VIAS DE ADMINISTRACION DE FARMACOS OBJETIVOS:
Un medicamento solo puede actuar cuando alcanza su propio lugar de acción; desde que se administra hasta que ejerce su efecto pasa por varias fases, el primer paso que debe sufrir es el de penetrar en el torrente circulatorio, para desde allí ser distribuido a todo el organismo y alcanzar su lugar de acción; la rapidez con que un medicamento llega al torrente sanguíneo él lo que caracteriza fundamentalmente su intensidad de acción, es decir su mayor o menor actividad, dependiendo todo esto del a vía de administración utilizada. Observar los efectos del anestésico Tiopental sódico (Pentotal sódico®) en ratones blancos, usando diferentes vías de administración y una misma dosis. Determinar las ventajas particulares de cada una de las vías de administración utilizadas
MARCO TEORICO: Vía Oral (VO): es la más adecuada para administrar un medicamento, aunque no siempre es la más útil. Cuando se emplee esta vía hay que dejar que los animales por lo menos en ayunas durante 24 horas antes. Para los pequeños roedores existen cánulas apropiadas que consisten generalmente en agujas de grueso calibre con la punta en forma de oliva, para evitar traumatismos. Para animales más grandes se emplean sondas de caucho. Vía Subcutánea (SC): (SC): siempre que se inyecta una sustancia por esta vía conviene asegurarse de que realmente la inyección es subcutánea, para lo cual una vez atravesada la piel, con la aguja se seguirá el trayecto de la misma con los dedos. Conviene que le liquido inyectado quede a bastante distancia del lugar de punción para evitar la salida del mismo. Las zonas de elección para la punción subcutánea en animales pequeños suelen ser a nivel del dorso ya sea en la base de la cola o en la parte superior del cuello
algo por detrás de las orejas. Si el volumen es pequeño, la piel se levanta en la zona afectada, pero si el volumen es mayor se forman grandes grandes masas edematosas que van desapareciendo lentamente. Vía Intramuscular (IM): esta (IM): esta vía provee una absorción más rápida que el anterior puesto que tiene mayor irrigación y es menos dolorosa, pero en animales pequeños no es una vía útil por lo reducido de sus masas musculares. En las aves, la inyección se practica a nivel del musculo pectoral y en los mamíferos grandes en los músculos de las patas traseras. Vía Intraperitoneal (IP): (IP): las punciones deben practicarse en la mitad inferior del abdomen, por fuera de la línea media, se recomienda utilizar el método “en bayoneta”, pues asegura la penetración adecuada en la cavidad
abdominal y evita que le liquido pueda refluir. Vía Intravenosa (IV): (IV): es la que produce efectos inmediatos, ya que le fármaco se deposita para entrega inmediata a los tejidos, esta vía es muy útil en experimentación animal, que lo mismo sirve para la administración de una sustancia a dosis exactas, que para extraer muestras de sangre para su análisis. En el conejo la administración IV se realiza en la vena marginal de la oreja: en el ratón la inyección se realiza en las venas de la cola; en el perro la vena que se utiliza es la safena. Vía rectal: los fármacos se absorben más rápidamente por el recto que por vía oral, como inconveniente, antes de la administración se debe dejar los animales 24 horas en ayunas, para evitar que las heces interfieran los procesos de absorción para lo cual es conveniente colocar a los animales con las patas traseras más elevadas que la cabeza para evitar el reflujo del producto administrado. Vía Conjuntival: Conjuntival: de entre las mucosas externas, la conjuntiva es la más utilizada, sobre todo para la aplicación de colirios y anestésicos locales. De los animales más utilizados está el conejo. En cualquier caso se debe procurar que la córnea este siempre indemne. Vía Inhalatoria: la velocidad de absorción por esta vía es mayor que por el intestino, los músculos o la piel y es útil en experimentación animal con analgésicos volátiles.
METODO EXPERIMENTAL EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, jeringuillas hipodérmicas, jeringuilla con cánula para administración oral, dispositivo para administración IV, embudo, algodón, marcadores.
SUSTANCIAS Y RACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos: Tiopental sódico, concentración 2 mg/ml Alcohol o xilol
PROCEDIMIENTO: Cada mesa de trabajo dispone de una jaula con 7 ratones, 6 servirán para diferentes pruebas y una actuara con testigo. 1. Proceder a pesar a los 6 ratones de prueba, realizar los cálculos tomando en cuenta que a todos los animales se les dará una misma dosis de Tiopental sódico de 40 mg/k de peso. 2. Administrar el fármaco a los 6 ratones de la siguiente manera: Ratón N°1: Vía Inhalatoria: introducir Inhalatoria: introducir el ratón bajo el embudo de vidrio y hacer gotear en el algodón el volumen del fármaco correspondiente y observar el efecto durante 10 minutos. min utos. Anotar el resultado. Ratón N°2: Vía Subcutánea: con una jeringuilla hipodérmica, inyecte le fármaco a nivel del dorso, ya sea en la base de la cola o en la parte superior del cuello por detrás de las orejas. Observe los efectos y anote el resultado. Ratón N°3: Vía Oral: sujete al animal en la forma indicada en la práctica N°1 y mediante una jeringuilla provista provista de una cánula especial para administración introducir introducir el fármaco en el hocico del ratón. ratón. Observe los efectos y anote el resultado. Ratón N°4: Vía Intravenosa: Intravenosa: coloque la cola del ratón en el dispositivo especial, ingurgite las venas de la cola mediante calor o con una torunda de algodón empapada en alcohol o xilol, con la mano izquierda tomar una torunda y atirantar atirantar la cola, de modo que se haga relieve sobre el dedo
índice, lo que sirve de apoyo para luego introducir la aguja y administrar el fármaco. Observe los efectos y anote el resultado. Ratón N°5: Vía Intramuscular: mediante una jeringuilla inyectar el fármaco en los músculos de las patas traseras. Observe los efectos y anote el resultado. Ratón N°6: Vía Intraperitoneal: Mediante una jeringuilla practicar la punción en la mitad inferior del abdomen, por fuera de la línea media. Con una mano se levanta la piel dela región, regi ón, para separar la pared del contenido abdominal y evitar así su punción. Primero se introduce la aguja subcutáneamente hasta la mitad de su longitud y luego se acaba de introducir verticalmente a través de la pared abdominal. El método utilizado se denomina “en bayoneta”. bayoneta”. Observe los efectos y anote el resultado. 3. Comprar los efectos obtenidos anteriormente con un ratón testigo, al que no se ha inyectado ningún fármaco. CUADRO DE RESULTADOS DURACION GRADOS DE PESO VOL. RATON VIA DE DEPRESION EFECTO N° ADMINISTRACION (g) (u.i) (min) 1 2 3 4 5 1
Inhalatoria
2
Subcutánea
3
Oral
4
Intravenosa
5
Intramuscular
6
Intraperitoneal
7
Testigo
Grados de depresión:
1. 2. 3. 4.
Ningún efecto aparente Locomoción incordiada. Ataxia Dormido, se acomoda luego de un estímulo doloroso. Dormido profundamente, pero no se acomoda luego de un estímulo doloroso. 5. Muerto. TECNICAS DE ADMINISTRACION: En el cuadro 7. Observaremos algunas de las técnicas más utilizadas en Farmacología experimental. (Los gráficos han sido tomados del libro Esquemas y Prácticas de C. Barastegui Almagro).
CUESTIONARIO:
1. De las siguientes vías de administración: intravenosa, subcutánea, intramuscular y oral, indique la formas e absorción, utilidad especial, limitaciones y precauciones de cada una de ellas. BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, Editorial Espaxs, España, 1976. Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
ANESTESIA GENERAL OBJETIVOS:
Para realizar ciertos procedimientos dolorosos como administración de fármacos, operaciones quirúrgicas, recogida de muestras, medida de constantes, etc. Se requiere que estas se realicen cómodamente y sin peligros para el operador y evitando dolor, violencia y sufrimiento a los animales, esto se consigue por medio de anestésicos generales. Conocer experimentalmente y manejar bien los planos y periodos dela anestesia general, para evitar contratiempos que puedan ser fatales, sea que se empleen anestésicos generales inhalatorios o no inhalatorios.
MARCO TEORICO: Anestesia: significa pérdida de sensibilidad, no sola de la sensibilidad al dolor sino también a otras formas de sensibilidad, táctil, térmica, etc. Formas de sensibilidad que reside en los órganos de los sentidos. Anestesia Inhaladora: emplea gases o líquidos volátiles. Su administración se hace directamente poniendo al animal bajo una campana de cristal, o bien poniéndole un bozal con un algodón empapado con el anestésico. También se puede hacer a través de la anulación endotraqueal, por medio de una bomba de respiración. Es útil para manipulaciones cortas. Su inducción es rápida y su eliminación también son embargo requiere una vigilancia constante por parte del operador o de un ayudante, para evitar llegas a niveles de depresión bulbar. Económicamente resulta cara. El anestésico más utilizado en experimentación animal es el éter. Anestesia no-Inhalatoria: utiliza soluciones anestésicas que se administran por vía oral o lo que es más frecuente, por vía parental (subcutánea, Intraperitoneal, intravenosa, en sacos linfáticos). Para anestesia en animales es preferible el uso de anestésicos No Inhalatorios. Su ventaja es que se administra una dosis única y permiten
mantener un nivel constante de anestesia durante el tiempo que dura la experiencia de parte del periodo posoperatorio. En la anestesia quirúrgica que es la que más interesa, se busca obtener insensibilidad, la desaparición de los movimientos reflejos, la relajación muscular manteniendo al paciente en un estado lo más próximo al estado normal. La anestesia general no se manifiesta de una manera selectiva en tal o cual parte del sistema nervioso, sino que afecta a todos los centros nerviosos sin excepción. La anestesia general comprende 4 periodos y el tercer periodo o anestesia quirúrgica comprende a su vez 4 planos. Periodo I, Analgesia o Inducción: el anestésico se fija en los centros corticales superiores y conduce en forma progresiva a la pérdida de la conciencia. Las funciones sensoriales son las únicas suprimidas. Al comienzo el paciente aún está consciente pero las percepciones dolorosas se vuelven imprecisas. Periodo II, Excitación o delirio: se produce una inhibición de los centros corticales motores, este periodo comprende desde la pérdida de la conciencia hasta el establecimiento de la respiración regular, a veces aparecen pesadillas, gritos y gestos desordenados. Periodo III, anestesia quirúrgica: se caracteriza por una depresión funcional de la medula espinal, con abolición de reflejos medulares, sensoriales y motores. Se produce entonces la relajación muscular y se establece una respiración regular característica. Consta de 4 planos o fases. Primera fase o primer plano: los globos oculares oscilan lentamente de derecha a izquierda, las pupilas presentan una miosis ligera, pero no aparece modificado el reflejo a la luz. La respiración es regular, ruidos, más rápida y amplia que la normal. No se produce aun relajación muscular. Segunda fase o segundo plano: la respiración se vuelve regular. Cesan los movimientos oculares, disminuye la miosis y desaparece el reflejo óculo palpebral, peor persiste le reflejo a la luz. Aparece la relajación muscular.
Tercera fase o tercer plano: la respiración se hace más superficial por parálisis de los músculos intercostales y abdominales, en tanto que el diafragma continúa sus contracciones normales. En esta fase desparece el reflejo de la luz. El tono muscular se encuentra muy disminuido, la pupila ligeramente dilatada. Se debe tratar de no llegar nunca más allá de esta fase.} Cuarto plano: la respiración es aún más superficial, estrictamente diafragmática, ocasionada por parálisis completa de los intercostales. La pupila de halla en franca midriasis, el pulso es rápido, la presión arterial es baja y la musculatura se encuentra en atonía. Periodo IV, Parálisis bulbar o paro respiratorio: es la fase tóxica cuya aparición debe evitarse de cualquier manera, pues si es alcanzado el centro respiratorio, cesan los movimientos de la respiración, pero sin suspensión de la contracción cardiaca. En forma simultánea se comprueba una midriasis total acompañada de sequedad de la boca y el sujeto se torna cianótico. Luego de 2-3 minutos del paro respiratorio puede producirse el paro cardiaco. METODO EXPERIMENTAL: EQUIPO Y MATERIALES:
Jaula, embudo, algodón
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos: Éter dietílico
PROCEDIMIENTO: 1. Saque al animal de la jaula y colóquelo debajo de un embudo sin vástago, en cuyo extremo superior tiene una torunda de algodón. 2. Haga gotear éter dietílico en la torunda de algodón 3. Anote los efectos más representativos observados en cada uno de los periodos de la anestesia, señalando la hora de observación. NOTA: LLEGAR UNICAMENTE AL TERCER PLANO DEL TERCER PERIODO
4. Retirar al animal del embudo y ventilarlo adecuadamente hasta que desaparezcan los efectos farmacológicos del éter dietílico. SIGNOS QUE CARACTERIZAN A CADA UNO DE LOS PERIODOS DE LA ANESTESIA GENERAL PRIMER PERIODO, IDUCCION O ANALGESIA a) b) c) d) e) f) g) h) i) j)
Analgesia parcial luego total Amnesia Respiración: ligeramente irregular Movimientos oculares voluntarios Pupilas (sin medicación ): Normales: Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso Presión sanguínea: se eleva ligeramente Tono muscular: normal Respuesta a la incisión cutánea SEGUNDO PERIODO, EXCITACIÓN O DELIRIO
a) b) c) d) e) f) g) h)
Respiración: amplia e irregular Movimientos oculares Pupilas: dilatadas, midriasis Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso Presión sanguínea Tono muscular: aumentando Respuesta a la incisión cutánea TERCER PERIODO, ANESTESIA QUIRURGICA PRIMER PLANO
a) b) c) d)
Sueño tranquilo Respiración: rítmica Movimientos oculares Pupilas: pequeñas
e) f) g) h) i)
Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso: Normal Presión sanguínea: Normal Tono muscular: Ligera relajación Respuesta a la inclusión cutánea SEGUNDO PLANO
a) b) c) d) e) f) g) h)
Respiración: rítmica Movimientos oculares: fijos Pupilas: poco dilatadas Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso: Normal Presión sanguínea: Normal Tono muscular: Relajación moderada Respuesta a la incisión cutánea TERCER PLANO
a) b) c) d) e) f) g) h)
Respiración: rítmica y superficial Movimientos oculares: Fijos Pupilas: bastante dilatadas Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso Presión sanguínea: disminuye Tono musculas: flacidez Respuesta a la incisión cutánea CUARTO PLANO
a) b) c) d) e) f) g) h)
Respiración: muy superficial e irregular Movimientos oculares. Fijos Pupilas: completamente dilatadas Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso Presión sanguínea: disminuida considerablemente Tono musculas: flacidez Respuesta a la incisión cutánea.
CUARTO PERIODO, PARALISIS BULBAR a) b) c) d) e) f) g) h)
Respiración: Movimientos oculares: fijos Pupilas: franca midriasis Reflejos corneal y faríngeo Frecuencia del pulso Presión sanguínea Tono muscular: flacidez externa Respuesta a la incisión cutánea. EFECTOS FARMACOLOGICOS DEL ÉTER DIETILICO EN EL RATÓN (ANESTESIA POR INHALACION)
I PERIODO II PERIODO PESO HORA INDUCCION EXCITACIÓN RATON DELIRIO ADM. ANALGESIA (g) (tiempo) (tiempo)
III PERIODO ANESTESIA QUIRURGICA (tiempo) I
II
III
IV PEIODO PARALISIS BULBAR (tiempo)
IV
NOTA: RIESGO DELA PRACTICA. DEBIDO A QUE EL ÉTER DIETILICO ES UN ANESTESICO VOLATIL INFLAMABLE Y EXPLOSIVO, QUEDA ESTRICTAMENTE FUMAR O PRENDER FUEGO EN EL INTERIOR DEL LABORATORIO DURANTE EL DESAROLO DE ESTA PRACTICA.
CUESTIONARIO: 1. ¿Cuáles son los modos de combatir algunos accidentes anestésicos? BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976 Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987 Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica , Editorial Medica Panamericana, 1986. Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986.
DISECCIÓN DE MAMÍFERO OBJETIVO:
La experimentación animal requiere de procedimientos de determinados órganos, aparatos y sistemas, por lo que es necesario que los estudiantes los identifiquen y ubiquen correctamente para que las manipulaciones se realicen con éxito y se obtengan los resultados esperados. Estudiar la anatomía interna y externa del ratón blanco. Contrastar con las diferencias existentes en determinados órganos de animales de otras especies, por ejemplo los anfibios utilizados también en farmacología experimental.
MARCO TEORICO: MORFOLOGIA EXTERMA DE RATON BLANCO: el cuerpo del ratón está recubierto de pelo presenta en la cara ventral unos pequeños mamelones solo perfectamente visibles en la hembra sexualmente activa. Está dividido en 3 regiones: cabeza, tronco y extremidades. En la cabeza se observan los pabellones auditivos muy desarrollados móviles, los ojos, redondeados, situados a ambos lados de la cabeza y protegidos por los parpados móviles. En el extremo anterior se sitúan orificios nasales y por debajo de ellos el hocico presenta una hendidura vertical que deja entrever los incisivos superiores a ambos lados del hocico se encuentran unos pelos largos llamados vibrisas (bigotes) de función táctil. En el tronco puede observarse en la zona ventral 2 pares de tetillas inguinales y dos pares de tetilla pectorales. El ano está situado en la parte posterior del cuerpo por detrás del orificio excretor y reproductor. Respecto a las extremidades, los miembros anteriores son bastantes cortos y la mano posees 4 dedos, los miembros posteriores son más largos y el pie posee 5 dedos. Todo los dedos están provistos de uñan. La cola es casi tan larga como el cuerpo y está formado por anillos recubiertos de escamas entre las que se inserta pelos cortos y rígidos.
ANATOMIA INTERNA: Para el estudio de la antinomia interna debe colocarse el animal previamente anestesiado en una cubeta de disección con la cara ventral hacia arriba. Se fija por los pies y las manos se produce en una cubeta a efectuar una incisión por la línea dentro- medial desde el extremo posterior del abdomen hasta cerca del mentón y también a lo largo de los cuatro miembros (Ver cuadro 9). Una vez efectuadas las incisiones se separa la piel lateralmente fijándose con las pinzas separadoras a la cubeta. Luego se procede de la misma forma con la capa muscular subyacente. La musculatura se separa lateralmente y se fija a la cubeta, quedando así al descubierto las vísceras del animal. En la región del cuello se encuentra la tráquea reforzada por anillos cartilaginosos que comunican mediante los bronquios con los pulmones. El esófago queda oculto por la tráquea y comunica directamente con el estómago. A ambos lados del esófago se sitúan las glándulas salivales que están muy desarrolladas. En la cavidad torácica se observan a ambos lados los pulmones y en el centro el corazón (formado por dos aurículas y dos ventrículos) rodeado por el pericardio. Entre la cavidad torácica y la abdominal existe una delgada capa muscular llamada diafragma. En la cavidad abdominal aparece en primer lugar el hígado, muy voluminoso y recortado en varios lóbulos y la vesícula biliar. En la parte izquierda se sitúa en el estómago del que parte el intestino delgado. Cerca del estómago está el bazo y en la zona del duodeno, muy cerca de la parte final del estómago, se encuentra el páncreas. La mayor parte de la cavidad abdominal está ocupada por las circunvoluciones del intestino, que se mantienen en su lugar gracias a una fina membrana trasparente muy vascularizada que es el mesenterio. Aparato excretor: situados en posición dorsal a ambos lados de la zona media de la columna vertebral, se encuentran los riñones. Sobre ellos se sitúan las glándulas suprarrenales. De la zona central del riñón sale el conducto urinario o uréter. Los dos uréteres comunican con la vejiga urinaria y de ella parte la uretra que desemboca al exterior.
Aparato genital: en las hembras, el aparato genital está formado por dos ovarios pequeños, granulosos, situados en el borde posterior externo de los riñones. En la proximidad de cada ovario se encuentran la Trompa de Falopio, destinadas a captar los óvulos, que se continua a través de un corto oviducto cuya parte final se dilata dando lugar al útero. Los dos cuernos de dicho útero se unen en la parte inferior originando la vagina que se abre al exterior a través de la vulva. En el macho el aparato genital está formado por dos testículos ovalados y blanquecinos que se alojan en la cavidad abdominal cuando aquella no esa sexualmente activo y en el escroto durante la época de celo. De los testículos parten conductos deferentes o espermiductos que se enrollan para formar el epidídimo desembocando finalmente en la uretra. En esta también desembocan las vesículas seminales, muy desarrolladas durante la época de celo. METODO EXPERIMENTAL: EQUIPOS Y MATERIALES:
Equipo de disección, cubeta de disección, jaula, embudo, piolas, esparadrapo, algodón.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones lancos Químicos: Éter dietílico para anestesia.
PROCEDIMIENTO: 1. Saque al animal de la jaula y colóquelo debajo de un embudo, en cuyo extremo superior tienen una torunda de algodón. 2. Anestesie al animal, haciendo gotear éter dietílico en la torunda. Podrá darse cuenta que la anestesia ha tenido efecto y que el animal se encuentre en el tercer plano del tercer periodo de anestesia cuando al hacerlo rodar por la cubeta no ofrezca resistencia. 3. Coloque al animal de espaldas y sujete las extremidades inferiores y superiores mediante piolas a la cubeta de disección.
4. Valiéndose del bisturí o tijeras, practique un corte en la piel del animal a nivel inferior del abdomen y nuevo en la línea media practique un corte de la piel longitudinalmente, desplazando el bisturí o la tijera hasta la altura de las extremidades anteriores, continúe el corte de la piel por la parte del abdomen hasta la altura de las extremidades posteriores. Practique ahora 2 cortes transversales perpendiculares al anterior y en posteriores. Practique ahora 2 cortes transversales perpendiculares al anterior y en dirección a las extremidades. 5. Separe la piel del animal, utilizando para esto el lado romo del buscador 6. Mantenga la anestesia necesaria para evitar el sufrimiento del animal. 7. Ahora tiene la vista la pared abdominal cuya cara anterior está recubierta por el peritoneo. 8. Proceda de la misma forma con la capa muscula subyacente (cortes) 9. La musculatura se separa lateralmente y se fija a la cubeta, quedando así al descubierto las vísceras dela animal. 10.Para abrir el tórax se practica un corte a un lado del esternón teniendo siempre cuidad de no lastimar los órganos internos. Proceda a distinguir los distintos órganos y sistemas, tanto de la cavidad abdominal como de la torácica.
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976 Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986. Litter, M., Compendio de Farmacología, Tercera Edición, Editorial Ateneo, Argentina, 1984. Fernández, M., Manual de Principios y Técnicas en Farmacología Experimental, Primera edición, Loja, 1982.
ABSORCION DE FARMACOS OBJETIVOS:
Cualquiera que sea la vía de administración, la absorción depende de la solubilidad de fármaco. Un medicamento solo puede actuar cuando alcanza su propio lugar de acción. Desde que se administra hasta que ejerce su efecto pasa por varias fases. El primer proceso que debe sufrir es el de penetrar en el torrente circulatorio, para desde ello ser distribuido a todo el organismo y alcanzar su lugar de acción. La rapidez con que un medicamento llega al torrente sanguíneo es lo que caracteriza fundamentalmente su intensidad de acción, es decir su mayor o menor actividad. En esta práctica se observara la distribución del Azul de Metileno (colorante) en ratones blancos, administrando por diferentes vías y en una misma dosis.
MARCOTEORICO: Distribución de fármacos en el organismo: en el organismo los medicamentos ya sean inyectables directamente en la circulación o bien absorbidos por la vía sanguínea o linfática, llegan a la sangre, plasma, desde donde se distribuyan a los diferentes tejidos del organismo. La concentración del fármaco en el plasma adquiere una importancia enorme en relación con el efecto farmacológico, pues dicho efecto depende de que la sustancia alcance las células que responden al mismo a una determinada concentración, la que depende a su vez de la concentración plasmática. Los fármacos pasan desde la sangre al líquido intersticial por transporte pasivo a través de los capilares por difusión y filtración, actuando algunos en la superficie celular, mientras que otros pasan luego al líquido extracelular. La velocidad de distribución de los fármacos, es generalmente rápida, una vez llegados a la circulación comienzan a pasar a los tejidos a los 15 a 20
segundos, y se distribuyen en el líquido extracelular, en el agua total del organismo o se fijan en las celular en pocos minutos. Desde el líquido intersticial los fármacos pasan a las células de los tejidos, atravesando la membrana plasmática, a menos que se fijen en los receptores de la superficie celular, este pasaje sigue las leyes generales de transporte por las membranas en relación a su liposolubilidad. Pasaje de los fármacos al Sistema Nervioso Central (SNC) y al líquido cefalorraquídeo (LCR): el pasaje de fármacos desde el plasma sanguíneo al cerebro y al LCR se realiza a través de una membrana lipídica (barrera hematoencefálica) y sigue los principios generales de transporte, debiendo señalarse que solo pasa la porción libre de los fármacos y no la combinada con las proteínas plasmáticas. Las sustancias muy ionizadas son incapaces de penetrar; lo fármacos que en el plasma se encuentran en forma no iónica penetran en el cerebro y en el LCR a una velocidad que depende del coeficiente de partición lípidos/agua. Ejemplo: el Tiopental sódico, atraviesa esta barrear de forma tan veloz que en 1 o 2 minutos alcanza su máxima concentraciones el SNC, los no electrolitos penetran si son liposolubles. Ejemplo el éter. Pasaje de fármacos por la placenta: Las sustancias atraviesan en general esta membrana lipídica por difusión pasiva. Es fácilmente permeable a la fracción libre. Almacenamiento de los fármacos en el organismo en muchas ocasiones los fármacos no se distribuyen de modo uniforme y se acumulan selectivamente en ciertas regiones. En estos dispositivos de almacenamiento los fármacos se encuentran en equilibrio con el plasma sanguíneo y se van liberando lentamente de aquellos a medida que se metabolizan y se excretan, en esta forma se mantienen niveles medicamentosos efectivos en el plasma que permiten obtener acciones farmacológicas prolongadas hasta el agotamiento de dichos dispositivos. Las proteínas del plasma pueden construir un dispositivo o reservorio, pero los principales depósitos del fármaco se encuentran en los tejidos. METODO EXPERIEMENTAL:
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas hipodérmicas, cánula para administración oral, dispositivo para administración intravenosa, equipo de disección, cubeta de disección, embudo son vástago, algodón, esparadrapo, piolas.
SUSTANCIAS REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos: Azul de metileno, solución al 1% en suero fisiológico Éter dietílico.
PROCEDIMIENTO: 1. Cada mesa de trabajo. Dispone de 5 ratones blancos. 2. Administrar el colorante por las siguientes vías y volúmenes.} RATON
VIA DE VOLUMEN ADMINISTRACION ADMINISTRADO
1
Oral
10 u.i
2
Subcutánea
10 u.i
3
Intravenosa
10 u.i
4
Intraperitoneal
10 u.i
TESTIGO
-------------------
---------------------
RESULTADO
3. Para visualizar mejor la distribución del Azul de Metileno, al cabo de unos 15 minutos de haberles administrado por las diferentes vías se precede a hacer La disección de los animales, previa anestesia. COMENTARIO DE LOS RESULTADOS: Es importante conocer en qué forma se absorben los fármacos, ya que, aparte de los diferentes factores que condicionan la distribución de un
fármaco en los tejidos, la absorción influye en la elección de la vía de administración. En la administración oral, se comprobara que el colorante permanece en el tracto digestivo, sin apenas ser absorbido. En la administración subcutánea se podrá especial atencional territorio vascular próximo al punto de aplicación del colorante una intensa coloración azulada en todo el sistema circulatorio con amplia difusión por todos los tejidos. En ratones albinos incluso antes de hacer la disección, se puede comprobar la intensa tonalidad azulada que adquieran los ojos y las partes acras del animal (orejas, patas y morro) ya que inmediatamente después de la administración intravenosa. En la administración Intraperitoneal el colorante ocupara la cavidad abdominal y el territorio vascular al punto de aplicación. Comparar los resultados con la coloración que presentan tracto digestivo, territorio vascular en general y la cavidad abdominal del ratón testigo al cual no le fue administrado el colorante. CUESTIONARIO: 1. ¿Cuáles sin los mecanismos que rigen el pasaje de las drogas a través de membranas corporales o barreras? BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976 Bevan, J., et. al., Fundamentos de Farmacología, Introducción a los Principios de Acción de Fármacos, Segunda Edición, Harla Harper & Row Latinoamericana, México, 1982. De la Vega, E., Manual de Farmacología Practica, Ecuador, 1985. Fernández, M., Manual de Principios y Técnicas en Farmacología Experimental, Primera edición, Loja, 1982. Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica , Editorial Medica Panamericana, 1986. Litter, M., Compendio de Farmacología, Tercera Edición, Editorial Ateneo, Argentina, 1984.
Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986. San Martín Casamada, E., Tratado de Farmacodinamia, Editorial Científico – Medica, Buenos Aires, Argentina, 1974. Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
EXPERIMENTO DE STARKENSTEIN OBJETIVOS:
La absorción depende entera uno de los factores más importantes de la solubilidad del fármaco de ahí la necesidad de conocer los mecanismos para interpretar las interacciones medicamentosas que tienen significancia clínica. En esta práctica se observara la importancia de la solubilidad frente a la acción de la estricnina actuando sobre ratón blanco.
MARCO TEORICO: Absorción de fármacos en el organismo: la absorción es el traslado de un fármaco desde el sitio de su aplicación hasta la sangre o la linfa a través de membranas celulares, utilizando como mecanismos físico-químicos de transferencia difusión simple, transporte activo, difusión facilitada, transporte conectivo o pinocitosis. La absorción influye directamente en la elección de la vía de administración del fármaco. La absorción está influenciada por varios factores entre los cuales se anotan. a) Factores dependiendo del fármaco: gradiente de concentración, liposolubilidad, grado de ionización, tamaño de la molécula. b) Factores dependientes del sitio de absorción: superficie, riego sanguíneo, pH del medio, tiempo de contacto, complejidad de la barrera de transferencia. Absorción desde el tubo digestivo:
Cavidad bucal su epitelio delgado, buena irrigación y medio acuoso ligeramente acido favorecen la absorción rápida. Estomago: 1. Absorción generalmente proporcional a la solubilidad en lípidos de los fármacos.
2. Compuestos básicos del tipo -N- generalmente no serán absorbidos si el plan es alto las bases con pKa bajo, por ejemplo 1,5 se absorberán en cierta proporción. 3. Los ácidos débiles pKa 3 o más serán absorbidos. 4. La alcalinización del estómago disminuye la absorción de ácidos débiles y aumenta la de las bases débiles. 5. La absorción es más completa mientras mayor es el tiempo que permanece el fármaco en el estomago. 6. La velocidad de vaciamiento, gástrico influye tanto en la absorción en el estómago como en la que se produce en el intestino. 7. La magnitud de la absorción a nivel gástrico es difícil de predecir porque depende de numerosos factores, pero en todo casi en considerablemente menos que la del intestino delgado.
Intestino delgado: 1. Es el principal tipo de absorción del tubo digestivo 2. El pH aparente de la barrea intestinal baria entre 6 y 7 3. Ácidos débiles con pKa mayor de 3 se absorben 4. Bases débiles con pKa menos de 7 se absorben 5. Los fármacos hidrosolubles relacionados con azucares, aminoácidos y elementos nutritivos polares se absorberán por transporte especializado. 6. El aumento de la velocidad del tránsito intestinal, diarrea, por ejemplo puede disminuir la absorción. Colon y recto: La absorción de fármacos desde el colon es similar a la del intestino delgado, en efecto los ácidos y bases débiles se absorben fácilmente pero los ácidos y bases fuertes lo hacen con bastante dificultad. En el recto, el pKa de los fármacos juega un papel determinante, dependiendo de la velocidad de absorción no solo del grado de ionización sino también de la concentración intraluminal y del coeficiente de reparto lípidos/agua. En todo casa, es irregular e incompleta y tiene la ventaja de que el fármaco llega a la circulación general sin pasar por el hígado.
MÉTODO EXPERIMENTAL: EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas hipodérmicas, cánula para administración oral, equipo de disección, cubeta de disección, embudo sin vástago, esparadrapo, piolas.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: Ratones blancos5 Químicos: Éter dietílico para anestesia Solución de estricnina al 25% Alcohol etílico
PROCEDIMIENTO: 1. Realizar previa anestesia con éter dietílico a la ligadura de pilono, suturar y esperar la recuperación completa del animal. 2. Una vez que el ratón está en condicione debe de tomar por vía oral, introdujo una dosis toxica de estricnina (0,2 ml de la solución al 25 %) 3. Dejar al animal en observación durante 24 horas. 4. A otro animal en las mismas condiciones que el anterior, introducirle además de la dosis toxica de estricnina una pequeña cantidad de alcohol etílico (0,3 ml). 5. Observar el comportamiento del animal y ver el desenlace al cabo de unos minutos. RATO N
PROCEDIMIENT O
FARMACO S
TIEMPO DE OBSERVACIO N
Ligadura de píloro
Estricnina
24 horas
Ligadura de píloro
Estricnina + EtOH
Enseguida
N° 1 2 5 Adaptación
RESULTADO S
de Janeth Montalvo Jaramillo (la técnica original sugiere la utilización de ranas para este experimento sin embargo yo las he sustituido por ratones blancos obteniéndose los mismo resultados).
El animal solo ha recibido la estricnina apenas sufre la más mínima intoxicación mientras que el que ha recibido además alcohol etílico presenta inmediatamente convulsiones, debido a que este favorece la liposolubilidad de la estricnina y acelera así el proceso de absorción gástrica. CUESTIONARIO: 1. En una tabla coloque las sustancias que se absorben en las distintas porciones del tubo digestivo (mucosa bucal, estomago; intestino delgado, colon, y recto), de acuerdo a los distintos valores de pH que presenta esas zonas. BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976 Bevan, J., et. al., Fundamentos de Farmacología, Introducción a los Principios de Acción de Fármacos, Segunda Edición, Harla Harper & Row Latinoamericana, México, 1982. De la Vega, E., Manual de Farmacología Practica, Ecuador, 1985. Fernández, M., Manual de Principios y Técnicas en Farmacología Experimental, Primera edición, Loja, 1982. Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica , Editorial Medica Panamericana, 1986. Litter, M., Compendio de Farmacología, Tercera Edición, Editorial Ateneo, Argentina, 1984. Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986. San Martín Casamada, E., Tratado de Farmacodinamia, Editorial Científico – Medica, Buenos Aires, Argentina, 1974. Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
TRANSPORTE DE FARMACOS OBJETIVOS:
Cuando los fármacos han llegado a la sangre se distribuyen en el plasma en dos formas: unidos a las proteínas plasmáticas y libres. La fracción que se une a las proteínas lo lace por fuerzas iónicas, de Van der Waals y de hidrógeno, en una proporción que es específica para cada fármaco. La capacidad fijadora de las proteínas no es ilimitada, si se ha suturado, la administración de pequeñas cantidades adicionales puede producir efectos tóxicos. Mediante la Experiencia de Chaplin6, se demostrara como el Tiopental sódico (Pentotal sódico®),el Ácido acetil salicílico (Aspirina®) y la Fenilbutazona (Butazolidina®) compiten entre sí por la fijación proteica.
MARCO TEÓRICO: La unión de los fármacos con las proteínas plasmáticas produce algunas consecuencias: 1. Como únicamente la fracción libre de los fármacos es capaz de atravesar las membranas y ejercer por tanto efectos farmacodinámicos, los complejos farmacoproteína disminuyen las concentraciones plasmáticas terapéuticamente eficaces. 2. Mientras mayor es la afinidad de ligadura, mayor es el tiempo de acción de un fármaco: así: la suramina (utilizada en el tratamiento de la tripanosomiasis) puede actuar hasta por 3 meses, debido a que se une fuertemente a las albúminas y se va desprendiendo de ella muy lentamente. 3. Mientras el fármaco no se libera de las albúminas no puede ser metabolizado ni eliminado por el riñón. 4. Algunos fármacos que son insolubles pueden circular en el plasma gracias a su fijación en las proteínas, ejemplo: bishidroxicumarina. 5. Varios fármacos pueden competir entre ellos por su fijación proteica 6 La adaptación y búsqueda de dosis efectivas para esta práctica han sido realizadas por la autora de este o competir con sustancias fisiológicas, en el primer caso tenemos un manual
ejemplo muy demostrativo en las experiencias realizadas por Chaplin: si se administra tiopental a una rata, esta pierde, por efecto de la droga, el reflejo de enderezamiento, queda inmóvil sobre la mesa, si se administra aspirina o Fenilbutazona en momento que le animal empieza a enderezarse se observa que nuevamente cae dormido, esto es, el tiopental que se fijó a las proteínas plasmáticas es desplazado por el ácido acetil salicílico, queda libre y ejerce su acción depresora. Un ejemplo del segundo casose refiere a la fijación de bilirrubina por las proteínas del plasma, si una droga con alta afinidad llega a la sangre la desplaza, tal ocurre con el sulfisoxazol que por este mecanismo produjo graves accidentes administrando a recién nacidos. MÉTODO EXPERIMENTAL EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas hipodérmicas, marcadores.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: Ratones blancos ambos sexos, peso 25 ± 2g. Químicos: Solución de Tiopental sódico, concentración 5 mg/ml Solución de ácido acetil salicílico, concentración 2 mg/ml Solución de Oxifenilbutasona, concentración 2 mg/ml
PROCEDIMIENTO: 1. Cada grupo de estudiantes trabajará con 2 ratones blancos. RATON N°1:
Pesarlo, administrar por vía intraperitoneal, en dosis de 40 mg/kg. De peso, una solución de Tiopental sódico. Observar el efecto y anotar el tiempo de duración. En el momento en que el animal empieza a enderezarse, administrar por vía Intraperitoneal, una solución de Ácido Acetil Salicílico, en una dosis de 15 mg/kg de peso. Observar el efecto y anotar el tiempo de duración del mismo.
RESULTADOS: RATON
TIEMPO DE DURACION DEL EFECTO (min)
1 2 COMENTARIO DE LOS RESULTADOS: Por efecto del tiopental en un ratón, este pierde, el reflejo de enderezamiento, queda inmóvil sobre la mesa, si le administra Aspirina o Fenilbutazona en el momento que el animal empieza a enderezarse, se observa que nuevamente cae dormido, esto es, el tiopental que se fijó a las proteínas plasmáticas es desplazado por el ácido acetil salicílico, queda libre y ejerce su acción depresora. CUESTIONARIO: 1. Esquematice la unión de proteínas plasmáticas y fármacos utilizados en la práctica. BIBLIOGRAFIA
Samaniego, E., Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987. Goodman y Gilman, Las Bases Farmacológicas de la Terapéutica, Editorial Medica Panamericana, 1986. Díaz Alejandro, et. al., Manual de Farmacología, Tomos I Y II , Universidad de Concepción , Facultad de Ciencias Biológicas y Recursos Naturales, Chile, 1986.
ACCIÓN FARMACOLÓGICA-FENÓMENO DE STRAUB OBJETIVOS:
Los fármacos pueden ejercer su acción sea tomando contacto con la célula, penetrándola o desde fuera de ella, según esto, hay varios niveles de acción farmacológica. La acción principal de los opiáceos, a nivel de la fibra lisa, es un aumento del tono llegando a ser incluso al espasmo. sobre el esfínter anal del ratón este aumento del tono llega a ser tan intenso que puede provocar la erección de la cola. Este hecho, típico de los opiáceos, se conoce con el nombre de Fenómeno de Straub.
MARCO TEÓRICO: Niveles de acción farmacológica: los fármacos pueden ejercer su acción sea
tomando contacto con la célula, penetrándola o desde fuera de ella, según esto, hay varios niveles de acción farmacológica. 1. Nivel extracelular: cuando el fármaco produce cambios físicos o fisicoquímicos en el líquido intersticial que modifican los intercambios de la célula, así, el manitol alcanza altas concentraciones en el túbulo renal aumentando la presión osmótica en la luz del túbulo, ellos impide que la célula tubular pueda reabsorber agua desde la luz; el agua escapa aumentando el volumen. 2. Nivel de membrana: la mayoría de fármacos actúan a este nivel, sitio celular en el cual se ubican la mayor parte de receptores farmacológicos, la unión del fármaco con el receptor casi siempre altera las propiedades de permeabilidad de la membrana y por tanto, el potencial eléctrico de reposo de la célula, permitiendo la entrada o salida de iones; este desequilibrio iónico intracelular es el responsable de los efectos que produce el fármaco en la célula. 3. Nivel intracelular: algunos fármacos deben ingresar al citoplasma y aun al núcleo para producir sus efectos que estarán en relación con el cambio bioquímico que a ese nivel determinen: inhibir la síntesis proteica, alterar la cadena de reacciones oxidativa de la respiración celular, destruir la membrana de los organoides celulares, interferir con la síntesis de ADN y ARN, etc. Varias sustancias como los hipnóticos, analgésicos, hormonas, antibióticos, citotóxicos, etc. Actúan de esta manera.
La reacción ante los opiáceos varía según la especie animal. Así existen reacciones características como la observada en el ratón (Fenómeno de Straub); en el gato (Agresividad Morfínica), debido a una acción estimulante central, y en el perro se manifiesta como un vomitivo de acción segura. MATERIALES:
Biológicos: Ratones blancos Jeringas y agujas Reactivos: Clorhidrato de morfina
METODO: Se inyecta a los ratones por vía intraperitoneal, una solución de clorhidrato de morfina y se observa a los animales. MESA
DOSIS DE Clorhidrato de Morfina
1
10 mg/kg peso
2
20 mg/kg peso
3
30 mg/kg peso
4
40 mg/kg peso
RESULTADOS: al cabo de unos 15 minutos se puede observar la erección de la cola que puede llegar a arquearse sobre el lomo del animal. El grado mayor o menor de inclinación estará en función de la dosis.
MESA
DOSIS
1
10 mg/kg peso
GRADOS DE INCLINACION DE LA COLA
2
20 mg/kg peso
3
30 mg/kg peso
4
40 mg/kg peso
CUESTIONARIO: 1. Clasificación de los medicamentos opiáceos BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, Editorial Espaxs, España 1976.
PERFIL DE ACTIVIDAD DE FÁRMACOS (SCREENING FARMACOLÓGICO) OBJETIVOS:
Mediante la utilización de una batería de pruebas o técnicas fáciles y baratas de realizar se pueden observar varios tipos de actividades de fármacos o extractos vegetales con una gran rapidez y una cantidad mínima de producto las cuales podrán completarse con otras técnicas más selectivas y complejas que confirmen y amplíen los resultados obtenidos. Determinar las acciones de un extracto vegetal (acuoso y alcohólico),un fármaco estimulante y u depresor de SNC, mediante las pruebas que constituye el screening farmacológico.
MARCO TEORICO: La investigación de las múltiples actividades farmacológicas en extractos vegetales o animales, pueden durar muchos años, por lo que se requiere la utilización de pruebas sencillas y fáciles para que den una primera orientación de la acción farmacológica que pudieran tener los extractos ensayados. Estas pruebas son: test de la catalepsia, reflejo de postura, test de tracción, test de Haffner, fenómeno de Straub, piloerección, ptosis palpebral, reflejo pineal, reflejo corneal, reflejo de flexión ipsolateral, lagrimeo, midriasis, actividad motora, conducta, estado de alerta, excitación del SNC, postura, incoordinación motora, tono muscular, entre otras, las que debidamente interpretados mediante el test de Irwin por ejemplo de podría catalogar al producto ensayado con acciones sobre Sistema Nervioso Central, Sistema Nervioso Vegetativo, etc. Lugo pueden completarse esos datos preliminares con ensayos y pruebas más específicos para determinar la acción con mayor seguridad. METODO EXPERIMENTAL EQUIPOS Y MATERIALES:
Cerda rígida, alambre, papel filtro, material quirúrgico, cronometro
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos: Clorpromazina, clorhidrato, concentración: 0,5 mg/ml Fenilpropanolamina, clorhidrato, concentración: 0,25 mg/ml SoluciónFisiológica (NaCl 0,9%) Extractos acuoso y alcohólico de planta
PROCEDIMIENTO:
Se utilizara un animal para ensayar cada uno de los fármacos y los extractos vegetales. Se miden en todos ellos los parámetros indicados en el cuadro a tiempo 0, medida que sirve de control, luego a los 5, 10, 15, 30 y 60 minutos. Ratón 1: suero fisiológico, vía IP; 0,1 ml Ratón 2: Clorpromazina; vía IP; Dosis 10 mg/kg Ratón 3: Fenilpropanolamina; vía IP; Dosis 5 mg/kg Ratón 4: extracto acuoso de la planta Ratón 5:extracto alcohólico de la planta
Controlar todos los parámetros a los distintos tiempos indicados en el cuadro, valorándolos de 0 a 4 según la intensidad del efecto observado y comparándolo con la medida realizada a tiempo cero.
DESCRIPCION DE LOS DIFERENTES TIPOS DE TEST: TEST DE CATALEPSIA: Se colocan las extremidades anteriores del ratón sobre un lápiz y se eleva unos 2 a 3 cm. El ratón normal, no cataléptico, retira las dos patas del lápiz recuperando la posición. REFLEJO DE POSTURA: un ratón normal colocado de espaldas se restablece rápidamente sobre las cuatro patas. TEST DE TRACCION: se coloca un alambre fino a unos 30cm del suelo, se suspende el ratón por las patas anteriores sobre el alambre. Si el ratón no es capaz de colocar al menos una de las patas posteriores sobre el alambre, en menos de 5 segundos, se considera que ha perdido parte del reflejo de
restablecimiento, si el ratón no es capaz de subir ninguna de las patas posteriores sobre el alambre, o bien cae en este intervalo de tiempo, entonces ha perdido totalmente el reflejo de restablecimiento. El ratón normal subirá encima del alambre en unos 5 segundos. TEST DE HAFFNER: se pinza la base de la cola de cada ratón. El ratón normal se gira y chilla. La pérdida de este reflejo se produce en los ratones bajo la influencia de los analgésicos. FENOMENO DE STRAUB: (Erección De la cola). El ratón levanta la cola en forma de S. PILOERECCION: enderezamiento del pelo PTOSIS PALPEBRAL: caída de los parpados REFLEJO PINEAL: se coloca una cerda rígida detrás de la oreja del ratón o dentro de la misma. Un ratón normal presenta el reflejo pineal, sacudiendo vigorosamente la cabeza. REFLEJO CORNEAL: mediante una cerda, se toca levemente la córnea del ratón. El ratón normal parpadea n la primera aplicación REFLEJO DE FLEXION IPSOLATERAL: Existen dos variantes de este reflejo: el reflejo de flexión ipsolateral anterior y el reflejo de flexión ipsolateral posterior. Se pinza por los dedos una de las patas anteriores o posteriores del ratón durante unos segundos, un animal normal flexional rápidamente la pata. LAGRIMEO: se observa con un trozo de papel filtro, que se humedecerá al contacto o no al contacto con la córnea. MIDRIASIS: Dilatación anormal y permanente de la pupila ACTIVIDAD MOTORA: observar si los movimientos espontáneos voluntarios de los ratones están aumentados o disminuidos, reactividad, respuesta al dolor. CONDUCTA: observar el comportamiento del ratón, si es agresivo pasivo o de temor. Para ellos se estimula al ratón mediante unas pinzas
comprobando la reacción del mismo, auto acicalamiento (arreglo del pelaje), vocalización (emisión de gritos), irritabilidad. ESTADO DE ALERTA: observar si se pone alerta al introducir Ud. La mano o un objeto dentro dela jaula. Ubicación visual (cuando se lo pone en contacto con un objeto), o si presenta pasividad. EXCITACIÓN DEL SNC: respuesta al espanto, Sacudida dela cola, temblores, contracciones, convulsiones. POSTURA: postura corporal, posición de las extremidades INCOORDINACION MOTORA: Marcha vacilante, marcha anormal. TONO MUSCULAR: extremidades (si esta sobre sus 4 extremidades), fuerza prensil (si se agarra fuertemente de la jaula), Encorvamiento corporal, Tono corporal, tono abdominal. CUADRO DE RESULTADOS: Especie: Sexo: Peso (g): Vía: Fármaco:
PARAMETROS ESTADO DE ALERTA: Alerta Ubicación Visual Pasividad ESTADO DE ANIMO: Autoacicalamiento Vocalización Intranquilidad Irritabilidad Temor ACTIVIDAD MOTORA: Reactividad
NORMAL 4 4 0 4 0 0 0 0 4
TIEMPO (min) 5 10 15 30 60
Actividad Espontanea Respuesta al dolor EXCITACIÓN DEL SNC: Respuesta al espanto Sacudida de la cola Temblores Contracciones Convulsiones POSTURA: Postura corporal Posición Extremidades INCOORDINACION MOTORA: Marcha vacilante Marcha anormal TONO MUSCULAR: Extremidades Fuerza prensil Encorvamiento corporal Tono corporal Tono abdominal Ratón normal TEST DE CATALEPSIA: Ratón cataléptico Ratón normal REFLEJO DE POSTURA: Ratón normal TEST DE TRACCIÓN: Ratón normal TEST DE HAFFNER: Ratón normal FENÓMENO DE STRAUB PILOERECCIÓN PTOSIS PALPEBRAL REFLEJO PINEAL: Ratón normal REFLEJO CORNEAL: Ratón normal REFLEJO DE FLEXION IPSOLATERAL: Ratón normal
4 4 0 0 0 0 0 4 4 0 0 4 4 0 4 4 4 4 0 4 4 4 0 0 0 4 4
4
LAGRIMEO MIDRIASIS
0 0
CUESTIONARIO: 1. ¿Sabría especificar a la vista de los resultados de que tipo es el extracto de planta analizado? BIBLIOGRAFIA:
Cuaderno de Prácticas de Farmacodinamia, Universidad de Salamanca, Facultad de Farmacia, Departamento de Fisiología y Farmacología, Farmacognosia y Farmacodinamia, España, 1994. Prácticas de Farmacología, Universidad Nacional de Colombia, Colombia, 1994. Prácticas de Farmacognosia y Farmacodinamia , Universidad de Granada, Facultad de Farmacia, Departamento de Farmacología, España, 1994. EFECTOS SECUNDARIOS DE LOS MEDICAMENTOS
OBJETIVOS:
Después de administrar un fármaco, es posible observar 2 tipos de acciones: el EFECTO DESEADO, esto es la acción clínicamente conveniente y beneficiosa que busco el médico, y los EFECTOS SECUNDARIOS INDESEADOS (que a veces aparecen con los deseados) que son fenómenos adicionales no buscados originalmente. Estas últimas alteraciones pueden ser dañinas o inocuas y si son lesivas reciben el nombre de reacciones adversas o perjudiciales a los fármacos. Demostrar experimentalmente como ciertos fármacos a más delos efectos farmacológicos esperados, producen efectos secundarios no deseados.
MARCO TEÓRICO:
El primer concepto que deben formarse al estudiar Farmacología es que todos los fármacos. Absolutamente todos son potencialmente tóxicos y varios de ellos no tienen ensayos clínicos suficientes que aseguren y garanticen su utilización. En circunstancias óptimas no surgirán efectos adversos si se administra el fármaco adecuado, al paciente indicado en la dosis conveniente (forma farmacéutica, cantidad e intervalo) y en la vía más apropiada , en el momento exacto y para la enfermedad perfectamente diagnosticada , lo que constituye la filosofía del USO RACIONAL DE LOS MEDICAMENTOS. Sin embargo esta situación rara vez se observa en la práctica, porque ningún medicamento es tan específico que origine solo los efectos deseados y buscados en todos los individuos. Entonces como concepto de reacción indeseable diremos que es aquella que produce una droga en forma independiente del efecto terapéutico que se busca y que generalmente no es la que el medico espera. Las reacciones indeseables se clasifican en los siguientes grupos: I. REACCIONES DEL TIPO TOXICO: a) Intoxicaciones: se producen cuando hay sobredosificación de los fármacos. Es aguda si ocurre en pocas horas por dosis toxicas; por ejemplo: la ingestión de grandes cantidades de alcohol. Intoxicación crónica: cuando es consecuencia de dosis pequeñas administradas a largo plazo en el mismo caso anterior la intoxicación alcohólica propia de los bebedores consuetudinarios que lleva a la necrosis hepática. b) Reacciones idiosincrásicas: se trata de reacciones atípicas producidas por los fármacos, distintos a los habituales, no tiene relación con la dosis o sensibilización previa. Este aumento de la capacidad reactiva puede ser adquirida si la reacción se produce a consecuencias de trastornos funcionales u orgánicos a nivel de órganos que metabolizan las drogas; la insuficiencia hepática llevara a reacciones indeseables aun con dosis terapéuticas de muchas sustancias y genéticas cuando el paciente es portador desde el
nacimiento de algún trastorno estructural en uno o más de sus componentes bioquímicos así: la polineuritis que ocasiona la isoniacida en algunos sujetos es causada por un defitic congénito de asetil transferasa. II. EFECTOS SECUNDARIOS: son las reacciones adversas no deseadas por los médicos que ocurren cuando se administran fármaco a una dosis terapéutica mínimas un mismo efecto colateral puede ser productivo por varios grupos farmacodinámicos, así las discrasias sanguíneas ocurren con los arsenicales, mostazas nitrogenadas, cloranfenicol, etc. Otras veces, un mismo fármaco puede producir varios efectos secundarios, tales es el caso de los cortisolicos que producen osteoporosis, diabetes, esteroide, irsutismo, alteración de la libido,etc. III. REACCIONES POR ACOSTUMBRAMIENTO: a) Acostumbramiento: en la administración repetida de un fármaco sin que exista necesidad física o psíquica para ello. b) Habito: el acostumbramiento llega a establecer dependencia psíquica por el fármaco con escaza necesidad de aumentar la dosis en forma progresiva, si deja de administrarse el fármaco el sujeto presenta ansiedad, desasosiego, irritabilidad. Este tipo de reacción puede observarse con el tabaco y el café. c) Dependencia o adicción: el acostumbramiento primero, el hábito luego lleva a un estado crónico de intoxicación en el cual se crea dependencia tanto física como psíquica hacia el fármaco con las siguientes características: 1. Necesidad incontenible (estado compulsivo) para administrarse el fármaco. 2. Tendencia a aumentar la dosis en forma progresiva (de 10 ml de morfina puede llevarse a 2 g diarios) es decir aparición de tolerancia crónica. 3. Aparición de signos y síntomas que constituyen el llamado síndrome de Abstinencia cuando deja de administrársela droga. 4. Efectos nocivos tanto para el sujeto como para la sociedad, para el por el progresivo deterioro psicofísico que va experimentando y para
la sociedad porque durante los estado compulsivos puede cometer atropellos contra los demás. Producen dependencia la morfina, cocaína, barbitúricos. IV. REACCIONES IRMUNOLOGICAS: siendo la gran mayoría de fármacos de peso molecular bajo, para provocar trastornos de hipersensibilidad, requieren actuar como haptenos uniéndose a macromoléculas endógenas, el conjunto trabaja en calidad de antígeno, en algunos casos inclusive ni siquiera es el fármaco el que se une a las macromoléculas sino su metabolismo o alguna impureza. V. REACCIONES FOTOINDICIDAS: a) Fototóxicas: la droga actual como un fotocalatizador que acelera y potencia los efectos nocivos de la luz solar, o bien, la luz convierte al fármaco en un producto toxico b) Fotoalérgicas: a consecuencia de la luz a nivel de la piel, algunos fármacos pueden actuar como antígenos. VI. REACCIONES TERATOGENICAS Y EMBRIOTOXICAS: a) Teratogenicidad: el fármaco o su metabolismo pueden, atravesando la placenta, llegar al embrión durante el primer trimestre del embarazo para alterar la evolución embriológica del nuevo ser y producir mal formaciones congénitas. b) Toxicidad embriotrópica: algunos fármacos que no obstante ser atóxicos para la madre pueden ser tóxicos para el feto. c) Toxicidad neonatal: algunos fármacos administrados durante el trabajo de parto pueden ocasionar trastornos en el recién nacido. d) Toxicidad selectica sobre el recién nacido: algunos fármacos pueden alcanzar en el recién nacido mayor concentración y por lo tanto puede ser tóxicos. METODO EXPERIMENTAL EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, jeringuillas de insulina, balanza, microscopio, lupa, placas de soporte.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos:Solución Naproxeno sódico, concentración 7 mg/ml, Solución Indometacina, concentración 5 mg/ml, Solución Acetil salicilato de lisina, concentracion 20 mg/ml, Suero fisiológico
PROCEDIMIENTO:
Mantener a los animales en ayuno por 12 horas con agua a voluntad antes de la practicas Seis horas antes de la practicas, pesar a los 4 ratones e inyectar subcutáneamente las siguientes soluciones: Ratón Nº 1:Solución Naproxeno sódico, en dosis de 50 mg/kg de peso. Ratón Nº 2:Solución Indometacina, en dosis de 10 mg/kg de peso. Ratón Nº 3:Solución Acetil salicilato de lisina, en dosis de 5 mg/kg de peso Ratón Nº 4:Suero fisiológico, 5 u.i.
Seis horas después de la administración de los fármacos, se sacrifican a los animales con anestesia etérea profunda. Se remueven los estómagos y se abren a lo largo de la curvatura menor. Se lava la mucosa con agua destilada y se fijan en placas de soporte para la inspección de las lesiones gástricas (con ayuda de una lupa o de microscopio). Se valoran los resultados comparándolos con el estómago de ratón que fue administrado suero fisiológico.
CUESTIONARIO: 1. Dibuje las ulceraciones en los estómagos de los 4 ratones.
2. Escriba los conceptos según la Organización Mundial de la Salud de: reacción adversa, efecto secundario, farmacovigilancia, teratogenicidad, acostumbramiento, dependencia y adicción.
BIBLIOGRAFIA:
CURSO DE VALIDACION DE PLANTAS MEDICINALES CON ACTIVIDAD GASTROINTESTINAL, Sao Paulo, Brasil, 1994. Samaniego, E., Fundamentos de la Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
INTERACCION ENTRE FARMACOS (I PARTE) OBJETIVOS:
Cuando se administran dos o más fármacos que actúan sobre un sistema biológico, el efecto integral puede resultar en el aumento o disminución del efecto de uno de ellos, según que actúen en el mismo sentido o tengan efectos contrarios. Si al consecuencia de la interacción resulta en un aumento del efecto de alguno de ellos se denomina SINERGISMO pudiendo el efecto real de los fármacos asociados, ser igual o mayor que el efecto calculado o virtual de la suma de las respuestas obtenidas al administrar separadamente los fármacos; estas formas de sinergismo se conocen como DE SUMA O ADICION cuando el efecto es igual a la suma y POTENCIACION cuando el efecto es mayor que la suma. Observar el SINERGISMO de suma que se produce entre el Tiopental sódico y el Pentobarbital sódico al actuar sobre el ratón blanco.
MARCO TEORICO: Sinergismo: Es el fenómeno por el cual el efecto farmacológico de un fármaco se ve aumentado por la acción de otro que se administra concomitantemente con aquel. El sinergismo suele ser de suma o de potenciación. Sinergismo de suma: Cuando la respuesta farmacológica corresponde a la suma de los efectos individuales de las drogas que se han combinado. Se produce este sinergismo cuando los dos fármacos se unen a los mismos receptores. Si el fármaco A produce un efecto de 10 y el fármaco B de 20, los dos administrados conjuntamente deben provocar un efecto de 30 para que el sinergismo se llame de suma. Sinergismo de potenciación: Cuando la respuesta farmacológica es mayor que la suma de los dos efectos individuales de los fármacos que se han
combinado. Se produce este sinergismo cuando los dos fármacos se unen a receptores diferentes. En el caso del ejemplo anterior el efecto farmacológico debe ser de 40 o más. Tanto el antagonismo como el sinergismo se producen cuando el medico administra dos o más fármacos simultáneamente, estas interacciones medicamentosas son conducta ordinaria en el momento actual, constituyendo por desgracia un abuso desleal de la práctica médica. Algunos inconvenientes de las interacciones medicamentosas son: mayor frecuencia de reacción indeseables y menor probabilidad de identificar al fármaco reposarle, encarecimiento innecesario del tratamiento, mayor posibilidad de enmascarar un cuadro clínico y dificultar el diagnostico, afianzamiento de la terapéutica sintomática y no de la etiológica, etc. METODO EXPERIMENTAL EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas de insulina
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos: Solución de Tiopental sódico, concentración 5 mg/ml Solución de Pentobarbital sódico, concentración 5 mg/ml
PROCEDIMIENTO: 1. Se trabajara con 3 ratones blancos por grupo. 2. Pesara a cada uno de los animales. 3. Administrar los fármacos de la siguiente manera: RATON N°1: Administrar por vía IP, una solución de Tiopental sódico, en dosis de 40 ml/kg de peso. Observar y anotar el tiempo de duración del efecto. RATON N°2: Administrar por vía IP, una solución de Pentobarbital sódico, en dosis de 40 ml/kg de peso. Observar y anotar el tiempo de duración del efecto.
RATON N°3: Administrar por vía IP, tanto la solución de Tiopental sódico como la de Pentobarbital sódico, en dosis de 40 ml/kg de peso cada una. Observar y anotar el tiempo de duración del efecto. CUADRO DE RESULTADOS: RATO N
PES O
N°
(g)
DOSIS VOL FARMACO EFECTOS . ADMINISTRAD (mg/kg OBSERVADO O S ) (u.i)
1
Tiopental
40
2
Pentobarbital
40
3
Tiopental + Pentobarbital
40 + 40
TIEMP O (min)
CUESTIONARIO: 1. Menciones 10 beneficiosas.
ejemplo
de
interacciones
medicamentosas
BIBLIOGRAFÍA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976 Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica , Editorial Medica Panamericana, 1986. Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986. Practicas de Farmacología, Universidad Autónoma de México, México, 1980. Practicas de Farmacognosia y Farmacodinamia, Universidad de Granada, Facultad de Farmacia, Departamento de Farmacología, España, 1994. Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
INTERACCION ENTRE FARMACOS (II PARTE) OBETIVOS:
Cuando se administran simultáneamente dos fármacos a un organismo la respuesta del antagonista puede disminuir o aumentar. En el primer caso, hablamos de antagonismo farmacológico y el fenómeno se registra con los mismos caracteres que la inhibición enzimática, sigue la cinética de acción de las masas e igualmente se clasifica en competitivo y no competitivo. Demostrar experimentalmente el antagonismo de tipo competitivo entre el Clorhidrato de Pilocarpina y el Sulfato de Atropina al actuar sobre el ratón blanco.
MARCO TEORICO: El antagonismo competitivo ocurre cuando el antagonista se une en forma reversible con el mismo receptor del agonista y puede ser desplazado de ese sitio al aumentar la concentración del agonista. La Acetilcolina contrae el intestino delgado y la Atropina se opone a este efecto. El antagonismo no competitivo ocurre cuando el antagonista “inactiva” al receptor de manera que no se forma un complejo receptor-droga, la actividad intrínseca del agonista se reduce sin cambio en la afinidad. La unión puede ser reversible o irreversible. METODO EXPERIMENTAL EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas de insulina, plano inclinado, papel filtro cuadriculado (4x4), sujetadores.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos Químicos: Clorhidrato de Pilocarpina, concentración 0,5 mg/ml Sulfato de Atropina, concentración 1 mg/ml
PROCEDIMIENTO:
1. Se trabajara con 3 ratones blancos 2. Pesar a cada uno de los animales 3. Administrar los fármacos de la siguiente manera: RATON N°1: Administrar por vía IP, una solución de Clorhidrato de Pilocarpina, en dosis de 5 mg/kg de peso. Observar el efecto, para ello se dispone al animal en posición ventral sobre un plano inclinado recubierto con un papel filtro cuadriculado, comenzando en la parte inferior. Cada 5 min se desplaza el ratón una cuadricula, marcando el perímetro de salivación. A los 25 min se obtiene 5 muestras de saliva del ratón. El área de salivación se pesa o se mide su superficie. Se comparara cada área obtenida a los distintos tiempos con los de los ratones 2 y 3. RATON N°2: Administrar por vía IP, una solución de Sulfato de Atropina, en dosis de 1 mg/kg de peso. Observar el efecto, para ello se dispone al animal en posición ventral sobre un plano inclinado recubierto con un papel filtro cuadriculado, comenzando en la parte inferior. Cada 5 min se desplaza el ratón una cuadricula, marcando el perímetro de salivación. A los 25 min se obtiene 5 muestras de saliva del ratón. El área de salivación se pesa o se mide su superficie. Se comparara cada área obtenida a los distintos tiempos con los de los ratones 1 y 3. RATON N°3: Administrar por vía IP, una solución de Clorhidrato de Pilocarpina, en dosis de 5 mg/kg de peso. Observar el efecto durante 10min. Al cabo de ese tiempo, administra por vía IP una solución de Sulfato de Atropina, en dosis de 3 mg/kg de peso. Observar el efecto, para ello se dispone al animal en posición ventral sobre un plano inclinado recubierto con un papel filtro cuadriculado, comenzando en la parte inferior. Cada 5 min se desplaza el ratón una cuadricula, marcando el perímetro de salivación. A los 25 min se obtiene 5 muestras de saliva del ratón. El área de salivación se pesa o se mide su superficie. Se comparara cada área obtenida a los distintos tiempos con los de los ratones 1 y 2. CUADRO DE RESULTADOS: RATON
TAMAÑO DE LAS MUETRAS DE PAPEL FILTRO (mm)
