FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS PROCESO PLAN CURRICULAR CONTENIDO DEL INFORME DE LABORATORIO Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; Fecha: 16 de enero de 2017
INFORME DE LABORATORIO Asignatura:
Bioquímica I
Número de práctica:
1
Fecha de realización:
09-05-18
Integrantes / Grupo N°:
Aguilar Esteban, Guerra Kevin
NOTA
Fecha de entrega:
15-05-18
carbohidratos. 1. Título: Identificación de carbohidratos.
2. Objetivos Objetivo general Identificar el carbohidrato presente en la muestra problema con ayuda de las distintas pruebas de reconocimiento de monosacáridos, disacáridos y polisacáridos realizadas en prácticas previas.
Objetivos específicos
Observar las características caracterís ticas de cada reacción química para determinar el contenido de la muestra. Interpretar Interpret ar y relacionar cada resultado resultad o obtenido con el fin de encontrar el carbohidrato presente.
3. Fundamento teórico Los carbohidratos, también llamados hidratos de carbono, glúcidos y sacáridos, son moléculas orgánicas cuyos componentes son hidrógeno, oxígeno y carbono. Estos son la forma primaria en la que la energía es almacenada y consumida. Los carbohidratos pueden ser clasificados en dos grandes grupos: Los carbohidratos simples, son azúcares cuyo sabor es sumamente dulce, se disuelven con facilidad en el agua y poseen forma de cristal. Algunas hortalizas, las frutas frescas y la miel son los principales proveedores de estos carbohidratos. Están los monosacáridos, monosacáridos, donde se encuentra en primer lugar la glucosa, la cual es el carbohidrato con mayor importancia para la sangre ya que es el azúcar de la sangre y cumple numerosas funciones. Además de la glucosa, otros monosacáridos son la fructuosa, presente en la miel y frutas y la galactosa, que integran a la lactosa. También están los disacáridos, donde se ubican el azúcar de mesa o sacarosa que está compuesta por glucosa y fructosa f ructosa en partes iguales. La lactosa, compuesta por glucosa y galactosa, que se halla en la leche también se ubica dentro de los disacáridos. Por último también forman parte de este grupo la maltosa o azúcar de malta. Los carbohidratos complejos, a este grupo también se lo conocen bajo el nombre de polisacáridos ya que están compuestos por varias unidades de azúcares simples. Los
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carbohidratos compuestos se dividen en fibras, como la pectina y celulosa, y en féculas (Enciclopedia de clasificaciones, 2016). Entre algunas de las reacciones para identificar carbohidratos están: Reacción de Molisch.- Esta reacción permite identificar la presencia de hidratos de carbono en una muestra; se basa en la acción hidrolizante y deshidratante que ejerce el ácido sulfúrico sobre estos comúestos. Las pentosas y hexosas, en presencia de ácidos minerales y a temperaturas elevadas sufren procesos de deshidratación, originando furfural (derovados de pentosas) o hidroximetilfurfural (derivados de hexosas). Los oligosacáridos y polisacáridos tambien sufren estas reacciones, ya que el medio ácido favorece la hidrólisis previa del enlace glucosídico (Jaramillo, 2013). Reacción de Fehling.- Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares reductores (aldosas: glucosa, ribosa, eritrosa, etc.). Se trata de una reacción redox en la que el grupo aldehído (reductor) de los azúcares es oxidado a grupo ácido por el Cu 2+ que se reduce a Cu +. Tanto los monosacáridos como los disacáridos reductores reaccionan con el Cu 2+ dando un precipitado rojo de óxido cuproso. Reacción de Barfoed.- Este ensayo se emplea para diferenciar a los monosacáridos de los disacáridos. Estos últimos reaccionan más lentamente con el acetato cúprico, debido probablemente al tamaño molecular, aunque también pueden estar implicados otros factores tales como una interacción más compleja con los dos anillos monosacáridos (ACASTI, s.f). Reacción de Seliwanoff.- Esta prueba es específica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan más rápidamente que las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el resorcinol produciendo un complejo coloreado. Si el tiempo de ebullición se prolonga, puede dar también positivo para otros azúcares (Morales, 2005).
4. Procedimiento Una vez recibido el tubo de ensayo con la muestra problema se realizó la prueba de Molisch para la identificación de carbohidratos, agregando en un tubo de ensayo 2 ml de la muestra con 5 gotas de α -Naftol y 5 gotas de ácido sulfúrico, obteniendo coloración violeta en el fondo del tubo. A continuación se realizó la reacción de lugol para identificar polisacáridos, colocando 2 ml de la muestra en un tubo de ensayo y añadiendo 3 gotas de ácido clorhídrico con 3 gotas de lugol, no se percibió un cambio. Después se realizó la reacción de reconocimiento de la sacarosa, para ello se puso 2ml de la muestra con 5 gotas de sulfato de cobalto y 5 gotas de hidróxido de sodio, observando así una coloración violeta. Luego se realizó la prueba de Barfored colocando acetato de cobre en un tubo junto con la muestra sin percibir cambio alguno. Finalmente se procedió a realizar la reacción de hidrolisis acida junto con Felling, para ello se colocó 2ml de la muestra con ácido clorhídrico y se llevó a baño María durante 5 minutos, terminado ese proceso se neutralizó la solución con hidróxido de sodio y se llevó a baño María una vez más hasta que se observó la formación de un precipitado rojo.
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5. Resultados Tabla 1. Resultados obtenidos en el laboratorio
Reactivos utilizados
Resultados
Observaciones
-Naftol
+
Se formó un anillo color violeta por la presencia de carbohidratos.
Reacciones coloreadas del almidón
-
No ocurrió el cambio de color a azul.
Reacción de reconocimiento de la sacarosa
+
Al añadir gotas de sulfato de cobalto e hidróxido de sodio el líquido adquirió una coloración violeta.
Barfored
-
No se produjo cambio alguno
Hidrólisis ácida de la sacarosa
+
La solución al añadir HCl fue incolora al ebullir durante 5 minutos y se agregó hidróxido para neutralizar.
Fehling A+B
+
Se formó un precipitado color rojo por la presencia de azucares reductores.
α
Elaborado por: Guerra K.
6. Discusión de Resultados La reacción de Molisch es una reacción general para los carbohidratos que contienen más de 5 átomos de carbono, la aparición del anillo violeta-rojizo en el sitio de contacto de los dos líquidos, indica que la muestra contiene carbohidratos (Mora, 2014). Esto se pudo comprobar al obtener como resultado el anillo color violeta al fondo del tubo de ensayo. Con la Prueba de Barfoed, un ensayo químico utilizado para detectar monosacáridos, que se basa en la reducción de Cu 2+ (en forma de acetato) a Cu 1+ (en forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo (Pajaro, 2011), se puedo de descartar la presencia de monosacáridos. La hidrolisis acida de disacáridos consiste en la ruptura del enlace glucosidico, generando así sus monómeros en disolución acuosa que al entrar en contacto con los reactivos de Felling A y B forman un precipitado de color rojo, debido a la presencia del óxido cúprico. Al realizar esta hidrolisis se está dejando libre el grupo carbonilo de los monómeros por lo tanto el carácter de reductor de los azucares aumenta. El poder reductor que pueden presentar los azúcares proviene de su grupo carbonilo, que puede ser oxidado a grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. (ALMEZ, s.f).
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La reacción de reconocimiento de la sacarosa utiliza sulfato de cobre, el cual en disolución se disocia en sus respectivos iones y junto con los grupos OH presentes en la glucosa pueden aportar con un par de electrones libre para poder coordinarse a un metal y generar un complejo coloreado, en donde el contra ion es el anión sulfato. Inmediatamente se agrega hidróxido de sodio, para que el contra ion sulfato sea reemplazado con el ion hidroxilo, esto provoca que el complejo cambie su conjugación por tanto cambiara su color.
7. Conclusiones
Se identificó al carbohidrato presente en la muestra primero por medio de la prueba de Molisch con α-Naftol comprobando que está presente un carbohidrato, con la prueba del almidón dando negativo descartando polisacáridos, con la prueba de reacción de sacarosa y f inalmente la hidrólisis ácida con la ayuda de la prueba de Fehling concluyendo así que el carbohidrato presente fue un disacárido en este caso glucosa + fructosa. Se analizó cada prueba experimentada al igual que sus características, como cambios de color y forma de reacción comparando con fuentes bibliográficas para comprobar los resultados experimentales y definir el carbohidrato de la muestra problema.
8. Cuestionario /Consulta No aplica 9. Bibliografía ACASTI. (S.f). IDENTIFICACION Y CUANTIFICACION DE AZUCARES . Recuperado el 30 de Abril de 2017, de https://acasti.webs.ull.es/docencia/practicas/5.pdf Acosta, O. (2018). Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Obtenido de Universidad del Valle : https://es.scribd.com/doc/115307519/Propiedades-de-LosCarbohidratos ALMEZ. (S.f). IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES. Recuperado el 30 de Abril de 2017, de http://almez.pntic.mec.es/~mbam0000/paginas/LABORATORIOs/azucares.htm Enciclopedia de clasificaciones . (2016). Tipos de carbohidratos. Recuperado el 30 de Abril de 2017, de http://www.tiposde.org/salud/254-tipos-de-carbohidratos/
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Jaramillo, C. (15 de Septiembre de 2013). SlideShare. Recuperado el 30 de Abril de 2017, de Reacciones para identificación de carbohidratos: https://es.slideshare.net/sextobtres/informe-de-extraccion-e-identificacin-decarbohidratos Mora, M. F. (5 de Noviembre de 2014). SlideShare. Recuperado el 30 de Abril de 2017, de Identificación de carbohidratos: https://es.slideshare.net/sunanowafer/informe-prctica-1-indentificacin-decarbohidratos Morales, A. (2005). Reconocimiento de carbohidratos. Recuperado el 4 de Noviembre de 2017, de http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf Pajaro, A. (27 de Marzo de 2011). Scribd. Recuperado el 30 de Abril de 2017, de https://es.scribd.com/doc/51664602/En-el-laboratorio-de-pruebas-cualitativaspara-carbohidrato-podemos-analizar-barios-cosas
10. Anexos
Figura 1: Muestra problema
Figura 3: Reacción de reconocimiento de la sacarosa
Figura 2: Reacción α-Naftol
Figura 4: Fehling A+B