Curva Tipo Azucar Reductor-1 (1)

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL – ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Práctica 5: Cinética Enzimática. Práctica 5.1: Curva Tipo de Azúcares Reductor Reductores. es.  Autores: Grupo: 4QV2 Sección: 1 Introducción. La cin cinétic ética a químic ímica a estud studia ia la velocidad de las reacciones cataliz lizadas por enzimas mas  las condiciones que las modi!ican" así como sus mecanismos de reacción# La enzima es un catalizador de las reacciones $ioló%icas" aumentan la velocidad en la que se alcanzar& el equi equili$ li$ri rio o sin sin a!ec a!ecta tarr el equi equili li$r $rio io !inal !inal de la reacci reacción# ón# 'ropor 'roporcio ciona nan n una ruta con menor ener%ía li$re de acti activ vació ción para para tran trans! s!or orma marr el sustrato a un producto# (stas son de alta especi!idad"  su actividad puede verse modi!icada por !actores como: temperatura" p)" concentración de enzima" concentración de sustrato" etc# *na enzima es una proteína %lo$ular" cua estructura tridime tridimens nsion ional al prese presenta nta una zona zona llamada sitio activo" donde se une a su sustra sustrato# to# Al%un Al%unas as enzima enzimas s son proteínas simples !ormadas e+clus e+clusiva ivamen mente te de amino amino&ci &cidos dos  otra otras s prot proteí eína nas s con,u on,u%a %ada das# s# Su activi actividad dad depend depende" e" adem&s adem&s de su estructura proteica" de otras estructuras no proteicas denominadas co!actores# La invertasa -./0/ !ructo!uranosidasa" ./0/ !ructo !ructo!ur !uranó anósid sido" o" !ructo !ructoid idrol rolasa asa cata catali liza za la idró idróli lisi sis s de res restos tos term termin inal ales es no redu eductor ctores es ./0/ /0/ !ructo!uranosídicos de !ructo!uranósidos#

enzima se desi%ne con el nom$re de sacarasa# La denominación trivial de invertasa" con la que tam$ién se conoce" ace re!erencia al eco de que que los los prod produc ucto tos s de la reac reacci ción ón son conocidos desde anti%uo como az3car invertido5 a que mientras la saca sacaro rosa sa es de+t de+tro rorr rrot otat ator oria ia"" la mezcla equimolecular de %lucosa  !ructosa que resulta de su idrólisis es levorrotatoria" por lo que en el proc proces eso o se ori% ori%in ina a un cam$ cam$io io de si%no si%no -de positiv positivo o a ne%at ne%ativo ivo del valor de rotación óptica# 6$,etivos: 

Resultados.

Gráfca 1. Curva tipo !" a#$car r!uctor

7a$la $la 1# A$sor $sor$a $anc ncia ia dad dada de acue acuerd rdo o a la conc concen entr trac ació ión n del del az3car reductor 

(ntre (ntre los sustr sustrato atos s so$re so$re los que act3 act3a a el m&s m&s si%n si%ni! i!ic icad ado o es" es" sin sin duda duda"" la saca sacaro rosa sa"" de aí aí que que el

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL – ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. !ueron los ideales pues se o$tuvo una %r&!ica líneal" considerando que esta dentro de un intervalo acepta$le de error# ;on los datos o$tenidos se realizó la %r&!ica de tendencia lineal correspondientes a partir de las a$sor$ancias  las concentraciones conocidas - curva tipo de az3car  reductor  a,ust&ndose a los datos" el @2  o$tenido para la ecuación de la recta !ue de #<
Análisis de resultados. 'ara la determinación de la actividad de la enzima invertasa se utilizó un ensao indirecto en el que los productos de reacción se detectaron espectro!otométricamente después de que se convirtieron en derivados coloreados# La e+tensión de la idrólisis enzim&tica de sacarosa en %lucosa m&s !ructosa se valoró mediante el método del &cido 8"9/ dinitrosalicílico -0S" el cual se $asa en la reducción del 0S -de color amarillo por la %lucosa u otro az3car reductor al &cido 8/amino/9/ nitrosalicílico -de color ro,o ladrillo -;aplin" 1<=> Se prepararon una serie de tu$os " incluendo un $lanco siendo aquel tu$o donde no e+iste la presencia de productos utilizado para cali$rar  el espectro!ometro utilizado para o$tener la cantidad de a$sor$ancia de cada tu$o# Se a%re%aron %lucosa  sacarosa en di!erentes vol3menes dado que estos son los resultados de la idrolisis enzim&tica# La presencia de un re%ulador de acetatos !ue para mantener el p) optimo en la reacción de la solución de invertasa " mientras que en el caso de la sacarosa " presenta un cierto %rado de a$sor$ancia  dado que siempre esta presente en la idrolisis se le a%re%o el mismo volumen a todos los tu$os? al a,ustar  la a$sor$ancia con una dilución " se o$servo el poder reductor del az3car por medio de la !ormación de un compuesto colorido en los tu$os# ;omo se puede o$servar en la gráfica 1 los resultados o$tenidos

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Referencias. 7in%" S#V# 1<9># @apid ;olorimetric Cetods !or  Simultaneous 0etermination o! 7otal @educin% Su%ars and Dructose in ;itrus Euices# •

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL – ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.  A%ric# Dood ;em# Vol# 4-8 2>8/2>># Capítulo 5: Análisis de regresión. ttp:FF#u%r#esFH$ioestadFIprivate Fcp!und9#pd!  # Deca de consulta: 2=FDe$F214# Extracción  ensao de la acti!idad in!ertasa de le!adura de panadería #

ttp:FF#uco#esFdptosF$ioq uimica/$iol/ molFpd!sF81J2KV(@7ASA J2(SA6#pd! # Deca de consulta: 2=FDe$F214# •

 Az3cares / 0ocencia *AC/K

docencia#izt#uam#m+FlanezFanalisis FpracticasFa"ucares#rt! # Deca de consulta: 2=FDe$F214#

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