Proposal Paling Bener

M i nimum nimum I nhi nhi bi tor y C once ncentr ntr ati on) EKSTRAK KULIT UJI MIC ( Mi ur i o zi zi bethinus hi nusM.) BUAH DURIAN RAJA GALUH ( D uri lebsie ella pneumo neumoniae ni ae TERHADAP BAKTERI K lebsi M i nimum nimum I nhi nhi bi tor y Co Conc nce entr ntr ati on) TEST OF DURIAN MIC ( Mi ur i o zi zi bethinus hi nus M.) RAJA GALUH FRUIT RIND EXTRACT ( D uri lebsie ella lla pneumo pneumoni niae ae BACTERIA. AGAINST K lebsi

LAPORAN HASIL PENELITIAN A kad demi c Wri ting pada Program Diajukan sebagai syarat kelulusan blok Aka Studi Akademik Pendidikan Dokter

Oleh: Mutiara Taslimah 114170044

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SWADAYA GUNUNG JATI CIREBON 2018

i

LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN HASIL PENELITIAN

M i nimum nimum I nhi nhi bi tor y C once ncentr ntr ati on) EKSTRAK KULIT UJI MIC ( Mi ur i o zi zi bethinus hi nus M.) BUAH DURIAN RAJA GALUH ( D uri lebsie ella lla pneumo pneumoni niae ae TERHADAP BAKTERI K lebsi M i nimum nimum I nhi nhi bi tor y Co Conc nce entr ntr ati on) TEST OF DURIAN MIC ( Mi ur i o zi zi bethinus hi nus M.) RAJA GALUH FRUIT RIND EXTRACT ( D uri lebsie ella lla pneumo pneumoni niae ae BACTERIA. AGAINST K lebsi Disusun oleh: Mutiara Taslimah 114170044

Telah disetujui:

Cirebon,

Mei 2018

Pembimbing I

Amanah, S.Si, M.Si.Med

Pembimbing II

Tiar Masykuroh P., dr., MM.,M.Biomed MM.,M.Biomed

ii

PERNYATAAN KEASLIAN PENELITIAN

Yang bertanda tangan di bawah ini, Nama

: Mutiara Taslimah

NIM

: 114170044

Alamat

: JL. H.R. Rasuna said No.08 RT.02/002 kelurahan pakojan kecamatan pinang Kota Tangerang

Dengan ini menyatakan bahwa, 1. Karya tulis ilmiah saya ini, adalah asli dan belum pernah diajukan untuk mendapatkan gelar akademik (sarjana), baik di Unswagati maupun di perguruan tinggi lain. 2. Karya tulis ilmiah (KTI) ini adalah murni gagasan, rumusan, dan penelitian saya sendiri, tanpa bantuan pihak lain, kecuali arahan Pembimbing. 3. Dalam KTI ini tidak terdapat karya atau pendapat yang telah ditulis atau dipublikasikan orang lain, kecuali secara tertulis dengan jelas dicantumkan sebagai acuan dalam naskah dengan disebutkan nama pengarang dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka. 4. Pernyataan ini saya buat dengan sesungguhnya dan apabila di kemudian hari terdapat penyimpangan dan ketidakbenaran dalam pernyataan ini, maka saya bersedia menerima sanksi akademik berupa pencabutan gelar yang telah diperoleh karena karya ini, serta sanksi lainnya sesuai dengan norma yang berlaku di Unswagati.

Cirebon,

Mei 2018

(Mutiara Taslimah) NPM. 114170044 114170044

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur saya panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-Nya saya dapat menyelesaikan proposal yang berjudul “Uji MIC ( Minimum inhibitory concentration) Ekstrak Kulit Buah Durian Raja Galuh ( Durio zibethinus M.) terhadap Bakteri Klebsiella pneumoniae“. Penulisan laporan hasil penelitian ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk kelulusan blok Academic Writing di Fakultas Kedokeran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon. Saya menyadari sangatlah sulit bagi saya untuk menyelesaikan proposal ini tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak serta penyusunan sampai dengan terselesaikannya proposal pengajuan penelitian ini. Bersama ini saya menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya serta penghargaan yang setinggi-tingginya kepada :

1. Rektor Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon Dr. Mukarto Siswoyo, Drs., M.Si yang telah memberi kesempatan kepada saya untuk menimba ilmu di Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon

2. Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon Catur Setiya, dr., M.Med.Ed. yang telah memberikan sarana dan prasarana kepada saya sehingga saya dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik dan lancar. 3. Amanah, S.Si.M.Si.Med selaku dosen Pembimbing 1 yang telah menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing saya dalam penyusunan proposal ini. 4. dr. Tiar Masykuroh Pratamawati, MM., M.Biomed selaku dosen Pembimbing 2 yang telah menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing saya dalam penyusunan proposal ini. 5. Para penguji yang telah menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk menguji saya dalam penyusunan skripsi ini 6. H. Tamrin dan Hj. Juju sebagai orang tua yang senantiasa memberikan dukungan moral maupun material.

iv

7. Para sahabat yang selalu memberi dukungan dalam menyelesaikan proposal ini. 8. Serta pihak lain yang tidak mungkin saya sebutkan satu-persatu atas bantuannya secara langsung maupun tidak langsung sehingga proposal ini dapat terselesaikan dengan baik.

Cirebon,

Mei 2018 Penulis

v

DAFTAR ISI

Halaman HALAMAN JUDUL ............................................................................................. i LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN HASIL PENELITIAN ...................... ii PERNYATAAN KEASLIAN PENELITIAN .................................................... iii KATA PENGANTAR .......................................................................................... iv DAFTAR ISI ......................................................................................................... vi DAFTAR TABEL ................................................................................................ ix DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. x DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................... xi ABSTRAK ........................................................................................................... xii

ABSTRAC T ......................................................................................................... xiii BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................................ 1 1.2 Permasalahan Penelitian .............................................................................. 2 1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................................... 2 1.3.1 Tujuan Umum ................................................................................................... 2 1.3.2 Tujuan Khusus .................................................................................................. 3

1.4 Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3 1.4.1 Manfaat untuk ilmu pengetahuan...................................................................... 3 1.4.2 Manfaat untuk pelayanan kesehatan ................................................................. 3 1.4.3 Manfaat untuk masyarakat ................................................................................ 3 1.4.4 Manfaat untuk penelitian .................................................................................. 3

1.5 Orisinalitas Penelitian yang Terkait ............................................................ 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA........................................................................... 8

2.1 Landasan Teori ............................................................................................ 8 2.1.1 Pneumonia......................................................................................................... 8

vi

2.1.1.1 Definisi ..................................... ........................................................... ................... 8 2.1.1.2 Klasifikasi ........................................................................ ....................................... 8 2.1.1.3 Etiologi ..................................... ........................................................... ................... 9 2.1.1.4 Patofisiologi ............................................................................... ........................... 10 2.1.1.5 Gejala Klinis ................................................. ........................................................ 12

2.1.2 Klebsiella Pneumoniae.................................................................................... 13 2.1.2.1 Morfologi ................................................................................... ........................... 13 2.1.2.2 Patogenitas ........................................................................................... ................. 14

2.1.3 Buah Durian .................................................................................................... 16 2.1.3.1 Definisi ..................................... ........................................................... ................. 16 2.1.3.2 Komposisi ........................................................................ ..................................... 17 2.1.3.3 Manfaat ...................................................................................... ........................... 17

2.2 Kerangka Teori ............................................................................................ 18 2.3 Kerangka Konsep ........................................................................................ 19 2.4 Hipotesis ...................................................................................................... 19 BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 20

3.1 Ruang Lingkup Penelitian (keilmuan) ........................................................ 20 3.2 Tempat dan Waktu penelitian ..................................................................... 20 3.3 Jenis dan Rancangan penelitian................................................................... 20 3.4 Populasi dan Sampel ................................................................................... 20 3.4.1 Populasi Penelitian.......................................................................................... 20 3.4.2 Sampel Penelitian............................................................................................ 20 3.4.2.1 Kriteria Inklusi ....................................................... ............................................... 20 3.4.2.2 Kriteria Eksklusi ......................... ....................................................... ................... 21

3.4.3 Cara Sampling................................................................................................. 21 3.4.4 Besar Sampel .................................................................................................. 23

3.5 Variabel Penelitian ...................................................................................... 23 3.5.1 Variabel bebas ( Independent ) ......................................................................... 23 3.5.2 Variabel terikat ( Dependent ) ........................................................................... 23

3.6 Definisi Operasional .................................................................................... 23 3.7 Cara Pengumpulan Data .............................................................................. 24 3.7.1 Bahan dan alat ................................................................................................. 24 3.7.2 Prosedur penelitian.......................................................................................... 24 3.7.2.1 Pembuatan Simplisia ........................................................ ..................................... 24

vii

3.7.2.2 Ekstrak Kulit Buah Durian .................................................................................... 25 3.7.2.3 Sterilisasi Alat ........................................................ ............................................... 25 3.7.2.4 Pembuatan Media.......................................... ........................................................ 25 3.7.2.5 Pembuatan Suspensi McFarland 0,5 .......................................... ........................... 25 3.7.2.6 Pembuatan Suspensi Klebsiella pneumoniae .............................................. .......... 26 3.7.2.7 Pengenceran Konsentrasi Ekstrak Kulit Durian .................................................... 26 3.7.2.8 Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (MIC) ................................................ 27

3.8 Alur Penelitian ............................................................................................ 28 3.9 Analisis Data .............................................................................................. 29 3.10 Etika Penelitian ......................................................................................... 29 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 30

4.1 Hasil Penelitian ........................................................................................... 30 4.1.1 Hasil isolasi dan identifikasi bakteri uji ( Klebsiella pneumoniae) .................. 30 4.1.1.1 Identifikasi secara makroskopis ............................................................................ 30 4.1.1.2 Identifikasi secara mikroskopis .................................................. ........................... 31

4.1.2 Pengaruh Pemberian Ekstrak Kulit Buah Durian Raja Galuh (Durio zibethinus Murr. ) terhadap Bakteri Klebsiella Pneumoniae. ........................................... 31 4.1.3 Identifikasi Gram ............................................................................................ 34

4.2 Pembahasan ................................................................................................. 35 4.2.1 Keterbatasan.................................................................................................... 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 38

5.1 Kesimpulan.................................................................................................. 38 5.2 Saran ............................................................................................................ 38 DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 39 LAMPIRAN......................................................................................................... 43

viii

DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 1. Orisinalitas penelitian ........................................................................................ 3 Tabel 2. Kandungan Gizi Buah Durian Per 100gr....................................................... 17 Tabel 3. Kelompok uji .................................................................................................... 21 Tabel 4. Definisi operasional .......................................................................................... 23 Tabel 6. Hasil pengamatan ekstrak kulit buah durian terhadap bakteri Klebsiella

pneumoniae dalam media Mueller Hinton:.......................................................... 32 Tabel 7. Hasil identifikasi Gram secara mikroskopis .................................................. 34

ix

DAFTAR GAMBAR

Halaman Gambar 1. Morfologi Klebsiella Pneumoniae. .............................................................. 14 Gambar 2. Buah durian. ................................................................................................ 16 Gambar 3. Kerangka Teori ............................................................................................ 18 Gambar 4. Kerangka Konsep ........................................................................................ 19 Gambar 5. Alur penelitian ............................................................................................. 28 Gambar 6. Hasil reidentifikasi makroskopis Klebsiella pneumoniae (Dokumentasi pribadi). ................................................................................................................... 30 Gambar 7. Hasil reidentifikasi mikroskopis bakteri

K lebsiella pneumoniae

(Dokumentasi pribadi). .......................................................................................... 31

x

DAFTAR SINGKATAN

CAP

:Community Acquired Pneumonia

GCSF

:Granulocyte Colony Stimulating Factor

IL

: Interleukin

LED

: Laju Endap Darah

MIC

: Minimum Inhibitory Concentration

NB

: Nutrient Broth

TNF

:Tumor Necrosis Factor

xi

UJI MIC ( Minimum I nhibitory Concentration) EKSTRAK KULIT BUAH DURIAN RAJA GALUH ( Durio zibethinus M.) TERHADAP BAKTERI Klebsiella pneumoniae Mutiara Taslimah*, Amanah**, Tiar Masykuroh Pratamawati** *Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati, **Dosen Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati

ABSTRAK Latar Belakang: Penyakit pneumonia dapat disebabkan oleh bakteri Klebsiella pneumoniae.Bakteri Klebsiella pneumoniae merupakan bakteri gram negatif yangmemiliki tingkat prevalensi yang tinggi dinegara berkembang.Pada tahun 2014, populasi balita di Jawa Barat terdapat 4.300.143 jiwa. Jumlah balita yang terdiagnosis pneumonia di Jawa Barat 48,06%, sedangkan di Kabupaten Cirebon terdapat 70,9% balita yang terdiagnosis pneumonia. Kulit Buah durian memiliki kandungan flavonoid, tanin, alkaloid, dan triterpenoid. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh konsentrasi terendahekstrak kulit buah durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae. Metode: Penelitian ini menggunakan desain penelitian deskriptif eksperimental. Sampel penelitian sebanyak 12 kelompok dengan 3 kali pengulangan yang terdiri dari, 1 kelompok kontrol positif, 1 kelompok kontrol negatif dan 10 kelompok perlakuan. Hasil: Hasil dari penilitian ini didapatkan bahwa pemberian ekstrak kulit buah durian terhadap pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae dengan konsentrasi 0,20% dan 0,39% merupakan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) bakteri Klebsiella pneumoniae. Kesimpulan: Ekstrak kulit buah durian Raja Galuh dapat menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae.

Kata kunci: Durio zibethinus Murr, Klebsiella pneumoniae, Kulit buah durian,

xii

DURIAN SKIN(Durio zibethinus M.) EXTRACT MIC (M inimum I nhibitory Concentration) TESTING TOWARDS Klebsiella pneumoniae BACTERIA. Mutiara Taslimah*, Amanah**, Tiar Masykuroh Pratamawati** * Student of Medicine Faculty Swadaya Gunung Jati University, ** Lecturer of Medicine Faculty Swadaya Gunung Jati University

ABSTRAC T Background: Pneumoniae can caused by Klebsiella pneumoniae bacteria. The Klebsiella pneumoniae is a gram negative bacteria that has a highprevalence rate in developing countries. In 2014, children underfive years old diagnosed with pneumonia in West Java was 48.06% while in Cirebon district was 70,9%. The skin of durian contains flavonoids, tannins, alkaloids and trit erpenoids, which may have antibacterial properties.

Purpose: The purpose of this research is to see the effect of the lowest concentration of Durian skin extract towards the growth of Klebsiella pneumoniae.

Method: This is an experimental-descriptive research design. Sample are divided into 12 groups that consist 1 positive control group, 1 negative control group and 10 treat groups. All experiment is done in triplicates.

Result: Based on the research, the minimum inhibitory concentration required to inhibit bacterial growth is 0,20% and 0,39%.

Conclusion: Skin extract of durian Raja Galuh can inhibit the growth of Klebsiella pneumoniae

Keywords: Durian Skin, Durio zibethinus Murr, Klebsiella pneumoniae.

xiii

BAB I PENDAHULUAN 1.1

Latar Belakang

Indonesia

memiliki

persebaran

penyakit

menular

yang

semakin

meningkat , salah satunya adalah penyakit pneumonia. Pneumonia memiliki tingkat prevalensi yang tinggi dinegara berkembang. (1) Pneumonia merupakan penyebab dari 15% kematian balita, yaitu diperkirakan sebanyak 922.000 balita di tahun 2015. Populasi yang rentan terserang pneumonia adalah anak-anak usia kurang dari 2 tahun, usia lanjut lebih dari 65 tahun dan orang yang memiliki masalah kesehatan (malnutrisi, gangguan imunologi). Pada tahun 2014 angka cakupan pneumonia pada balita tidak mengalami perkembangan berarti yaitu berkisar antara 20%-30%.Pada tahun 2015 terjadi peningkatan menjadi 63,45%. Pada tahun 2015 menggunakan hasil Riskesdas 2013 yang berbeda-beda untuk setiap provinsi dan secara nasional sebesar 3,55%. (2) Menurut Dinas Kesehatan Jawa Barat tahun 2014, populasi balita di Jawa Barat terdapat 4.300.143 jiwa. Jumlah balita yang terdiagnosis pneumonia di Jawa Barat 48,06%, sedangkan di Kabupaten Cirebon terdapat 70,9% balita yang terdiagnosis pneumonia. (3) Penyakit

pneumonia

yang

disebabkan

oleh

bakteri

Klebsiella

pneumoniae. Bakteri Klebsiella pneumoniae merupakan bakteri gram negatif yang dapat menyebabkan infeksi nosokomial dan dapat menyebabkan infeksi pada sistem pernafasan, seperti pneumonia, rhinoscleroma serta sinusitis.(4) Semakin lama tingkat kejadian pneumonia di Jawa Barat semakin meningkat. Untuk mengatasi infeksi pneumonia tersebut dapat menggunakan antibiotik yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Antibiotik yang biasa digunakan adalah golongan, quinolone, sefalosporin, penisilin dan karbapenem. Namun, penggunaan antibiotik dalam jangka panjang dapat menyebabkan kerusakan organ tubuh jika digunakan dengan dosis yang tidak tepat.(5) Di provinsi Jawa Barat, terutama daerah Cirebon memiliki keanekaragaman buah, salah satunya adalah durian. Cirebon sebagai salah

1

2

satu sentra durian di Jawa Barat dan jenis durian di Cirebon adalah durian rajagaluh, durian tersebut memiliki rasa yang manis dan ukuran yang besar. Kulit durian hanya dijadikan limbah, jika dimanfaatkan kulit buah durian memiliki kandungan berupa flavonoid, tanin, alkaloid dan triterpenoid. (6) Kandungan tersebut memiliki potensi sebagai antimikroba. Hal ini didukung oleh penelitian Fahmi, bahwa buah durian memiliki kemampuan antibakteri terhadap Staphylococcus epidermidis dan Shigella sonnei.(7) Lulu dkk menambahkan bahwa, kulit buah durian memiliki kemampuan menghambat bakteri Klebsiella pneumoniae dan Streptococcus pyogenes pada konsentrasi 3125 μg/disk, 6250 μg/disk, 1250 μg/disk, 2500μg/disk. (8) Penggunaan bahan alami kini semakin menarik minat masyarakat, karena bahan alami lebih mudah didapatkan, lebih ekonomis dan tidak terdapat efek samping. Pada penelitian tersebut, belum ada konsentrasi terstandar ekstrak kulit buah durian sebagai antimikroba.Maka perlu dilakukan uji MIC ( Minimum Inhibitory Concentration) yang merupakan uji standar dimana mikroba tidak dapat tumbuh atau berkembang biak. Dari pernyataan diatas, peneliti tertarik untuk meneliti Uji MIC (Minimum Inhibitory Concentration) Ekstrak Kulit Buah Durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap Bakteri Klebsiella Pneumoniae. 1.2

Permasalahan Penelitian

Berdasarkan latar belakang yang sudah di jelaskan, penulis dapat menyimpulkan bahwa permasalahan yang timbul adalah konsentrasi minimum Ekstrak Kulit Buah Durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap Bakteri Klebsiella pneumoniae. 1.3

Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk melihat pengaruh konsentrasi terendah ekstrak kulit buah durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap bakteri Klebsiella pneumonia.

3

1.3.2 Tujuan Khusus

Untuk menganalisis konsentrasi efektifekstrak kulit buah durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae. 1.4

Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat untuk ilmu pengetahuan

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan tambahan bagi ilmu pengetahuan di bidang kedokteran tentang Uji MIC (Minimum Inhibitory Concentration) ekstrak kulit buah durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae. 1.4.2 Manfaat untuk pelayanan kesehatan

Dapat digunakan sebagai pertimbangan klinis untuk ekstrak kulit durian ( Durio zibethinus Murr.) sebagai obat alternatif dari pneumonia agar mengurangi resistensi dari pemakaian obat antibiotik. 1.4.3 Manfaat untuk masyarakat

Untuk

memberikan

informasi

kepada

masyarakat

tentang

efektivitas ekstrak kulit buah durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae. 1.4.4 Manfaat untuk penelitian

A. Menambah ilmu pengetahuan bagi peneliti tentang efek ekstrak kulit buah durian terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae dan bisa menjadi tambahan dalam pengobatan penyakit bakteri Klebsiella pneumoniae. B. Penelitian ini bisa menjadi dasar penelitian-penelitian lain tentang ekstrak kulit buah durian. 1.5

Orisinalitas Penelitian yang Terkait Tabel 1. Orisinalitas penelitian No.

1.

Nama penulis

Metode

dan judul

Penelitian

Fahmi 2015.

Azhari. Aktivitas

Antibakteri Ekstrak

Eksperimen

Hasil

Hasil

uji

aktivitas

antibakteri

terhadap

Staphylococcus

4

Etanol Kulit Buah

epidermidis

dan

Durian

( Durio

Shigella

sonnei

zibethinus

Murr.)

menunjukkan

bahwa

terhadap

ekstrak etanol kulit

Staphylococcus

buah durian memiliki

epidermidis Shigella

dan

aktivitas

antibakteri

sonnei

ditandai

dengan

serta

terbentuknya

zona

Bioautografinya.(7)

hambat berturut-turut sebesar 13,00 ± 0,50 mm, 12,00 ± 1,00 mm, 11,33 ± 0,57 mm, dan 9,66 ± 1,15 mm

terhadap

Staphylococcus epidermidis,

serta

11,00 ± 1,00 mm, 10,33 ± 0,57 mm, 9,00 ± 0,50 mm, dan 9,33

±

0,57

terhadap

mm

Shigella

sonnei. 2.

Lulu Hanif Faizah. 2015.

Aktivitas

Eksperimen

Hasil

uji

aktivitas

antibakteri

Antibakteri Ekstrak

menunjukkan

Etanol Kulit Buah

ekstrak

Durian

( Durio

durian

zibethinus

Murr.)

aktivitas

antibakteri

terhadap Klebsiella

terhadap

Klebsiella

pneumoniae

pneumonia

dan

Streptococcus pyogenes

kulit

bahwa buah

memiliki

dengan

zona hambat sebesar serta

Bioautografinya.(8)

8,3±2,08

mm,

9,17±0,29

mm,

5

9,6±0,28

mm,

10,6±0,57 mm, dan Streptococcus pyogenessebesar 10±1 mm,

8±1

mm,

8,3±0,57

mm,

8.6±1,15 mm. 3.

Nina Arlofa. 2015. Uji

Eksperimen

Kandungan

Kulit

bagian dalam

buah

durian

Senyawa Fitokimia

mengandung senyawa

Kulit

Durian

tanin,

sebagai

Bahan

triterpenoid

Aktif

Pembuatan

alkaloid, dan

flavonoid

Sabun.(9)

sebagai

bahan anti bakteri dan saponin

zat

mengandung

yang buih,

sehingga kulit durian dapat

digunakan

sebagai bahan aktif pembuat sabun anti bakteri yang ramah lingkungan.

4.

Nera O. Duazo,dkk. 2012.

Crude

Eksperimen

Ekstrak kasar dengan konsentrasi

yang

methanolic extract

berbeda (100%, 75%,

activity from rinds

50% dan 25%) diuji

and seeds of native

terhadap

durian

dan setelah 24 jam

( Durio

dua

isolat

zibethinus) against

inkubasi,

Escherichia

penghambatan diukur.

and

coli

zona

Benih dan kulit durian

6

Staphylococcus

menunjukkan

aureus.(10)

penghambatan

yang

lebih

pada

besar

bakteri E. coli dengan inhibisi

yang

besar

lebih

daripada

kloramfenikol, merupakan

yang kontrol

positif. 5.

Surasak

Eksperimen

Ekstrak

etanol

dari

Thanutchapisut,

Monthong dan Cha-

dkk. 2015. A study

nee

of

penghambatan

antibacterial

menunjukkan

activity of Durio

maksimum

terhadap

zibethinus

typhimurium (12.00 t

MURRAY.(11)

0.00

mm)

dengan

kandungan

fenolik

total 87,53 dan 79,33 mg

/

ml

menggunakan Folin

dengan uji

Ciocalteu.

Konsentrasi bakterisida minimum (MBC) adalah 307,69 dan 315,50 mg / ml.

Perbedaan penelitian yang akan saya lakukan dengan penelitian sebelumnya adalah: 1. Perbedaan penelitian Fahmi Azhari,2015 dengan penelitian ini adalah penelitian mencari Uji MIC (Minimum Inhibitory Concentration) Ekstrak Kulit Buah Durian ( Durio zibethinus Murr.) terhadap Bakteri Klebsiella Pneumoniae.

7

2. Perbedaan penelitian Lulu Hanif Faizah,2015 dengan penelitian ini adalah penelitian menggunakan konsentrasi paling rendah. 3. Perbedaan penelitian Nina Arlofa,2015 dengan penelitian ini adalah penelitian menggunakan metode dilusi cair. 4. Perbedaan penelitian Nera O. Duazo, dkk, 2012 dengan penelitian ini adalah penelitian menggunakan bakteri Klebsiella pneumoniae. 5. Perbedaan penelitian Surasak Thanutchapisut, dkk, 2015 dengan penelitian ini adalah penelitian menggunakan buah durian raja galuh.

8

2

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1

Landasan Teori

2.1.1 Pneumonia 2.1.1.1

Definisi

Pneumonia adalah peradangan akut pada parenkim paru, bronkiolus respiratorius dan alveoli yang disebabkan oleh beberapa mikroorganisme seperti bakteri, jamur, virus, atau parasit yang mengakibatkan reaksi inflamasi pada alveoli dan inflamasi pada jalan nafas sehingga menimbulkan konsolidasi jaringan paru yang dapat mengganggu pertukaran oksigen dan karbon dioksida di paru paru.(12) 2.1.1.2

Klasifikasi

Klasifikasi pneumonia berdasarkan letak tempatnya: 1. Community-Acquired Pneumonia (CAP) Pneumonia komunitas adalah salah satu penyakit infeksi yang sering di sebabkan oleh bakteri yaitu Streptococcus pneumonia

( Penicillin

sensitive

and

resistant

strains),

Haemophilus influenza (ampicillin sensitive and resistant strains) and Moraxella catarrhalis (all strains penicillin resistant ). CAP bisa menular karena masuk melalui inhalasi atau aspirasi organisme patogen ke segmen paru atau lobus paru paru. Pada pemeriksaan fisik, sputum yang purulen merupakan karakteristik penyebab dari tipikal bakteri, jarang terjadi mengenai

lobus

atau

segmen

paru.

Tetapi

jika

terjadi

konsolidasi akan terdapat peningkatan taktil fremitus, nafas bronkial. Risiko kematian akan meningkat pada CAP jika ditemukan faktor komorbid berupa peningkatan respiratory rate, hipotensi, demam, multilobar involvement , anemia dan hipoksia.(13)

8

9

2. Hospital-Aquired Pneumonia Pneumonia nosokomial (lebih dikenal sebagai Hospital-acquired pneumonia atau Health care-associated pneumonia) merupakan pneumonia yang muncul setelah lebih dari 48 jam di rawat di rumah sakit tanpa pemberian intubasi endotrakeal. Terjadinya pneumonia nosokomial akibat

tidak

seimbangnya

pertahanan

inang

dan

kemampuan kolonisasi bakteri sehingga menginvasi traktus respiratorius bagian bawah. Bakteria yang terdapat dalam pneumonia nosokomial adalah P. Aeruginosa , Klebsiella sp, S. Aureus, S.pneumonia. Pneumonia nosokomial dibagi menjadi early onset (biasanya muncul selama 4 hari perawatan di rumah sakit) dan late onset (biasanya muncul setelah lebih dari 5 hari perawatan di rumah sakit).Pada early onset pneumonia nosokomial memiliki prognosis baik dibandingkan late onset pneumonia nosokomial, hal ini dipengaruhi oleh multidrug-resistant organism sehingga mempengaruhi peningkatan mortalitas.(14) 2.1.1.3

Etiologi

Pneumonia dapat disebabkan oleh beberapa faktor, antara lain: 1.

Bakteri. Penyebab pneumonia yang berasal dari bakteri gram positif : A. Streptococcus pneumonia:Termasuk bakteri anaerob fakultatif.

Bakteri

ini

dapat

ditemukan

pada

pneumonia komunitas.(15) B. Staphylococcus aureus : Termasuk bakteri anaerob fakultatif, pasien bisa tertular karena memasukkan obat menggunakan jarum suntik secara intravena (intravena drug abusers). (15)

10

Sedangkan penyebab pneumonia yang berasal dari bakteri gram negatif biasanya menyerang seseorang yang mengalami defisiensi imun (imunocompromised) atau pasien yang sedang dirawat dirumah sakit dalam jangka waktu lama dan dengan pasien meggunakan endotracheal tube.Yang termasuk bakteri gram negatif adalah A. Pseudomonas

aeruginosa

dan

Klebsiella

pneumonia yang merupakan bakteri aerob. B. Haemophilus

influensi

merupakan

bakteri

anaerob.(16) 2. Atipikal organisme Bakteri yang termasuk atipikal organisme yaitu: Mycoplasma sp., chlamedia sp., Legionella sp.(17) 3. Fungi Infeksi pneumonia yang disebabkan oleh jamur oportunistik, yaitu spora jamur dapat masuk ke dalam tubuh saat manusia menghirup udara. Organisme jamurnya seperti, Candida sp., Aspergillus sp. dan Cryptococcus neoformans.(18) 2.1.1.4

Patofisiologi

Pneumonia adalah keadaan yang timbul karena adanya proliferasi mikroorganisme di alveolus. Mikroorganisme yang bers ifat patogen dapat masuk ke saluran nafas bagian bawah melalui beberapa cara, paling sering akibat aspirasi melalui orofaring pada saat saat tidur, yang sering terjadi pada usia lanjut, saat terjadi penurunan kesadaran, dan melalui penyebaran infeksi secara hematogen.(19) Faktor yang paling penting dalam pertahanan tubuh pada saat terkena infeksi adalah faktor mekanik (rambut-rambut halus, turbinasi udara di rongga hidung, struktur anatomis percabangan trakhea bronkus, mekanisme pembersihan muko-siliaris), faktor antibakteri lokal yang ada didalam tubuh yang berguna untuk menangkap partikel

11

atau membunuh mikroorganisme tersebut, pertahanan humoral (antibodi dan komplemen) dan pertahanan seluler (leukosit, makrofag, limfosit dan sitokinin).(20) Saat

sistem

pertahanan

tubuh

yang

baik

atau

jumlah

mikroorganisme yang dapat mencapai ke alveolus masih sedikit, makrofag dan protein lokal yang terdapat di alveolus akan melawan patogen yang masuk melalui aktivitas antibakteri atau antiviral. Gej ala pneumonia dapat timbul ketika aktivitas makrofag di alveolus berlebihan dalam melawan mikroorganisme patogen. Pada kondisi ini, makrofag menginisiasi respon inflamasi dari tubuh yang merupakan proses yang lebih dominan daripada proliferasi mikroorganisme itu sendiri sehingga memicu timbulnya gejala klinis pada pneumonia. Pelepasan mediator inflamasi Interleukin (IL) 1 dan Tumor Necrosis Factor (TNF) menimbulkan demam, kemokin IL-8 dan GranulocyteColony Stimulating Factor (GCSF) menstimulasi pelepasan neutrofil ke alveolus dan menimbulkan leukositosis perifer serta sekret yang purulen.

Adanya

menimbulkan

mediator

kerusakan

inflamasi

pembuluh

dan

masuknya

neutrofil

kapiler

alveolus

sehingga

menghasilkan gambaran infiltrat pada pemeriksaan radiologi, suara ronkhi pada auskultasi, dan hipoksemia akibat terganggunya proses pertukaran gas di alveolus. Dan inflamasi juga dapat mengakibatkan peradangan pada membran paru khusunya bagian dari sawar udara alveoli sehingga cairan plasma dan sel darah merah dari kapiler masuk, hal tersebut akan menyebabkan rasio ventilasi perfusi dan saturasi oksigen akan menurun. (21) Pada pemeriksaan dapat diketahui bahwa paru-paru akan dipenuhi oleh sel radang dan cairan, hal tersebut merupakan bagian dari reaksi tubuh untuk membunuh patogen, tetapi dengan adanya dahak dan fungsi paru yang menurun akan menyebabkan pasien kesulitan bernafas dan dapat terjadi asidosis respiratorik, sianosis bahkan kematian.(22)

12

2.1.1.5

Gejala Klinis

1. Anamnesis Pada penderita pneumonia akan didapatkan gejala seperti demam, menggigil, suhu tubuh meningkat dapat melebihi 40 ℃, batuk produktif atau non produktif atau menghasilkan sputum yang berlendir, purulen atau bercak darah, sesak nafas, dan nyeri dada karena pleuritis, pasien juga lebih suka berbaring pada sisi yang sakit dengan lutut tertekuk. (23) 2. Pemeriksaan fisik Pada pemeriksaan fisik dada tergantung dari luas lesi di paru. Pada inspeksi dapat terlihat bagian yang sakit tertinggal pada saat bernafas, pada palpasi fremitus taktil dapat meningkat atau menurun, pada perkusi suara redup sampai pekak karena terdapat cairan pleura, pada auskultasi terdengar suara nafas bronkovesikuler sampai bronkial yang dapat disertai ronkhi basah halus, yang kemudian menjadi ronkhi basah kasar pada stadium resolusi, takipneu, pleural friction rub.(18) 3. Pemeriksaan penunjang A. Gambaran radiologis Gambaran

radiologis

dapat

berupa

infiltrat

sampai

konsolidasi dengan “air bronchogram”. Foto toraks saja tidak dapat secara khas menentukan penyebab pneumonia, hanya untuk petunjuk ke arah etiologi, misalnya gambaran pneumonia lobaris tersering disebabkan oleh Streptococcus pneumoniae, gambaran infiltrat bilateral atau bronkopneumonia tersering oleh Pseudomonas auruginosa, sedangkan Klebsiella pneumonia sering menunjukkan konsolidasi yang terjadi pada lobus atas kanan meskipun dapat mengenai beberapa lobus. (15)

13

B. Pemeriksaan laboratorium Pada pemeriksaan laboratorium, terdapat peningkatan jumlah leukosit, biasanya lebih dari 10.000/ul dapat mencapai 30.000/ul.Pada hitung jenis leukosit terdapat pergeseran ke kiri serta terjadi peningkatan LED (Laju Endap Darah). Untuk menentukan

diagnosis

etiologi

diperlukan

pemeriksaan

sputum, kultur darah dan serologi. Analisis gas darah menunjukkan hipoksemia dan hiperkarbia, serta pada stadium lanjut dapat terjadi asidosis respiratorik.(13) 2.1.2 Klebsiella Pneumoniae

Infeksi yang terjadi pada penyakit pneumonia dapat disebabkan

oleh

bakteri

Klebsiella

pneumoniae.Klebsiella

pneumoniae adalah suatu bakteri gram negatif yang tidak bergerak (non motil), tidak berselubung, melakukan fermentasilaktosa, fakultatif anaerob, ditemukan sebagai flora normal di mulut, kulit dan usus.(24) 2.1.2.1 Morfologi

Taksonomi Klebsiella Pneumoniae adalah(25) Kingdom Bacteria Filum

Proteobacteria

Kelas

Gamma Proteobacteria

Ordo

Enterobacteriales

Famili

Enterobacteriaceae

Genus

Klebsiella

Spesies

Klebsiella pneumonia

14

Gambar 1. Morfologi Klebsiella Pneumoniae.(24)

Spesies Klebsiella menunjukkan pertumbuhan mukoid, simpai polisakarida yang besar, tidak ada pergerakan dan biasanya memberikan hasil positif untuk tes dekarboksilase lisin dan sitrat. Morfologi khas dari Klebsiella dapat dilihat dalam pertumbuhan padat in vitro tetapi morfologinya sangat bervariasi dalam bahan klinik.Biasanya Klebsiella simpainya besar dan teratur. Selain itu Klebsiela

koloninya

besar,

sangat

mukoid

dan

cenderung

bersatu.(26) 2.1.2.2

Patogenitas

Klebsiella pneumoniae dapat menyebabkan pneumonia bakterial. Klebsiella pneumoniae banyak terdapat di dalam saluran nafas dan feses. Klebsiella pneumoniae dapat menyebabkan konsolidasi luas disertai nekrosis hemoragik pada paru-paru. Klebsiella kadang-kadang menyebabkan infeksi saluran kemih dan bakteremia dengan lesi fokal pada pasien yang lemah. Klebsiella menduduki ranking kedua setelah E.coli untuk infeksi saluran kemih di orang-orang yang sudah berumur. Klebsiella juga merupakan suatu opportunistic pathogen untuk pasien dengan

15

penyakit paru-paru kronis dan rhinoscleroma. Feses adalah salah satu sumber yang paling signifikan dalam hal infeksi kepada pasien, yang selanjutnya diikuti oleh berhubungan dengan alat-alat yang sudah terkontaminasi oleh bakteri. Penyakit utama yang ditimbulkan oleh bakteri ini adalah pneumonia. Pneumonia adalah inflasi parenkim paru, biasanya berhubungan dengan pengisian cairan di dalam alveoli. Hal ini terjadi ini terjadi akibat adanya invaksi

agen

atau

infeksius

adalah

adanya

kondisi

yang

mengganggu tahanan saluran. Dengan demikian flora endogen menjadi patogen ketika memasuki saluran pernafasan. (24) Faktor virulensi bakteri yang mempengaruhi patogenesis pada tubuh manusia adalah kapsul polisakarida, endotoksin, reseptor dinding sel. Klebsiella sp. memiliki kapsul besar yang terdiri dari polisakarida K yang menutupi antigen somatik. Struktur kapsul berfungsi melindungi bakteri dari fagositosis oleh granulosit polimorfonuklear dan mencegah kematian bakteri oleh serum bakterisidal. Adanya antigen pada kapsul yang dimiliki Klebsiella sp. dapat meningkatkan patogenitas bakteri. Infeksi sistem pernafasan oleh Klebsiella sp. umumnya disebabkan oleh kapsular antigen tipe 1 dan 2. (24) Reseptor dinding sel yang dimiliki bakteri memungkinkan Klebsiella sp. melekat pada sel host, mengubah permukaan bakteri sehingga fagositosis oleh leukosit polimorfonuklear dan makrofag terganggu, dan invasi sel inang non-fagositik terfasilitasi. Invasi pada sel inang ini juga dipengaruhi oleh kapsul polisakarida yang mengelilingi sel bakteri dan setelah itu Klebsiella sp. memproduksi endotoksin. Endotoksin merupakan liposakarida kompleks yang terdapat pada dinding sel bakteri gram negatif. Efek biologi endotoksin dapat menyebabkan demam, leukopenia, pendarahan kapiler, hipotensi, kolaps sirkulasi. (24)

16

2.1.3 Buah Durian 2.1.3.1 Definisi

Durian ( Durio zibethinus Murr) merupakan salah satu tanaman hasil perkebunan yang telah lama dikenal oleh masyarakat yang pada umumnya dimanfaatkan sebagai buah saja. Sebagian sumber liter atur menyebutkan tanaman durian adalah salah satu jenis buah tropis asli Indonesia.(27)

Gambar 2. Buah durian.(28)

Taksonomi buah durian:(29) Kingdom

Plantae

Divisi

Spermatophyta

Sub Divisi

Angiospermae

Kelas

Dicotyledonae

Ordo

Malvaceae

Famili

Bombaceae

Genus

Durio

Spesies

Durio zubethinus Murr

17

2.1.3.2

Komposisi

Durian merupakan makanan sehat yang baik untuk tubuh jika dimakan tanpa berlebihan. Di dalam daging buah durian mengandung banyak sekali zat gizi, di antaranya adalah karbohidrat, lemak, protein, serat, kalsium (Ca), fosfor (P), asam folat, magnesium (Mg), potasium/kalium (K), zat besi (Fe), zinc, mangaan (Mn), tembaga (Cu), karoten, vitamin C, thiamin, niasin, dan riboflavin. Fosfor dan zat besi yang terdapat dalam durian ternyata 10 kali lebih banyak daripada buah pisang. (30) Kandungan gizi tiap 100 gram buah durian adalah 67 gram air, 2,5 gram lemak, 28,3 gram karbohidrat, 1,4 gram serat, 2,5 gram protein, dan menghasilkan energi sebesar kurang lebih 520 kJ. (28) Sedangkan Kulit bagian dalam buah durian mengandung senyawa tanin, alkaloid, triterpenoid dan flavonoid sebagai bahan anti bakteri. (27)

Tabel 2. Kandungan Gizi Buah Durian Per 100gr. (30)

Kandungan Gizi

Satuan

Jumlah

Energi

Kal

134,0

Protein

Gr

2,4

Lemak

Gr

3,0

Karbohidrat

Gr

28,0

Kalsium

Mgr

7,4

Fosfor

Mgr

44,0

Zat Besi (Fe)

Mgr

1,3

Vitamin A

SI

175,0

Vitamin B1

Mgr

0,1

Vitamin C

Mgr

53,0

Air

Gr

65,0

2.1.3.3 Manfaat

Beberapa bagian tumbuhan kadang-kadang dimanfaatkan sebagai bahan obat tradisional. Akarnya dimanfaatkan sebagai obat demam.

18

Daunnya, dicampur dengan jeringau ( Acorus calamus), digunakan untuk menyembuhkan cantengan (infeksi pada kuku). Kulit buahnya untuk mengobati ruam pada kulit (sakit kurap) dan susah buang air besar (sembelit). Kulit buah ini biasa dibakar dan abunya digunakan dalam ramuan untuk melancarkan haid.(12) 2.2

Kerangka Teori

Pneumonia

Ekstrak

Farmakoterapi

kulit

buah durian

Flavonoid, tanin,

Levofloxacin

triterpenoid,

Penghambat replikasi dan transkripsi DNA

Merusak membran

bakteri

sel bakteri

Agen antimikroba untuk Klebsiella pneumoniae

Gambar 3. Kerangka Teori

19

2.3

Kerangka Konsep

Variabel bebas

Ekstrak

kulit

Variabel terikat

buah

Klebsiella pneuoniae

durian

Gambar 4. Kerangka Konsep 2.4

Hipotesis

Hipotesis dari penelitian ini adalah konsentrasi rendah dari ekstrak kulit durian dapat menghambat aktivitas bakteri.

20

3

BAB III

METODE PENELITIAN 3.1

Ruang Lingkup Penelitian (keilmuan)

Penelitian ini termasuk dalam lingkupan bidang Pulmonologi dan Mikrobiologi. 3.2

Tempat dan Waktu penelitian

Penelitian ini dilakukan selama 3 bulan.Dimulai dari bulan Oktober 2017 hingga bulan Desember 2017.Penelitian mulai dilakukan setelah mendapat ethical clearance dari Komite Etik Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati.Tempat penelitian dilakukan pada Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati. 3.3

Jenis dan Rancangan penelitian

Penelitian dilakukan dengan desain deskriptif eksperimental dan bersifat eksploratif dengan menggunakan Klebsiella pneumoniae sebagai objek penelitian. Penelitian ini menggunakan 12 kelompok, yaitu 1 kelompok kontrol negatif, 1 kelompok kontrol positif dan 10 kelompok perlakuan. 3.4

Populasi dan Sampel

3.4.1 Populasi Penelitian

Populasi penelitian ini adalah bakteri Klebsiella pneumoniae. 3.4.2 Sampel Penelitian

Sampel penelitian ini adalah bakteri Klebsiella pneumoniae pada media Mueller Hinton. 3.4.2.1 Kriteria Inklusi

Koloni Klebsiella pneumoniae yang tumbuh pada media agar setelah dipaparkan dengan perlakuan.

20

21

3.4.2.2

Kriteria Eksklusi

Bakteri yang mengalami kontaminasi. 3.4.3 Cara Sampling

Penelitian ini menggunakan 12 kelompok, yaitu 1 kelompok kontrol negatif, 1 kelompok kontrol positif dan 10 kelompok perlakuan uji. Kelompok penelitian ini terdiri dari : Tabel 3. Kelompok uji No. 1.

Kelompok

Keterangan

Kontrol negatif

Klebsiella

pneumoniae

yang diberi 1 ml DMSO 10% 2.

Kontrol positif

Klebsiella

pneumoniae

yang diberi levofloxacin 750mg. 3.

Perlakuan I

Klebsiella

pneumoniae

yang diberi ekstrak kulit durian dengan konsentrasi 100% 4.

Perlakuan II

Klebsiella

pneumoniae


Perlakuan III

Klebsiella

pneumoniae


Perlakuan IV

Klebsiella

pneumoniae

yang diberi ekstrak kulit

22

durian dengan konsentrasi 12,5% 7.

Perlakuan V

Klebsiella

pneumoniae

yang diberi ekstrak kulit durian dengan konsentrasi 6,25% 8.

Perlakuan VI

Klebsiella

pneumoniae


Perlakuan VII

Klebsiella

pneumoniae


Perlakuan VIII

Klebsiella

pneumoniae


Perlakuan IX

Klebsiella

pneumoniae


Perlakuan X

Klebsiella

pneumoniae

yang diberi ekstrak kulit durian dengan konsentrasi 0,20%

23

3.4.4

Besar Sampel

Kelompok sampel dibagi menjadi 12 kelompok. Besarnya sampel tiap kelompok ditentukan dengan rumus Federer. Bila dihitung sebagai berikut: (n-1)(t-1) ≥ 15 (n-1)(12-1) ≥ 15 11n-11 ≥ 15 11n ≥ 26n ≥ 2,36 Keterangan: n = Jumlah sampel t = Jumlah kelompok Jadi jumlah pengulangan yang digunakan setiap kelompok adalah 3 (n>2,36) dan jumlah kelompok pada penelitian ini adalah 12. 3.5 Variabel Penelitian 3.5.1 Variabel bebas (I ndependent )

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi ekstrak kulit durian. 3.5.2 Variabel terikat ( Dependent )

Variabel terikat dalam penelitian ini adalah pertumbuhan bakteri Klebsiellapneumoniae. 3.6 Definisi Operasional Tabel 4. Definisi operasional

No.

Variabel

Definisi

Alat ukur

Skala

Nominal

operasional 1.

Ekstrak kulit

Ekstrak dengan

Timbangan

buah durian

konsentrasi

(mg) dan gelas

100%, 50%,

ukur (ml)

25%, 12,5%, 6,25%, 3,13%, 1,56%, 0,78%, 0,39%, 0,20%.

24

2.

Kadar

Konsentrasi

Di lihat

hambat

ekstrak kulit

menggunakan

pertumbuhan

buah durian

mata

bakteri

dapat

Klebsiella

menghambat

pneumonia

pertumbuhan

Ordinal

bakteri Klebsiella pneumoniae 3.

Pertumbuhan

Pertumbuhan

Di lihat dengan

bakteri

Klebsiella

menggunakan

Klebsiella

pneumoniae

mata

pneumonia

setelah

Ordinal

diberikan ekstrak kulit buah durian

3.7

Cara Pengumpulan Data

3.7.1 Bahan dan alat A. Bahan

Bahan yang akan digunakan adalah kulit buah durian, bakteri Klebsiella pneumoniae, media Mueller Hinton, DMSO 10%, aquadest, etanol 96%, levofloxacin. B. Alat

Alat yang akan digunakan adalah vortex, ose, autoklaf, inkubator, tabung reaksi, mikropipet, blue tip, rak tabung reaksi, burner dan korek api. 3.7.2 Prosedur penelitian 3.7.2.1 Pembuatan Simplisia

Pembuatan simplisia dilakukan dengan memilih kulit durian yang segar di sentra durian kabupaten Cirebon Jawa Barat. Kemudian dibersihkan dengan air mengalir, selanjutnya kulit durian dipotong menjadi bagian kecil-kecil dan dikeringkan dengan cara dijemur.

25

Kemudian dilakukan sortasi kering dan simplisia dihaluskan menjadi serbuk halus sebanyak 700gr. 3.7.2.2

Ekstrak Kulit Buah Durian

Serbuk kulit buah durian sebanyak 3 buah direndam dalam 10 L etanol 96% selama semalam sambil diaduk beberapa kali. Dilakukan penyaringan maserat dengan corong Buchner.Ampas yang didapat dilakukan remaserasi sebanyak 2x, maserat dievaporasi dengan rotary evaporator , kemudian diuapkan diatas waterbath sampai didapat ekstrak yang kental sebanyak 50ml. 3.7.2.3

Sterilisasi Alat

Sterilisasi dilakukan dengan sterilisasi cara fisik, umumnya dilakukan dengan cara pemanasan pada suhu tinggi. Cara sterilisasi dengan menggunakan alat autoclave yang diisi dengan NaCl setinggi batas sarangan, atur suhu 121°C dengan tekanan 1,5 kg/cm2 (15 pound) atau sekitar 2 atm dalam jangka waktu 15-20 menit. Sebelum disterilisasi semua alat dibungkus dengan kertas HVS kemudian masukkan ke dalam plastik. Jarum ose disterilisasi dengan api bunsen. 3.7.2.4 Pembuatan Media

A. Mueller Hinton Media Mueller Hinton didapatkan dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia sebanyak 10 buah. B. Nutrient Broth (NB) Sebanyak 37 gram NB dilarutkan dalam 500 ml aquadest dan dipanaskan sampai bening. Kemudian disterilisasi dengan menggunakan autoklaf pada temperatur 121°C selama 15 menit. 3.7.2.5 Pembuatan Suspensi McFarland 0,5

Sebanyak 0,5 ml larutan barium klorida 0,048 M (BaCl 2 2H2O 1,175%) dicampurkan dengan 9,5 ml larutan asam sulfat 0,18 M (H2SO4 1% b/v) dalam labu takar dan dihomogenkan. Suspensi ini

26

digunakan sebagai larutan standar pembanding kekeruhan suspensi bakteri uji. 3.7.2.6

Pembuatan Suspensi Klebsiella pneumoniae

Klebsiella pneumoniae didapatkan dari laboratoriumMikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Pembiakan dilakukan dengan cara inkubasi selama 2-6 jam dengan suhu 37 oC lalu kekeruhan disamakan dengan standar Mc Farland 1,5x10 8 CFU/mL. 3.7.2.7 Pengenceran Konsentrasi Ekstrak Kulit Durian

Pengenceran bertujuan untuk menghasilkan konsentrasi yang akan digunakan dari ekstrak kulit buah durian yang dapat membunuh bakteri Klebsiella pneumoniae. Pengenceran dibuat konsentrasi 100%, 50%,

25%,

12,5%,

6,25%,

3,13%,

1,56%,

0,78%,

0,39%,

0,20%.Kultur murni 100% digunakan sebanyak 1 ml ekstrak kulit buah durian.Selanjutnya melakukan perhitungan menggunakan rumus sebagai berikut :

N1·V1=N2·V2

Keterangan : N1 = Normalitas sebelum pengenceran V1 = Volume sebelum pengenceran N2 = Normalitas setelah pengenceran V2 = Volume setelah pengenceran Perhitungan konsentrasi : A.

Konsentrasi 100% adalah 1 ml ekstrak kulit buah durian.

B.

Konsentrasi 50% adalah 0,50 ml ekstrak kulit buah durian dicampur dengan 0,50 ml DMSO 10% sampai volume 1ml.

C.

Konsentrasi 25% adalah 0,25% ml ekstrak kulit buah durian dicampur dengan 0,75 ml DMSO 10% sampai volume 1 ml.

D.

Konsentrasi 12,5% adalah 0,125 ml ekstrak kulit buah durian dicampur dengan 0,875 ml DMSO 10% sampai volume 1 ml.

27

E.


F.


G.


H.


I.

Konsentrasi 0,39% adalah 0,0039 ml ekstrak kulit buah durian di campur dengan 0,9961 ml DMSO 10% sampai volume 1 ml.

J.


K.

Konsentrasi kontrol negatif (K1) adalah biakan Klebsiella pneumoniae dengan pemberian DMSO 10% sebanyak 1 ml.

L.

Konsentrasi kontrol positif (K2) adalah Levofloxacin 50  g/ml.

3.7.2.8 Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (MIC)

Penentuan KHM dilakukan dengan cara memasukkan ekstrak kulit buah durian dengan konsentrasi 100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,13%, 1,56%, 0,78%, 0,39%, 0,20% ke dalam tabung reaksi berisi suspensi bakteri uji. Kemudian untuk kontrol positif dimasukkan 50  g/ml levofloxacin ke dalam tabung yang sudah berisi suspensi bakteri dan untuk kontrol negatif dimasukkan 1 ml DMSO ke dalam tabung yang sudah berisi suspensi bakteri. Selanjutnya tabung tersebut di vortex hingga homogen dan diinkubasi pada temperatur 37°C selama 24 jam pada inkubator, lalu lihat kejernihan tabung dengan membandingkan tabung tersebut dengan kontrol. Konsentrasi Bunuh Minimum ditandai dengan kejernihan pada tabung.

28

3.8

Alur Penelitian

Bakteri Klebsiella pneumoniae Pembuatan bahan uji

di dapatkan dari laboratorium mikrobiologi Fakultas kedokteran Universitas Indonesia

Konsentrasi

ekstrak

Media pertumbuhan

kulit buah durian

100%,

50%,

25%,

12,5%,

Inkubasi selama 2-6

6,25%, 3,13%, 1,56%, 0,78%,

jam pada suhu 37℃

0,39%, 0,20%.

Masukan

ke

dalam

tabung reaksi

Suspensi bakteri

Nilai

Konsentrasi

Hambat Minimum

Kejernihan

Di inkubasi 2-6 jam pada suhu 37℃

dan

kekeruhan tabung

Gambar 5. Alur penelitian

29

3.9 Analisis Data

Data awal yang di peroleh dari penelitian ini ditetapkan sebagai konsentrasi hambat minimum. 3.10 Etika Penelitian

Penelitian ini menggunakan bakteri Klebsiella pneumoniae sebagai bahan uji coba. Sebelum melakukan penelitian penulis meminta persetujuan etik terlebih dahulu dari Komite Etika Penelitian Fakultas Kedokteran Unswagati. Kemudian penulis juga mengajukan surat permohonan dan persetujuan untuk melakukan penelitian di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati.

4

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian 4.1.1 Hasil isolasi dan identifikasi bakteri uji (Klebsiella pneumoniae)

Bakteri yang di gunakan di dapatkan dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Media yang digunakan ialah Mueller Hinton (MH) yang berfungsi untuk menumbuhkan bakteri uji pada cawan petri dengan suhu 37oC selama 2-6 jam. Setelah itu diidentifikasi secara makroskopis dan mikroskopis. Penelitian ini telah disetujui oleh Komisi Etika Penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati dengan No.15/EC/FK/1/2018. 4.1.1.1 Identifikasi secara makroskopis

Klebsiella pneumoniae yang telah dikultur pada media MH menunjukkan pertumbuhan koloni berwarna krem, berbentuk bulat, licin dan halus.

Gambar

6.

Hasil

reidentifikasi

pneumoniae (Dokumentasi pribadi).

30

makroskopis

Klebsiella

31

4.1.1.2 Identifikasi secara mikroskopis

Digunakan mikroskop untuk mengidentifikasi isolat Klebsiella pneumoniae pada

kaca

objek.

Ditemukan

bakteri Klebsiella

pneumonie berbentuk basil atau batang, tidak berspora, tidak bergerak, dan memiliki kapsul.

Gambar 7. Hasil reidentifikasi mikroskopis bakteri Klebsiella

pneumoniae (Dokumentasi pribadi).

Dari gambar diatas, terlihat bakteri berbentuk basil, berwarna merah dikarenakan terdapat pewarnaan Gram. 4.1.2 Pengaruh Pemberian Ekstrak Kulit Buah Durian Raja Galuh (Durio

zibethinus Murr. ) terhadap Bakteri Klebsiella Pneumoniae. Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh konsentrasi terendah ekstrak kulit buah durian ( Durio zibethinus Murr .) terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae, penelitian ini menggunakan 12 kelompok dengan 3 kali pengulangan.

32

Tabel 5. Hasil pengamatan ekstrak kulit buah durian terhadap bakteri

Klebsiella pneumoniae dalam media Mueller Hinton: Kelompok

Konsentrasi

N

Hasil

Kontrol positif

Levofloxacin

1

Jernih, tanpa endapan

(K I)

750mg

2


3


Kontrol negatif

1ml DMSO

1


(K II)

10%

2


3


1

Jernih , dengan endapan

Perlakuan I

100%

(P I)

keruh 2

Jernih , dengan endapan keruh

3


Perlakuan II

50%

1

(P II)


2


3


Perlakuan III

25%

1

(P III)


2


3


Perlakuan IV

12,5%

1

(P IV)


2


3


33

Perlakuan V

6,25%

1

(P V)


2


3


Perlakuan VI

3,13%

1

(P VI)


2


3


Perlakuan VII

1,56%

1

(P VII)


2


3


Perlakuan VIII

0,78%

1

(P VIII)


2


3


Perlakuan IX

0,39%

1

(P IX)

Jernih, dengan sedikit endapan keruh

2


3


Perlakuan X (P X)

0,20%

1


2


3


34

Keterangan: N: Pengulangan. Hasil pengamatan pada Tabel 6 menunjukkan bahwa, kelompok kontrol positif dan kontrol negatif dan P (X) menunjukkan hasil jernih tanpa endapan, kelompok P (I), P (II), P (III), P (IV), P (V,) P (VI), P (VII), dan P (VIII) menunjukkan hasil jernih, dengan endapan keruh, sedangkan kelompok P (IX) menunjukkan hasil jernih dengan sedikit endapan keruh. 4.1.3

Identifikasi Gram

Setelah dilakukan pembiakan dengan media agar Mueller Hinton, pengamatan secara mikroskopis juga dilakukan pada semua kelompok uji dengan hasil sebagai berikut: Tabel 6. Hasil identifikasi Gram secara mikroskopis

Kelompok

Konsentrasi

Hasil

Kontrol positif

Levofloxacin 750mg

Negatif

Kontrol negatif

1ml DMSO 10%

Positif

Perlakuan I

100%

Positif

Perlakuan II

50%

Positif

Perlakuan III

25%

Positif

Perlakuan IV

12,5%

Positif

Perlakuan V

6,25%

Positif

Perlakuan VI

3,13%

Positif

Perlakuan VII

1,56%

Positif

Perlakuan VIII

0,78%

Positif

Perlakuan IX

0,39%

Negatif

35

Perlakuan X

0,20%

Negatif

Berdasarkan hasil pada Tabel 7, bahwa kelompok kontrol positif, P (IX) dan P (X) tidak ditemukan bakteri gram negatif, sedangkan kelompok kontrol negatif, P (I), P (II), P (III), P (IV), P (V,) P (VI), P (VII), dan P (VIII) ditemukan bakteri gram negatif yang tidak bergerak (non motil), tidak berselubung, koloninya besar, sangat mukoid dan cenderung bersatu. Dari tabel terlihat bahwa konsentrasi 0,39% dan 0,20% memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri. 4.2 Pembahasan

Berdasarkan hasil identifikasi secara mikroskopis dan makroskopis, bakteri yang tumbuh pada cawan petri adalah bakteri Klebsiella pneumoniae. Secara mikroskopis pertumbuhan bakteri berbentuk basil atau batang, tidak berspora, tidak bergerak, dan memiliki kapsul, sedangkan secara makroskopis menunjukkan pertumbuhan koloni berwarna krem, berbentuk bulat, licin dan halus.(31) Penelitian ini menggunakan ekstrak kulit buah durian raja galuh (Durio zibethinus M.), karena durian tersebut berasal dari Cirebon, selain ingin menggunakan

durian

asli

Cirebon,

penelitian

ini

bertujuan

untuk

memanfaatkan limbah yang ada. Penelitian ini menggunakan 12 kelompok dengan 3 kali pengulangan, berdasarkan hasil penelitian, didapatkan bahwa pada K (+) dan K (-) menunjukkan hasil jernih tanpa endapan, sama seperti kelompok P (X). Kelompok P (1), P (II), P (III), P (IV), P (V), P (VI), P (VII), dan P (VIII) menunjukkan hasil keruh dengan endapan, sedangkan P (IX) menunjukkan hasil jernih dengan sedikit endapan. Berdasarkan hasil identifikasi Gram, didapatkan bahwa kelompok kontrol positif, P (IX) dan P (X) tidak ditemukan bakteri gram negatif, sedangkan kelompok kontrol negatif, P (I), P (II), P (III), P (IV), P (V,) P (VI), P (VII), dan P (VIII) ditemukan bakteri gram negatif yang tidak bergerak (non motil), tidak berselubung, koloninya besar, sangat mukoid dan cenderung bersatu. Perlakuan pada K (-) dengan menggunakan DMSO 10%.DMSO adalah

36

pelarut aprotik polar yang larut dalam senyawa polar maupun nonpolar, serta larut pula dalam berbagai pelarut organik seperti air. air. DMSO tersebut tidak memberikan pengaruh pada pertumbuhan bakteri. Menurut Fariza (2015) DMSO 10% yang digunakan sebagai pelarut untuk membuat variasi konsentrasi ekstrak tidak berpengaruh terhadap penghambatan pertumbuhan bakteri.(32) Berdasarkan hasil penelitian ini di dapatkan bahwa ekstrak kulit buah durian ( Durio Durio zibethinus M.) terbukti dapat menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae pneumoniae dengan berbagai konsentrasi yang berbeda. Hasil dari penelitian ekstrak kulit buah buah durian Raja Galuh ( Durio Durio zibethinus zi bethinus M.) dengan konsentrasi terendah, yaitu 0.20% terbukti lebih efektif untuk menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae. pneumoniae. Sedangkan menurut penelitian Lulu Hanif, 2015 bahwa ekstrak kulit buah durian dengan dosis

2500μg/disk memiliki

aktivitas

antibakteri

terhadap Klebsiella

pneumoniae dengan zona hambat sebesar 10,6±0,57 10,6±0,57 mm. (8) Terhambatnya pertumbuhan bakteri bakteri Klebsiella Klebsiella pneumonia pada pneumonia pada penelitian ini, dikarenakan ekstrak kulit buah durian ( Durio ( Durio zibethinus M.) memiliki senyawa aktif sebagai antibakteri yangdapat menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella bakteri Klebsiella pneumoniae pada pneumoniae pada piring agar Mueller Hinton.(33) Senyawa aktif tersebut berupa berupa flavonoid, tanin, alkaloid dan triterpenoid. (11) Flavonoid merupakan senyawa pereduksi, menghambat banyak reaksi oksidasi secara enzim maupun non enzim. Flavonoid memiliki sifat sebagai antibakteri dengan cara menghambat fungsi membran sel, menghambat sintesis asam nukleat, menghambat metabolisme energi.(34) Tanin

dapat

mengkerutkan

dinding

sel

sehingga

mengganggu

permeabilitas sel sehingga akan mengakibatkan sel tidak dapat melakukan aktivitas hidup, pertumbuhannya terhambat dan mengalami kematian. (35) Selain itu, tanin juga dapat menghambat enzim reverse transkriptase dan DNA

topoisomerase,

hambatan

enzim

reversetranskriptase

dapat

menyebabkan tidak terjadinya proses transkripsi balik sehingga membuat DNA tidak terbentuk dan bakteri akan mati. (36) Alkaloid dapat menghambat

37

penyusunan peptidoglikan yang terdapat pada sel bakteri sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara sempurna dan menyebabkan sel tersebut mati.(37) Triterpenoid dapat bereaksi dengan porin (protein transmembran) yang terdapat pada membran luar dinding sel bakteri dan membentuk ikatan polimer yang kuat dan merusak porin sehingga mengurangi permeabilitas dinding sel bakteri dan menyebabkan sel tersebut kekurangan nutrisi, dan terhambatnya pertumbuhan bakteri.(38) Terhambatnya pertumbuhan bakteri hanya dalam waktu kurang dari 24 jam dikarenakan ekstrak kulit buah durian ( Durio Durio zibethinus M.) berbentuk seperti gel yang mengandung polisakarida sebagai sistem kekebalan tubuh bakteri Klebsiella pneumoniae sehingga setelah waktu lebih dari 24 jam bakteri bakteri Klebsiella pneumonia akan tumbuh kembali.(39) Pada penelitian menggunakan obat levofloxacin sebagai kontrol positif, karena levofloxacin adalah salah satu antibiotik yang dipakai untuk mengobati penyakit pneumonia. (40) Berdasarkan penelitian ini, kontrol positif dengan dosis 50  g/ml menunjukkan hasil jernih tanpa endapan, selain itu pada pemeriksaan identifikasi Gram menunjukkan hasil negatif yang berarti sudah tidak terdapat bakteri pada tabung reaksi tersebut. Hal tersebut dikarenakan levofloksasin memiliki efek antibakterial dengan spektrum luas, aktif terhadap bakteri gram-positif dan gram-negatif termasuk bakteri anaerob.(41) Menurut penelitian Grillon (2016) levofloxacin mempunyai efek bakterisida dan bakteriostatik walaupun dengan dosis yang rendah.(40) Menurut Riahifard (2017) levofloxacin menghambat enzim penting, topoisomerase, yang diperlukan oleh sel bakteri untuk pembelahan sel DNA.(42) 4.2.1 Keterbatasan

Keterbatasan pada penelitian ini adalah: 1. Tidak dilakukannya metode hitungan cawan atau Total Plate Count.

5

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan

1. Ekstrak kulit buah durian Raja Galuh ( Durio zibethinus M.) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella bakteri Klebsiella pneumoniae. 2. Ekstrak kulit buah durian Raja

Galuh ( Durio zibethinus M.) dengan

konsentrasi 0,20% dan 0.39% efektif dapat menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella bakteri Klebsiella pneumoniae. pneumoniae. 5.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut menggunakan metode lain, seperti menguhitung daya hambat, metode hitungan cawan atau Total Plate Count, dan lain-lain. 2. Perlu dilakukan penelitian uji bioautografi pada ekstrak kulit buah durian Raja Galuh ( Durio Durio zibethinus M.) agar yang memiliki aktivitas sebagai antibakteri dapat diketahui.

38

39

6

DAFTAR PUSTAKA

1.

Ottosen J, Evans H. Pneumonia. Surg Clin North Am [Internet]. 2014.

2.

Kementrian Kesehatan. Profil Data Kesehatan Indonesia Tahun 2015. Jakarta: Kementerian Kesehatan RI. 2015.

3.

Bott R. Data Kesehatan di Jawa Barat. Igarss 2014.

4.

PDPI. Pneumonia komuniti 1973 - 2003. Pedoman diagnosis dan penatalaksanaan. 2003.

5.

Ishida T. Treatment of pneumonia in the elderly. Japanese J Chest Dis. 2013.

6.

Penjumras P, Rahman RBA, Talib RA, Abdan K. Extraction and Characterization of Cellulose from Durian Rind. Agric Agric Sci Procedia [Internet]. 2014.

7.

Azhari F. Aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah durian (Durio zibethinus Murr.) terhadap Staphylococcus epidermidis dan Shigella sonnei serta bioautografinya. 2015.

8.

Faizah LH. Aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah durian (Durio zibethinus Murr) terhadap Klebsiella pneumoniae dan Streptococcus pyogenes serta bioautografinya. 2015.

9.

Arlofa N. Uji Kandungan Senyawa Fitokimia Kulit Durian sebagai Bahan Aktif Pembuatan Sabun. 2015.

10.

Duazo NO. Crude methanolic extract activity from rinds and seeds of native

durian

(Durio

zibethinus)

against

Escherichia

coli

and

Staphylococcus aureus. African J Microbiol Res. 2012. 11.

Surasak Thanutchapisut, Oraphin chantarasriwong, Punchira Wongsawasdi ST. A study of antibacterial activity of Durio zibethinus MURRAY. Pure Appl Chem Int Conf. 2015.

12.

Masrol SR, Ibrahim MHI, Adnan S. Chemi-mechanical Pulping of Durian Rinds. Procedia Manuf. 2015.

13.

DiBardino DM, Wunderink RG. Aspiration pneumonia: A review of modern trends. Vol. 30, Journal of Critical Care. 2015.

40

14.

Nair GB, Niederman MS. Nosocomial Pneumonia. Lessons Learned. Vol. 29, Critical Care Clinics. 2013.

15.

Victorian Department of Human Services. Pneumonia [Internet]. Better Health Channel. 2014.

16.

Metersky ML, Masterton RG, Lode H, File TM, Babinchak T. Epidemiology, microbiology, and treatment considerations for bacterial pneumonia complicating influenza. Vol. 16 , International Journal of Infectious Diseases. 2012.

17.

(UK)

NCGC.

Pneumonia

[Internet]. Pneumonia:

Diagnosis

and

Management of Community- and Hospital-Acquired Pneumonia in Adults. 2014. 18.

Gereige RS, Laufer PM. Pneumonia. Pediatr Rev [Internet]. 2013.

19.

Kasper D, Fauci A, Hauser S, Longo D, Jameson J, Loscalzo J. Harrison’s Principles of Internal Medicine. Star. 2015.

20.

Sudoyo AW, Setiyohadi B, Alwi I, Simadibrata M, Setiadi S. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid 3. Interna Publishing. 2014.

21.

National

Clinical

Guideline

Centre. Pneumonia:

Diagnosis

and

Management of Community- and Hospital-Acquired Pneumonia in Adults. Clin Guidel Draft Consult [Internet]. 2015. 22.

Vinay Kumar, Ramzi S. Cotran SLR. Buku Ajar Patologi Robbins. Patologi. 2013.

23.

Musher DM, Thorner AR. Community-Acquired Pneumonia. N Engl J Med [Internet]. 2014.

24.

Li B, Zhao Y, Liu C, Chen Z, Zhou D. Molecular pathogenesis of Klebsiella pneumoniae. Future Microbiol [Internet]. 2014.

25.

Delost MD, Delost P and D of CLPYSUYOME. Introduction to Diagnostic Microbiology for the Laboratory Sciences [Internet]. Vlsi Design. 2014.

26.

Bauman RW. Microbiology with Diseases by Body System, 4th Edition. Pearson Education, Inc., Benjamin Cummings. .ISBN-13: 978-0-32191855-0. 2014.

27.

Yuniarti. Inventarisasi dan Karakterisasi Morfologis Tanaman Durian

41

(Durio zibethinus Murr.). Plasma Nutfah. 2011. 28.

Siddiq M, Nasir M. Dragon Fruit and Durian. In: Tropical and Subtropical Fruits: Postharvest Physiology, Processing and Packaging. 2012.

29.

Wong KC, Tie DY. Volatile constituents of durian (Durio zibethinus Murr.). Flavour Fragr J. 1995.

30.

Siriphanich J, Saen K, Asia E. Durian (Durio zibethinus Merr.) [Internet]. Book chapter. 2011.

31.

Huynh DTN, Kim AY, Kim YR. Identification of pathogenic factors in Klebsiella

pneumoniae

using

impedimetric

sensor

equipped

with

biomimetic surfaces. Sensors (Switzerland). 2017. 32.

Andriyawan F. Fariza Andriyawan NIM I11110036. 2015.

33.

Online IP, Sivananthan M, Elamaran M, Tras J, Kemacahaya J, Kemacahaya T. In vitro evaluation of antibacterial activity of chloroform extract Andrographis paniculata leaves and roots , Durio zibethinus wood bark and Psidium guajava leaves against selected bacterial strains Department of Biomedical Science , Faculty of Biomedici. 2013.

34.

Cushnie TPT, Lamb AJ. Antimicrobial activity of flavonoids. Int J Antimicrob Agents. 2005.

35.

Trentin DS, Silva DB, Amaral MW, Zimmer KR, Silva M V., Lopes NP, et al.

Tannins

Possessing

Bacteriostatic

Effect

Impair

Pseudomonas

aeruginosa Adhesion and Biofilm Formation. PLoS One. 2016. 36.

Si Heung Sung. Antibacterial and antioxidant activities of tannins extracted from agricultural by-products. J Med Plants Res [Internet]. 2012.

37.

Cushnie TPT, Cushnie B, Lamb AJ. Alkaloids: An overview of their antibacterial, antibiotic-enhancing and antivirulence activities. Int J Antimicrob Agents. 2014.

38.

Rebamang AM, Mandlakayise LN, Thandeka VD, Andy RO. Antibacterial activity of two triterpenes from stem bark of Protorhus longifolia. J Med Plants Res [Internet]. 2014.

39.

kitprathaung Nustha NN. Rind on Immune Responses , Bacteria Counts

42

and

ผลของสารสก ั ดเจลพอล ั แซ ั กคาไรด ั จากเปล ั อกท ั เร ั ยน

Durio zibethinus ต ั 40.

อการตอบสนองทาง . 2013.

Grillon A, Schramm F, Kleinberg M, Jehl F. Comparative activity of ciprofloxacin,

levofloxacin

and

moxifloxacin

against

Klebsiella

pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa and Stenotrophomonas maltophilia assessed by minimum inhibitory concentrations and time-kill studies. PLoS One. 2016. 41.

Fish DN, Chow AT. The clinical pharmacokinetics of levofloxacin. Vol. 32, Clinical Pharmacokinetics. 2015.

42.

Riahifard N, Tavakoli K, Yamaki J, Parang K, Tiwari R. Synthesis and evaluation

of

antimicrobial

activity

of

[R4W4K]-levofloxacin

[R4W4K]-levofloxacin-Q conjugates. Molecules. 2017.

and

LAMPIRAN Lampiran 1. Surat Ethical Clearence

43

44

Lampiran 2. Surat Rekomendasi Kesbangpol Kota Cirebon

45

Lampiran 3. Surat Keterangan Pemakaian Laboratorium Biomedis Fakultas

Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati

46

Lampiran 4. Sertifikat Uji Taksonomi Tanaman Durio zibethinus Murr.

47

Lampiran 5. Surat Keterangan Ekstraksi Kulit Buah Durian Raja Galuh

48

Lampiran 6. Perhitungan Pengenceran Ekstrak Kulit Buah Durian

Penelitian ini menggunakan 12 kelompok perlakuan yang terdiri dari 1 kelompok kontrol positif (Levofloxacin 50  g/ml), 1 kelompok kontrol negatif (DMSO 10% 1ml), 100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,13%, 1,56%, 0,78%, 0,39%, 0,20%. Pengenceran bertujuan untuk menghasilkan beberapa konsentrasi yang akan digunakan dari konsentrasi ekstrak kulit buah durian yang mempunyai aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae. Konsentrasi

awal

dariekstrak

kulit

buah

durian

adalah

100%.Masing-masing diencerkan menjadi konsentrasi yang diinginkan sebanyak 1 ml menggunakan pelarut DMSO 10%. Berikut ini adalah rumus pengenceran : N1·V1=N2·V2 Keterangan : N1 = Normalitas sebelum pengenceran V1 = Volume sebelum pengenceran N2 = Normalitas setelah pengenceran V2 = Volume setelah pengenceran Pengenceran dibuat dalam konsentrasi sebagai berikut: 1.

Perlakuan 1 konsentrasi ekstrak 100% 1mL ekstrak kulit buah durian.

2.

Perlakuan 2 konsentrasi ekstrak 50% adalah 0,50 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. )dicampur 0,50 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 50·1

= 100·V2

V2 = 0,5 ml 3.

Perlakuan 3 konsentrasi ekstrak 25% adalah 0,25 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) dicampur 0,75 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 25·1

= 100·V2

49

V2 = 0,25 ml 4.

Perlakuan 4 konsentrasi ekstrak 12,5% adalah 0,125 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 12,5·1

= 100·V2

V2 = 0,125 ml 5.

Perlakuan 5 konsentrasi ekstrak 6,25% adalah 0,063 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 6,25·1

= 100·V2

V2 = 0,0625 ml 6.

Perlakuan 6 konsentrasi ekstrak 3,13% adalah 0,031 mLekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) dicampur 0,969 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 3,13·1 = 100·V2 V2 = 0,0313 ml 7. Perlakuan 7konsentrasi ekstrak 1,56% adalah 0,0156 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. )dicampur 0,984 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 1,56·1= 100·V2 V2 = 0,0156 ml 8. Perlakuan 8 konsentrasi ekstrak 0,78% adalah 0,0078 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) dicampur 0,9922 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 0,78·1

= 100· V2

V2

= 0,0078 ml

50

9. Perlakuan 9 konsentrasi ekstrak 0,39% adalah 0,0039 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) dicampur 0,9961 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 0,39·1

= 100· V2

V2

= 0,0039 ml

10. Perlakuan 10 konsentrasi ekstrak 0,20% adalah 0,002 mL ekstrak kulit buah durian (Durio zibethinus M. ) dicampur 0,998 mL DMSO 10% sampai volume 1 mL. N1·V1 = N2·V2 0,20·1

= 100· V2

V2

= 0,002 ml

11. Kontrol positif adalah Levofloxacin 50  g/ml 12. Kontrol negatif adalah DMSO 10% volume 1 mL.

51

Lampiran 7. Dokumentasi Penelitian

Alat dan bahan.

Bakteri Klebsiella pneumoniae.

Ekstrak kulit buah durian Raja Galuh.

Pembuatan perlakuan.

52

Kontrol positif (K+).

Perlakuan I dengan konsentrasi 100%.

Kontrol negatif (K-).

Perlakuan II dengan konsentrasi 50%.

53

Perlakuan IV dengan konsentrasi 12,5% Perlakuan III dengan konsentrasi 25%.

Perlakuan V dengan konsentrasi 6,25%. Perlakuan 3,13%.

VI

dengan

konsentrasi

54

Perlakuan VII dengan konsentrasi 1,56%.

Perlakuan

VIII

dengan

konsentrasi

0,78%.

Perlakuan IX dengan konsentrasi 0,39%.

Perlakuan X dengan konsentrasi 0,20%.

55

Kelompok perlakuan Perlakuan I dengan konsentrasi 100%.

Perlakuan II dengan konsentrasi 50%

Perlakuan 0,39%.

IX

dengan

konsentrasi

56

Perlakuan X dengan konsentrasi 0,20%.

57

Lampiran 5 BIODATA MAHASISWA PENELITI

Nama Lengkap

: Mutiara Taslimah

NPM

: 114170044

Jenis kelamin

: Perempuan

Tempat, Tanggal Lahir

: Tangerang, 20 Juni 1996

Asal Institusi

: Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon

Agama

: Islam

No. HP

: 087767891997

Email

: [email protected]

Alamat

: JL. H.R. Rasuna Said No.8 RT.02/002 Kelurahan Pakojan Kecataman Pinang Kota Tangerang

Riwayat Pendidikan

: TK Miftahul Huda SDN Cipete 3 SMPN 13 Tangerang SMAN 3 Tangerang

Pendidikan Sekarang

: Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati

Proposal Paling Bener

Recommend Documents