel; también se recomiéndale recomiéndale uso de zapatos cerrados y protector respiratorio. 3. Se recomien recomienda da usar un gorro gorro blanco blanco mientras mientras se permane permanezca zca en el laborator laboratorio. io. 4. Si tienes tienes el pelo pelo largo, largo, es convenie conveniente nte que lo lo lleves lleves recogido. recogido. 5. Se recue recuerda rda que en el labora laborator torio io está está terminan terminantem tement ente e prohibi prohibido do fumar fumar,, tomar tomar bebidas y comer. 6. Sólo perman permanecer ecerán án en el laborato laboratorio rio siempre siempre y cuando cuando estén dentro dentro de sus sus horarios horarios estipulados y con el consentimiento explícito del profesor. profesor. 7. El mate materi rial al que que se romp rompa a o dete deteri rior ore e esta estand ndo o en poder poder los los alum alumno nos, s, debe deberá rá ser ser repuesto por otro de las mismas características a mas tardar al final del semestre

II . 1. 2. 3. 4.

5. 6. 7.

SEGURIDAD Y PROTECCIÓN Antes Antes de utilizar utilizar un compuesto compuesto,, asegurarse asegurarse bien bien de que es es el que se necesita necesita,, fijarse fijarse bien el rótulo. No coger coger ningún ningún producto producto químico, químico, sin autoriz autorizació ación n de tu profesor profesor.. No devolver devolver nunca nunca a los frascos frascos de origen origen los sobrantes sobrantes de los produc productos tos utilizado utilizadoss sin consultar con el profesor. Es muy importa importante nte que cuando cuando los produc productos tos químico químicoss de desech desecho o se viertan viertan en la pila de desagüe, aunque estén debidamente neutralizados, debe dejarse que circule por la misma, abundante agua. No tocar tocar con las manos manos y menos menos con la boca, boca, los los productos productos químic químicos. os. No pipe pipete tear ar con con la boca boca.. Util Utiliz izar ar la bomb bomba a manu manual al,, una una jeri jering ngui uilllla a segú según n que que se disponga en el Centro. Los ácidos ácidos requiere requieren n un cuidado cuidado especia especial.l. Cuando Cuando queram queramos os








GUÍA DE PRÁCTICAS – BIOQUÍMICA I 8. Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc) no deben estar cerca de fuentes

de calor. calor. Si hay que calentar tubos con estos productos, se hará al baño María, nunca directamente a la llama. 9. Si se vierte sobre sobre ti cualquier cualquier ácido ácido o producto producto corrosivo corrosivo,, lávate inmedia inmediatame tamente nte con mucha agua y avisa al profesor. 10. 10. Al prep prepar arar ar cual cualqu quie ierr diso disolu luci ción ón se colo coloca cará rá en un fras frasco co limp limpio io y rotu rotula lado do convenientemente. 11. Cuidado con los bordes bordes y puntas cortantes de los tubos u objetos de vidrio. Si durante clases se quiebra algún objeto de vidrio se debe desechar de inmediato. Previamente comunicar al profesor (a) responsable. responsable. 12. 12. El vidr vidrio io cali calien ente te no se dife difere renc ncia ia a simp simple le vist vista a del del vidr vidrio io frío frío.. Para Para evit evitar ar quemaduras, dejarlo enfriar antes de tocarlo. 13. 13. Si tien tienes es que que cale calent ntar ar a la llam llama a el cont conten enid ido o de un tubo tubo de ensa ensayo yo,, obse observ rva a cuidadosamente cuidadosamente estas dos normas: La boca del tubo de ensayo no apunte a ningún compañero. compañero. Puede hervir el líquido y salir salir disparad disparado, o, por lo lo que podría podríass ocasiona ocasionarr un accidente accidente.. •

Como ves en el dibujo, calienta por el lateral del tubo de ensayo, nunca por el fondo; agita suavemente. •

14. Cuando se determinen determinen masas de productos químicos con balanza, balanza, se colocará papel de filtro sobre los platos de la misma y si es necesario porque el producto a pesar fuera corrosivo, se utilizará un vidrio de reloj; asegúrese de tarar previamente el papel o la luna de reloj. 15. Se debe evitar evitar cualquie cualquierr perturba perturbación ción que conduzca conduzca a un error, error, como vibraciones vibraciones debidas a golpes, aparatos en funcionamiento, soplar sobre los platos de la balanza, etc.

III. III.

SUST SUSTAN ANCI CIAS AS QUE QUE DEBE DEBEN N USAR USARSE SE CON CON PREC PRECAU AUCI CIÓN ÓN









cautel cautela a y normar normar el compo comporta rtami mient ento o en el labora laborator torio io por las exigen exigencia ciass de la seguridad personal y del grupo que se encuentre realizando una práctica.









Numer Numerosa osass sustan sustancia ciass orgán orgánica icass e inorgá inorgánic nicas as son corros corrosiva ivass o se absorb absorben en fácilmente por la piel, produciendo intoxicaciones o dermatitis, por lo que se ha de evitar evitar su contac contacto to direc directo; to; si este este ocurri ocurriera era,, deberá deberá lavars lavarse e inmed inmediat iatame amente nte con abundante agua la parte afectada.

IV.

RECOMENDACIONES ESPECÍFICAS.

PARA

EL

MANEJO

DE

ALGUNAS

SUSTANCIAS

Ácido Fluorhídrico (HF): Causa quemaduras de acción retardada en la piel, en contacto con las uñas causa fuertes dolores, y sólo si se atiende a tiempo se puede evitar la destrucción de los tejidos incluso el óseo. Ácido Nítrico (HNO3): Este Este ácido ácido daña daña perma permanen nentem tement ente e los ojos ojos en unos unos cuanto cuantoss segund segundos os y es sumamente corrosivo en contacto con la piel, produciendo quemaduras, mancha las manos de amarillo por acción sobre las proteínas. Ácido Sulfúrico (H2SO4), Fosfórico (H3PO4) y Clorhídrico (HCl) Las soluciones concentradas de estos ácidos lesionan rápidamente la piel y los tejidos internos. Sus quemaduras tardan en sanar y pueden dejar cicatrices. Los accidentes más más frec frecue uent ntes es se prod produc ucen en por por salp salpic icad adur uras as y quem quemad adur uras as al pipe pipete tear arlo loss directamente con la boca. V.

¿QUÉ HACER EN CASO DE ACCIDENTE? En caso de accidente en el laboratorio, hay que comunicarlo inmediatamente al docente.

Salpicaduras por ácidos y álcalis: Lavarse inmediatamente y con abundante agua la parte afectada. Si la quemadura fuera en lo ojos, después de lavado, acudir al servicio medico. Si la salp salpic icad adur ura a fuer fuera a exte extens nsa, a, llev llevar ar al lesi lesion onad ado o al chor chorro ro de la rega regade dera ra inmediatamente inmediatamente y acudir después al servicio medico.

Quemaduras por objetos, líquidos o vapores calientes:










GUÍA DE PRÁCTICAS – BIOQUÍMICA I VI.

BUENAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO LABORATORIO (BPL / GLP)

Las Buenas Prácticas de Laboratorio o Good Laboratory Practices (BPL / GLP), es un conjunto de reglas, procedimientos procedimientos operacionales y prácticas establecidas y promulgadas por determinados organismos como The Organization for Economic Cooperation and Development (OCDE), o la Food and Drug Administration (FDA) que se consideran de obligado cumplimiento para asegurar la calidad e integridad de los datos producidos en determinados tipos de investigaciones o estudios. Esto surge debido a que en los años 1969 y 1975 las agencias reguladoras se enfrentaron con con gran grande dess disc discre repa panc ncia iass en los los dato datoss diri dirigi gida dass a ella ellas, s, obte obteni nida dass en dist distin into toss laboratorios. Había caso de laboratorios que no trabajaban bajo protocolos y la información solo estaba en forma oral, en general los informes eran incompletos y no contaban con documentos de procedimiento procedimiento estandarizado. estandarizado. Es necesario realizar un mejor trabajo, tanto en el manejo y desarrollo de estudio de informes como en reportes de los laboratorios. Las BPL abarcan todos los eslabones de un estudio de investigación y para ello se necesita que previamente se haya establecido un “Plan de Garantía de la Calidad”. Para verificar que el plan se cumple a lo largo de todo el estudio se precisa de un “sistema planificado de actividades”, cuyo diseño o finalidad es asegurar que el Plan de Garantía cumpla. Las Normas BPL constituyen una filosofía de trabajo, son un sistema de organización de todo lo que de alguna forma interviene en la realización de un estudio o procedimiento encaminado a la investigación de todo producto químico o biológico que pueda tener









PRÁCTICA Nº 1 SOLUCIONES I.

OBJETIVOS : - Identificar la existencia de soluciones en los sistemas biológicos. - Explicar los cálculos y procedimientos para preparar soluciones porcentuales, molares y normales, así como las diferentes diluciones de éstas.

II.

FUNDAMENTO TEÓRICO: Una solución es una mezcla homogénea de por lo menos dos componentes: una fase dispersa, que es el Soluto, y una dispersora que constituye el solvente (disolvente) y que, generalm generalmente ente,, se encuentra encuentra en mayor mayor proporci proporción. ón. Las solucion soluciones es más utilizad utilizadas as en bioquímica son las que tienen agua como solvente.

La concentración es la magnitud física que expresa la cantidad de un elemento o un compuesto por unidad de volumen. En el SI se emplean las unidades mol·m-3. Cada sustancia tiene una solubilidad que es la cantidad máxima de soluto que puede disolverse en una disolución, y depende de condiciones como la temperatura, presión, y otras substancias disueltas o en suspensión. suspensión.









Si bien la densidad no es una forma de expresar la concentración, ésta es proporcional a la concentración (en las mismas condiciones de temperatura y presión). Por esto en ocasiones se expresa la densidad de la solución a condiciones normales en lugar de indicar la concentración; pero se usa más prácticamente y con soluciones utilizadas muy ampliamente. También hay tablas de conversión de densidad a concentración para estas soluciones; aunque el uso de la densidad para indicar la concentración es una práctica que está cayendo en desuso. La molaridad (M); expresa la concentración, como las moles de soluto en un litro de solución. Se expresa como: M = (moles de soluto)/(Litro de solución) La normalidad (N); es el número de pesos pesos equivalentes equivalentes de soluto contenidos contenidos en un litro de solución. Éstos indican la cantidad exacta de un reactivo que reacciona completamente con una cantidad de otro. Al darse la concentración en Normalidad debe especificarse la reacción, ya que el número de equivalencia depende de ésta. Por lo tanto, la normalidad de una solución depende de la reacción para la cual está indicada y puede variar de una reacción a otra.

III.

N = (número de pesos pesos equivalentes)/(Litro equivalentes)/(Litro de solución) solución) . MATERIALES Y REACTIVOS:

III.1 Equipos, Equipos, Utensilios Utensilios y Material de vidrio Balanza analítica Espátula Fiola 100 ml Vaso precipitación 100 ml Luna de reloj − − − − −








GUÍA DE PRÁCTICAS – BIOQUÍMICA I V.

DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA Preparar 100 ml de una solución de glucosa al 5%. Preparar 50 ml de Hidróxido Hidróxido de sodio al 0.1 N. A partir de una solución de alcohol al 96º, obtener 100 ml de alcohol al 20%. Para realizar lo anterior primero deben de realizar los cálculos correspondientes, luego pesar los solutos solutos a disolver y mezclar mezclar vigorosamente. vigorosamente.

VI.

RESULTADOS Y DISCUSIONES 6.1. ¿Qué es una solución? 6.2. ¿Cuántas clases de concentraciones de Normalidad existen?, describa cada una de ellas. 6.3. ¿Qué se entiende por los siguientes términos: mol, formalidad, molalidad? 6.4. ¿Qué significan: v/v, p/v, p/p y ppm? 6.5. ¿Qué es una solución isotónica? 6.6. ¿Qué es una solución osmolar? 6.7. ¿Qué se entiende por dilución y dilución seriada de las soluciones?









PRÁCTICA Nº 2 PROPIEDADES FISICO QUÍMICAS DEL AGUA I.

OBJETIVO Comprender la relación existente entre las propiedades físicas y químicas del agua con las fuerzas de interacción intermolecular. Observar el comportamiento de dos grasas distintas en diferentes medios acuosos para identificar las propiedades fisicoquímicas del agua.

II.

FUNDAMENTO TEÓRICO Cuando un compuesto soluble en agua es colocado en ésta, desaparece rápidamente en el líquido. Por el contrario, si no es soluble, entonces permanece donde se le coloca. Si posee una solubilidad intermedia, entonces se puede dispersar sobre la superficie del agua hasta que se vuelve invisiblemente delgada. Lo que determina el comportamiento de un compuesto en una solución son las complejas interacciones de tipo eléctrico en las superficies de las moléculas. Por ejemplo, la solubilidad de un compuesto químico en agua depende de la magnitud de las interacciones de unión entre sus moléculas y las del agua. El grado de solubilidad resulta de una competencia entre los enlaces que mantienen a cada molécula unida y las oportunidades oportunidades alternas de unirse con la otra sustancia. Los compuestos orgánicos varían grandemente en su solubilidad en agua. La vida en la Tierra Tierra no existiría existiría sin esta variabil variabilidad idad.. Los compuesto compuestoss orgánicos orgánicos insolubles insolubles tienen tienen grupos componentes de átomos que forman pocas uniones (ninguna en algunos casos) con moléculas de agua.











MATERIALES MATERIALES Y REACTIVOS

III.

Equipos – materiales Balanza Piceta Placas petri Espátula Manguera de hule Matraces volumétricos Mechero Pipetas Micropipeta Vasos de precipitado de 50 ml Vaso de precipitado de 100 ml

Reactivos Acetona. Ácido clorhídrico concentrado. Aceite de oliva. (ácido oleico). Agua destilada. Bicarbonato de sodio. Hidróxido de amonio. Hidróxido de sodio. Petrolato líquido. (Mezcla hidrocarburos hidrocarburos del petróleo). Sudán III.

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de

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IV.

METODOLOGIA El alumno tendrá que aplicar el método experimental para el desarrollo de esta práctica así como el método analítico para obtener los resultados citados.

V.

DESCRIPCION DE LA PRACTICA Antes de la práctica se debe preparar las siguientes soluciones:

Preparación de soluciones:









Lave y caliente al rojo la punta de un clip o pinza, posteriormente colocarlo en una placa con agua adicionar una pequeña gota de ácido oleico. Observe. Coloque una segunda gota sobre la superficie. Observe. Nota Nota:: para para la elim elimin inac ació ión n de las las sust sustan anci cias as,, neut neutra raliliza zarr los los resi residu duos os ácid ácidos os con con bicarbonato de sodio, y los residuos alcalinos con bicarbonato de sodio. VI.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN Revise las estructuras químicas de los compuestos utilizados en el experimento. Iden Identitifiq fique ue las las prop propie ieda dade dess físi física cass y quím químic icas as de los los grup grupos os func funcio iona nale less de los los compuestos utilizados. Explique las variaciones en términos de las fuerzas que actúan entre el aceite de oliva, el aceite mineral y las diferentes soluciones.

Guia de Practicas Bioquimica I-2009

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