63 Kragujevac J. Sci. 33 (2011)63-72. (2011)63-72.
UDC 581,19: 582.929.4: 577.164.3
TOTAL FENOL KONTEN, flavonoid KONSENTRASI DAN AKTIVITAS
Marr ubii um per egri gr i num num L. EKSTRAK ANTIOKSIDAN DARI Marrub Milan S. Stanković
Departemen Biologi Biologi dan Ekologi, Ekologi, Fakultas Sains, Sains, Universitas Kragujevac, Kragujevac, Radoja Radoja Domanovića 12, 12, 34 000 Kragujevac Kragujevac , Republik Serbia Serbia e-mail:
[email protected] [email protected] (Diterima 28 Desember 2010)
ABSTRAK. Dalam studi ini, in vitro aktivitas antioksidan, kandungan total fenol dan konsentrasi flavonoid dari lima ekstrak yang berbeda, dari seluruh ramuan dari Marrubium peregrinum L. (Lamiaceae) ditentukan dengan menggunakan metode spektrofotometri. antioksidan aktivitas ekstrak dinyatakan sebagai persentase DPPH radikal penghambatan danIC50 nilai(ug / ml). Nilai-nilai dalam persentase berkisar 27,26-89,78%. Kandungan fenol Total berkisar 27,26-89,78 mg / g berat kering ekstrak, dinyatakan sebagai setara asam galat. Total konsentrasi flavonoid bervariasi 18,72-54,77 mg / g, dinyatakan sebagai rutin setara. Exstract metanol M. peregrinum peregrinum menunjukkan fenolik tertinggi dan konsentrasi flavonoid dan aktivitas antioksidan yang kuat. Korelasi linear signifikan dikonfirmasi antara nilai-nilai untuk total konten fenolik dan aktivitas antioksidan dari ekstrak tumbuhan. Isi tinggi senyawa fenolik menunjukkan bahwa senyawa ini berkontribusi terhadap aktivitas antioksidan. M.peregrinum antioksidan. M.peregrinum dapat dapat dianggap sebagai kandidat yang menjanjikan untuk sumber tumbuhan alami antioksidan dengan nilai tinggi. Katakunci:Aktivitas kunci:Aktivitas antioksidan, flavonoid, Marrubium flavonoid, Marrubium peregrinum L., peregrinum L., fenol
PENDAHULUAN Horehound, Marrubium peregrinum peregrinum L. (Lamiaceae) merupakan tanaman tahunan dengan batang rectan-gular, bercabang di bagian atas, tinggi hingga 100 cm. Rimpang dari spesies ini ligne-ous, daun lonjong, bunga dikelompokkan dalam perbungaan longgar. Ini mendiami rocky meadows kering dan substrat berpasir gersang di Eropa dan Asia Tengah dan milik elemen floristik Pontic-Mediterania Pontic-Mediterania (J OSIFOVIĆ, 1974). Karena efek farmakologis terkenal mereka, beberapa spesies genus Marrubium Marrubium banyak digunakan dalam pengobatan tradisional dan modern untuk persiapan tonik pahit, pengobatan
gangguan pencernaan, kehilangan nafsu makan dan dispepsia (B LUMENTHAL et al.,2000), mengurangi mengasapi-ing, dan stimulan sistem saraf sebagai. Zat obat dari spesies tanaman darigenus Mar-rubium antinociceptivepameran (D E JESUS et al.,2000), antihipertensi (E L BArdai et al., 2003), antispasmodic (R IGANO et al.,2009), antioedematogenic (S TULZER et al.,2006), analgetic (MEyre-SILVA et al.,2005), insektisida (P Avela,2004), antiinflamasi (S AHPAZ et al,. 2002a), antimikroba (R IGANO et al,2006;. QUAVE et al, WARDA etal,2008;.. 2009),
64 aktivitas terutama antihelicobacter (R AMADAN dan SAFWAT,2009), sitoprotektif (MArtin NIZARD et al.,2003) dan aktivitas antileukemic signifikan (A LKHATIB et al.,2010). Zat aktif spesies dari genus Marrubium adalah bahan pahit labdan-terstruktur (T ELEK et al.,1997), furanat labdan diterpen, marubin (B LUMENTHAL et al.,2000) dan marrubenol (EL BArdai et al.,2003), phenylethanoid glikosida, marruboside, ester phenylpro-PanoId (S AHPAZ et al.,2002b), methoxylated flavon (A LKHATIB et al.,2010), caffeic turunan asam, sterol, dan flavonoid (K HANAVI et al.,2005; LAzari et al.,1999). Dalam M. peregrinum telah terbukti banyak senyawa fenolik dan diterpenoid (HENNEBELLEA et al.,2006), diterpen alkohol peregrinol, diterpen hydroxylactone Peregrin (SALEI et al., 1966), flavon methoxylated, ladanein, eter scutellarein-5,7,4'-trimetil, dan scutellarein-5,6,7,4'-tetrametil eter (ALKHATIB et al.,2010). Dalam penelitian sebelumnya, seskuiterpen hidroka rbon (β-caryophyllene, bicyclogermacrene dan germacree-D) dan oksigen sesqu-terpene (spathulenol dan oksida caryophyllen) telah terbukti dalam minyak esensial dari M. peregri-num senyawa aktif dan aktivitas antioksidan yang baik dari minyak esensial telah menunjukkan (K AURINOVIĆ et .al,2010). Metabolit sekunder dari tanaman memiliki aktivitas biologis dan farmakologis penting, seperti anti-oksidatif, anti-alergi, antibiotik, hipoglikemik, dan anti-karsinogenik (BORNEO et al.,2008; K ATALINIĆ et al.,2004; MULABAGAL dan TKATAKAN,2004). Banyak gangguan dalam organisme manusia seperti aterosklerosis, arthritis, penyakit Alzheimer, kanker dll, mungkin hasil dari peningkatan konsentrasi radikal bebas dalam suatu organisme. Spesies oksigen reaktif (ROS) dan nitrogen (RNS) spesies, sebagai yang paling sering pro-oxi-dants, baik berasal dari metabolisme normal atau diinduksi oleh radiasi UV dan polutan yang berbeda. Efek berbahaya dari gangguan keseimbangan antioksidan-prooksidan dapat sebagian besar pra-vented oleh asupan zat antioksidan (G Hosh et al.,2008; OGNJANOVIĆ et al.,2008).
Antioksidan telah ditemukan dalam bahan tanaman dan suplemen. Karena berasal dari alam mereka, antioksidan yang diperoleh dari tanaman dari manfaat yang lebih besar dibandingkan dengan yang sintetis (R OHMAN et al,2010.; ZHENG dan WANG,2001). Penggunaan antioksidan alami dari tanaman tidak menyebabkan efek samping, sementara antioksidan sintetik ditemukan memiliki efek genotoksik (C HEN et al.,1992; K AHL dan K APPUS,1993). Oleh karena itu, investi-gations aktivitas biologis dan komposisi kimia dari tanaman obat sebagai potensi yang begitu-urce antioksidan alami banyak. Tujuan dasar dari penelitian ini adalah untuk menentukan kandungan phenolic total dan konsentrasi flavonoid dalam berbagai ekstrak dari spesies M. peregrinum menggunakan metode spektrofotometri, serta untuk menguji aktivitas antioksidan dari ekstrak tanaman menggunakan dalamvitro. sistem model
BAHAN DAN METODE
Kimia Aseton, metanol, petroleum eter, etil asetat dan natrium hidrogen karbonat yang
dibeli dari “Zorka farmasi” Sabac, Serbia. Standar asam fenolik (asam galat) dan flavonoid
(rutin hidrat), asam klorogenat dan 2,2-dyphenyl-1-pikrilhidrazil (DPPH) diperoleh dari Sigma Chemicals Co, St Louis, MO, USA. The Folin-Ciocalteu ini fenol reagen, 3-tert-
butyl-4-hydroxyanisole (BHA) dan aluminium klorida (AlCl3) berasal dari Fluka Chemie AG, Buchs, Swiss. Semua pelarut lainnya dan bahan kimia yang kelas analitis.
Bahan tanaman Marrubium peregrinum dikumpulkan pada bulan Juli 2009, dari wilayah Suva Planina Mt. di Serbia timur. Spesimen voucher M.peregrinum dikonfirmasi dan disimpan di Herbarium di Departemen Biologi dan Ekologi, Fakultas Sains, Universitas
65
Kragujevac. Bahan tanaman yang dikumpulkan adalah udara kering dalam kegelapan pada o
suhu kamar (20 C). Bagian tanaman kering dipotong dan disimpan dalam wadah gelap yang ketat-segel sampai dibutuhkan.
Persiapan ekstrak tanaman ekstrak tanaman disiapkan sesuai dengan protokol standar. Bahan tanaman siap (10 g) dipindahkan ke termos berwarna gelap dan dicampur dengan 200 ml pelarut dengan polaritas yang berbeda (air, metanol, etil asetat, aseton, petroleum eter) masing-masing dan disimpan pada suhu kamar. Setelah 24 jam, infus disaring melalui Whatman No 1 kertas saring dan residu kembali diekstraksi dengan volume yang sama dari pelarut. Setelah 48 jam, proses diulang. Supernatan gabungan diuapkan sampai kering di bawah vakum pada 40 o C menggunakan Rotary evaporator. Ekstrak yang diperoleh disimpan dalam tabung sampel o
steril dan disimpan dalam lemari es pada 4 C.
Penentuan isi total fenolik di pabrik ekstrak Konsentrasi fenolat di ekstrak tanaman ditentukan dengan menggunakan metode spektrofotometri (SIngleton et al.,1999). Solusi metanol ekstrak konsentrasi 1 mg / ml digunakan dalam analisis. Campuran reaksi dibuat dengan mencampurkan 0,5 ml larutan metanol ekstrak, 2,5 ml reagen 10% Folin-Ciocalteu ini dilarutkan dalam air dan 2,5 ml 7,5% NaHCO3.Kosong itu bersamaandisiapkan, yang mengandung 0,5 ml metanol, reagen 2,5 ml 10% Folin-Ciocalteu ini dilarutkan dalam air dan 2,5 ml 7,5% dari NaHCO3.Sampel o kemudian diinkubasi dalam termostat pada 45 C selama 45 menit. Absorbansi ditentukan dengan menggunakan spektrofotomet er pada λ max = 765 nm. Sampel yang telah disiapkan dalam rangkap tiga untuk masing-masing analisis dan nilai rata-rata absorbansi diperoleh. Prosedur yang sama diulangi untuk solusi standar asam galat dan garis kalibrasi ditafsirkan. Berdasarkan absorbansi diukur, konsentrasi fenolat dibacakan (mg / ml) dari garis kalibrasi; kemudian isi fenolat dalam ekstrak itu dinyatakan dalam ekuivalen asam galat (mg GA / g ekstrak).
Penentuan konsentrasi flavonoid dalam tanaman ekstrak Kandungan flavonoid dalam ekstrak tanaman diperiksa ditentukan dengan metode spektrofotometri (QUETTIER et al.,2000). Sampel mengandung 1 ml larutan metanol ekstrak dalam konsentrasi 1 mg / ml dan 1 ml dari 2% AlCl3 solusi dilarutkan dalam metanol. Sampel diinkubasi selama satu jam pada suhu kamar. Absorbansi ditentukan dengan menggunakan spektrofotometer pada λ max = 415 nm. Sampel yang telah disiapkan dalam rangkap tiga untuk masing-masing analisis dan nilai rata-rata absorbansi diperoleh. Prosedur yang sama diulangi untuk solusi standar rutin dan garis kalibrasi ditafsirkan. Berdasarkan absorbansi diukur, konsentrasi flavonoid dibacakan (mg / ml) pada baris kalibrasi; kemudian, kandungan flavonoid dalam ekstrak dinyatakan dalam hal rutin yang setara (mg RU / g ekstrak).
E valuasi aktivitas antioksi dan Kemampuan ekstrak tanaman untuk mengais DPPH radikal bebas dinilai dengan metode standar (Tekao et al., 1994), diadopsi dengan modifikasi yang sesuai (K UMARASAMY et al.,2007). Larutan stok ekstrak disiapkan dalam metanol untuk mencapai konsentrasi 1 mg / ml. Pengenceran dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi 500, 250, 125, 62,5, 31,25,
15,62, 7,81, 3,90, 1,99 dan 0,97 mg / ml. Solusi diencerkan (1 ml masing-masing) dicampur dengan 1 ml larutan metanol DPPH konsentrasi 1 mg / ml. Setelah 30 menit inkubasi dalam o kegelapan pada suhu kamar (23 C), absorbansi tercatat sebesar 517 nm. Kontrol sederhana berisi semua reagen kecuali ekstrak. Penghambatan persentase dihitung dengan menggunakan persamaan 1, sementara IC50 nilaidiperkirakan dari penghambatan% dibandingkan petak konsentrasi, menggunakan algoritma regresi non-linear. Data disajikan sebagai nilai mean ± standar deviasi (n = 3).
66 A kontrol - Sebuah sampel% penghambatan =
X 100
(1) kontrol
analisis statistik Semua pengukuran eksperimental dilakukan dalam rangkap tiga dan dinyatakan sebagai rata-rata tiga analisis ± standar deviasi. Besarnya korelasi antara variabel dilakukan dengan menggunakan SPSS (Chicago, IL) paket software statistik (SPSS untuk Windows, ver. XII, 2004).
HASIL DAN PEMBAHASAN encer, metanol, etil asetat, aseton dan minyak bumi ekstrak eter siap untuk meneliti kandungan phenolic total, konsentrasi flavonoid dan aktivitas antioksidan. Hasil ekstrak yang diperoleh dari 10 g bahan tanaman kering diukur untuk masing-masing ekstrak (Tabel 1). Hasil tertinggi residu padat diperoleh dengan menggunakan air atau metanol sebagai pelarut ekstraksi. Tabel 1. - The hasil residu padat setelah ekstraksi dan penguapan dari 10 g bagian tanaman kering
ekstrak Methanol Water Etil asetat Aseton Petroleum ether 1
hasil (g) 1,98 ± 0,082 1
1,54 ± 0,094 0,49 ± 0,021 0,32 ± 0,047 0,15 ± 0.014
Setiap nilai adalah rata-rata tiga pengukuran ± standar deviasi.
Isi total fenolik di pabrik diperiksa ekstrak menggunakan reagen Folin-Ciocalteu ini 2 dinyatakan dalam ekuivalen asam galat (persamaan kurva standar: y = 7.026x - 0,0191, r = 0,999). Nilai yang diperoleh untuk konsentrasi total fenol dinyatakan sebagai mg GA / g ekstrak (Tabel 2). Isi total fenolik dalam ekstrak diperiksa berkisar 27,44-49,27 mg GA / g. Konsentrasi tertinggi fenol diukur dalam metanol, aseton dan air ekstrak. Etil asetat dan minyak bumi ekstrak eter mengandung concentrati-on jauh lebih kecil dari fenol. Isi total fenolik dalam ekstrak tanaman dari spesies M. peregrinum de-pends pada jenis ekstrak, yaitu polaritas pelarut yang digunakan dalam ekstraksi. Kelarutan tinggi fenol dalam pelarut polar menyediakan konsentrasi tinggi senyawa ini dalam ekstrak yang diperoleh dengan menggunakan pelarut polar untuk ekstraksi (M OHSEN dan AMMAR,2008; ZHOU dan YU,2004). Tabel 2. - Jumlah isi fenolik dalam ekstrak tanaman dinyatakan dalam ekuivalen asam galat (mg GA / g ekstrak)
ekstrak
metanol Air Etil asetat Acetone Petroleum ether 1
mg GA / g ekstrak 49,27 ± 0,815 1
46,78 ± 0,258 33,51 ± 0,616 48,72 ± 0,407 27,44 ± 0,556
Setiap nilai adalah rata-rata tiga analisis ± standar deviasi.
67 Konsentrasi flavonoid dalam berbagai ekstrak tanaman dari spesies M. peregrinum ditentukan dengan menggunakan metode spektrofotometri dengan aluminium klorida. Isi dari fla-vonoids diungkapkan dalam hal rutin yang setara (persamaan kurva standar: y = 17.231x 2
- 0,0591, r = 0,999), mg RU / g ekstrak (Tabel 3). Konsentrasi flavonoid dalam ekstrak tanaman dari M. peregrinum berkisar 18,72-54,77 mg / g. Metanolic, aseton dan ekstrak etil asetat mengandung flavonoid konsentrasi tertinggi. Konsentrasi flavonoid dalam ekstrak metanol adalah 54,77 mg RU / g, yang sangat mirip dengan nilai konsentrasi ekstrak aseton. Konsentrasi flavonoid terendah diukur dalam petroleum eter dan ekstrak air. Konsentrasi flavonoid dalam ekstrak tanaman tergantung pada polaritas pelarut yang digunakan dalam penyusunan ekstrak (MIN dan CHUNZHAO,2005). Tabel 3. - Konsentrasi flavonoid dalam ekstrak tanaman dinyatakan dalam rutin setara (mg RU / g ekstrak) ekstrak
metanol Air Etil asetat Aseton Petroleum ether 1
mg RU / g ekstrak 54,77 ± 0,5981
18,72 ± 0,417 51,33 ± 0,793 53,47 ± 0.940 22,92 ± 0.386
Setiap nilai adalah rata-rata tiga analisis ± standar deviasi.
Aktivitas antioksidan dari tanaman yang berbeda ekstrak dari M. peregrinum itu determined menggunakan larutan metanol DPPH reagen. DPPH sangat stabil radikal bebas. Tidak seperti di vitro dihasilkan radikal bebas seperti radikal hidroksil dan superoksida anion, DPPH memiliki keuntungan menjadi terpengaruh oleh reaksi samping tertentu, seperti khelasi ion logam dan enzy-me penghambatan. Sebuah solusi DPPH baru disiapkan menunjukkan warna ungu dengan ab-serapan maksimum pada 517 nm. Warna ungu ini umumnya memudar ketika molekul antioksidan radikal bebas DPPH (yaitu dengan memberikan atom hidrogen atau dengan donasi elektron, conce-ivably melalui serangan radikal bebas pada molekul DPPH) dan mengubahnya menjadi sebuah colourless- / produk yang diputihkan (yaitu 2 , 2-difenil-1hidrazin, atau hidrazin analog diganti), resul-ting dalam penurunan absorbansi pada pita 517 nm (AMAROWICZ et al.,2003).
Aktivitas antioksidan dari lima ekstrak yang berbeda dari spesies M. peregrinum dinyatakan dalam persentase inhibisi (%) dan IC50 nilai(ug / ml) (Gbr. 1). Sejajar dengan pemeriksaan aktivitas antioksidan dari ekstrak tanaman, nilai-nilai untuk dua standar com pound diperoleh dan dibandingkan dengan nilai-nilai aktivitas antioksidan. Zat standar yang BHA dan asam klorogenat. Pemeriksaan kegiatan antioksidan dari ekstrak tanaman dari M. peregrinum nilai yang berbedasho-wed. Nilai-nilai yang diperoleh bervariasi dari 27,26% menjadi 89,78%. Terbesar capaci-ty untuk menetralisir radikal DPPH ditemukan untuk ekstrak metanol, yang dinetralkan 50% dari radikal bebas pada konsentrasi 187,41 ug / ml. Sebuah aktivitas moderat ditemukan untuk aseton, air dan etil asetat ekstrak. Kapasitas terkecil untuk menghambat DPPH radikal itu menghalangi-ditambang untuk minyak ekstrak eter. Karena
rendahnya aktivitas ekstrak petroleum eter, IC 50 tidak dihitung untuk itu. Dibandingkan denganIC50 nilaidari BHA dan asam chlorogenic, metanol mantan saluran dari M. peregrinum diwujudkan kapasitas terkuat untuk netralisasi DPPH radi-cals. Ekstraksi zat antioksidan struktur kimia yang berbeda, dicapai dengan menggunakan pelarut dari polaritas yang berbeda. Banyak penyelidikan komposisi kualitatif ekstrak tumbuhan mengungkapkan adanya konsentrasi tinggi dari fenol dalam ekstrak yang diperoleh
68 menggunakan pelarut polar (c ANADANOVIĆ -BRunet et al.,2008). Ekstrak yang melakukan aktivitas antioksidan tertinggi (Gambar 1) memiliki konsentrasi tertinggi fenol (Tabel 2). Fenol adalah konstituen tanaman sangat penting karena kemampuan pemulungan mereka pada bebas radhiyallahu-cals karena kelompok hidroksil mereka. Oleh karena itu, isi fenolik tanaman dapat berkontribusi di-rectly tindakan antioksidan mereka (T Osun et al.,2009). Sebuah korelasi linear signifikan yang ditemukan antara nilai-nilai untuk konsentrasi senyawa fenolik (Tabel 2) dan aktivitas antioksidan dari ekstrak dari M. peregrinum.Antara nilai-nilai untuk konsentrasi senyawa fenolik (Tabel 2) dan aktivitas antioksidan dari ekstrak tanaman yang berbeda dari M. peregrinum telah terbukti korelasi linear yang signifikan (Gambar 2). Banyak investigati-ons dari aktivitas antioksidan dari ekstrak tumbuhan telah mengkonfirmasi linear tinggi korelasi taruhan-Ween nilai-nilai konsentrasi fenol dan aktivitas antioksidan (B ORNEO et al.,2008; K ATALINIĆ et al.,2004).
Gambar 1. - Antioksidan (DPPH scavenging) aktivitas ekstrak tumbuhan diselidiki disajikan sebagai persentase DPPH radikal penghambatan dan IC50 nilai(ug / ml).
Flavonoid adalah kelas metabolit tanaman sekunder dengan antioksidan dan kelat properti yang signifikan. Aktivitas antioksidan flavonoid tergantung pada struktur dan substitusi pola kelompok hidroksil (S HARIFIFAR et al.,2008). Metanol dan aseton ekstrak dari M. peregrinum memiliki konsentrasi tinggi total fenol (Tabel 2) dan flavonoid (Tabel 3), yang dalam korelasi dengan aktivitas antioksidan yang intens ekstrak (Gambar 1).
69
100
y = 2.4538x - 34,083 R2 = 0,9382
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0
10
20
30
40
50
konsentrasi fenol aktivitas antioksidan
Gambar 2. - korelasi linier antara jumlah total fenol dan aktivitas antioksidan. Korelasi koefisien r = 0,969, koefisien determinasi (R 2)= 0,9382. Korelasi adalah signifikan pada tingkat 0,01 (2-tailed).
KESIMPULAN Hasil penelitian kami menunjukkan nilai yang besar dari spesies M. peregrinum untuk digunakan dalam farmasi dan Phytotherapy. Berdasarkan informasi ini, dapat disimpulkan bahwa tanaman ini sumber alami zat antioksidan penting tinggi.
60
Hal ini melihat bahwa konsentrasi tertinggi senyawa fenolik dalam ekstrak diperoleh dengan menggunakan pelarut dari polaritas yang tinggi; ekstrak metanol terwujud kekuatan yang lebih besar dari ekstraksi senyawa fenolik dari M. peregrinum. Isi tinggi senyawa fenolik dan korelasi linier yang signifikan antara nilai konsentrasi senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan menunjukkan bahwa senyawa ini memberikan kontribusi pada aktivitas antioksidan yang kuat. Penelitian lebih lanjut dari spesies tanaman ini harus diarahkan untuk melaksanakan in vivokomponen aktif obat untuk menyiapkan produk farmasi alami bernilai tinggi. Ucapan Terima Kasih
Penelitian ini didukung oleh “Promosi proyek dan mempopulerkan perlindungan alam aktif dalam pusat Serbia '' dan memberikan III41010 dari Departemen Ilmu dan Pengembangan Teknologi Republik Serbia.
Referensi: [1] SebuahLKHATIB,R., JOHA,S., CHeok,M., R OUMY,V., sayaDZIOREK,T., PREUDHOMME, C., QUESNEL,B., SAHPAZ, S., BAILLEUL,F., HENNEBELLE,T. (2010): Kegiatan ladanein pada baris sel leukemia dan kejadiannya di Marrubium vulgare. PlantaMed. 76,86-87.
70 [2] AMAROWICZ,R., PTELUR,BR, R AHIMI-MOGHADDAM, P., BAR,B., WEIL,JA (2003): Kapasitas pemulungan radikal bebas dan aktivitas antioksidan dari spesies tanaman yang dipilih dari Kanada padangrumput.MakananChem. 84,551-562. [3] BLUMENTHAL, M., GOLDBERG, A., BRINCKMANN, J. (2000): Herbal Medicine.Diperluas E Monographs Komisi. Amerika Botanical Council. Integrative Medicine Komunikasi, Newton, MA. [4] BORNEO,R., LEΌN,EA, AGUIRRE, A., R IBOTTA,P., CAntero,JJ (2008): Kapasitas Antioksidan tanaman obat dari Provinsi Cordoba (Argentina) dan di mereka vitro pengujian di sistem model makanan. MakananChem. 112,664-670. [5] CANADANOVIĆ -BRunet,J., CETKOVIĆ,G., ĐILAS,S., TUmbas,V., BOGDANOVIĆ, G., MANDIĆ, A., MARKOV,S., CVETKOVIĆ,D. , CANADANOVIĆ, V. (2008): pemulungan radikal, antibakteri, dan kegiatan antiproliferatif ekstrak Melissa officinalis L.. J. Med. Makanan 11,133-143. [6] CHEN,C., PEARSON,MA, GRAY,IJ (1992): Pengaruh antioksidan sintetik (BHA, BHT dan PG) pada mutagenisitas senyawa IQ-seperti. MakananChem. 43,177-183. [7] DE JESUS,RA, CECHINEL-FIlho,V., OLIVEIRA, AE, SCHLEMPER, V. (2000): Analisis sifat antinociceptive dari marrubiin diisolasi dari Marrubiumvulgare. Phytomedicine 7,111115. [8] DIKLIĆ, N. (1974): Marrubium, Dalam: Flora Republik Serbia.Josifović M (eds.), Acad. Serbia. Sci. & Seni, Belgrade (Serbia), 6,366-371. [9] EL BArdai,S., LYOUSSI,B., WIBO,M., MOrel, N. (2004): Studi perbandingan aktivitas antihipertensi dari Marrubium vulgare dan dari dihidropiridin antagonis kalsium amlodipine pada tikus hipertensi spontan. Clin. Exp.Hypertens. 26,465-474. [10]GHosh,T., MAITY,KT, SENGUPTA, P., DASH,KD, BOSE,A. (2008): antidiabetes dan in vivo aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol Bacopa monnieri Linn. bagian udara: mekanisme kemungkinanaksi.Iran J.Pharm.Res. 7,61-68. [11]HENNEBELLEA, T., SAHPAZ,S., SKALTSOUNISB, AL, BAILLEULA, F. (2007): senyawa fenolik dan diterpenoid dari Marrubium peregrinum. Bioch. Syst.Ecol. 35,624-626. [12] K AURINOVIĆ, B., VLAISAVLJEVIĆ,S., POPOVIĆ, M., VASTAG,D., BRENSEL,DM (2010): sifat antioksidan Marrubium peregrinum L. (Lamiaceae) Minyak atsiri. Molekul 15,5943-5955. [13] K AHL,R., K APPUS,H. (1993): Toksikologi dari antioksidan sintetik BHT BHA dan dibandingkan dengan vitamin antioksidan alami E. Z. Lebensm. Unters.Forsch. 196,329-338.
[14] K ATALINIĆ, V., MILOs,M., K ULIŠIĆ,T., JUKIĆ,M. (2004): Pemutaran 70 tanaman obat ekstrak untuk kapasitas antioksidan dan jumlah fenol. Makanan Chem. 94,550-557. [15] K HANAVI,M., GHASEMIAN, L., MOTLAGH,EH, HADJIAKHOONDI, A., SHAFIEE,A. (2005): Komposisi kimia dari minyak esensial dari Marrubium parviflorum Fisch. & CA Mey. dan Marrubium vulgare L. dari Iran. Rasa FragranceJ. 20,324-326.
[16] K UMARASAMY,Y., BYRES,M., COX,PJ, JASAPARS,M., NAhar,L., SARKER,SD (2007): Skrining benih beberapa tanaman Skotlandia untuk kegiatan pemulungan radikalbebas. Phytother.Res. 21,615-621.
71
[17] LAzari,DM, SKALTSA,HD, CONSTANTINIDIS, T. (1999): Minyak atsiri dari Marrubium velutinum Sm. dan Marrubium peregrinum L., tumbuh liar diYunani.Rasa FragranceJ. 14,290-292. [18] MArtin NIZARD,F., SAHPAZ,S., FUrman,C., FRUCHART,JC, DURIEZ,P., BAILLEUL, F. (2003): phenylpropanoids Alam melindungi sel endotel terhadap LDL teroksidasi diinduksi sitotoksisitas. PlantaMed. 69,207-211. [19] MEyre-SILVA,C., YUNES,RA, SCHLEMPER,V., CAMPOS-BUzi,F., CECHINEL,V. (2005): Potensi Analgesik derivatif marrubiin, sebuah diterpen bioaktif hadir dalam Marrubium vulgare (Lamiaceae). Il Farmaco. 60,321-326. [20] MIN,G., CHUNZHAO,L. (2005): Perbandingan teknik untuk ekstraksi flavonoid dari sel berbudaya saussurea medusa Maxim. Dunia J. MicroB.Biot. 21,1461-1463. [21] MOHSEN,MS, AMMAR,SMA (2008): Total isi fenolik dan aktivitas antioksidan dari ekstrak jagung rumbai. MakananChem. 112,595-598. [22] MULABAGAL,V., TSAY,H. (2004): Budaya Plant Cell - sebuah alternatif dan sumber yang efisien untuk produksi metabolit sekunder biologis Penting. Int. J. Appl. Sci. Eng. Tech. 2,29-48. [23] OGNJANOVIĆ, BI, MARKOVIĆ, SD, PAVLOVIĆ,SZ, ŽIKIĆ,RV, ŠTAJN,A.ş., SAIČIĆ,ZS (2008): Efek kadmium kronis pada sistem pertahanan antioksidan dalam beberapa jaringan tikus: efek perlindungan dari selenium. Physiol.Res. 57,403-411.
[24] PAvela,R. (2004): Kegiatan insektisida dari tanaman obat tertentu. Fitoterapia 75,745749. [25] QUAVE,C., PLANO,L., PANTUSO,T., BENNETT, B. (2008): Pengaruh ekstrak dari tanaman obat Italia pada pertumbuhan plankton, pembentukan biofilm dan kepatuhan dari methicillin-resistant Staphylococcus aureus. J.Ethnopharmacol. 118,418-428. [26] QUETTIER, DC, GRESSIER,B., VASSEUR,J., DINE,T., BRunet,C., LUYCKX,MC, CAYIN,JC, BAILLEUL, F., TRotin, F. (2000): senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dari soba(Fagopyrumesculentum Moench) lambung dan tepung. J. Ethnopharmacol. 72,3542. [27] R AMADAN,M., SAFWAT, N. (2009): Antihelicobacter Kegiatan dari Senyawa Flavonoid Terisolasi dari Desmostachya bipinnata. Aust. J. Dasar. Aplikasi.Sci. 3,2270-2277.
[28] R IGANO,D., FORMISANO,C., BAsile,A., LAVITOLA, A., SENATORE, F., R OSSELLI, S., BRuno,M. (2006): Aktivitas antibakteri flavonoid dan phenylpropanoids dari Marrubium globosum ssp.libanoticum. Phytother.Res. 21,395 - 397.
[29] R IGANO,D., AVIELLO, G., BRuno,M., FORMISANO,C., R OSSELLI, S., CAPASSO,R., SENATORE, F., sayaZZO, A, A, B(2009):.ORRELLI, F. Efek Antispasmodic dan StrukturAktivitas Hubungan dari labdan diterpenoid dari Marrubium globosum ssp. libanoticum. J. Nat.Prod. 72,1477-1481. [30] R OHMAN,A., R IYANTO,S., YUNIARTI, N., SAPUTRA,WR, UTAMI,R. (2010): Aktivitas antioksidan total fenolik, dan jumlah flavaonoid dari ekstrak dan fraksi buah merah(Pandanusconoideus Lam). Int. Makanan Res. J. 17,97-106. [31] SAHPAZ,S., GARBACKI, N., TITS,M., BAILLEUL, F. (2002a): Isolasi dan aktivitas farmakologi dari ester fenilpropanoid dari Marrubiumvulgare. J. Ethnopharmacol. 79,389-392.
72 [32] SAHPAZ,S., HENNEBELLAE, T., BAILLEUL,F. (2002b): Marruboside, glikosida phenylethanoid baru dari Marrubium vulgare L. Nat. Melecut.Lett. 16,195-199. [33] SALEI,LA, POPA,DP, LAZUR'EVSKII,GV (1966): diterpenoid dari Marrubium peregrinum. Khim. Prir.Soedin. 2,249-251. [34] SHARIFIFAR,F., Nudeh-DEHGHN, G., MIRTAJALDINI, M. (2008): flavonoid Mayor dengan aktivitas antioksidan dari Teucrium polium L. Food Chem. 112,885-888. [35] SIngleton, VL, ORTHOFER,R., LAMUELA-R AVENTOS, RM (1999): Analisis total fenol dan substrat oksidasi lain dan antioksidan dengan cara Folin-Ciocalteu reagen. MetodeEnzymol. 299,152-178. [36] STULZER, H., TAGLIARI,M., ZAMPIROLO, J., CECHINEL-FIlho,V., SCHLEMPER, V. (2006): efek Antioedematogenic dari marrubiin diperoleh dari Marrubiumvulgare.J. Ethnopharmacol. 108,379-384. [37] TEKAO,T., WATANABE, N., YAGI,I., SAkata,K. (1994): Sebuah metode skrining sederhana untuk antioksidan dan isolasi beberapa antioksidan yang dihasilkan oleh bakteri laut dari ikan dan kerang. Biosci. Biotechnol.Biochem. 58,1780-1783. [38] TELEK,E., Tlembaga lainnya,L., BOTZ,L., MAthe,I. (1997): tes kimia dengan Marrubium. spesies Data resmi pada Marubii herba di Farmakope HungaricaVII.Acta Pharm. Hung. 67,31-37. [39] TOsun,M., ERCISLI, S., SENGUL, M., OZER,H., POlat,T. (2009): sifat antioksidan dan kandungan total fenol dari delapan Salvia spesiesdari Turki. Biol.Res. 41,175-181.
[40] WARDA,K., MARKOUK,M., BEKKOUCHE,K., LARHSINI,M., ABBAD,A., R OMANE,A., BOUSKRAOUI, M. (2009): Evaluasi antibakteri dari Maroko yang dipilih tanaman obat terhadap Streptococcus pneumonie. Afr. J. Pharm. danPharmacol. 3,101-104. [41] ZHENG,W., WANG,YS (2001): Kegiatan Antioksidan dan fenolik Senyawa dalam Herbal Dipilih.J. Agric. MakananChem. 49,5165-5170. [42] ZHOU,K., YU,L. (2004): Pengaruh ekstraksi pelarut pada dedak gandum aktivitas antioksidanestimasi.LWT. 37,717-721.