http://slideplayer.info/slide/2380815/ https://prezi.com/p9rcwf84v6kd/pengaruh-ph-terhadap-aktivitas-enzim/ Enzim merupakan sekelompok protein dengan sifat khasnya yang berfungsi se bagai katalisator untuk berbagai reaksi kimia dalam sistem biologis di dalam tubuh manusia, tanpa adanya katalisator dalam tubuh, reaksi kimia akan berlangsung sangat lambat. . Pada percobaan kali ini, dilakukan uji pengaruh pH terhadap aktivitas enzim. Larutan dalam tabung reaksi yang berisi HCl dan campuran larutan penyangga , substrat, larutan NaCl serta enzim yang kemudian ditambahkan dengan larutan KI-KIO3 mengalami perubahan warna menjadi biru gelap. Fungsi dari larutan KIKIO3 adalah sebagai penyedia yodium yang kemudian akan bereaksi dengan HCl, dalam suasana yang asam maka KI-KIO3 akan melepaskan I2. Berikut merupakan rekasi pelepasan I2 dari KIKIO3 : 5KI + KIO3 + HCl --> 3I2 + KCl + 3H 2O Pada percobaan didapatkan larutan yang berwarna biru gelap setelah penambahan KI-KIO3, hal ini menandakan bahwa substrat yang digunakan adalah amilum, karena amilum akan menghasilkan warna biru ketika berekasi dengan iodium. Sedangkan enzim yang digunakan adalah amilase . Amilase adalah suatu endopolisakaridase , jadi tidak dapat memotong glukosa yang terletak di ujung, selain itu juga juga tak dapat memotong ikatan αα -(1→4) pada glukosa yang terletak sebelum titik cabang. Sedangkan amilum terdri dari amilosa dan amilopektin. Produk hasil pemecahan amilosa adalah maltosa dan sedikit glukosa. Pada praktikum, kelompok B14 menggunkan pH 8, setelah penambahan KI-KIO3 warna larutan pada tabung reaksi dengan waktu yang semakin lama berubah menjadi kunimg, hal ini menandakan pencernaan terjadi dengan sempurna dan menghasilkan maltosa, maltosa sendiri tidak berwarna apabila berekasi dengan yodium sehingga warna larutan adalah warna yodium yaitu kuning. Selain itu , dalam
tabung rekasi juga terdapat larutan penyangga yang berfungsi berfungsi untuk
memberikan pH untuk larutan (dalam praktikum, kelompok B14 menggunkan pH 8). Larutan penyangga juga berfungsi untuk mempertahankan pH selama percobaan. Sementara larutan NaCL 0,9 % dalam percobaan ini berfungsi sebagai aktivator dari enzim amilase. Larutan HCl selain berfungsi agar terjadi pelepasan I2, HCl juga berfungsi untuk menghentikan kinerja enzim, sehingga ketika larutan dipindahkan dipindahkan ke tabung reksi dan dicampur dengan dengan HCl , kerja enzim dapat dihentikan dan substrat yang telah dicerna dari tiap menit yang berbeda dapat dibandingkan. dibandingkan. HCl
sebagai asam kuat bekerja menghentikan kerja enzim dengan cara menyebabkan enzim
mengalami denaturasi.
Aktivitas enzim dapat diukur dari beberapa nilai pH. Enzim mempunyai aktivitas paling besar pada pH optimumnya. Berdasarkan literatur, aktivitas amilase total kemungkinan dapat terjadi pada nilai pH dengan interval 5,5 – 7,0, yaitu sesuai dengan data dari literatur yaitu dimana pH untuk amilase signifikan berada antara 4,5 - 8,0 (Ciornea, 2008). Pada praktikum digunakan grafik yang membandingkan antara prosentase substrat yang dicerna (ΔS) dan waktu (t). Pada pH optimum harga ΔS/t selalu lebih besar dibandingkan pH yang lain. Berdasarkan grafik hubungan antara ΔS/t pada grafik 2, didapatkan hasil bahwa pH optimum terjadi pada pH 6,5 dimana pada saat itu substrat yang tercerna mencapai 91,12 % dalam waktu 20 menit, sementara pH yang lain lebih rendah. Dalam waktu 20 menit, substrat yang tercerna pada pH 4 sebanyak 1%, pH 5 27,98% , pH 8 89,5%, dan pH 10 8,7%. Grafik ΔS/t atau disebut juga progress curve menggambarkan banyaknya substrat yang tercerna terhadap waktu. Pada grafik didaptkan kurva yang awalnya naik kemudian akan berbelok menjadi landai, hal ini dapat dikarenakan aktivitas enzim yang semakin berkurang karena semakin lama jumlah substrat yang tercerna semakin sedikit. Selain itu juga dapat disebabkan oleh adanya mekanisme hambatan dari produk ( product inhibition) . Hasil pada grafik 2 menunjukkan bahwa pada pH 4 dan pH 10 terjadi penurunan kurva , hal ini diiikarenakan pH yang terlau rendah ataupun pH yang terlalu tinggi, mengakbatkan enzim kurang aktif bekerja karena terjadi denaturasi enzim .Untuk enzim, pH dapat mempengaruhi aktivitas dengan mengubah struktur atau dengan mengubah muatan residu fungsional pada pengikatan substrat atau katalisis. Pada pH yang rendah, Enzim (Enz) mengalami protonasi dan kehilangan muatan negatifnya. Pada pH yang tinggi, SH + mengalami ionisasi dan kehilangan muatan positifnya. Nilai pH yang ekstrim akan menurunkan konsentrasi efektif enzim dan SH+ dan demikian menurunkan kecepatan reaksi.
Misalnya E- dan SH + --> ESH
Bila pH> maka SH+ --> S + H + S tidak dapat berikatan dengan E -
Bila pH < maka E- bereaksi dengan H+ --> EH EH tidak dapat berikatan dengan SH +
KESIMPULAN Berdsarkan hasil praktikum dapat disimpulkan bahwa enzim dapat bekerja optimal pada pH optimum 6,5-8. Pada pH yang terlalu rendah (pH 4) atau pH yang terlalu tinggi (pH 10) mengakibatkan enzim kurang aktif bekerja karena terjadi denaturasi enz im. JAWABAN PERTANYAAN
1. buatlah bagan 2. S= amilum E= amilase Amilase adalah suatu endopolisakaridase , jadi tidak dapat memotong glukosa yang terletak di ujung, selain itu juga tak dapat memotong ikatan α -(1→4) pada glukosa yang terletak sebelum titik cabang. Sedangkan amilum terdri dari amilosa dan amilopektin. Produk hasil pemecahan amilosa adalah maltosa dan sedikit glukosa. Pada praktikum, kelompok B14 menggunkan pH 8, setelah penambahan KI-KIO3 warna larutan pada tabung reaksi dengan waktu yang semakin lama berubah menjadi kunimg, hal ini menandakan pencernaan terjadi dengan sempurna dan menghasilkan maltosa, maltosa sendiri tidak berwarna apabila berekasi dengan yodium sehingga warna larutan adalah warna yodium yaitu kuning. 3. Initial velocity merupakan kecepatan dimana kurva masih mendekati garis lurus. Cara mengukur initial velocity dengan cara dihitung dengan progress curve
4. suhu pH kadar enzim kadar substrat inhibitor aktivator 5. HCl akan berekasi dengan KI-KIO3 sehingga terjadi pelepasan I2, sela in itu HCl juga berfungsi untuk menghentikan kinerja enzim 6 .
Spektrum yang diinginkan dari sumber cahaya akan ditangkap oleh filter, kemudian kemurnian akan ditingkatkan oleh slit sehingga didapatkan panjang gelombang tertentu . Sinar kemudian akan diteruskan dari kuvet yang berisi cairan yang diperiksa menuju ke fotossel. Pada fotosel terjadi perubahan energi sinar menjadi energi listrik. Galvanometer akan mengubah energi listrik menjadi energi mekanik yang akan menggerakkan jarum . nilai absorbance didpatkan berdasarkan sinar yang diserap Sumber Ciornea, E., Vasile, G., Cojocaru, D., 2008, On The Influence Of The Temperature And pH Of The Incubation Medium On The Activity Of Total Amylase In Some Spontaneous And Cultivated poaceae, (online) (http://www.bio.uaic.ro/publicatii/anale_biochimie/2008_IX_F1/2008_Anale_GBM_I X_F1_l14.pdf ,diakses 7 Oktober 2017.)
