Laporan Biokim Uji Pengaruh PH

Laboratorium Biokimia Pangan

Enzim II (Uji Pengaruh pH)

I PENDAHULUAN Bab Bab ini ini akan akan meng mengur urai aika kan n meng mengen enai ai : (1) (1) Lata Latar r Bela Belaka kang ng Perc Percob obaa aan, n, (2) (2) Tujua ujuan n Perc Percob obaa aan, n, (3) (3) Prin Prinsi sip p Percobaan, dan (4) eaksi Percobaan! 1.1. Latar Belakang Belakang Percobaan Percobaan "n#im "n#im adala$ adala$ golong golongan an prote protein in %ang %ang paling paling ban%a ban%ak k terdapat dalam sel $idup! &ekarang, kira'kira lebi$ dari 2 en#im en#im tela$ tela$ teride teridenti ntiik ikasi asi,, %ang %ang masing masing'ma 'masin sing g berun berungsi gsi sebaga sebagaii katali katalisat sator or reaksi reaksi kimia kimia dalam dalam sistem sistem $idup! $idup! "n#im "n#im *milase adala$ suatu komponen %ang sangat penting saat pros proses es penc pencer erna naan an maka makana nan! n! Tanpa npa adan adan% %a en#i en#im m ini karb karbo$ o$id idra ratt %ang %ang kita kita kons konsums umsii tida tidak k akan akan bisa bisa beru beruba ba$ $ menjadi gula %ang nanti pada ak$irn%a diuba$ menjadi *TP %ang %ang sang sangat at pent pentin ing g dala dalam m meta metabo boli lism sme e mak$ mak$lu luk k $idu $idup! p! &ela &elain in berp berper eran an dala dalam m pros proses es penc pencer erna naan an amil amilas ase e juga juga memi memili liki ki ban% ban%ak ak peran peranan an pent pentin ing g lain lainn% n%a a baik baik %ang %ang bisa bisa dimanaatkan dalam bidang industri, kese$atan maupun untuk pembuatan makanan! (+ira$adikusuma$, 1-) &epert &epertii protei protein n pada pada umumn% umumn%a, a, strukt struktur ur ion ion en#im en#im tergantung pada p. lingkungann%a! "n#im dapat berbentuk ion positi, ion negati, atau ion bermuatan ganda ( zwitter ion)! ion )! /engan demikian peruba$an p. lingkungan akan berpen berpengar garu$ u$ ter$ad ter$adap ap eekti eekti0i 0itas tas bagian bagian akti akti en#im en#im dalam dalam membentuk kompleks en#im substrat! /i samping pengaru$ ter$adap struktur ion pada en#im, p. renda$ atau p. tinggi dapat pula men%ebabkan terjadin%a proses denaturasi dan ini akan mengakibatkan menurunn%a akti0itas en#im (Poedjiadi, 14)! 1.2. Tujuan Tujuan Percobaan ntuk ntuk menge mengeta$ ta$ui ui pengar pengaru$ u$ p. ter$ad ter$adap ap akti0 akti0ita itas s en#im!

1.3. Prinsi Percobaan



Berdasarkan pada semakin tinggi p. sampai batas optimum maka akti0itas en#im akan meningkat tetapi apabila meleati batas optimum akti0itas en#im akan menurun! 1.!. "eaksi Percobaan

"& "&

"& "P

#a$bar 1. "eaksi Percobaan Uji Pengaru% PH



II &ET'DE PE"('BAAN Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Ba$an %ang /igunakan, (2) Pereaksi %ang /igunakan, (3) *lat %ang /igunakan, dan (4) etode Percobaan! 2.1. Ba%an )ang Digunakan Ba$an %ang digunakan dalam ji pengaru$ p. adala$ * (bua$ pir), dan B (kacang kedelai)! 2.2. Alat )ang Digunakan *lat %ang digunakan dalam ji pengaru$ p. adala$ pipet tetes, dan tabung reaksi! 2.3. &eto*e Percobaan

#a$bar 2. &eto*e Percobaan Uji Pengaru% H



III HA+IL PEN#A&ATAN Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) .asil Pengamatan dan, (2) Pemba$asan! 3.1. Hasil Penga$atan Tabel 1. Hasil Penga$atan Uji Pengaru% H Ekstrak +ubs H H H %asil keterangan trat a,al ak%ir setela% *isi$an * 6 1 1 ' "n#im tidak akti Bua$ pir 5ate bekerja * 6 4 7  "n#im akti kol Bua$ pir bekerja * 6 6 8  "n#im akti Bua$ pir bekerja * 6 1 6  "n#im akti Bua$ pir bekerja B 6 1 1 ' "n#im tidak akti kedelai rea bekerja B 6 4 7  "n#im akti 5edelai bekerja B 6 6   "n#im akti 5edelai bekerja B 6 1   "n#im akti kedelai bekerja &umber : /icki *rianto dan /i *%u 9a$%anti, 5elompok , eja -, 214 5eterangan : () ; terjadi peruba$an p. (') ; tidak terjadi peruba$an p.



#a$bar 3. Hasil Penga$atan Uji Pengaru% H



3.2. Pe$ba%asan Berdasarkan $asil pengamatan uji pengaru$ p. ter$adap akti0itas en#im didapatkan $asil dari ekstark bua$ pir dengan substrat katekol, dimana en#im katekin positi akti bekerja pada p. 4, 6, dan 1 tetapi pada p. 1 tidak akti bekerja! &edangkan pada ekstrak kedelai dengan substrat urea, dimana en#im urease positi akti bekerja pada p. 4, 6, dan 1 tetapi pada p. 1 tidak akti bekerja! "n#im dikenal untuk pertama kalin%a sebagai protein ole$ &umner pada ta$un 128 %ang tela$ ber$asil mengisolasi urease dari 2 dan ?.3! Beberapa ta$un kemudian ?ort$rop dan 5unit# dapat mengisolasi pepsin, tripsin , kimotripsin! &elanjutn%a makin ban%ak en#im %ang tela$ dapat diisolasi dan tela$ dibuktikkan ba$a en#im tersebut iala$ suatu protein! (Poedjiadi, 14) &eperti protein pada umumn%a, struktur ion en#im tergantung pada p. lingkungann%a! "n#im dapat berbentuk ion positi, ion negati atau ion bermuatan ganda ( zwitter ion)! /engan demikian peruba$an p.lingkungan akan berpengaru$ ter$adap eekti0itas bagian akti en#im dalam membentuk kompleks en#im substrat! (Poedjiadi, 14) "n#im menunjukkan akti0itas maksimum pada suatu kisaran p. %ang disebut p. optimum, %ang umumn%a antara p. 4,7 sampai -,! &uatu en#im tertenu mempun%ai kisaran p. optimum %ang sempit! /i sekitar p. optimum en#im mempun%ai stabilitas %ang tinggi! Beberapa en#im %ang mempun%ai p. optimum %ang sangat eksoterm! (+inarno, 1-3)

pH ambar 4! raik pengaru$ p. ter$adap akti0itas en#im /isamping pengaru$ ter$adap struktur ion pada en#im, p. renda$ atau p. tinggi dapat pula men%ebabkan



terjadin%a proses denaturasi dan ini akan mengakibatkan menurunn%a akti0itas en#im! Pada suatu p. tertentu atau daera$ p. tertentu dapat me%ebabkan kecepatan reaksi paling tinggi! p. tersebut dinamakan p. optimum! (Poedjiadi, 14) "n#im pada substrat urea adala$ en#im rease, p. optimum dari urease adala$ 6,4! (?ursiam, 21) "n#im pada substrat katekol adala$ katekin! 5atekin memiliki p. optimum 4'-! (&%a$, 21) Larutan pen%angga, larutan dapar, atau buffer adala$ larutan %ang digunakan untuk memperta$ankan nilai p. tertentu agar tidak ban%ak beruba$ selama reaksi kimia berlangsung! &iat %ang k$as dari larutan pen%angga ini adala$ p.'n%a $an%a beruba$ sedikit dengan pemberian sedikit asam kuat atau basa kuat! (anonim, !214) Larutan pen%angga tersusun dari asam lema$ dengan basa konjugatn%a atau ole$ basa lema$ dengan asam konjugatn%a! eaksi di antara kedua komponen pen%usun ini disebut sebagai reaksi asam'basa konjugasi! (anonim, 214) Larutan pen%angga secara seder$ana dibuat dengan mencampurkan asam lema$ dengan basa konjugatn%a! &ecara sama, larutan pen%angga juga dapat dibuat dengan mencampurkan basa lema$ dengan asam konjugatn%a! Larutan pen%angga bekerja secara bereaksi dengan asam atau basa %ang ditamba$kan untuk mengendalikan p.! &ebagai conto$, ba%angkanla$ sebua$ larutan pen%anga %ang terbuat dari basa lema$ amonia, ?. 3 dan asam konjugatn%a, ion amonium (?. 4)! 5etika asam klorida (.9l) ditamba$kan pada larutan tersebut, amonia akan @merendam@ proton (. ) dari asam menjadi ion ?. 4! 5arena proton tela$ terkunci dalam ion amonium, proton tidak dapat menjalankan aksin%a untuk menurunkan p. larutan! 5etika ?a>. ditamba$kan pada larutan pen%angga %ang sama, ion amonium akan men%umbangkan proton %ang tadi terkunci kepada basa menjadi amonia dan air! /alam $al ini larutan pen%angga menetralkan basa! &eperti pada conto$ di atas, larutan pen%angga bekerja dengan menggantikan asam atau basa kuat dengan %ang lema$! Proton asam kuat digantikan ole$ ion amonium (sebua$ asam lema$)! Basa kuat >. ' digantikan



ole$ basa lema$ amonia! Penggantian ini men%ebabkan larutan pen%angga mempun%ai kekuatan mengendalikan p.! (*nonim, 213) Pada uji pengaru$ p. ini mengapa dilakukan pengujian pada p. 1,4,6 dan 1 itu dikarenakan untuk mengeisienkan percobaan karena dengan rentan jarak segitu mampu mengetau$ui akti0itas en#im dari p. paling asam $ingga p. basa! *pabila jarakn%a terlalu berdekatan itu terlalu boros dalam melakukan percobaann%a se$ingga dik$aatirkan dengan rentan satu belum terli$at peruba$an akti0itas en#imn%a!



I- E+I&PULAN DAN +A"AN Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) 5esimpulan dan (2) &aran! !.1. esi$ulan Berdasarkan $asil pengamatan uji pengaru$ p. ter$adap akti0itas en#im didapatkan $asil dari ekstark bua$ pir dengan substrat katekol, dimana en#im katekin positi akti bekerja pada p. 4, 6, dan 1 tetapi pada p. 1 tidak akti bekerja! &edangkan pada ekstrak kedelai dengan substrat urea, dimana en#im urease positi akti bekerja pada p. 4, 6, dan 1 tetapi pada p. 1 tidak akti bekerja! !.2. +aran Praktikan di$arapkan dapat menguasai materi percobaan, serta $arus teliti dalam melakukan percobaan serta pengamatan ter$adap $asil percobaan!



DA/TA" PU+TAA *nonim! 213! (ara $e$buat larutan bu00er ! $ttp:AA!ilmukimia!org! /iakses: 4 ei 214 *nonim! 214! Pengertian *an 0ungsi larutan bu00er ! $ttp:AAid!ikipedia!org! /iakses: 4 ei 214 ?ursiam, ntan! 21! Aktiitas Eni$! $ttp:AAintannursiam!ordpress!com! /iakses: 4 ei 214 Poedjadi, *nna, dkk! 14! Dasar*asar Bioki$ia. 'Press: Cakarta &%a$, *ndi ?ur *lam!21! Taklukan Pen)akit *engan Te% Hijau. *gromedia : Cakarta +inarno! D!! 1-3! i$ia Pangan *an #ii ! PT!ramedia Pustaka tama:Cakarta +ira$adikusuma$, ! 1-! Bioki$ia rotein4 eni$4 *an asa$ nukleat. nstitut Teknologi Bandung: Bandung



LA&PI"AN Ekstrak

+ubstrat

H

%asil

keterangan

* 1 ' "n#im tidak akti Bua$ pir 5atekol bekerja * 4  "n#im akti bekerja Bua$ pir * 6  "n#im akti bekerja Bua$ pir * 1 ' "n#im tidak akti Bua$ pir bekerja B 1 ' "n#im tidak akti kedelai rea bekerja B 4 ' "n#im tidak akti 5edelai bekerja B 6  "n#im akti bekerja 5edelai B 1  "n#im akti bekerja kedelai &umber: laboratorium Biokimia pangan, 214

Laporan Biokim Uji Pengaruh PH

Recommend Documents