Guia de Practicas Farmacologia

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL FACULTAD DE MEDICINA "HIPÓLITO UNANUE" DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA ASIGNATURA:

FARMACOLOGIA MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO ALUMNO:

CÓDIGO:

COORDINADOR DE LABORATORIO: Dr. Jesús Lujan Donayre. PERSONAL DOCENTE MARTES Dr. Tomas Gargurevich Sánchez. Dra. Ana Pareja Fernández. Dr. Arturo Erazo Ramírez. Dra. Castillo Huapaya Patricia Dr. Augusto Díaz Sánchez.

MESA 01 MESA 02 MESA 03 MESA 04 MESA 05

JUEVES Dr. Jesús Lujan Donayre. Dra. Matilde Estupiñán Vigil. Dr. Ángel Suárez Zuzunaga. Zuzunaga. Dra. Maria Huapaya Paricoto. Dr. Ither Sandoval Díaz

MESA 01 MESA 02 MESA 03 MESA 04 MESA 05

Dr. Segundo Gallardo Vallejo.

SEMINARIOS

PERSONAL DE LABORATORIO TEC. Richard Paredes Yupanqui DELEGADOS DEL CURSO Falcón Espiritu Andrea Meléndez Espinoza Alida Pinedo Baltazar Lizeth

2013

INDICE Paginas INTRODUCCION……………………………………………………………….. 01 PRÁCTICA Nº 1. Factores que modifican el efecto de los fármacos……............……………..…….

04

PRÁCTICA Nº 2. Interacciones farmacodinámicas: sinergismo y antagonismo………………..….… 06 PRÁCTICA Nº 3. Anticonvulsivantes………………………………………………….……………… 13

PRÁCTICA Nº 4. Anestesia local……….………………………………………………………..…… 15

PRÁCTICA Nº 5. Unión neuromuscular………………………………………………………………

22

PRÁCTICA Nº 6 . Analgésicos…………………………………………….………………………….

11

PRÁCTICA Nº 7. Intoxicación por Organofosforados…………..………………………………....…

18

PRÁCTICA Nº 8. bloqueadores ……………………….………..... 20 Neurovegetativo II: II: colinérgicos y bloqueadores……………………….………..... PRÁCTICA Nº 9. Digitalicos / Antiarrítmicos………………………………………….…………..…

24

PRÁCTICA Nº 10. Oxitócicos y Tocolí ticos……………………………………….………………… 29 REGLAMENTO DEL LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA FARMACOLOGÍA …………… 31 NORMAS GENERALES……………………………………….……………… 32

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___________________________________________________L _____________________________________ ______________L aborator abor ator i o de F armacol ar macol ogia ogi a - U .N.F .V.

FARMACOLOGIA INTRODUCCIÓN ASPECTOS GENERALES Las prácticas de Farmacología, inducen al estudiante en el campo de la experimentación farmacológica, mediante la participación en una serie de trabajos experimentales prácticos. Teniendo en consideración que cada una de las prácticas tiene dos partes: 

Establecen un "modelo biológico".



Estudio de los cambios que producen diversos fármacos sobre dicho modelo.

En estas prácticas se emplearán técnicas utilizadas en farmacología far macología experimental.

IN VIVO

:

Evaluación de la actividad en un espécimen.

IN VITRO :

Evaluación de la actividad en un órgano aislado.

IN SITU

Evaluación directa del efecto en el órgano del espécimen vivo.

:

Con el objeto de obtener un mayor aprovechamiento, es necesario que el alumno antes de cualquier experimento tenga como requisitos básicos: a)

Conocimientos teóricos y los objetivos de cada trabajo práctico.

b)

El material de laboratorio necesario para la realización de dicha práctica.

c)

El método seleccionado que permitirá obtener los resultados deseados.

Todo lo anterior redundará en la obtención de mejores resultados, siendo de importancia la discusión con el fin de estimular un juicio científico crítico sobre los hechos. La Farmacología Experimental es una rama orientada a la investigación pre clínica, necesaria para el posterior uso de cualquier medicamento, proporciona los fundamentos para el empleó racional de los fármacos, realiza la investigación de la acción del fármaco, así como sus propiedades farmacológicas. En cada práctica de laboratorio, el manual de prácticas de laboratorio debe ser revisado antes del de l inicio de la actividad. Al finalizar el curso y el desarrollo de prácticas de laboratorio el estudiante habrá desarrollado habilidades en la manipulación del material biológico, observación de los efectos farmacológicos, obtención de resultados y la discusión de los mismos; y destrezas que en un futuro le permitirán la aplicación de la terapéutica farmacológica. farmacológica.

1

_____________________________L aborator io de F arm acologi a. F acul tad de M edici na - U.N.F .V.

MANEJO DE ESPECIMENES DE EXPERIMENTACIÓN Los experimentos de farmacología se realizan en su mayor parte en los denominados especímenes de laboratorio. Las experiencias en especímenes vivos deben realizarse con un planteamiento bien definido. Cuando la experiencia a desarrollar produzca un sufrimiento mayor que el originado por la técnica y la manipulación, el espécimen deberá ser anestesiado. La selección del espécimen depende del tipo de ensayo, los más usados los mamíferos por una similitud biológica y fisiológica con el hombre (rata, ratón, cobayo, conejo, etc.). Para de reducir la variabilidad esperada en un ensayo si fuera necesario, es conveniente emplear especímenes de una sola raza, de una sola cepa; considerando además la edad y el sexo como un factor determinante en los resultados esperados. La muerte del espécimen, cuando sea necesario, deberá ser siempre verificada.

A) MANEJO DEL RATÓN. Sacar el espécimen de la jaula, tomándolo del tercio superior de la cola o colocando los dedos bajo su cuerpo y conseguir que suba a la palma de la mano. Apóyelo sobre una superficie rugosa contra la que pueda ejercer resistencia. Sin soltarlo, tome en forma rápida, suave y firmemente, la piel del cuello con los dedos índice y pulgar y luego sujete la cola entre el dedo meñique y la palma de la mano. Levante el espécimen.

También puede apoyarlo sobre la jaula, coger la cola entre la palma de la mano y dedo meñique y anular y firmemente con la misma mano, tome la piel del dorso del cuello. Así puede realizar la administración intraperitoneal (I.P.) e intra gástrica (con sonda). Para la administración intraperitoneal use la aguja calibre 25 ó 26 de bisel corto. La administración intra gástrica se realiza mediante una cánula protegida, introduciéndola suavemente por el esófago (2-3 cm.).

B) MANEJO DE LA RATA. Sacar el espécimen de la jaula tomándola suavemente del cuerpo o de la cola y apóyela sobre la jaula, cuando el espécimen este tranquilo colocar la palma sobre el dorso y cerrar los dedos pulgar, índice y medio alrededor del cuello y meñique alrededor del tórax, tratando de no asfixiarla. Además Existen diferentes formas de sujetar la rata:

1- Apoye la palma de la mano sobre el lomo del espécimen, coloque el dedo índice y medio a ambos lados de la mandíbula, de forma que la cabeza de la rata quede entre dichos dedos impidiendo su movimiento. Con la otra mano tome la parte posterior del cuerpo. Así podrá levantarla sujetándola firmemente. 2


2- Tome la rata apoyando la mano alrededor del tórax, quedando una de las patas entre sus dedos índice y medio y la otra sobre su dedo pulgar (con el dedo índice realice una presión leve sobre la mandíbula de la rata, para prevenir mordeduras). Con la otra mano, tome la parte posterior del cuerpo y levántela, sujetándola firmemente.

3- Tomar el espécimen por la piel del cuello con los dedos pulgar e índice por detrás de las orejas y con los otros dedos de su mano sujetar la piel de todo el lomo de la rata. Levántela, sujetando firmemente. Par a evitar acci dentes es r ecomendabl e reali zar estas mani obras util izando un pedazo de tela o fr anela.

Para la administración intraperitoneal (I.P.) e intramuscular (I.M.) estirar con la otra mano los cuartos traseros y presentar el abdomen para que otra persona inyecte. Para la vía IP se hará en el cuadrante inferior a la izquierda de la línea media. Para la administración IM, depositar el fármaco en la parte posterior de los cuartos traseros. Para la administración oral se usa una sonda metálica con el extremo en forma de oliva, para evitar producir alguna lesión, deslizándola suavemente a través del esófago.

C) MANEJO DEL CONEJO. Para el manejo del conejo existen diferentes formas de sujeción:

1- Tome con una mano un pliegue de piel del cuello y apoye sobre la otra mano las patas traseras. La sujeción incorrecta puede llevar a la producción de luxaciones e incluso a fracturas de columna vertebral.

2- Otra forma de sujeción es tomando con una mano un pliegue de piel del cuello (siempre dejando libres las orejas), mientras que con la otra mano toma un pliegue de piel de la parte posterior del lomo. (Fig. A).

3- Para transportarlos en trayectos más largos debe colocarse el cuerpo del espécimen sobre el antebrazo del operador, con la cabeza dirigida hacia el codo quedando ésta y los ojos tapados (debajo del brazo). (Fig. B).

Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio: conejos. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2010. Figura A

Figura B

D) MANEJO DEL COBAYO. Se retira de la jaula tomándolo del tronco, por debajo de las axilas, con la palma de la mano sobre el lomo. Se apoya sobre la mesa de trabajo. 3


La sujeción se realiza apoyando la palma de la mano sobre el lomo del espécimen y colocando los dedos alrededor del tórax, de forma tal que quede una de las patas delanteras entre los dedos índices y medio, y la otra sobre su dedo pulgar. Con el dedo índice se ejerce una suave presión sobre la mandíbula con el fin de inmovilizar la cabeza. Al levantarlo de la mesa debe sujetar con su otra mano la parte posterior del cuerpo.

E) MANEJO DEL SAPO. Los sapos difieren, en su aspecto externo, de las ranas en que su piel es más seca y con frecuencia está cubierta de verrugas. Procedimiento para descerebrar al sapo, se debe tomar en cuenta las siguientes consideraciones: 

Sujetar firmemente al sapo y de tal manera que se le pueda flexionar la cabeza hacia delante con el dedo índice. (Figura A).



La punción se efectúa en un punto en donde se cruzan dos líneas imaginarias: Una de las líneas une los bordes posteriores de las ventanas auriculares. La otra línea corresponde al eje céfalo caudal (el equivalente a la línea vertebral del humano). (Figura B)

Para destruir la médula espinal: Se introduce el estilete en dicho punto, hasta llegar al canal medular. Para destruir los hemisferios cerebrales: El estilete, se dirige hacia los lados, haciendo movimientos circulares. Método para desmedular: Se corta con una tijera parte de la cabeza, de un solo tajo y de forma transversal a través de la boca, y por detrás de los ojos. Posteriormente limpiar el exceso de sangre y se observa el canal medular.

Figura A

Figura B

F) MANEJO DE AVES (PALOMA, POLLO): Estos especímenes son muy asustadizos, pudiendo además huir volando. Para lo cual es recomendable mantenerlos en jaulas adecuadas a fin de evitar que se lastimen. Para manejar es importante tomarlos suave y firmemente de las alas para evitar su marcha. Apoyarse con una mano para cogerlos de las patas y evitar que puedan lastimar al experimentador. 4


Después de sujetar las alas y las patas, un segundo experimentador podrá realizar la administración del fármaco por la vía correspondiente.

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PRÁCTICA Nº 1 “FACTORES QUE MODIFICAN LOS EFECTOS DE LOS FÁRMACOS” “Solamente la dosis determina que una cosa sea o no veneno. ” Paracelso.

Existe una diversidad de factores tanto endógenos como exógenos que pueden modificar los efectos de los fármacos: la dosis, el estado de salud o enfermedad, la variabilidad biológica, la especie, la raza, la edad, el peso y el área corporal, las vías de administración, los vehículos de los preparados, interacciones farmacológicas, tolerancia, adaptación, taquifilaxia, sensibilización, intolerancia, idiosincrasia, alergia medicamentosa, entre otros.

COMPETENCIAS: Comprende y explica los diferentes factores que alteran los efectos de los fármacos, mediante la adquisición de conocimientos, habilidades y destrezas. Explica correctamente porqué las vías de administración modifican los efectos de los fármacos. Explica correctamente como el vehículo de un fármaco modifica el efecto de un fármaco Interpreta los parámetros para evaluar los efectos de los fármacos. Manipula correctamente los especímenes de laboratorio y el instrumental empleado, prodigando buen trato al espécimen de experimentación. 

   

TAREAS DEL ALUMNO. Previamente el alumno debe revisar los aspectos de la farmacocinética general de los fármacos a utilizar, en la presente práctica. Al final de la práctica, desarrollar el informe respectivo, consignando los experimentos realizados, los resultados obtenidos, explicando los fenómenos farmacológicos observados y los mecanismos de producción. 



EXPERIMENTOS: EXPERIMENTO Nº 1: VÍAS DE ADMINISTRACIÓN FÁRMACO:

Pentobarbital Sódico (concentración: 20 mg/ml).

ESPECÍMENES: 04 Ratones. INSTRUMENTOS: Catéter de metal, Jeringas 1ml con aguja, Cronometro, Balanza de precisión, Tinta indeleble, guantes, Jaula. PROCEDIMIENTOS: 1. Pesar los ratones y colocarle una marca con tinta para identificarlos. 2. Administrar Pentobarbital sódico a la dosis de 30 mg/Kg de peso, a cada ratón según la indicación:    

Ratón cabeza pintada : Ratón de lomo pintado : Ratón de cola pintada : Ratón blanco :

vía subcutánea, debajo de la piel del lomo. vía intramuscular, en los músculos cuádriceps. vía intraperitoneal, cuadrante inferior izquierdo. vía oral, utilizando la cánula gástrica, procurando no introducirla en tráquea.

3. Anotar cuidadosamente la hora de la administración del fármaco. 4. Observar cambios en la actitud o marcha, como parámetros de comparación para determinar el periodo de latencia, intensidad del efecto y duración del efecto. 5. Registrar los resultados obtenidos y tabularlos. (Registrar el tiempo que tarda en aparecer cada uno de los efectos). 6. Realizar la discusión de resultados. 7. Establecer las conclusiones. 6


TABLA Nº. 1 VÍAS DE ADMINISTRACIÓN PARAMETROS RATÓN

PESO (g)

Pentobarbital Sódico 2% (DOSIS)

VÍAS DE ADMINISTRACION

CABEZA

SUBCUT NEA (S. C.)

LOMO

INTRAMUSCULAR (I. M.)

COLA

INTRAPERITONEAL (I.

BLANCO

PER ODO DE LATENCIA

INTENSIDAD DEL EFECTO

DURACIÓN DEL EFECTO

Orden

P.)

ORAL (V. O.)

Grado de Intensidad del efecto: Sin efecto: – Incoordinación de movimientos: +

Depresión (Hipnosis): ++

Anestesia: +++

Período de latencia, se define como el tiempo que transcurre desde que se administra un fármaco hasta que se evidencie su primer efecto, es decir, s ignifica el tiempo que demora el fármaco en llegar al sitio de acción. Biodisponibilidad, representa la fracción de la droga administrada que alcanza, en forma activa, la circulación y llega a la biofase. Biofase, es el sitio donde el fármaco ejerce su acción, es decir es el lugar en el que un medicamento administrado puede unirse a su receptor.

EXPERIMENTO Nº 2: VEHÍCULOS DE LOS PREPARADOS FÁRMACOS:

Sulfato de Estricnina. Epinefrina. Gelatina. Agua destilada.

1 mg/ml

ESPECÍMENES: 03 Ratones. INSTRUMENTOS: Jeringas de 1ml con aguja, Cronometro, Balanza de precisión, Tinta indeleble, Jaula para animales pequeños, guantes.

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PROCEDIMIENTOS: 1. Pesar los ratones y colocarle una marca con tinta para identificarlos. 2. En este experimento se utilizará 03 ratones a los cuales se les administrará Sulfato de Estricnina en solución 1/1000, a la dosis letal de 1.8 mg/Kg de peso, por la misma vía (Vía subcutánea), empleando un vehículo diferente para cada ratón: a. Inyectar a un ratón, por vía subcutánea, una dosis letal de estricnina (1.8 mg/kg de peso) más 0,30 ml de agua destilada como vehículo). b. A un segundo ratón, inyectarle la misma droga a la misma dosis y por la misma vía, pero reemplazando el agua destilada por gelatina en solución al 3%. c. A un tercer ratón, administrarle la misma droga por la misma vía y con la misma dosis, pero ésta vez usando como vehículo 0,30ml de una solución de adrenalina. 3. Contrólese en los tres casos el período de latencia, la intensidad y la duración del efecto. 4. Analizar los resultados.

TABLA Nº 2 VEHÍCULO DE LOS PREPARADOS Ratón

Período de

Duración

Intensidad

volumen en ml

0,3 ml

latencia

del efecto

del efecto

DERECHA

+ Estricnina GELATINA + Estricnina ADRENALINA + Estricnina

PATA



Vehículo

Agua destilada

IZQUIERDA



Estricnina 1‰

OREJA OREJA



Peso

Muerte

Se administra a 3 ratones, por vía subcutánea, la misma dosis (letal) de estricnina, empleando vehículos diferentes: agua destilada, gelatina y adrenalina. En el caso de agua destilada, el período de latencia así como la intensidad de la respuesta se considera como control para comparar estas magnitudes con los resultados de los otros ratones. Los otros vehículos en que se administra la estricnina (gelatina y adrenalina) retardan su velocidad de absorción, lo que se evidencia por la prolongación del período de latencia y por un efecto menos intenso. El vehículo, es una solución en la que se diluye el fármaco para ser administrado. Los vehículos también determinan el grado y velocidad de absorción del fármaco.

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PRÁCTICA N° 2 “INTERACCIONES FARMACODINÁMICAS: SINERGISMO Y ANTAGONISMO” El secreto del éxito en la vida, consiste en estar dispuesto para aprovechar la ocasión que se le depare. Benj amín Disraeli .

La modificación de las acciones profilácticas, terapéuticas y diagnosticas de un fármaco por el empleo de otro en forma simultánea o concomitante determinan las interacciones farmacológicas. Un fármaco interacciona al alterar la respuesta de otro fármaco en forma cuantitativa, ya sea aumentando la respuesta farmacológica (sinergismo) o disminuyendo la misma (antagonismo). El uso de varios fármacos aumenta la probabilidad de interacciones medicamentosas.

COMPETENCIAS: 

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Comprende y explica mediante la adquisición de conocimientos, habilidades y destrezas los fenómenos farmacológicos del sinergismo y antagonismo entre los fármacos al ser administrados simultáneamente. Interpreta y explica correctamente el sinergismo de facilitación entre la cocaína y la adrenalina al ser administrado en los especímenes. Interpreta y explica correctamente el antagonismo que se produce entre cianuro y nitrito de sodio en especímenes de laboratorio y su importancia en la intoxicación por cianuro. Trabaja en equipo y mantiene un comportamiento ético deontológico en la relación con sus compañeros y el manejo de los especímenes de laboratorio. Interpreta y explica correctamente el antagonismo entre estricnina y fenobarbital, así como también entre Calcio y Magnesio.

TAREAS DEL ALUMNO: 

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Previamente el alumno debe revisar aspecto de la farmacodinamia general así mismo de los fármacos a utilizar, en la presente práctica. Deberá conocer, correctamente los fenómenos del sinergismo, antagonismo y el mecanismo de acción de dichos fenómenos farmacológicos. Igualmente, debe conocer los aspectos generales de los fármacos a utilizar en la presente práctica y los procedimientos a seguir en cada uno de los experimentos. La semana siguiente deberá presentar el informe respectivo, consignando los experimentos realizados, los resultados obtenidos, explicando los fenómenos farmacológicos observados y los mecanismos de producción.

EXPERIMENTOS: EXPERIMENTO N° 1:

SINERGISMO COCAINA - ADRENALINA

FÁRMACOS:

Cocaína Clorhidrato, solución al 1%. Adrenalina, solución al 0.1%.

(10 mg/ml) (1 mg/ml)

ESPÉCIMEN:

Se trabajará con 01 conejo por mesa.

MATERIALES:

Goteros, jeringas, regla milimetrada, linterna, Mesa de Claude Bernard.

PROCEDIMIENTOS: 1. Inmovilizar a un conejo, atándolo a la mesa de trabajo de Claude Bernard, medir el diámetro pupilar basal de ambas pupilas, empleando para el efecto una regla transparente graduada en milímetros, teniendo cuidado de no contactar la córnea. Obsérvese las características y color de la mucosa conjuntival. Verificar la sensibilidad de la cornea. Anote. 9


2. 3. 4. 5.

Instilar 02 gotas de Cocaína en el saco conjuntival del ojo derecho. Transcurridos 10 minutos medir nuevamente el diámetro pupilar del ojo derecho. Anotar. Luego, instilar 04 gotas de solución de adrenalina en ambos sacos conjuntivales. Después de 5 minutos medir ambos diámetros pupilares. Anotar, comparar e interpretar los resultados obtenidos.

TABLA Nº 1 SINERGISMO COCAINA – ADRENALINA DIÁMETRO PUPILAR Espécimen: CONEJO

Basal (mm)

Cocaína

Diámetro (mm.)

Adrenalina

Ojo derecho

SI

SI

Ojo izquierdo

NO

SI

Diámetro pupilar (mm.)

Resultado

Observaciones: - Debe cuidarse que la iluminación sobre ambos ojos debe ser uniforme para evitar la variación pupilar por efecto de la luz. - Se controlarán como parámetros: Diámetro de la pupila, color de la conjuntiva, congestión, sensibilidad de la cornea antes y después de las instilaciones.

EXPERIMENTO Nº 2:

ANTIDOTISMO

KCN - Na NO2

FÁRMACOS:

Nitrito de Sodio (Na NO2). Cianuro de Potasio (KCN).

(20 mg/ml). (1 mg/ml).

ESPÉCIMEN:

Se trabajará con 01 paloma por mesa.

MATERIALES:

Balanza de precisión, marcadores, Jeringas de 1 ml, algodón, cronometro, jaula para aves.

PROCEDIMIENTOS: 

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Registrar controles iníciales del espécimen, sobre la capacidad de volar, caminar, tipo de respiración y posición del cuello. Administración profunda en el músculo pectoral de cianuro de potasio en dosis de 4mg/Kg. Observar presencia de síntomas tóxicos: Aleteo, ataxia, cambios respiratorios, convulsiones, posición de cuello y vómitos. Inmediatamente de producidos algunos de estos signos administrar vía intravenosa rápido Nitrito de Sodio en dosis de 35 mg/Kg.

TABLA Nº 2 ANTIDOTISMO Fármacos

Volumen Apariencia Capacidad Capacidad Posición de Otros Signos (ml) General para volar para caminar la cabeza (Respiración)

Estado Basal KCN Na NO2 10


PRÁCTICA Nº 3 “ANTICONVULSIVANTES” Buscando el bien de nuestros semejantes encontramos el nuestro. Platón

Los anticonvulsivantes, son Fármacos que suprimen selectivamente las crisis convulsivas, sin provocar mayor depresión del sistema nervioso en general (hipnosis, analgesia, etc.). Experimentalmente es posible provocar crisis convulsivas semejantes a las crisis típicas de la epilepsia humana, mediante diversos tipos de excitaciones: traumáticas, eléctricas, químicas, acústicas, etc., siendo posible medir la aptitud del anticonvulsivante para alterar el umbral convulsivo.

COMPETENCIAS: Comprende y explica, mediante los conocimientos y habilidades, las diferentes acciones y efectos Farmacológicos de los anticonvulsivantes. Interpreta y explica correctamente la depresión del sistema nervioso central por efecto de la inhalación del anestésico general. Reconoce las propiedades de los diferentes tipos de anticonvulsivantes, como agentes protectores de convulsiones producidas experimentalmente. Explica la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacología del pentilenotetrazol. Explica la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacología del fenobarbital. Explica la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacología de la difenilhidantoina. Explica la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacología del diazepan. Explica la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacología de la carbamazepina. Compara las características anticonvulsionantes de cada fármaco. Características de las convulsiones producidas por electrochoque. 



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TAREAS DEL ALUMNO. Antes de asistir a la práctica, el alumno debe revisar en sus libros de texto el mecanismo de producción de las convulsiones, las características de los diferentes tipos de convulsión, así como la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacognosia de los diferentes fármacos a utilizar en la realización de los experimentos. Igualmente debe conocer los procedimientos de la realización de los diferentes experimentos consignados. 



La semana siguiente a la realización de la práctica, debe presentar un informe escrito de los resultados obtenidos, interpretándolos correctamente. Indicando el cumplimiento o no los objetivos de la práctica.

EXPERIMENTOS:

EXPERIMENTO Nº 1: Anticonvulsivantes frente al Pentilenotetrazol. FÁRMACOS:

Pentilenotetrazol Fenobarbital Diazepan Difenilhidantoína Carbamazepina

Sol 10 mg/ml Sol 5 mg/ml Sol 0.5 mg/ml Sol 5 mg/ml Sol 1 mg/ml

(ESTRICNINA 1.8 mg/kg)

ESPECIMENES: 05 ratones marcados y pesados por mesa. EQUIPOS:

Estimulador eléctrico, Jeringas de 1 ml, Balanza de precisión, guantes, jaulas metálicas, tinta indeleble.

MÉTODO:

Inducción a convulsión química. (In Vivo).

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PROCEDIMIENTOS 1. Cada mesa contará con 05 ratones. 2. Observar la actividad espontánea y el reflejo de enderezamiento de cada uno de los ratones. 3. Administrar al 1º Ratón (Control) por vía Intra peritoneal, Pentileno tetrazol a la dosis de 100 mg/kg. Anotar el período de latencia, convulsiones y muerte. 4. A los otros especimenes se les administrará, vía intraperitoneal los fármacos anticonvulsivantes, uno a cada ratón, a las dosis consignadas: o o o o

Ratón cabeza pintada Ratón de lomo pintado Ratón de cola pintada Ratón pata pintada

: : : :

Fenobarbital Diazepan Difenilhidantoína Carbamazepina

50 mg/kg de peso 3 mg/kg de peso. 30 mg/kg de peso. 10 mg/kg de peso.

5. Luego de la administración hacer nuevamente las observaciones de la actividad espontánea y el reflejo de enderezamiento de cada uno de los ratones 6. Transcurridos 40 minutos, se les administrará por vía intraperitoneal el Pentileno tetrazol en dosis 100 mg/Kg 7. Comparar el período de latencia, convulsiones, y la muerte entre los especímenes tratados con anticonvulsivantes y el espécimen control.

TABLA Nº 1 CONVULSIONES METRAZÓLICAS Y SUS MODIFICACIONES Ratón

Peso (g)

Control

Fármaco

Dosis ( ml )

Periodo de latencia

Intensidad Muerte de las Observaciones convulsiones

Pentilenotetrazol 100 mg/Kg

Cabeza

Fenobarbital 50 mg/Kg

Lomo

Diazepan 10mg/Kg

Cola

Difenilhidantoína 30 mg/Kg

Pata

Carbamazepina 10 mg/Kg

Escala de intensidad:

Mínima +

Moderada ++

Severa +++

EXPERIMENTO Nº 2: Convulsiones por electrochoque supra máximo FÁRMACOS:

Fenobarbital Difenilhidantoina Diazepan Carbamazepina

50 mg/kg de peso, solución al 0.4% 30 mg/kg de peso, solución al 0.4% 10 mg/kg de peso, solución al 0.1% 10 mg/kg de peso, solución al 0.1%

ESPECIMENES: 05 Ratas. MÉTODO:

Inducción a convulsión eléctrica. (In Vivo). 12


PROCEDIMIENTOS 1. Con la ayuda del instructor, producir las convulsiones por estímulo eléctrico supra máximo, en una de las ratas. 2. Observe y registre las fases de flexión y extensión tónicas, de los miembros posteriores, el clonus y la depresión post-paroxismal. 3. A las 04 ratas restantes se les inyectará cada uno de los anticonvulsivantes consignados, vía intraperitoneal y a las dosis indicadas. 4. Una hora después provocar convulsiones por electrochoque máximo. 5. Comparar las respuestas con la rata control.

TABLA Nº 2 ANTICONVULSIVANTES FRENTE AL ELECTROCHOQUE SUPRA MÁXIMO Rata

Peso (g)

Fármaco

Blanco

----

Cabeza

Fenobarbital

Cuello

Difenilhidantoína

Lomo

Carbamezapina

Cola

Diazepan

Escala de intensidad:

Mínima +

Dosis ( ml )

Periodo de latencia

Moderada ++

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Intensidad de las convulsiones

Fase suprimida

Severa +++

Observaciones


PRÁCTICA Nº 4 “ANESTESIA LOCAL” “No hay efecto sin causa”. Claude Bern ard .

La anestesia local puede definirse como la inhibición o bloqueo reversible de la sensibilidad dolorosa gracias a la prevención de la generación y/o conducción del impulso nervioso, limitándose habitualmente a una porción definida del organismo.

COMPETENCIAS: Comprende y explica mediante los conocimientos, habilidades, y destrezas, la supresión de la sensibilidad, especialmente la dolorosa por acción de los efectos farmacológicos y manifestaciones adversas de los anestésicos locales. Interpreta y explica adecuadamente la supresión de la sensibilidad periférica por efecto de la anestesia local. Interpreta y explica adecuadamente los parámetros farmacocinéticas, para la elección del anestésico local. Interpreta y explica correctamente la farmacocinética y farmacodinamia de la anestesia por pincelación, infiltración y troncular. Define correctamente la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacognosia de los diferentes anestésicos locales. Explica correctamente la forma de potenciar la a nestesia local. 

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TAREAS PARA EL ALUMNO: Previo a la realización de la práctica, el alumno debe revisar todo lo concerniente a la anestesia local, así como la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacognosia de los diferentes anestésicos locales. Debe conocer el procedimiento a seguir para la culminación correcta de los diferentes experimentos de la práctica consignados en su respectivo manual. Al final de la práctica elaborará un informe. 

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MATERIALES: FÁRMACOS:

Lidocaína con epinefrina. Solución al 2 %. Lidocaína, solución al 2 % Bupivacaína 0.5% Suero fisiológico.

ESPECIMENES:

01 sapo por mesa. 01 conejo por mesa.

EQUIPOS:

Estimulador eléctrico con electrodos, Jeringas de 1ml, Balanza, Algodón, Mesa Claude Bernard, Afeitador, Set de disección, Soporte de madera, Lanceta o sujetadores, Alfileres, Hilos de seda.

EXPERIMENTO Nº 1:

ANESTESIA POR PINCELACIÓN

PROCEDIMIENTO: 1. Descerebrar a un sapo, pasado el efecto del shock, fijarlo con lancetas a una tablilla de disección. 2. Determinar el umbral basal de respuesta a la descarga eléctrica en ambas patas (retracción de la extremidad). 3. Luego, pincelar una pata con una torunda de algodón impregnado con Bupivacaína y la otra con lidocaína.

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4. Estimular nuevamente cada pata con intensidad creciente de descarga eléctrica hasta lograr su retracción. 5. Repetir la acción a los 10 minutos, anotar los nuevos umbrales de respuesta en dos oportunidades más, comparar, analizar e interpretar los resultados.

TABLA Nº 1 ANESTESIA POR PINCELACIÓN UMBRAL DE SENSIBILIDAD Primer Segundo Umbral basal estímulo estímulo

Observaciones

Lidocaína Pata derecha Bupivacaína Pata izquierda ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

EXPERIMENTO Nº 02:

ANESTESIA TRONCULAR

PROCEDIMIENTOS: 1. En el sapo, disecar, identificar y aislar ambos nervios ciáticos, cuidando de no comprometer las estructuras vasculares (manejar los nervios entre hilos debidamente ligados). 2. Determinar el umbral de respuesta motora a la descarga eléctrica usando estímulos eléctricos débiles en los 2 nervios. Anotar. 3. A continuación, envolver un nervio ciático suavemente con un algodón impregnado de Lidocaína. Hacer lo mismo en el otro nervio, empleando esta vez solución de Bupivacaína. 4. Esperar 5 minutos y volver a estimular por separado cada nervio ciático hasta obtener el nuevo umbral de respuesta. Repetir luego de 5 minutos. Anotar, comparar e interpretar los resultados.

TABLA Nº 2 ANESTESIA TRONCULAR Fármaco / Localización

UMBRAL DE SENSIBILIDAD Umbral Primer Segundo basal

estímulo

Lidocaína Ciático derecho Bupivacaína Ciático izquierdo

15

estímulo

Observaciones


EXPERIMENTO Nº 03:

ANESTESIA POR INFILTRACIÓN

PROCEDIMIENTOS: En cada una de las mesas de prácticas se hará el siguiente experimento: 1. Depilar la pared abdominal del conejo. 2. Determinar la mínima intensidad de corriente eléctrica capaz de provocar la retracción de la piel estimulada. (umbral basal). 3. Demarcar 4 cuadrantes en el área depilada. 4. Infiltrar por vía intradérmica, en cada uno de los cuadrantes demarcados 0,2 ml de los fármacos en el mismo orden delimitando la pápula formada. 0,2 ml de las siguientes soluciones: A. Bupivacaína. B. Lidocaína C. Lidocaína + Adrenalina. D. Agua destilada. 5. Controlar las variaciones del umbral cada 15 minutos. 6. Determinar el período de latencia en cada cuadrante; para el efecto se estimulará con la intensidad del umbral basal hasta no obtener respuesta. 7. Anotar el tiempo transcurrido. Después de 10 minutos estimular en cada cuadrante, aumentando progresivamente la intensidad de la descarga eléctrica hasta obtener respuesta contráctil. Luego de 10 minutos, repetir con un segundo estímulo. Anotar, comparar e interpretar los resultados.

TABLA Nº 3 ANESTESIA POR INFILTRACIÓN UMBRAL DE SENSIBILIDAD Umbral Primer Segundo basal estímulo estímulo A. Bupivacaína B. Lidocaína C. Lidocaína + Adrenalina D. Agua destilada

16

Total


PRÁCTICA Nº 5 “UNIÓN NEUROMUSCULAR” Así como el hierro se oxida por falta de uso, también la inactividad destruye el intelecto. L eonardo da Vinci .

Los fármacos que interrumpen la transmisión del impulso nervioso en la unión mioneural, provocando parálisis y relajación muscular en forma reversible se denominan bloqueadores Neuromusculares. Tambien conocidos como drogas curarizantes debido al curare, usado durante siglos como veneno de flechas, que contienen alcaloides cuaternarios o terciarios con estas propiedades.

COMPETENCIAS: Explica correctamente la fisiología de la unión neuromuscular y el modo de acción de los fármacos en esta estructura. Explica y analiza la farmacocinética, la farmacodinamia, la farmacosología y el mecanismo de acción de los fármacos a este nivel. Explica y analiza la farmacocinética, la farmacosología y el mecanismo de acción del bromuro de vecuronio. Explica y analiza la farmacocinética, la farmacodinamia, la farmacosología y el mecanismo de acción de la succinilcolina. Explica y analiza la farmacocinética, la farmacodinamia, la farmacosología y el mecanismo de acción de la neostigmina. 

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TAREAS PARA EL ALUMNO: Previamente a la realización de la presente práctica, el alumno debe revisar sobre la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacosología de los fármacos a utilizar en la realización de los experimentos. Asimismo debe conocer el o los procedimientos a seguir durante los experimentos consignados en su manual de práctica. 

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La semana siguiente a la realización de los experimentos debe presentar un informe escrito de los resultados y su correcta interpretación. Debe además consignar el logro o no de los objetivos planteados.

EXPERIMENTO FÁRMACOS:

Bromuro de vecuronio Succinilcolina (Distensil) Neostigmina Atropina

0,1 mg/ml 4 mg x 1 ml 0,25 mg/ml 0,1 mg/ml 0,25 mg/ml

ESPECIMENES: 2 pollos (peso aproximado 1 – 2 kg) EQUIPOS:

Ventilador manual con sonda traqueal, Jeringas de 1ml, Balanza, Algodón, cronometro, gasa, Lanceta o sujetadores.

MÉTODO:

Farmacológico in vivo.

Experimento Nº 1: PROCEDIMIENTOS: Comparar el efecto bloqueante del receptor nicotínico provocado por la administración de Vecuronio y Succinilcolina. 1. Pesar y marcar los especímenes. 2. Anotar los datos básales de motilidad, sensibilidad y tono muscular de cada uno de los pollos. 17


3. Administrar por vía endovenosa, utilizando la vena marginal del ala: POLLO A: Bromuro de Vecuronio

0.05 mg / Kg

POLLO B: Succinilcolina

0.1 mg / Kg

4. Anotar el tiempo de administración. Observar los efectos inmediatos y tardíos; prestar atención al tipo de parálisis muscular inicial y final producida por los fármacos.(cuello, párpados y patas) Anotar el tiempo de presentación de los efectos. 5. Tabular los datos y discutir.

Experimento Nº 2: Observa el efecto de la Neostigmina 1. Recuperados los pollos, tomar nuevamente los datos básales. 2. Administrar Neostigmina por vía endovenosa 0.1 mg/Kg y Atropina 0.25 mg/Kg a ambos pollos. Esperar de 5 a 10 minutos. 3. Luego administrar por vía endovenosa: POLLO A: Vecuronio

0.05 mg/Kg

POLLO B: Succinilcolina

0.1 mg/Kg

4. Tomar nota de los efectos en cada uno de los especímenes. 5. Tabular los datos y discutir. Anotar las diferencias.

TABLA Nº 1 RELAJANTES NEUROMUSCULAR EVENTO

FÁRMACO

POSICIÓN DE

POSICIÓN

DOSIS EN ml

LAS PATAS

DEL CUELLO

PARPADO

TIPO DE PARÁLISIS

Basal Experimento I

Vecuronio Succinilcolina

Experimento II

Neostigmina Vecuronio Neostigmina Succinilcolina

Observación: - Se puede realizar la administración de los fármacos por vía IM, considerando duplicar la concentración del vecuronio para producir el efecto. (0.1 – 0.2 mg/kg de peso). -Se puede administrar la neostigmina junto a la atro pina.

18


PRÁCTICA Nº 6 “ANALGÉSICOS” Solo el que sabe lo que busca, sabe interpretar lo que encuentra. C.B.

Los analgésicos son fármacos que atenúan o anulan las sensaciones nociceptivas o dolorosas, sin producir pérdida de conciencia, ni depresión de otras sensaciones. El dolor es una manifestación subjetiva, adquirida a lo largo de la personalidad, que varía en las personas y aún dentro de la misma persona, según factores endógenos o exógenos que ocurren en el momento del dolor. La sensibilidad al dolor varía incluso con el ritmo circadiano.

COMPETENCIAS: 

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Comprende y explica mediante los conocimientos, habilidades y destrezas, la supresión del dolor fiebre e inflamación, mediante la acción y efecto farmacológico, de los antiinflamatorios inespecíficos no esteroideos. Interpreta y explica correctamente la inhibición del dolor por efecto de los analgésicos. Interpreta y explica correctamente los parámetros farmacocinéticas y farmacodinámicos para la elección de un AINES. Compara la eficiencia y potencia analgésica de los diferentes grupos farmacológicos de analgésicos.

TAREAS DEL ALUMNO. 

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El alumno debe revisar sobre Fisiopatología del dolor. Mediadores químicos, parámetros de farmacocinética, la farmacodinamia de los AINES así mismo la diferente clasificación de los fármacos a utilizar. Deberá conocer, correctamente el procedimiento a seguir, para la culminación correcta del experimento. Deberá desarrollar el instrumento de práctica de los experimentos realizados en la hoja que se adjunta, y presentarlo en la siguiente semana.

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EXPERIMENTO Nº 01: FÁRMACOS:

VALORACIÓN DE LA CAPACIDAD ANALGÉSICA

Metamizol Sol. 2 mg/ml. Ketorolaco Sol. 2 mg/ml. Tramadol Sol. 2 mg/ml. Morfina Sol. 1 mg/ml. Acido acético, solución al 2%

ESPECIMENES: 05 ratones por mesa. EQUIPOS

:

Jeringas, jaulas de metal.

PROCEDIMIENTOS 1. Pesar y marcar los especímenes. 2. Observar el comportamiento inicial del espécimen. 3. Administrar al Ratón blanco por vía intra peritoneal (Control), una solución de acido acético en dosis de 10 ml / kg. A continuación registrar el número de contracciones abdominales desarrolladas en los siguientes 25 minutos. 4. Administrar los siguientes fármacos a cada espécimen a las dosis consignadas por vía intraperitoneal: a. Ratón blanco : (Control) b. Ratón cabeza pintada : Metamizol 10 mg/kg c. Ratón lomo pintado : Ketorolaco 5 mg/kg d. Ratón cola : Tramadol 5 mg/kg e. Ratón pata pintada : Morfina 10mg/kg 19


5. Después de transcurridos 20 minutos, proceder a la administración vía intraperitoneal de la solución de acido acético en dosis de 10 ml/kg a cada uno de los ratones y colocarlos en jaulas individuales. Anotar el tiempo de administración. 6. Durante 25 minutos, contar y registrar las contracciones abdominales de cada uno de los especimenes (arqueado de la espalda, aumento de la tensión en los músculos abdominales, alargamiento del cuerpo y extensión de los muslos). 7. Determinar el número total de contracciones y comparar. 8. Discutir resultados.

TABLA Nº 1 VALORACIÓN DE LA CAPACIDAD ANALGÉSICA Registro de contracciones Ratones Blanco Cabeza Lomo Cola Pata

Fármaco

Peso (g)

Fármaco

Volumen (ml.)

5’

10’

15’

20’

Total 25’

---Ac. Acético

Metamizol Ac. Acético

Ketorolaco Ac. Acético

Tramadol Ac. Acético

Morfina Ac. Acético

Porcentaje de Inhibición (%)*

Metamizol Ketorolaco Tramadol Morfina (*) Porcentaje de inhibición de las contracciones provocado por cada Fármaco con respecto al control. Los fármacos analgésicos opioides, actúan sobre receptores farmacológicos específicos denominados receptores opioides, producen intensa analgesia, inducen farmacodependencia y depresión respiratoria.

20


ADMINISTRACIÓN - VÍA INTRAPERITONEAL Se usa jeringas y aguja calibre 25 – 27 G. ½ a 1 pulgada, de bisel pequeño. Aplicando la sujeción con una mano e inmovilizando la pata izquierda del ratón, con una inclinación hacia craneal para producir un desplazamiento de las vísceras con el fin de no lesionarlas. (Fig. 1.) Se inserta la aguja en la piel en el cuadrante izquierdo inferior del abdomen, luego se lleva hacia craneal y se introduce en la cavidad peritoneal, levantando la aguja en contra de la pared abdominal para evitar la punción en el interior del intestino; la jeringa con aguja debe estar paralela a la columna vertebral. (Fig. 2.) En ratones se puede administrar un volumen de hasta 3 ml. Una rápida administración del fluido puede causar daños en el tejido y hemorragia debido a la presión interna.  

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Figura Nº 1

Figura Nº 2

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PRÁCTICA Nº 7 “TOXICIDAD AGUDA POR ÓRGANOFOSFORADOS ” “No basta con tener una idea, es necesario tenerla en el momento oportuno y además el coraje necesario para llevarla a cabo”. Kon rad Adenauer .

COMPETENCIAS: Interpreta y explica correctamente la toxicidad aguda por órganos fosforados. Interpreta y explica correctamente la acción de la atropina (antagonismo), evidenciando sus efectos, considerando su farmacocinética y su farmacodinamia. Interpreta y explica correctamente la farmacología de los órgano fosforados, considerando su farmacocinética y su farmacodinamia.  

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TAREAS PARA EL ALUMNO: Previamente a la realización de la práctica, el alumno debe revisar sobre intoxicación por órganos fosforados y sustancias relacionadas. Asimismo debe conocer el procedimiento a seguir para la realización del experimento. La semana siguiente a la realización de la práctica debe presentar un informe escrito, consignando los resultados y su interpretación desde el punto de vista farmacológico. Igualmente debe consignar si cumplió o no los objetivos planteados. 

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EXPERIMENTO : TOXICIDAD DE INSECTICIDAS - ORGANOFOSFORADOS FÁRMACOS:

Insecticida organofosforado (Malatión). Solución comercial, diluida. Sulfato de Atropina. 0.25 mg/ml Pentobarbital

4 mg/ml

ESPECIMENES: 03 ratones por mesa. MATERIALES:

Jeringas de 1 ml, Cronometro, Jaulas para animales pequeños, Guantes.

PROCEDIMIENTOS 1.

Pesar y marcar a los especímenes.

2.

Tomar datos básales del estado de los animales.

3.

A un ratón administrar el insecticida por vía intraperitoneal y determinar el periodo de latencia de los efectos tóxicos. Observar el comportamiento del animal, presencia de convulsiones fasciculares, sialorrea y muerte.

4.

A un segundo ratón administrar Atropina y Pentobarbital intraperitoneal, cinco minutos antes de administrar el insecticida órgano fosforado. Si aparecen manifestaciones tóxicas administrar Atropina a igual dosis.

5.

En un tercer ratón administrar el insecticida e inmediatamente la Atropina.

6.

Anote y discuta los resultados.

NOTA: el alumno deberá manipular el insecticida con guantes, teniendo en cuenta en todo momento no manipular directamente.

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Tabla 1. Intoxicación por Órgano fosforados Peso (g)

1º Espécimen

Pentobarbital

Sulfato de Atropina

fosforado

Volumen (ml)

Volumen (ml)

Volumen (ml)

---

---

2º Espécimen 3º Espécimen

---

23

Órgano

Periodo de Latencia

Máximo Efecto

00’ 00’’

00’ 00’’

Observaciones


PRÁCTICA Nº 8 NEUROVEGETATIVO II: “AGONISTAS Y ANTAGONISTAS DE RECEPTORES COLINÉRGICOS” “Para la mayor parte de los farmacólogos modernos el receptor es como una mujer muy bella, pero remota. El hombre le ha escrito varias cartas y ella frecuentemente le ha contestado. A partir de esas contestaciones el farmacólogo se ha creado una imagen de la bella dama. Sin embargo, no puede pretender ni haberla visto, aunque quizá algún día ello pueda ocurrir”.

D.K. Jongh 1964 Los parasimpático mimeticos son aquellos fármacos que actuando sobre las células efectoras en forma directa o indirecta, producen efectos similares a los que provoca la estimulación de las fibras colinérgicas post ganglionares , en su mayoría parasimpáticas, actúan en las es t r uc t u r a s periféricas en que la acetilcolina es el neurotrasmisor.

COMPETENCIAS: Explica y analiza correctamente los efectos que se producen al activar o bloquear los diferentes receptores colinérgicos, en el espécimen de experimentación, extrapolándolos al humano. Enuncia, analiza y explica los efectos de la acetilcolina, así como su farmacocinética. Enuncia, analiza y explica los efectos de la neostigmina, así como su farmacocinética y farmacognosia. Enuncia, analiza y explica los efectos de la atropina, así como su farmacocinética y farmacosología. 

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TAREAS PARA EL ALUMNO: Antes de asistir a la práctica, el alumno debe revisar sobre fisiología del Sistema Nervioso parasimpático, Receptores colinérgicos: localización tipos y diferenciación; la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacognosía de los fármacos a utilizar en los experimentos; asimismo debe conocer el procedimiento a seguir consignado en su práctica. La semana siguiente a la realización de la práctica debe presentar un informe escrito de los resultados obtenidos, interpretándolos correctamente. Debe consignar además si cumplió o no los objetivos de la práctica. 

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FÁRMACOS:

Acetilcolina Neostigmina Atropina

Solución 0,01; 0.1; y 1mg/ml Solución 0,5 mg/ml Solución 1 mg/ml

REACTIVOS:

Lactato de Ringer a 30°C. Azul de Evans o azul de metileno al 1%.

ESPECIMENES: 01 Sapo grande. EQUIPOS:

Mesa de disección para animales pequeños, Set de disección, jeringas de tuberculina con aguja N° 27, 02 ligaduras, jeringas de 03 ml, soporte universal, embudo de vidrio, cánula de vidrio, vasos de precipitación pequeños.

EXPERIMENTOS: AGONISTAS Y ANTAGONISTAS DE RECEPTORES COLINÉRGICOS Procedimiento inicial: 1. Des medular el espécimen hasta obtener el sapo espinal. 2. Exponer la cavidad abdominal y observar las contracciones peristálticas espontaneas y por estimulo mecánico a lo largo del tracto digestivo. 3. Aislar el estomago y extirparlo, haciendo una incisión antes del cardias y después del píloro. Posteriormente vaciar el contenido del estómago. 4. Insertar una cánula de vidrio a través del 24


cardias y fijarlo con una ligadura. 5. Aplicar la solución de Ringer temperada y coloreada con azul de metileno con la ayuda de una jeringa de tuberculina, introduciendo la aguja entre la cánula de vidrio y la mucosa. Verificar que la solución se deposite en el estomago en cantidad suficiente hasta alcanzar ser visible en cánula de vidrio. 6. Fijar verticalmente la preparación en un soporte universal. 7. Aplicar el Órgano en cada uno de los fármacos por inmersión, según el orden descrito, observando y registrando los efectos.

Nota: Después de cada fármaco realizar un lavado en solución de Lactato de Ringer, y luego continuar.

a) Efectos colinérgicos Acetilcolina Acetilcolina Acetilcolina

(1) (2) (3)

0,0001 mg/Kg. 0,001 mg/Kg. 0,01 mg/Kg

Solución 0.01mg/ml Solución 0.1mg/ml Solución 1 mg/ml

b) Efectos potenciales de la Neostigmina Neostigmina Acetilcolina

0,03 mg/Kg. 0,0001 mg/Kg.

Solución 0,5 mg/ml Esperar 5 minutos. Solución 0,01 mg/ml

c) Control del efecto colinérgico farmacológico Acetilcolina 0,0001 mg/Kg.

Solución 0,01 mg/ml

d) Bloqueo del receptor muscarínico Atropina 2 mg/Kg Diluir el volumen hallado 5 veces, administrar lentamente. (Mejor en 20 ml de sol. fisiológica). Estimulación del cabo distal del vago. Acetilcolina (1) 0,0001 mg/Kg Solución 0.01mg/ml Acetilcolina (3) 0,002 mg/Kg Solución 1 mg/ml

COLINÉRGICOS Y BLOOUEADORES INTESTINO

OBSERVACIONES

(MOTILIDAD) GRÁFICA

INICIO

Control basal Acetilcolina(l) Acetilcolina (2) Acetilcolina (3) Neostigmina Acetilcolina (1 ) Umbral estimulación Acetilcolina (1) Atropina Acetilcolina (1) Acetilcolina (3)

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AMPLITUD


PRÁCTICA Nº 9 “ANTIARRÍTMICOS” / “DIGITALICOS” Admiramos a las personas por motivos, pero las amamos sin motivos. G. Keith Chesterton

COMPETENCIAS: Explica correctamente el funcionamiento cardíaco in situ y los efectos y mecanismos de acción de los fármacos que modifican su funcionamiento. Explica correctamente los efectos de los digitálicos, sobre el músculo cardíaco normal e insuficiente. Explica los efectos de los digitálicos sobre el electrocardiograma, señalando los que indican toxicidad. Explica correctamente la farmacocinética de los digitálicos; el mecanismo de acción de los cardiotónicos y las diferencias farmacocinéticas de los diferentes cardiotónicos. Explica correctamente las interacciones de los digitálicos con K y Ca, así como la acción de estos sobre el corazón. Explica correctamente la acción de la lidocaína, administrada en el corazón con manifestaciones de toxicidad digitálica. 

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TAREAS PARA EL ALUMNO: Previo a la realización de la práctica, el alumno debe revisar en sus libros de texto la fisiología cardiaca normal, la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacosología de los cardiotónicos y la metodología a seguir en la realización de la práctica, consignada en su manual respectivo. Previo a la realización de la práctica, el alumno debe revisar sobre la fisiología cardíaca normal, la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacosología de los cardiotónicos, Quinidina, Acetilcolina, Lidocaína, Propanolol. Conocer la acción de los antiarrítmicos sobre el corazón. Conocer la metodología a seguir en la realización de la práctica, consignada en su manual respectivo. La semana siguiente a la realización de la práctica debe presentar un informe escrito, consignando los resultados obtenidos y su interpretación farmacológica. 

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---------------------------------------------------------------------------------------------------------EXPERIMENTO 1: ANTI ARRÍTMICOS FÁRMACOS:

Acetilcolina Sol 0.2 mg/ml Amiodarona 1mg/Kg. Sol 1% Lidocaína 1ml de la Sol 1% Propanolol 1,5 mg/Kg. Sol 2,5% Lactato de ringer para sapo.

ESPÉCIMEN:

1 sapo.

MÉTODO :

Corazón in situ (cielo abierto)

EQUIPOS :

Tabla de disección para animales pequeños, Set de disección, jeringas de tuberculina con aguja N° 27, lancetas o sujetadores, hilos de seda, soporte universal, powerlab, transductor de fuerza.

PROCEDIMIENTOS: Procedimiento inicial: 1. Desmedular el espécimen hasta obtener el sapo espinal. 2. Fijar con lancetas el espécimen con el abdomen hacia arriba sobre una plancha de corcho, y se abre el tórax, el pericardio y se expone el corazón. 3. Con un gancho de acero inoxidable, atravesar el ápex del corazón, el extremo opuesto se fija al transductor de fuerza. 4. Se ajusta el hilo al transductor, hasta que el corazón quede apuntando hacia arriba y “suspendido” del transductor.

5. El transductor de fuerza se conecta a un amplificador y posteriormente al powerlab para el registro digital* de la 26


actividad cardiaca. 5. Aplicar la solución de Ringer temperada sobre el órgano para mantener la humedad. 6. Obtener un registro basal de la frecuencia cardiaca. 7. Aplicar cada uno de los fármacos por goteo en el órgano según el orden descrito, observando y registrando los efectos.

Procedimiento experimental: 8. Después de los controles iníciales, aplicar en la zona del nodo sinusal (entre las desembocaduras de la vena cava) una torunda de algodón impregnado con Acetilcolina al 1% y mantenerlo por 1 minuto, luego retirar el algodón y con una pinza aplicar inmediatamente pinzadas de regular intensidad en diferentes zonas de la aurícula hasta obtener respuesta (fibrilación), esperar la recuperación espontánea anotando así el tiempo que dura la fibrilación y su total recuperación. 9. Provocar nuevamente fibrilación y al minuto después, administrar cualquiera de los tres fármacos siguientes: Lidocaína al 1 % 1 ml Propanolol 1,5 mg/Kg Amiodarona 1 mg/Kg   

1. Observar los cambios producidos por estos fármacos. 2. Aplicar Amiodarona Sol 10% lentamente y después de haber transcurrido 5 minutos hacer los mismos pasos que el procedimiento de fibrilación para determinar el efecto protector de la Amiodarona sobre el corazón.

TABLA Nº 1 ANTIARRÍTMICOS FARMACOS

PRESIÓN

CONTRACCION

ARTERIAL

AURICULAR

CONTRACCION

TIEMPO DE

VENTRICULAR FIBRILACIÓN

BASAL ACETILCOLINA(l) LIDOCAÍNA ATROPINA PROPANOLOL ADRENALINA AMIODARONA (1) AMIODARONA (2) ACETILCOLINA (2)

Nota 1: Después de cada fármaco se puede realizar un lavado en solución de Lactato de Ringer, y luego continuar. Nota 2: Este preparado permite contar frecuencia cardíaca, ver los efectos de variar la precarga, post carga por diversas drogas, sobre la actividad contráctil del corazón, teniendo al corazón intacto y funcionando normalmente. (*) analógico-digital que permite ingresar los datos a una computadora y graficarlos en la pantalla del monitor.

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_____________________________L aborator io de F arm acologi a. F acul tad de M edici na - U.N.F .V. Transductor de fuerza PC con plaqueta A/D

Amplificador

Sapo

EXPERIMENTO 2: DIGITALICOS Fármacos

:

Digoxina Lanatósido C. 0,4mg/2ml Sol original Cloruro de Calcio al 10%

Espécimen :

1 sapo o rana.

Método

Corazón in situ (cielo abierto).

:

PROCEDIMIENTOS: 1. Hacer el mismo procedimiento inicial del experimento anterior. 2. Tomar un registro basal durante 1 minuto. Luego administrar los siguientes fármacos: 1ml de Digoxina, 0,2ml de Lanatósido C. Repitiendo esta dosis hasta que presente paro cardíaco, debiendo existir un intervalo de 10 a 20 minutos entre las dosis a administrar. 3. Observar periódicamente las modificaciones producidas por el digital sobre la frecuencia y energía de contracción. Al final del experimento administrar Cloruro de Calcio al 10%. (o KCl ) 4. Evaluar los resultados, tabular y discutir.

TABLA Nº 2 CORAZON IN SITU ACTIVIDAD AURICULAR

ACTIVIDAD VENTRICULAR

Basal ( ) 5' Digoxina y Lanatosido C

10' 15'

20' Cloruro de calcio Cloruro de potasio

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PRESIÓN ARTERIAL


PRACTICA Nº 10 “OCITOCICOS Y TOCOLITICOS”

COMPETENCIAS: Adquiere conocimientos, habilidades y destrezas que le permiten explicar e interpretar correctamente la acción de los fármacos que modifican la motilidad uterina, incrementándola o disminuyéndola. Al finalizar la práctica, el alumno: Interpreta y explica correctamente la motilidad uterina. Interpreta y explica correctamente la acción de los fármacos que incrementan la motilidad uterina (oxitócicos), considerando su farmacocinética, su farmacodinamia y su farmacosología. Interpreta y explica correctamente la acción de los fármacos inhibidores de la motilidad uterina (tocolíticos), incluyendo la farmacocinética, la farmacodinamia y la farmacognosia de los mismos. 

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TAREAS PARA EL ALUMNO: Previamente a la realización de la práctica, el alumno debe revisar sobre la fisiología uterina en la práctica. Asimismo debe conocer el procedimiento a seguir para la realización del experimento. La semana siguiente a la realización de la práctica debe presentar un informe escrito, consignando los resultados y su interpretación desde el punto de vista farmacológico. Igualmente debe consignar si cumplió o no los objetivos planteados. 

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Fármacos:

Oxitocina (Pitocin) Ritodrina (Materlac) Ergonovina (Ergotrate) Nifedipina (Adalat) Misoprostol (Citotec) Sulfato de Magnesio.

Espécimen:

01 rata hembra de 180 - 230 gramos. Administrar 48 horas antes de la práctica 8 mg/Kg de Estradiol.

Método:

Baño de órganos aislados. (In Vitro).

EXPERIMENTO Nº 1. : Oxitócicos y Tocolíticos Fármacos:

Isoxuprina 0,2 ml Sol Ergonovina. 0,2 ml Sol Sulfato de magnesio 0,2 ml Sol Oxitocina 0,2 ml Sol Nifedipino 0,2 ml Sol Solución Tyrode – Lactato de Ringer.

Equipos:

Baño para órganos aislados a 38° C. Bomba de aire. Equipo para registro - Powerlab.

Procedimientos: 1. Sacrificar una rata, Disecar con cuidado el útero. 2. Dividir en dos astas el útero e instalar un cuerno, Atar un hilo a cada extremo y montar la preparación en el vaso del baño de órganos aislados de 20 ml de capacidad conteniendo solución de Tyrode con aireación continua a temperatura constante de 38° C. 3. Registrar las contracciones uterinas, esperar durante 15 minutos hasta que se estabilice la preparación, hacer un registro de control. 4. Observar un trazado basal en el registrador durante dos minutos. 5. Luego instilar 0,2 ml del fármaco en estudio, en el líquido nutricio. 29


6. Después de observar el efecto deseado del fármaco (durante 2 minutos), lavar el órgano a fin de que no interfiera con el siguiente fármaco que se va a aplicar, dejar que se estabilice y agregar el fármaco siguiente. 7. El momento de administración el fármaco será de acuerdo al estado de contracción del útero.

El orden de administración de los fármacos: Isoxuprina, Ergonovina, Sulfato de Magnesio, Oxitocina, Nifedipino.

TABLA Nº 1 OCITOCICOS Y TOCOLITICOS FÁRMACOS

TIPO DE ACTIVIDAD

INTENSIDAD

Basal Isoxuprina Ergonovina MgSO4 Oxitocina Nifedipino

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GRÁFICA


REGLAMENTO DE LABORATORIO FARMACOLOGÍA 1. Durante el curso de Farmacología, a cada grupo se le asignara un día, martes o jueves para llevar a cabo las sesiones de práctica. 2. La sesión de laboratorio tendrá una duración de cuatro horas de trabajo práctico a la semana. 3. Las fechas y horas de las prácticas son fijas y solo podrán modificarse por causas de fuerza mayor; en tal caso serán comunicadas con anticipación. 4. Cada alumno podrá realizar su práctica, únicamente, en el día y la fecha que le corresponda a su grupo. 5. La tolerancia por faltas de asistencia a las prácticas de laboratorio será del 20%

(3 faltas únicamente). 6. La lista de asistencia se pasará al inicio de la práctica. Todo alumno que no este presente al momento de pasar lista perderá su derecho a tomarla y no podrá intervenir en la realización de su informe. Los horarios de las prácticas son: de 14:00 a 18:00 horas (sólo en este horario tienen tolerancia de 05 minutos). 7. El uso de Guardapolvo o Mandil en el laboratorio será indispensable y no podrá permanecer en el mismo todo estudiante que no lo porte. 8. Se prohíbe fumar y comer durante las prácticas de laboratorio de Farmacología. 9. Cada grupo será dividido, según acuerdo con el instructor en mesas de trabajo de

laboratorio. 10. Los alumnos de cada mesa de trabajo serán responsables de la integridad del material didáctico. 11. La limpieza será importante, después de la práctica deberán de dejar el equipo, el material de vidrio y las instalaciones limpias y ordenadas en condiciones de ser usadas de nuevo. 12. Cada alumno tendrá un Manual de Prácticas de Laboratorio, donde anotará las observaciones y resultados que obtenga durante su trabajo. 13. Cada Mesa de trabajo entregará un informe de la práctica de laboratorio, el cual estará basado en los resultados obtenidos durante la práctica y en el material bibliográfico correspondiente. 14. La fecha de entrega del informe del laboratorio será a la siguiente sesión de su práctica de laboratorio:”NO ACEPTANDOSE POSTERIORMENTE”.

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NORMAS GENERALES Para obtener provecho en una práctica de laboratorio, es necesario seguir ciertas normas que disminuyan al máximo los errores y accidentes. 1. Nunca sacrificar un espécimen, si previamente no existe un planteamiento experimental coherente. 2. Todos los accidentes personales, por triviales que sean, se comunicaran inmediatamente al profesor. 3. Jamás tener prisa a la hora de realizar los experimentos de la práctica. 4. En las prácticas de laboratorio son indispensables: El máximo grado de observación de los fenómenos. El rigor científico. La limpieza. 5. No confiar nada a la memoria, anotar todas las observaciones. Una parte esencial de cualquier trabajo científico es la de consignar por escrito la descripción de lo que se ha hecho y observado en tal forma que permita a cualquiera persona, con cierto conocimiento del tema, repetir el trabajo realizado sin necesidad de guía especial. Las notas de sus observaciones deben ser breves, claras y deben realizarse inmediatamente después de cada paso del trabajo, deben conservarse con orden y limpieza; éstas deben ser una descripción completa y honesta de todo lo que el estudiante ha visto y realizado. 6. Cualquier equipo que se utilice se manejará dé acuerdo con el instructivo y una vez utilizado se dejará en condiciones de ser manejado por otra persona. 7. Evitar la contaminación de los reactivos líquidos, para esto es necesario utilizar una pipeta para cada reactivo; en el caso de los reactivos sólidos se utilizará una espátula para cada reactivo.

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Relación de Seminarios de Farmacología: Temas 1. Farmacodependencia. Cocaína, pasta básica, morfina, marihuana y tranquilizantes. 2. Intoxicación alcohólica: etanol, mecanismo de acción, alcoholismo agudo y crónico. Tratamiento. 3. Epilepsias: Manejo terapéutico. 4. Intoxicación por órgano fosforados, órgano clorados y carbamatos. 5. AINES: Clasificación, RAM. Usos. 6. Insuficiencia Cardiaca: caso clín, fisiopatología, exámenes aux y tto. 7. Corticosteroides, presentaciones, usos.

Responsable Grupo Martes

Responsable Grupo Jueves

Dr. Gargurevich

Dr. Gallardo

Dra. Pareja

Dr. Estupiñán.

Dr. Erazo

Dr. Suarez.

Dra. Castillo

Dra. Huapaya

Dr. Díaz

Dr. Sandoval.

Dr. Gargurevich

Dr. Gallardo

Dra. Pareja

Dr. Estupiñán.

Dr. Erazo

Dr. Suarez.

8. Crecimiento poblacional y Métodos Anticonceptivos. 9. Parasitosis Intestinales: casos clínicos, exámenes auxiliares y tratamiento. 10. Infección del Tracto Urinario, Shock séptico: casos clínicos, fisiopatología y tto.

Dra. Castillo Dr. Díaz

Dra. Huapaya Dr. Sandoval.

BIBLIOGRAFIA LITTER Manuel Compendio de Farmacología. Editorial El Ateneo 4ta Ed. Reimpresión 1997 GOODMAN&GILMAN.

Las

bases

farmacológicas

de

la

Terapéutica.

9º

edición

1996.editorialMc·Graw·Hill Interamericana. TORTORA. Farmacología Clínica 1995. MYCEK Mary, HARVEY, Richard y col. Pharmacology. Lippincott - Raven 2da Edition 1998 KATZUNG Bertram G. Farmacología Básica y Clínica 2001. 8ª Edición Manual Moderno VELASQUEZ. Farmacología Editorial Interamericana 16 Edición 1993

La farmacología es la ciencia que estudia las drogas, o fármacos, o sustancias, que tienen acción sobre los seres vivos.Según la OMS: Droga o fármaco es toda sustancia que puede utilizarse para curar, aliviar, tratar o prevenir las enfermedades del hombre o de animales. Es así como el término droga es sinónimo de medicamento, pudiendo denominarse también agente farmacológico.

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Guia de Practicas Farmacologia

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