Pengaruh pH dan Temperatur terhadap Aktivitas Enzim Amilase OK.docx

LAPORAN PRAKTIKUM
BIOKIMIA
PENGARUH pH DAN TEMPERATUR
TERHADAP AKTIVITAS ENZIM AMILASE
NAMA : DIAN EKA PERTIWI
NIM : H31114 029
KELOMPOK : I (SATU)
HARI/ TANGGAL PERCOBAAN : SELASA/ 5 APRIL 2016
ASISTEN : DWI NICHE

LABORATORIUM BIOKIMIA
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2016
BAB I
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Enzim merupakan katalis yang mengatalisis perubahan satu atau lebih senyawa (substrat) menjadi satu atau lebih senyawa lain (produk) dengan mampu meningkatkan laju reaksi setidaknya 106 kali dibandingkan jika tidak dikatalisis. Selain sangat efisien enzim juga merupakan katalis yang sangat selektif. Tidak seperti kebanyakan katalis yang digunakan dalam bidang kimia sintetik, enzim bersifat spesifik baik bagi tipe reaksi maupun substrat yang dikatalisis (Murray, dkk., 2009).
α-Amilase merupakan enzim yang berkaitan dengan pemecahan pati dan glikogen menjadi maltosa. Enzim ini terdapat pada getah pankreas dan saliva (Adugna, dkk., 2004). α-Amylase saliva yang juga dikenal sebagai ptyalin berperan dalam hidrolisis ikatan α-(1,4)-glukosida dalam polimer glukosa (Caballero, dkk., 2016). Hidrolisis pati (starch) dikatalisis oleh amilase liur dan amilase pankreas. Enzim α-amilase yang mengkatalisis reaksi hidrolisis ikatan glikosida α-(l,4) menghasilkan dekstrin, kemudian campuran glukosa, maltosa, dan isomaltosa (Murray, dkk., 2009).
Faktor-faktor yang mempengaruhi aktivitas enzim adalah aktivator enzim, inhibitor enzim, pH, suhu dan konsentrasi Enzim. Tiap enzim mempunyai pH dan suhu optimum tersendiri. Semakin jauh suhu dan pH dari kondisi optimumnya maka kerja enzim semakin tidak baik (Sumardjo, 2008). Berdasarkan uraian di atas, maka dilakukanlah praktikum tentang pengaruh pH dan temperatur terhadap aktivitas enzim amilase.
1.2 Maksud dan Tujuan Percobaan
1.2.1 Maksud Percobaan
Maksud dari percobaan ini adalah untuk mengetahui dan memahami pengaruh pH dan temperatur terhadap aktivitas enzim amilase dalam penguraian pati (amilum).

Tujuan Percobaan
Menentukan pH optimum untuk aktivitas enzim amilase dari penguraian pati (amilum).
Menentukan temperatur optimum untuk aktivitas enzim amilase dari penguraian pati (amilum).

1.3 Prinsip Percobaan
Pengaruh pH terhadap Aktivitas Enzim Amilase
Menentukan aktivitas dari enzim amilase berdasarkan waktu penguraian pati menjadi glukosa pada berbagai pH dengan penambahan iodin sebagai indikator yang memberi warna biru dan akan berubah menjadi tidak berwarna.

Pengaruh Temperatur terhadap Aktivitas Enzim Amilase
Menentukan aktivitas dari enzim amilase berdasarkan waktu penguraian pati menjadi glukosa pada berbagai temperatur dan diuji dengan iodin pada interval waktu tertentu hingga warna biru yang terbentuk berubah menjadi tidak berwarna.

1.4 Manfaat Percobaan
Setelah mahasiswa melakukan percobaan ini mahasiswa mampu menentukan pH dan temperatur optimum untuk aktivitas enzim amilase dari penguraian pati (amilum).
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
Enzim
Enzim merupakan katalis yang mengatalisis perubahan satu atau lebih senyawa (substrat) menjadi satu atau lebih senyawa lain (produk) dengan mampu meningkatkan laju reaksi setidaknya 106 kali dibandingkan jika tidak dikatalisis. Selain sangat efisien enzim juga merupakan katalis yang sangat selektif. Tidak seperti kebanyakan katalis yang digunakan dalam bidang kimia sintetik, enzim bersifat spesifik baik bagi tipe reaksi maupun substrat yang dikatalisis (Murray, dkk., 2009). Enzim merupakan suatu protein, sehingga sulit mengetahui rumus dan strukturnya. Oleh sebab itu, nama enzim tidak berdasarkan senyawa, melainkan dari nama reaksi yang dipercepat dan ditambah akhiran 'ase'. Dalam reaksi redoks, misalnya enzimnya disebut oksidoreduktase (Syukri, 1999).
Menurut Stoker (2007), enzim dikelompokkan ke dalam enam kelas utama berdasarkan tipe reaksi katalisisnya, yaitu:
Oksidoreduktase (enzim yang mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi).
Transferase (enzim yang mengkatalisis reaksi pemindahan gugus dari satu molekul ke molekul lain).
Hidrolase (enzim yang mengkatalisis reaksi hidrolisis).
Liase (enzim yang mengkatalisis reaksi penambahan gugus ke ikatan rangkap atau pelepasan gugus dari ikatan rangkap tanpa melibatkan reaksi hidrolisis atau oksidasi).
Isomerase (enzim yang mengkatalisis reaksi penataan ulang gugus fungsi dalam sebuah molekul).
Ligase (enzim yang mengkatalisis reaksi pembentukan ikatan antara dua molekul menjadi satu molekul dengan bantuan ATP).

Enzim Amilase
Hidrolisis pati (starch) dikatalisis oleh amilase liur dan amilase pankreas. Enzim α-amilase yang mengkatalisis reaksi hidrolisis ikatan glikosida α-(l,4) menghasilkan dekstrin, kemudian campuran glukosa, maltosa dan isomaltosa (Murray, dkk., 2009).
Pemecahan polisakarida yakni pati dimulai di mulut. α-Amilase saliva yang juga dikenal sebagai ptialin berperan dalam hidrolisis ikatan α-(1,4)-glukosida dalam polimer glukosa. Enzim ini tidak bisa menghidrolisis ikatan α-(1,6) dalam polimer bercabang, terminal ikatan α-(1,4) dan ikatan α-(1,4) dekat titik percabangan sehingga produk utama dari pencernaan amilase adalah oligosakarida, maltose, maltotriosa dan α-dekstrin (Caballero, dkk., 2016).

Aktivitas Enzim
Aktivitas amilase ditentukan berdasarkan kadar glukosa hasil hidrolisis pati dengan menggunakan metode Nelson-Somogy. Aktivitas optimum amilase hasil ekstraksi menggunakan etanol ialah pada pH 5,0 dan suhu 50 °C (Iswendi, 2010).
Hashemi, dkk., (2013) meneliti tentang produksi α-amilase oleh Bacillus sp. KR-8104 pada temperatur yang berbeda dalam fermentasi terendam (submerged fermentation, SMF). Kemudian pengaruh suhu dan pH pada aktivitas α-amilase yang dihasilkan melalui SMF diselidiki menggunakan metodologi respon permukaan (response surface methodology, RSM) dan hasilnya dibandingkan dengan yang diperoleh dari fermentasi keadaan padat (SSF). Produksi maksimum dan minimum α-amilase tercatat sebesar 3824 U L-1 (37 °C) dan 662 U L-1 (30 °C). Meskipun terjadi peningkatan dalam konsumsi dekstrin, penurunan yang signifikan dalam produksi α-amilase pada suhu 45 °C sebesar 3035 U L-1 dibandingkan dengan yang diamati pada 37 °C.

Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Enzim
Menurut Sumardjo (2008), ada beberapa faktor yang mempengaruhi aktivitas enzim yakni:
Aktivator Enzim
Aktivator enzim adalah zat-zat yang mempunyai peranan dalam meningkatkan aktivitas suatu enzim. Kebanyakan aktivator adalah ion-ion anorganik, terutama ion logam atau kation. Aktivator yang baik untuk enzim deoksiribonuklease adalah ion-ion Mg2+, Mn2+, Co2+ dan Fe2+, sedangkan aktivator yang lemah untuk enzim ini adalah ion-ion Ca2+, Ba2+, Sr2+ dan Cd2+. Selain aktivator kation, ada juga aktivator anion, misalnya aktivator ion Cl¯ untuk amilase ludah atau ptialin.
Inhibitor Enzim
Inhibitor atau penghambat suatu enzim adalah suatu senyawa atau zat yang dapat menghalangi aktivitas kerja enzim. Berdasarkan sifat kestabilan penghambatan, penghambatan enzim dapat dibedakan atas penghambatan reversible (tak stabil) dan penghambatan irreversible (stabil). Penghambatan reversible dibedakan atas dua golongan yaitu penghambatan kompetitif dan non kompetitif.
pH
Tiap enzim mempunyai pH optimum tersendiri (misalnya pepsin = 1,5, steapsin = 8,0, amilopepsin = 7,0). Jika pH ini dilewati atau dilampaui maka aktivitas enzim semakin menurun.
Suhu
Tiap enzim memiliki suhu optimum yaitu ketika enzim tersebut dapat bekerja dengan baik. Semakin jauh dari suhu optimum maka kerja enzim semakin tidak baik. Daerah atau kisaran suhu ketika kerja atau laju reaksi enzim masih baik disebut suhu optimum. Suhu optimum untuk enzim-enzim yang terdapat dalam tubuh adalah berkisar 36 °C - 40 °C.
Konsentrasi Enzim
Jumlah enzim menentukan lamanya waktu yang digunakan untuk mencapai kesetimbangan. Kecepatan reaksi atau aktivitas enzim berbanding lurus dengan konsentrasi enzimnya.

Saliva
Dalam kondisi fisiologis normal manusia memproduksi saliva (air liur) sekitar 0,5-1,0 liter per hari. Beberapa kelenjar saliva seperti kelenjar parotis dan kelenjar lingual minor adalah kelenjar serosa murni. Kedua kelenjar itu menghasilkan saliva berair dengan kandungan enzim (amilase dan lipase) yang tinggi pada saat stimulasi. Kelenjar palatal kecil menghasilkan saliva yang lebih kental dan lebih banyak (Pedersen, 2007).

Pati
Pati berbeda dengan selulosa. Pada selulosa monomer D-glukosa satu dengan yang lain secara β, sedangkan pada pati monomer D-glukosa terhubung secara α. Pati merupakan cadangan karbohidrat bagi tanaman dan seperti halnya selulosa, pati akan terhidrolisis dalam suasana asam menjadi monomer D-glokopiranosa. Sumber utama pati adalah beras, singkong, gandum, jagung, kentang, ketela, umbi dan lain-lain. Molekul pati umumnya terdiri dari 20 % amilosa dan 80 % amilopektin. Namun demikian, ada jiga jenis pati yang hanya terdiri dari amilosa saja atau amilopektin saja (Riswiyanto, 2009).
Bengkoang
Pada penelitian yang dilakukan oleh Syofyan, dkk., (2012) diperoleh rendemen pati sebesar 3,38%. Rendemen merupakan hasil perbandingan dari jumlah pati yang didapat (1,3554 kg) dengan jumlah umbi bengkoang yang digunakan (40 kg). Berdasarkan pengujian/ evaluasi tablet yang dilakukan meliputi keseragaman bobot, keseragaman ukuran, kekerasan, kerapuhan, waktu hancur, perhitungan kadar isoniazid dalam sediaan dan disolusi tablet disimpulkan bahwa pati bengkoang dapat dikembangkan menjadi eksipien co-process bahan pengisi tablet cetak langsung dengan peningkatan konsentrasi avicel PH101.
Pati bengkoang memperlihatkan sifat fungsional yang sama untuk sebagian besar pati dari umbi-umbian. Suhu gelatinisasi (53-63 °C) dan suhu adonan (64.5 °C) lebih kecil dibanding pati gandum, namun daya pembengkakannya tinggi (54,4 g gel/ g pati kering). Adonan pati bengkoang menyajikan profil viskositas yang tinggi, kecenderungan gradasi-mundur yang tinggi dan stabilitas rendah pada saat memasak. Sifat fungsional dari pati bengkoang, mirip dengan pati singkong, memungkinkan bengkoang untuk digunakan sebagai sumber pati baru yang potensial (Melo, dkk., 2003).

BAB III
METODE PERCOBAAN
Bahan Percobaan
Bahan yang digunakan pada percobaan ini antara lain larutan amilum 1 %, saliva encer (enzim amilase), es batu, buffer fosfat pH 8,0; 7,4; 7,0; 6,8; 6,4; 6,0; 5,8 dan 5,0, NaCl 0,1 M, asam asetat 1 M, iodin 0,01 M, akuades, tissue roll, kertas label dan sabun cair.

Alat Percobaan
Alat yang digunakan pada percobaan ini antara lain tabung reaksi, rak tabung, sikat tabung, gelas kimia 600 mL, pipet tetes, plat tetes, labu semprot, gegep, inkubator, penangas air, vortex, tabung ukur 10 mL dan stopwatch.

Prosedur Percobaan
Saliva diencerkan dengan akuades dengan perbandingan 1:9. Disiapkan 8 buah tabung reaksi dan masing-masing diisi dengan 5 mL larutan buffer berturut-turut pH 8,0; 7,4; 7,0; 6,8; 6,4; 6,0; 5,8 dan 5,0. Kemudian ke dalam larutan buffer ini ditambahkan 2,5 mL larutan pati 1% dan 1 mL NaCl 0,1 M. Tabung yang berisi larutan pH 8,0; 7,4 dan 7,0 ditambahkan 1 mL asam asetat. Kemudian ditambahkan 6 tetes iodin 0,01 M. Tabung dimasukkan ke dalam inkubator selama 5 menit. Dikeluarkan dari inkubator dan ditambahkan 1 mL saliva encer ke dalam masing-masing tabung kemudian dimasukkan kembali ke dalam inkubator. Setiap interval 5 menit dilihat perubahan warna sampai pada menit ke 35. Waktu masing-masing perubahan yang terjadi dicatat dan ditentukan pH optimumnya dari grafik yang diperoleh.

Disiapkan 4 buah tabung reaksi dan masing-masing diisi dengan 5 mL larutan amilum 1 % lalu ditambahkan 2 tetes saliva. Tabung reaksi pertama dimasukkan ke dalam air es (0 °C), tabung reaksi kedua ditempatkan pada suhu kamar (25 °C), tabung reaksi ketiga dimasukkan ke dalam inkubator (38 °C) dan tabung reaksi keempat dimasukkan ke dalam air mendidih (100 °C). Setiap 5 menit, diambil campuran larutan pati dan saliva encer yang kemudian diteteskan sebanyak 2 tetes pada plat tetes yang telah berisi 1 tetes iodin 0,01 M. Diamati perubahan warna yang terjadi setiap interval waktu 5 menit. Ditentukan kecepatan penguraian masing-masing contoh dengan dilihat perubahan warna yang terjadi dan ditentukan temperatur optimum dari grafik yang diperoleh.

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Pengamatan
Tabel 1. Pengaruh pH terhadap Enzim Amilase
Waktu (menit)
Warna

pH 8,0
pH 7,4
pH 7,0
pH 6,8
pH 6,4
pH 6,0
pH 5,8
pH 5,0
0
+++++
+++++
+++++
+++++
+++++
+++++
+++++
+++++
5
+ +
+ +
+ + +
+ + +
+ + + +
+ + + +
+ + +
+ + +
10
+
+ +
+ +
+ +
+ + + +
+ + + +
+ + +
+ + +
15

+
+ +
+ +
+ + + +
+ + + +
+ + +
+ + +
20

+
+
+ + + +
+ + + +
+ +
+ +
25

+
+
+ + + +
+ + + +
+ +
+ +
30

+
+
+ + +
+ + +
+ +
+ +
35

+ +
+ + +
+ +
+ +
Keterangan :
+ + + + + = Biru tua + + = Sedikit kebiruan
+ + + + = Biru muda + = Mendekati tidak berwarna
+ + + = Agak kebiruan = Tidak berwarna

Tabel 2. Waktu Laju Perubahan Warna terhadap pH
pH Buffer
Waktu (t) (menit)
1/t
(detik-1)
8,0
15
0,0011
7,4
20
0,0008
7,0
35
0,0005
6,8
35
0,0005
6,4

0,0000
6,0

0,0000
5,8

0,0000
5,0

0,0000
pH optimum
pH optimum
Gambar 1. Grafik hubungan pH terhadap aktivitas enzim amilase.
Tabel 1. Pengaruh Temperatur terhadap Enzim Amilase
Waktu (menit)
Warna

Tabung I
Tabung II
Tabung III
Tabung IV
0
+ + + + +
+ + + + +
+ + + +
+ + + + +
5
+ + + + +

+ + + +
+ + + + +
10
+ + + + +

+ + +
+ + + + +
15
+ + + +

+ +
+ + + + +
20
+ + +

+ + + + +
25
+ + +

+ + + + +
30
+ + +

+ + + + +
35
+ +

+ + + + +
40
+ +

+ + + + +
45
+ +

+ + + + +
50
+

+ + + + +
55
+

+ + + + +
Keterangan :
+ + + + + = Biru tua + + = Sedikit kebiruan
+ + + + = Biru muda + = Mendekati tidak berwarna
+ + + = Agak kebiruan = Tidak berwarna
Tabel 4. Waktu Laju Perubahan Warna terhadap Temperatur
Temperatur (°C)
Waktu (t) (menit)
1/t
(detik-1)
0
55
0.0003
25
5
0.0033
38
20
0.0008
100

0.0000

Temperatur Optimum
Temperatur Optimum
Gambar 2. Grafik hubungan temperatur terhadap aktivitas enzim amilase.
Pembahasan
pH optimum dari enzim amilase ditentukan dengan mengamati kecepatan reaksi katasis enzim amilase terhadap pati bengkoang yang ditandai dengan perubahan warna dari biru menjadi tidak berwarna. Pada percobaan ini digunakan larutan buffer fosfat dengan pH yang bervariasi. Variasi pH larutan buffer fosfat yakni pH 8,0; 7,4; 7,0; 6,8; 6,4; 6,0; 5,8 dan 5,0. Larutan pati 1 %, dan larutan NaCl 0,1 M ditambahkan ke dalam masing-masing larutan buffer fosfat tersebut. Asam asetat ditambahkan pada larutan buffer fosfat pH 8,0; 7,4 dan 7,0 untuk mengasamkan larutan tersebut. Larutan iodin 0,01 M diteteskan pada masing-masing tabung reaksi. Masing-masing tabung dimasukkan ke dalam inkubator selama 5 menit untuk menyamakan kondisinya. Saliva encer (dengan perbandingan saliva dalam air adalah 1:9) ditambahkan ke masing-masing tabung. Larutan pati bertindak sebagai substrat, NaCl sebagai penyuplai ion Cl¯ yang merupakan aktivator enzim amilase, iodin sebagai indikator pati yang akan memberikan warna biru dan saliva sebagai enzim amilase yang akan ditentukan pH optimumnya.
Perubahan warna dari biru menjadi tidak berwarna menunjukkan aktivitas dari enzim amilase. Enzim amilase mengidrolisis pati menjadi molekul yang lebih sederhana sehingga tes iodin akan memberi hasil negatif (tidak berwarna).
Berdasarkan hasil pengamatan setiap interval 5 menit diperoleh hasil pada pH 8,0 larutan berubah warna menjadi tidak berwarna pada menit ke 15, pada pH 7,4 larutan berubah warna menjadi tidak berwarna pada menit ke 20 dan pada pH 7,0 dan 6,8 larutan berubah warna menjadi tidak berwarna pada menit ke 35. Pada pH 6,4; 6,0; 5,8 dan 5,0 tidak menunjukkan perubahan warna menjadi tidak berwarna sampai pada menit ke 35 namun masing memberikan perubahan warna menjadi sedikit kebiruan, agak kebiruan, sedikit kebiruan dan sedikit kebiruan. Dari data yang diperoleh di atas dibuat grafik pengaruh pH terhadap aktivitas enzim amilase sehingga diperoleh pH optimum untuk aktivitas enzim amilase adalah pH 8.

Temperatur atau suhu optimum dari enzim amilase ditentukan dengan mengamati kecepatan reaksi katasis enzim amilase terhadap pati bengkoang yang ditandai dengan larutan tidak berubah warna menjadi dari biru (tetap tidak berwarna) setelah diteteskan pada iodin. Percobaan ini dilakukan pada kondisi yang bervariasi. Variasi kondisi yakni tabung reaksi pertama dimasukkan ke dalam air es (0 °C), tabung reaksi kedua ditempatkan pada suhu kamar (25 °C), tabung reaksi ketiga dimasukkan ke dalam inkubator (38 °C) dan tabung reaksi keempat dimasukkan ke dalam air mendidih (100 °C). Masing-masing tabung diisi dengan 5 mL larutan amilum 1 % lalu diteteskan saliva. Setiap 5 menit campuran larutan pati dan saliva encer diambil dan diteteskan pada plat tetes yang telah berisi iodin 0,01 M.
Berdasarkan hasil pengamatan setiap interval 5 menit diperoleh hasil pada suhu 0 °C larutan tetap memberi hasil positif terhadap uji iodin (larutan berubah warna menjadi biru) sampai pada menit ke 55 (larutan berwarna biru tapi mendekati tidak berwarna), pada suhu kamar (25 °C) larutan menunjukkan hasil negatif pada tes iodin (larutan tetap tidak berwarna) mulai pada menit ke 5, pada suhu 38 °C larutan menunjukkan hasil negatif pada tes iodin (larutan tetap tidak berwarna) mulai pada menit ke 20 dan pada suhu 100 °C larutan tetap memberi hasil positif terhadap uji iodin (larutan berubah warna menjadi buru) sampai pada menit ke 55 (larutan berwarna biru tua). Dari data yang diperoleh di atas dibuat grafik pengaruh temperatur terhadap aktivitas enzim amilase sehingga diperoleh temperatur optimum untuk aktivitas enzim amilase adalah pada 25 °C.

Reaksi

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Dari hasil percobaan yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa:
pH optimum untuk aktivitas enzim amilase adalah pH 8.
Temperatur optimum untuk aktivitas enzim amilase adalah pada 25 °C.

Saran
Saran Untuk Percobaan
Sebaiknya bahan yang digunakan untuk percobaan ini (enzim, indikator dan lain-lain) ditambah atau diganti dengan bahan yang lain.

Saran Untuk Laboratorium
Sebaiknya kondisi kelayakan alat dan bahan untuk praktikum seperti wastafel yang tersumbat dan bocor diperhatikan dan ditangani agar percobaan yang dilaksanakan dapat berjalan dengan lancar.

Saran Untuk Asisten
Saran untuk asisten adalah pertahankan sikap disiplin kakak dan selalu berusaha membimbing praktikannya agar menjadi lebih baik lagi.

DAFTAR PUSTAKA
Caballero, B., Finglas, P.M. dan Toldra, F., 2016, Encyclopedia of Food and Health, Elsevier, London.

Hashemi, M., Mousavi, S.M., Razavi, S.H. dan Shojaosadati, S.A., 2012, Comparison of submerged and solid state fermentation systems effects on the catalytic activity of Bacillus sp. KR-8104 a-amylase at different pH and temperatures, Industrial Crops and Products, 43(2013): 661– 667.

Iswendi, 2010, Penentuan Aktivitas Amilase dari Umbi Bengkuang (Pachyrrhizus erosus L. Urb) Hasil Ekstraksi dengan Etanol dan Ammonium Sulfat, Jurnal Saintek, 11(2): 94-98.

Melo, E.A., Stamford, T.L.M., Silva, M.P.C., Krieger, N. dan Stamford, N.P., 2002, Functional Properties of Yam Bean (Pachyrhizus erosus) Starch, Bioresource Technology, 89(2003): 103–106.

Murray, R.K., Granner, D.K. dan Rodwell, V.W., 2009, Biokimia Harper, Edisi 27, Ahli Bahasa Braham U. Pendit, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.

Pedersen, A.M.L., 2007, Saliva, University of Copenhagen, Kopenhagen.

Riswiyanto, 2009, Kimia Organik, Erlangga, Jakarta.

Stoker, H.S., 2007, General, Organic, and Biological Chemistry, Fourth Edition, Houghton Mifflin Company, Boston.

Sumardjo, D., 2006, Pengantar Kimia: Buku Kuliah Mahasiswa Kedokteran dan Program Strata 1 Fakultas Bioeksakta, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.

Syofyan, Yelni, E.A. dan Azhar, R., 2012, Penggunaan Kombinasi Pati Bengkuang – Avicel PH101 sebagai Bahan Pengisi Co-Process Tablet Isoniazid Cetak Langsung, Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi, 17(2): 164-171.

Syukri, S., 1999, Kimia Dasar 3, Penerbit ITB, Bandung.

Lampiran 1. Bagan Kerja
Tabung reaksiPengaruh pH terhadap Aktivitas Enzim Amilase
Tabung reaksi

Dibersihkan dan dikeringkan
Diisi dengan 5 mL larutan buffer fosfat pH 8; 7,4; 7,0; 6,8; 6,4; 6,0; 5,8 dan 5,0
Ditambahkan 2,5 mL larutan pati 1%
Ditambahkan 1 mL NaCl 0,1 M
Ditambahkan 1 mL asam asetat
Ditambahkan 6 tetes iodin 0,01 M
Dimasukkan ke dalam inkubator selama 5 menit
Dikeluarkan dari inkubator dan ditambahkan 1 mL saliva encer (1:9)
Diamati dan dicatat perubahan warna setiap interval 5 menit sampai pada menit ke 40 dan dicatat
Dibuat grafik
Ditentukan pH optimumnya
Hasil
Hasil

Catatan:
Pada larutan buffer fosfat pH 6,8; 6,4; 6,0; 5,8 dan 5,0 tidak dilakukan penambahan asam asetat.
Pengaruh Temperatur terhadap Aktivitas Enzim AmilaseTabung reaksi
Tabung reaksi

Dibersihkan dan dikeringkan
Diisi dengan 5 mL larutan pati 1%
Ditambahkan 2 tetes saliva encer (1:9)
Ditempatkan ke dalam wadah yang berisi es (0 °C), pada suhu kamar (25 °C), dalam inkubator (38 °C) dan dalam air mendidih (100 °C).
Diambil campuran larutan pati dan saliva encer kemudian diteteskan sebanyak 2 tetes pada plat tetes yang telah berisi 1 tetes iodin 0,01 M (dilakukan setiap 5 menit)
Diamati dan dicatat perubahan warna yang terjadi
HasilDitentukan kecepatan penguraian larutan pati oleh enzim amilase
Hasil

Lampiran 2. Foto Percobaan

Gambar 3. Percobaan pengaruh pH terhadap aktivitas enzim amilase menit ke 0.

Gambar 4. Percobaan pengaruh pH terhadap aktivitas enzim amilase menit ke 35.

Gambar 5. Percobaan pengaruh temperatur terhadap aktivitas enzim amilase pada suhu 0 oC.

Gambar 6. Percobaan pengaruh temperatur terhadap aktivitas enzim amilase pada suhu 36 oC.
pH
1/t

pH
1/t

Pengaruh pH dan Temperatur terhadap Aktivitas Enzim Amilase OK.docx

Recommend Documents