DETERMINACIÓN DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS 1.
OBJETIVOS
Determinar la concentración de los triglicéridos en el suero.
2.
INTRO NTRODU DUC CCIÓ CIÓN
a) Triglicéridos Los triglicéridos, denominados denominados también triacilgliceroles, triacilgliceroles, tripalmitinas son lípidos que están formados por tres moléculas de ácidos grasos y una molécula de alcohol: el glicerol. Estos lípidos en parte se obtienen de la dieta, sin embargo en muchos tejidos, especialmente en hígado y en tejido adiposo se produce la síntesis de triglicéridos a partir de carbohidratos (se forman por reacción de dos moléculas de acil-CoA grasos con glicerol-3-fosfato para producir ácido fosfatídico fosfatídico, que se desfosforila a diacilglicerol , que es seguidam seguidamente ente acilado acilado por una tercera tercera molécula molécula de acil-CoA acil-CoA,, produci produciendo endo finalmen finalmente te el triglicérid triglicérido, o, mediante la enzima glicerofosfato aciltransferasa). aciltransferasa) . El tejido tejido adipo adiposo so está está espec especial ialmen mente te diseñ diseñado ado para para la síntes síntesis, is, almac almacena enamie miento nto e hidr hidróli ólisis sis de triglicéridos. Siendo este el mecanismo principal que tiene el cuerpo para el almacenamiento de energía a largo plazo, también se produce almacenamiento en el músculo esquelético y cardíaco, sólo para consumo local. La síntesis de triglicéridos en el hígado se utiliza principalmente para la producción de lipoproteínas sanguíneas.
b) Lipoproteínas sanguíneas Son macromoléculas compuestas por lípidos y proteínas, encargadas del transporte de lípidos a través del cuerpo humano. Su función es envolver los líquidos insolubles en el plasma provenientes de: los alimentos (exóge (exógenos) nos) y los sintetiza sintetizados dos por nuestro nuestro organis organismo mo (endóge (endógenos) nos),, que son transpor transportado tados s desde el intestino y el hígado a los tejidos periféricos y viceversa; devolviendo el colesterol al hígado para su eliminación del organismo en forma de ácidos biliares. Más del 95% de todos los lípidos del plasma está en forma de lipoproteínas, lipoproteínas, que son pequeñas partículas muchos más pequeñas que los quilomicrones pero de una composición similar desde el punto de vista cualitativo. Los lípidos no pueden movilizarse en los fluidos corporales debido a su naturaleza hidrofóbica. hidrofóbica. Por ello, para permitir su transporte en el organismo, son combinados con proteínas llamadas betaglobulinas para formar lipoproteínas. Una vez que los lípidos han sido absorbidos a través del intestino, se combinan en el plasma sanguíneo con cadenas de polipéptidos para producir producir una familia de lipoproteínas distinta, las que son clasificadas en función de su densidad, determinada mediante centrifugación. Como los lípidos son mucho menos densos que las proteínas, se observa una relación inversa entre el contenido de lípidos y su densidad; por ejemplo, un alto contenido de lípidos significa partículas de baja densidad.
c) Clasificación de las lipoproteínas según su densidad HDL o lipoproteínas de alta densidad La HDL sirve para remover el colesterol de las paredes de las arterias y devolverlo al hígado. Niveles alto altos s de HDL HDL (sup (super erio iore res s a 45 mg/d mg/dL) L) se cons consid ider era a que que prot proteg egen en las las arte arteri rias as del del peli peligr gros oso o estrechamiento y, así, contribuyen a prevenir los ataques cardíacos. En un estudio, los niveles de HDL por debajo de 35 mg/dl fueron estrechamente predictivos de muerte por enfermedad arterial coronaria.
LDL o lipoproteínas de baja densidad Estas son las agresoras y son las que más daño nos pueden producir porque contienen mayor cantidad de colesterol, estas cantidades de colesterol y ésteres asociadas a la LDL son habitualmente de unas dos terceras partes del colesterol plasmático total.
VLDL o lipoproteínas de muy baja densidad Esta partícula, partícula, compues compuesta ta sobre sobre todo de triglicér triglicéridos idos es secretad secretada a por los hepatocitos hepatocitos y contiene contiene apolipoproteínas B-100. Concentraciones elevadas de VLDL dan como resultado hipertrigliceridemia. Los triglicéri triglicéridos dos de la partícul partícula a C-VLDL C-VLDL plasmáti plasmática ca circulan circulante te son eliminad eliminadas as por lipasas lipasas titulare titulares s (desli (deslipid pidac ación ión)) para para almace almacenar narse se (lipas (lipasa a lipopr lipoprote oteica ica adipo adiposa) sa) o utiliz utilizars arse e (lipa (lipasa sa lipop lipopro rotei teica ca esquelética). esquelética). La apolipoproteína apolipoproteína C tiene una función muy importante en la modulación de la actividad de las lipasas lipoproteicas.
Quilomicrones Lipopro Lipoproteína teínas s de muy baja densidad densidad menor a 0.95 y son precursora precursoras s de las lipoproteí lipoproteínas nas de baja densidad. Son relativamente bajas en proteínas, fosfolípidos fosfolípidos y colesterol, colesterol, pero altas en triglicéridos (55 a 95 %). En términos más amplios, estas partículas son denominadas denominadas «lipoproteínas ricas en triglicéridos». Derivaban de las grasas dietarias (exógenas) absorbidas en el intestino, y se forman en el epitelio intestinal. Estas partículas consisten sobre todo en triglicéridos (98% de su peso) con colesterol y una sola apolipoproteína, la B-48.
3.
OBTENCIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
Vía exógena Obtención de triglicéridos a través de la dieta y absorción de monoacilgliceroles a nivel del intestino.
Vía endógena Obtención por biosíntesis tanto en el hígado (síntesis de VLDL) como en el tejido adiposo (síntesis y degradación).
4.
PROCE ROCED DIMIE IMIENT NTO O Tubo Blanco
Suero (mL.) Estandar (mL.) Rvo de trabajo (mL.)
-- -- 1,0
Tubo Estandar --0,01 1,0
Tubo M.P 0,01 --1,0
Mezclar e incubar por 10’ a 37ºC Leer las absorbancias a 510 nm.
5.
CÁLCULOS
[T.A.G] = FC x ABS M.P
, donde FC = 200 mg/dL / ABS ESTANDAR
6. VALOR ALORES ES DE REFE REFERN RNCI CIA A
Concentración Normal: 25 a 160 mg/dl
7. IMPO IMPOR RTANCI ANCIA A CLÍN CLÍNIC ICA A
La evaluaci evaluación ón de triglicéridos triglicéridos en sangre sangre es importan importante te para el diagnóst diagnóstico ico y seguimie seguimiento nto de las hipertrig hipertriglice liceridem ridemias, ias, ya sean de origen origen genético genético o secundar secundarias ias entre entre otras otras enferme enfermedade dades. s. Valores alores elevados aumentan el riego de arteriosclerosis y de enfermedad coronaria.
Hipertrigliceridemia
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Pancreatitis Agrandamiento del hígado
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Agrandamiento del bazo Depósitos grasos en la piel conocidos como xantomas. Fuera Fuera de de esto, esto, los los triglicér triglicéridos idos pueden pueden no provoca provocarr otros otros síntom síntomas as hasta hasta que que se presentan enfermedades cardiacas o de los vasos sanguíneos. Factor importante de riesgo de arterosclerosis. Arter rteriiopatí patía a co coronari naria a