Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
TEKNIK PENYIMPANAN MIKROORGANISME Dosen Pengampu : Dr. Ir. Joni Kusnadi, M.Si
Disusun oleh : Iqbal Ali Musthofa
(125100500111002) (125100500111002)
Nunung Prasetyo
(125100507111018) (125100507111018)
Rabitha Almas Fasya
(125100500111010) (125100500111010)
Anggi Nurvianti Pradana
(125100501111006) (125100501111006)
Dininurilmi Putri
(125100501111014) (125100501111014)
Sugiyati Ningrum
(125100501111022) (125100501111022)
Lydia Ariyani
(125100507111008) (125100507111008)
Ullyvia Dewi Octarina
(125100507111016) (125100507111016)
Elysabeth
(125100507111026) Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI INDUSTRI
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Indonesia yang terletak didaerah tropik merupakan sumber biodiversitas yan
luas, termasuk mikrobanya, baik yang menguntungkan maupun yang merugika
bagi masyarakat. Mikroba tersebut, disamping beragam jenisnya juga sang
mudah mengalami perubahan sifat sehingga menjadi strain baru yang berbed
dengan aslinya. Hal ini menambah cepat tumbuh dan berkembangny biodeversitas tersebut.
Mikroba yang ditemukan disuatu lingkungan ditemukan dalam bentu
populasi campuran, dan jarang sekali ditemukan sebagai satu spesies tungga
Penelitian mengenai mikroorganisme biasanya memerlukan teknik untu
memisahkan populasi campuran pada permulaannya atau biakan campura
menjadi spesies-spesies yang berbeda-beda sebagai biakan murni (Pressco You're Reading a Preview 2003). Hal yang perlu diperhatikan adalah pemeliharaan mikroba selam Unlock full access with a free trial.
penyimpanan agar produk atau metabolisme suatu mikroba tetap terjaga.
Withsuatu Free Trial Untuk itu, para ahliDownload melakukan proses koleksi penyimpanan da
pemeliharaan mikroba utuk mempelajari teknik penyimpanan dan karakterist dari mikroba tersebut.
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
A. Teknik Penyimpanan Mikroorganisme
Penyimpanan (preservasi) bertujuan untuk menjaga agar biakan mikrob
tetap hidup, ciri-ciri genetiknya tetap stabil dan tidak berubah, serta hem
biaya dan tenaga. Metode yang dipilih sangat tergantung pada sifat mikrob
dan tujuan preservasi. Tujuan koleksi dan preservasi meliputi tujuan jangk
pendek dan jangka panjang. Preservasi jangka pendek dilakukan untu
keperluan rutin penelitian yang disesuaikan dengan kegiatan program ata
proyek tertentu. Preservasi jangka panjang dilakukan dalam kaitannya denga
koleksi dan konservasi plasma nutfah mikroba, sehingga apabila suatu sa
diperlukan, dapat diperoleh kembali atau dalam keadaan tersedia (Suriawiri 2005).
Penyimpanan jangka pendek mikroba dilakukan dengan memindahka You're Reading a Preview secara berkala jangka pendek misalnya sebulan sekali dari media lama k Unlock full access with a free trial.
media baru. Teknik ini memerlukan waktu dan tenaga yang banyak. Beberap
Downloadyang With efektif Free Trial teknik penyimpanan sederhana untuk penyimpanan isolat jangk
pendek atau menengah, dan biasanya tidak sesuai untuk penyimpanan jangk
panjang. Berikut ini beberapa metode yang digunakan dalam penyimpana mikroorganisme antara lain:
1. Metode Agar Slant
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Sign In
Upload
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
Gambar1. Teknik Slant Agar. (a) memasukkan kultur pada slant agar bagian-bagian yang akan dipindahkan (Rachdie, 2008)
Agar slants adalah kultivasi biakan mikroba ke dalam agar miring
dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni bakteri yan
tumbuh. Metode ini digunakan dengan cara kultur ditumbuhkan pada aga
miring. Komposisi media dan suhu serta interval waktu pemindahan haru tepat dan disimpan pada refrigerator dengan suhu 5oC atau freezer
20oC. Subkultur setiap 6 bulan atau sampai dengan 1 tahun, bila kult ditutup dengan menggunakan mineral oil (Sulistinah, 2006).
Penggunakan metode ini merupakan penggunaan dengan jangka pende
yang murah dan mudah sehingga tidak cocok untuk penyimpanan jangk
panjang. Namun, penggunaan metode ini dapat mengakibatkan kultu
mudah terkontaminasi. Apabila digunakan untuk mengkultur bakte selama 2-3 minggu dan fungi selama 3-4 minggu. You're Reading a Preview Unlock full access with a free trial.
2. Metode Liofilisasi atau Kering Beku (Qiophylization atau Freez Drying)
Download With Free Trial
Teknik kering beku atau liofilisasi merupaka teknik penyimpanan yan
paling popular dan banyak digunakan untuk penyimpanan jangka panjan mikroba.
Teknik
ini
cocok
untuk
menyimpan
berbagai
jen
mikroorganisme termasuk virus (Holding dan Lelliot 2006), bakteri (S
2003), khamir, jamur berspora dan jamur yang tidak berspora (Cla Sign up to vote on this title
2006). Proses kering beku merupakan kombinasi duaNot teknik penyimpana Useful useful
jangka panjang yang paling baik, yaitu pembekuan dan pengeringan. Gar
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
dibekukan dengan cara pendinginan dan penguapan pada kondisi vakum
sementara ampulnya diputar dengan kecepatan rendah untuk menghinda
timbulnya buih. Cara ini menghilangkan kendala yang terjadi pad
pengeringan biakan dari kondisi cair. Selanjutnya ampul kering beku dap
disimpan pada suhu ruang di tempat gelap. Kemampuan bertahan hidu jangka panjang mikroba dapat ditingkatkan dengan penyimpanan kulkas.
Hal yang perlu diperhatikan adalah cairan pengawet (preservatif) yan
akan digunakan untuk pembuatan suspensi sel untuk mencegah kerusaka
sel hidup pada tahap pembekuan dan pengeringan. Fungsi preservat
adalah menstabilkan protein, mencegah kerusakan akibat pembekuan, da
melindungi dari kekeringan yang berlebihan. Pemilihan preservatif haru
dapat memelihara mikroorganisme dalam kondisi hidup dan membe
peluang untuk dapat ditumbuhkan kembali dengan baik dari kondi
kering. Salah satu preservatif terbaik dan telah digunakan untu You're Reading a Preview penyimpanan jangka panjang mikroba adalah mist dessicants (Sly 200 Unlock full access with a free trial.
yang merupakan cairan dengan komposisi pepton Difco 12 gr dan glukos
Download Free Trial 30 gr dalam 100 ml akuades.With Beberapa cairan preservatif lain yang serin
digunakan ialah larutan pepton 1%, larutan susu skim 1%, larutan Na
glutamat 1%, dan larutan campuran serum kuda dengan pepton 10% (Sl 2003).
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
Tahap penyimpanan kering beku adalah sebagai berikut:
1. Ampul kosong ukuran 1 ml diberi label di dalamnya denga
menuliskan nomor kode strain mikroba pada sepotong kertas filt
3x20 mm menggunakan pensil, ditutup dengan kapas dan di lua
ampul diberi label nomor kode strain menggunakan spidol permane
Ampul disterilkan dengan oven kering bersuhu 160 0C selama satu jam
2. Strain mikroba yang akan disimpan dibiakkan pada medium yan
sesuai hingga pertumbuhan optimum (log phase), umumnya 24-48 ja pada suhu ruang.
3. Penyediaan larutan preservatif yang sesuai untuk mikroba yang aka diawetkan.
4. Suspensi pekat strain mikroba 10 8-109 sel atau konidia/ml dibu dalam cairan preservatif.
5. Ampul yang telah disterilkan diisi dengan 0,1-0,3 ml suspensi mikrob secara aseptik menggunakan Pasteur atau pipet mikro. You're Readingpipet a Preview
6. Suspensi mikroba ampul pada suhu -20 0C sampai Unlockdalam full access with a dibekukan free trial.
300C atau menggunakan dry ice. Download With Free Trial 7. Ampul yang telah dibekukan dengan cepat dilakukan proses kerin
beku dengan menempelkan pada alat pengeringan beku. Prosed
kering beku dilakukan sesuai dengan petunjuk pada masing-masin alat.
8. Setelah selesai proses kering beku, ampul dipotong menggunakan ap las.
Sign up to vote on this title
usefulpenyimpana Useful Not 9. Ampul yang sudah dipotong diatur rapi pada kotak
ampul.
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Sign In
Upload
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
a. Ampul dikeluarkan dari tempat penyimpanan dan direndam pad
suhu 370C atau dibiarkan beberapa saat pada suhu ruang untu mencairkan isi ampul (thawing ).
b. Secara aseptik leher ampul dipotong dengan pemotong kaca da dipatahkan.
c. Beberapa tetes medium cair dimasukkan ke dalam ampu
dibiarkan beberapa saat dan agak dikocok agar biakan cepat larut.
d. Sebagian suspensi diambil dan ditumbuhkan pada cawan medium agar yang sesuai. e. Koloni mikroba ditumbuhkan pada medium agar miring.
Penyimpanan dengan teknik pengeringan cairan. Beberapa strain bakte
yang peka terhadap proses kering beku dapat disimpan dengan car
pengeringan suspensi (liquid drying ) mikroba. Teknik ini dikembangkan ole
Annear pada tahun 1954, 1956, dan 1962 dan berhasil digunakan untu
menyimpan bakteri, khamir, jamur, dan virus. Teknik ini dimodifikasi ole You're Reading a Preview Banno dan Sakane (1979). Tahapan teknik pengeringan cairan adala sebagai berikut: 1.
Unlock full access with a free trial.
Download With dan Freediberi Trial label kertas filter di dalamny Ampul steril bertutup kapas
disediakan seperti untuk penyimpanan dengan teknik kering beku. 2.
Suspensi pekat biakan mikroba (10 8-109sel/ml) dibuat dalam caira
pengawt seperti larutan mist dessicant, pepton 1%, susu skim 1% ata Na-glutamat 1%. 3.
Pada tiap ampul dimasukkan 0,1-0,3 ml suspensi mikroba, tutu Sign up to vote on this title
kapas dipasang dan digunting, kemudian dimasukkan ke dalam ampu Useful Not useful
hingga leher ampul atau tempat di atas label.
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Sign In
Upload
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
Sebagian besar mikroba dapat bertahan dalam media preservasi liofilisa
selama 10 tahun, selain itu untuk pemindahan tidak perlu untuk ditumbuhka
lagi dalam agar miring atau dicairkan. Metode ini dapat mencegah air tersera
kembali. Air dapat memicu aktivitas mikroba dan enzim yang dapat merusa
substrat. Jika air ini dapat dikurangi maka aktivitas sel dan enzim aka semakin lambat sehingga daya simpannya lebih lama.
Hal-hal yang dapat menyebabkan kerusakan pada sel ketika dibekuka
antara lain mencakup efeksolusi, formasie ekstraseluler dan dehidra
intraseluler pembentukan. Sedangkan kerugian dari metode ini adalah kultu
harus tetap dalam keadaan beku atau ditumbuhkan kembali pada agar mirin selama transportasi.
3. Liquid Nitrogen Freezing
Metode ini memerlukan alat khusus untuk mengontrol tingkat pembekua
sebelum disimpan dalam waktu lama dalam nitrogen cair. Media yan You're Reading a Preview digunakan adalah 10 % (vol/vol) gliserol atau 5% (vol/vol) DMSO. Suh Unlock full access with a free trial.
penyimpanan pada metode ini adalah 77 K atau -196 0C yang merupakan tit
Download With Free Trialini beberapa aktivitas biolog didih dari nitogen cair. Pada suhu rendah
termasuk reaksi biokimia yang menyebabkan kematian pada sel dap
diperlambat (Suriawiria, 2005). Penyimpannan dengan menggunakan metod ini dapat berlangsung hingga 100 tahun.
Nitrogen cair memiliki titik didih pada suhu -195,8 derajat Celsiu
sedangkan karbon dioksida cair -57 derajat Celsius. Pada suhu yang lebi Sign up to vote on this title
tinggi dari suhu tersebut, nitrogen dan karbon dioksidaNot akan berbentuk ga Useful useful
volatil, sehingga umumnya nitrogen cair dan karbon dioksida cair berada pad
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
Prosedur pembekuan mikroorganisme dalam nitrogen cair : 1.
Slant cultures (media agar miring)
Tambahkan 5 ml cairan nutrien yang terdiri dari 10% (vol/vol) gliser pada masing-masing slant. Keruk permukaan slant dengan pipet steril 1
untuk mendapatkan larutan spora. Gunakan pipet 2 sampai 5 ml, masukka
masing-masing 1 ml larutan spora ke dalam ampul. Tempatkan seluruh amp dalam pendingin (5 C) selama 30 menit.
2.
Submerged cultures
Tambahkan 20% (vol/vol) gliserol ke dalam biakan cair sehingg
konsentrasi akhir menjadi 10% (vol/vol). Goyangkan tabung perlahan-laha
sehingga tercampur rata. Gunakan pipet agar 2 – 5 ml, masukkan masin
masing 1 ml larutan ke dalam ampul 2 ml. Letakkan seluruh ampul dalam
pendingin (5 C) selama 30 menit untuk ekuilibrasi antara sel dan laruta
media.
3.
You're Reading a Preview Pengontrolan tingkat pembekuan
Unlock full access with a free trial.
Letakkan ampul yang telah ditutup dalam kaleng aluminium yang terdap
Download With Free masukkan Trial dalam wadah yang lebih besar. Kemudian wadah tersebut ke dala
tabung freezer pengontrol tingkat pembekuan. Pertahankan tingkat dingin hingga 2
C/menit sampai beberapa derajat dibawah perubahan fase yan
didapat. Titik beku biasanya adalah -30
C. Biasanya nitrogen cair har
ditambahkan ke dalam system, secara manual maupun otomatis, sehingg
mendekati titik beku dan perubahan fase akan segera dicapai. Setelah s Sign up to vote on this title
membeku, atur tingkat dingin lagi hingga1Useful C/menit sampai useful kurang leb Not
mencapai suhu -50 C. pindahkan segera ampul ke dalam ruang penyimpana
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
campurkan dengan cara mengocoknya. 0.1 – 0.2 ml diinokulasikan pada med agar miring. . 4.
Gliserol
Gliserol pada umumnya digunakan sebagai media dalam pengawetan ata
penyimpanan jangka pendek, jangka panjang atau sekedar sebagai media untu
memindahkan mikroorganisme. Sebagai contoh dalam metode pembekua
menggunakan nitrogen, media yang digunakan adalah 10 % (vol/vol) glisero atau 5% (vol/vol) DMSO.
Gliserol dapat digunakan sebagai media karena gliserol dapat melindun
aktivitas antimikroba dengan cara meningkatkan stabilitas struktur protein as
dari mikroba sehingga dapat mencegah protein dari proses termal dan agregas
Selain itu gliserol dapat meningkatkan energi bebas dari kompleks yan
diaktifkan dan mengeser kesetimbangan energo tersebut. Gliserol ini dap
menyerap air pada permukaan protein yang dapat mengakibatkan hidrasi yan You're Reading a Preview dapat melindungi protein dari kerusakan. Oleh karena itu giserol dap Unlock full access with a free trial.
memperpanjang penyimpanan mikroorganisme.
Download With Free Trial
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Upload
Sign In
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
Mikrobiologi Acara 4.pdf
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
BAB III PENUTUP
Kesimpulan
Berdasarkan uraian tentang teknik penyimpan mikroorganisme dap
disimpulkan bahwa, Teknik penyimpanan mikroorganisme dapat dilakuka
melalui empat cara yakni agar slants, glyserol, liofilisasi dan liquid nitrogen. Da
keempat cara tersebut , didapatkan cara yang paling efektif yakni liquid nitroge
karena dalam teknik tersebut menggunakan suhu rendah pada prosesnya sehingg
reaksi biokimia yang menyebabkan kematian pada sel dapat diperlambat da
teknik ini termasuk dalam penyimpanan jangka panjang yakni 100 tahu penyimpanan.
You're Reading a Preview Unlock full access with a free trial.
Download With Free Trial
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join
Search
Home
Saved
1.8K views
0
Sign In
Upload
Join
RELATED TITLES
0
Teknik Penyimpanan Mikroorganisme.fix
Uploaded by Mega Khoiru Nissa
Top Charts
Books
Audiobooks
Save
Embed
Share
Print
1
Download
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Mikrobiologi Acara 4.pdf
of 12
Medium Dan Larutan
laporanpraktikum-tpc
Search document
DAFTAR PUSTAKA
Clark, W. A. 2006. Selected bibliography of literature on preservation o
microorganisms, blood, tissues, and vaccines with emphasis on freezing an
freeze-drying (1968-1976). Atlanta: US Departement of Health Education an Welfare, Center of Disease Control.
Holdings, M. and R.A. Lelliot. 2006. Preservation of some plant viruses b freeze-dry. Plant Pathology 9:63.66. Prescoot, L.M. 2003. Mikrobiology 5 th edition. Mc Graw Hill. New York Rachdie.
2008.
Faktor
yang
Mempengaruhi
Pertumbuhan
Mikrob
http://rachdie.blogsome.com/2006/10/14/faktor-yang-mempengaruhi pertumbuhan-mikroba/. Diakses pada tanggal 17 April 2010
Sly, L.I. 2003. Preservation of microbial culture. In fahy, P.C. and G.J. Persle
( Eds). Plant Bacterial Diseases.A. Diagnostic Guide. Sidney: Academis Press
Sulistinah, N. 2006. Mikroba Pentranformasi Adiponitril di Palembang. Jurn You're Reading a Preview Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia : 1-8 Unlock full access with a free trial.
Suriawiria, U. 2005.Mikrobiologi Dasar. Papas Sianr Sinanti, Jakarta. Download With Free Trial
Sign up to vote on this title
Useful
Not useful
Home
Saved
Top Charts
Books
Audiobooks
Magazines
News
Documents
Sheet Music
Upload
Sign In
Join