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Determinacion de azucares
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Uno de los métodos más acordes y con mejor resultados en la determinación de los azúcares con carácter reductor, es el método (DNS), método que ha sufrido varias modificaciones a través de l…Descripción completa
ANA
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Escuela nacional de ciencias biologicas, departamento de bioquimica.Descripción completa
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Laboratorio de bioquimica
DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES EN ALIMENTOS UTILISADO EL METODO VOLUMETRICO DE EYNON Y LANE 1. OBJETIVOS Determinar las azucares reductores de la miel de abeja utilizar adecuadamente adecuadamente las materiales de laboratorio para obtener resultados adecuados.
2. FUNDAMENTE TEÓRICO Los Azúcares presentes en una muestra de azúcar comercial o de algún producto azucarado se determinan cuantitativamente por métodos físicos (ópticos) o por métodos químicos. Cuando se usan métodos químicos el más aconsejable es el que utiliza el reactivos de Fehling-Soxhlet, que precipita el oxido cuproso (Cu2O) en presencia de una sustancia reductora. El método puede ser volumétrico o gravimétrico. El método gravimétrico se conoce como la propuesta de Munson y Walker W alker y el método volumétrico como la propuesta de Eynon-Lane. El método gravimétrico corresponde a la cantidad de cobre reducido en presencia de azúcares reductores; el peso en miligramos de Cu2O corresponden a los miligramos de azúcares analizados, por medio de las tablas de Munson y Walker que aparecen en el AOAC. (hay que tener en cuenta las diluciones para reportar la concentración final) 3. MATERIALES Y EQUIPOS EQUIPOS probeta graduada de 10 ,50 y 100 bequeres balones volumétricos bureta erlenmeyers bagueta de vidrio embudos filtro de papel baño maria cocinilla eléctrica poteciometro
REACTIVOS
ferricianato de potacio 0.25 m acetato de zinc 1,0m
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naoh 35% y 1.0n hclconcentrado solución de fehing a y b glucosa anhidra p.a
4, PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL DETERMINACION DEL TITULO DE FEHLING
Pesar exactamente 0,25g de glucosa anhídrida (desecada previamente) disolver en gua y completar para 50ml pipetear 5,0 ml de solución de de fehling a y 50 ml de solución solución de fehling ben Erlenmeyer de 250ml adicionar 50ml de agua destilada y calentar hasta ebollucion abastecer una bureta con solución padrón de glucosa y titular la solución de fehling manteniendo la temperatura total de la coloración azul (sobrenadante incoloro)
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PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
pesamos 4.0gr de miel transferir para un becquer con auxilio de 100ml de agua destilada si la muestra fuera excesivamente acida neutralizar con NaOH 0.1N si fuera necesario adicionar ferrocianato de potación potación 0,25 0,25 M y acetato de de zinc 1.0m en la proporción pr oporción 6.7 (v/v) hasta la obtención de una buena clarificación
agitar y transferir para un balón de 250ml y completar el volumen con agua destilada
filtrar en en papel de filtro con bonba de vacio
DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES REDUCTORES COMO GLUCOSA GLUCOSA
ABASTECER UNA BURETA con el filtrado F1
pipetear 5.0 5.0 ml de solución solución de de felihling a y 5.0ml de fehling B Y TRANSFERIR PARA UN ERLENMEYER DE 259 ML
adicionar 50ml de agua destilada
calentar hasta ebullición
titular esa solución hasta la formación de un un precipitado precipitado de un precipitado rojo con desaparecimiento total de la coloración azul (sobrenadante incoloro)
calcular el contenido de azucares resuctores como glucosa
DETERMINACIÓN DE AZÚCAR TOTAL 1. Inversión de la sacarosa
pipetear 50 ml de filtrado(f1) en un becquer de 100
adicionar 5.0 ml de HCL CONCENTRADO
calenta a baño maria a 68 a70 durante 5 min
enfriar
neutralizar con NaOH 35%
Transferin para un balón volumétrico de 100ml y completar con agua destilada (solución hidrolizada H)
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Pipetear 5.0ml de fehling ayb
Transferir para un Enlenmeyer de 250 ml
Adicionar 50 ml de agua destilada
titular en caliente hasta la formación de un precipitado rojo (sobrenadante incoloro)
esta determinación incluye las azucares azucares reductores como glucosa más los azucares proveniente de la inversión de la sacarosa(a)