UNIVERSIDAD PRIVADA TELESUP
FACULTAD MEDICINA HUMANA CATEDRA: CATEDRA: BIOQUÍMICA BIOQUÍMICA
TEMA: DETERMINACI$N DEL PERFIL LIPIDICO % HDL y DETERMINACI$N DE LDL COLESTEROL DOCENTE: URETA SIERRA Percy PUMA MAMANI Miguel ESTUDIANTE: MANCHEGO MEZA M EZA Dhaa A!"ri#
CICLO: IV
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O&'ETIVOS ANALISIS DE COLESTEROL O()e"i*+ Geeral:
Determinar la concentración de colesterol en una muestra de sangre u orina.
O()e"i*+! E!,ec-.ic+!: Comrender desde el unto de !ista de reacciones "io#u$micas% las "ases cient$&icas del An'lisis de determinación de la concentración colesterol en sangre ( orina.
ANALISIS DE TRIGLICERIDOS O()e"i*+ Geeral:
Determinar la concentración de triglic)ridos en una muestra de sangre.
O()e"i*+! E!,ec-.ic+!:
Comrender desde el unto de !ista de reacciones "io#u$micas% las "ases cient$&icas del
An'lisis de determinación de la concentración de triglic)ridos en sangre.
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INTRODUCCI$N *os l$idos son un con+unto mu( ,eterog)neo de "iomol)culas cu(a caracter$stica distinti!a aun#ue no e-clusi!a ni general es la insolu"ilidad en agua% siendo or el contrario% solu"les en disol!entes org'nicos "enceno% cloro&ormo% )ter% ,e-ano% etc./. Est'n constituidas "'sicamente or tres elementos: car"ono C/% ,idrógeno 0/ ( o-$geno O/1 en menor grado aarecen tam"i)n en ellos nitrógeno 2/% &ós&oro 3/ ( a4u&re 5/. Estos son constitu(entes imortantes de la alimentación no solo or su ele!ado !alor energ)tico% sino tam"i)n or las !itaminas liosolu"les ( los 'cidos grasos esenciales contenido en las grasas de los alimentos naturales. El colesterol es un l$ido anti'tico% #ue se encuentra en los te+idos ( en las liorote$nas lasm'ticas como colesterol li"re o 6ster de colesterilo. Es sinteti4ado or numerosos te+idos a artir de acetil7CoA1 es un elemento indisensa"le en la roducción de esteroides% s$ntesis de ,ormonas estrógenos/ rincial comonente de "ilis% catali4ador acti!o de intercam"ios celulares% inter!ienen acti!amente en la s$ntesis e los andrógenos e indisensa"le en la &ormación de mem"ranas celulares. El colesterol es un l$ido anti'tico% #ue se encuentra en los te+idos ( en las liorote$nas lasm'ticas como colesterol li"re o 6ster de colesterilo *os triglic)ridos son esteres de glicerol% generalmente de tres 'cidos grasos de distintos% es transortado en el lasma &undamentalmente en &orma de #uilomicrones ( 8*D*. *os triglic)ridos &orman arte de las liorote$nas ( se di!iden en e-ógenos #ue son los #ue se ingieren en la dieta ( los endogenos #ue son sinteti4ados or el ,$gado en su roceso &isiológico al degradar los e-ógenos. *a dosi&icación de colesterol ( triglic)rido de"en ,acerse &recuentemente% comlement'ndolo con el er&il li9dico (a #ue son &actores desencadenantes del in&arto cardiaco.
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MARCO TEORICO El colesterol es un tio una grasa #ue se encuentra normalmente en nuestro orgamismo. El colesterol se encuentra en nuestro cuero &ormando arte de mem"ranas celulares% liorote$nas% ( ,ormonas esteroideas entre ellas se encuentran las ,ormonas se-uales: rogesterona% testosterona ( estrógenos/. El colesterol es tam"i)n un imortante constitu(ente de la "ilis #ue es secretada or la !es$cula "iliar ( #ue cumle una imortante &unción en la digestión de las grasas. El colesterol tam"i)n es un recursor de la !itamina D. El rincial trastorno #ue ro!oca el colesterol en el organismo cuando se encuentra en e-ceso lo constitu(e la roducción de deósitos de grasas en arterias !itales% causando aterosclerosis% accidente cere"ro!ascular ( en&ermedad !ascular eri&)rica.
C+le!"er+l /(ue+/ y c+le!"er+l /0al+/ El colesterol es una grasa es oco solu"le en agua% or lo #ue si se transortara li"re or la sangre ser$a en &orma de gotas de colesterol ( se !er$a en nuestra sangre como gotas de grasa. 3ero el caso% es #ue la naturale4a ,a ideado una manera de ,acer solu"le en agua al colesterol ( transortarlo or la sangre ( esto es or medio de liorote$nas. *as liorote$nas son sustancias mediante las cuales distintos tios de grasas como el colesterol% los )steres de colesterol% los triglic)ridos ( &os&ol$idos son transortados a tra!)s de la sangre. El colesterol asociado a las liorote$nas de "a+a densidad se le denomina *D*7 colesterol% ( se le conoce como colesterol malo% (a #ue es la rincial liorote$na #ue lle!a el colesterol del ,$gado al resto del organismo. Al colesterol asociado a la liorote$na 0D* se le denomina 0D*7colesterol% ( se le conoce como colesterol "ueno (a #ue su rincial &unción es recoger el colesterol de los te+idos% ( lle!arlo al ,$gado. El aumento del *D*7colesterol o colesterol malo en la sangre lle!a a un con+unto de rocesos #ue desem"ocan en la &ormación de lacas de grasa en las aredes de los !asos sangu$neos% conocidos como ateromas. *as lacas de ateroma reducen la lu4 de las arterias ( !enas% ( si una de estas lacas se desrende uede roducir un in&arto agudo al miocardio o en el cere"ro un derrame o accidente !ascular cere"ral..
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F+r0aci1 #e a"er+0a El ateroma es la lesión caracter$stica de la arteriosclerosis ( consiste en el deósito de grasas en la suer&icie interna de las asterias. *os deósitos de colesterol en las arterias son la rincial causa de &ormación de ateroma ( de en&ermedades !asculares% entre ellas el in&arto agudo al cora4ón. 3or esto es imortante determinar en &orma reco4 los ni!eles ele!ados de colesterol en los acientes.
Fue"e! #e c+le!"er+l El origen del colesterol en el organismo tiene dos &uentes% la e-terna #ue #ue ro!iene de la dieta ( la interna #ue roduce el roio organismo. De"ido a #ue el organismo uede roducir su roio colesterol% e-iste la osi"ilidad #ue ersonas #ue no consuman e-ceso de colesterol% tengan ni!eles sangu$neos ele!ados or tener alg;n desorden gen)tico7meta"ólico #ue conlle!a a dic,a ele!ación. *os alimentos deri!ados de animales son ricos en colesterol esecialmente ,ue!os% l'cteos ( las carnes. El organismo a"sor"e aro-imadamente la mitad del colesterol contenido en la dieta. El ,$gado es el rincial órgano roductor de colesterol <= al >= ? del total/% siendo otros órganos imortantes en la roducción como el intestino% corte4a surarrenal% test$culos ( o!arios. *a s$ntesis del colesterol se ,alla regulada so"re todo or la ingesta de colesterol en la dieta.
Ni*ele! #el c+le!"er+l e la !agre *a medición de solamente el colesterol total tiene !alor limitado. 5in em"argo cuando se mide en con+unto con las di&erentes liorote$nas so"re todo el colesterol *D* ( el colesterol 0D* o&rece un anorama m's amlio so"re la ro"a"ilidad de roducción de ateroma ( or lo tanto de riesgo de en&ermedades de las arterias coronarias. *os ni!eles normales en sangre de colesterol !ar$an con la o"lación ( suelen aumentar con la edad. 3or eso% aun#ue en grasas sangu$neas se uede ,a"lar de ni!eles normales es me+or utili4ar los ni!eles recomenda"les (a #ue estos s$ nos indican riesgo de aterosclerosis. Adem's% e-isten muc,os &actores am"ientales como la dieta% ( el &umado #ue tam"i)n inciden en aumento de los ni!eles de l$idos grasas/ sangu$neos. Colesterol total mg@dl/
Ni*ele! !eg2 rie!g+ #e c+r+ari+,a"-a! 2i l
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*D*7Colesterol mg@dl/ tam"i)n llamado colesterol malo
Ni*ele! !eg2 rie!g+ #e e.er0e#a#e! #e la! ar"eria! c+r+aria! En general lo desea"le es menos de <= ero deende de &actores de riesgo. M's adelante se detallan dic,os &actores de riesgo. Con "ase en los di&erentes &actores de riesgo #ue resente el aciente as$ como la resencia o ausencia de en&ermedad coronaria% los ni!eles de *D* desea"les !an a cam"iar% ues con un aciente con en&ermedad coronaria declarada se !a a #uerer tener el *D* a;n m's "a+o. 3er&il del aciente
2i!el *D* o"+eti!o
Ausencia de M'-imo &actores de riesgo Ausencia de M'-imo <= en&ermedad coronaria ( mg@dl m's de > &actores de riesgo 3resencia de M'-imo <== en&ermedad coronaria mg@dl
Fac"+re! #e rie!g+ #e e.er0e#a# c+r+aria <. Edad:
0om"re G aHos
Mu+er GG aHos o meno'usica sin tratamiento de reemla4o ,ormonal
>. umador . 3ortador de Dia"etes mellitus . 0istoria &amiliar de en&ermedad coronaria G. 0iertensión J <=@= o tratamiento con anti7,iertensi!os F. 0D*7colesterol G mg@dl *a dia"etes mellitus es un &actor tan imortante #ue algunos autores sugieren tomarlo en cuenta como un &actor aislado ( or lo tanto se recomienda ara acientes dia")ticos intentar mantener los !alores de colesterol *D* de ser osi"le "a+o de <== mg@dl. 0D*7Colesterol mg@dl/% tam"i)n llamado colesterol "ueno 2i!eles seg;n riesgo de coronarioat$as Alto
G
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M$nimo
J F=
En el caso del 0D* colesterol se uede ser m's esec$&ico con resecto al riesgo coronario asociado a los di&erentes ni!eles como lo muestra la siguiente ta"la.
Rie!g+ #e e.er0e#a# c+r+aria a!+cia#+ c+ l+! i*ele! #e HDL3C+le!"er+l Concentración7 0D* mg@dl/
Riesgo coronario
>G
2i!el eligroso
>G7
Riesgo ele!ado
G7
Riesgo moderado
G7G
Riesgo romedio
GG7K
Riesgo "a+o
J KG
*onge!idad
Relaci1 c+le!"er+l "+"al4HDL + I#ice #e Ca!"elli Otro dato mu( ;til ara anali4ar en con+unto los !alores o"tenidos es la relación colesterol total@0D*% conocido como $ndice de Castelli o $ndice aterog)nico. Est' relación nos muestra si los ni!eles de 0D* son su&icientes ara mane+ar la carga total de colesterol ( directamente nos seHala la concentración de *D* ( 8*D*. Medir esta relación es ;til cuando el 0D* arece ser el adecuado ero el colesterol total est' mu( alto. Di&erentes estudios ,an demostrado #ue las mu+eres mane+an ni!eles de 0D* ma(ores #ue el ,om"re ero con el mismo riesgo. 3or lo tanto% a la ,ora de !alorar a las mu+eres sus ni!eles de 0D* desea"les de"en ser ma(ores a G mg@dl% or eso la relación colesterol total@0D* colesterol desea"le ara mu+eres es menor. Riesgo de en&ermedad coronaria asociado con el $ndice de Castelli 0om"re
Mu+er
Riesgo coronario
%G
%
Mitad del romedio
%G 7 G%= % 7 %G 3romedio G%< 7 %F %G 7 K%< Dos !eces
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%K 7 > K%> 7 << Tres !eces el romedio Aun#ue se ,an utili4ado muc,os $ndices tratando de !alorar el riesgo de coronarioat$as% no se recomienda su uso como ;nica !aria"le a !alorar% (a #ue cada una de las liorote$nas es un &actor indeendiente de cardioat$a coronaria.
Triglic5ri#+! Casi todo el mundo conoce la e-istencia del colesterol% ( uede #ue ,a(a tenido la ocasión de o"ser!ar #ue &recuentemente los m)dicos al solicitar un an'lisis de colesterol% iden tam"i)n Llos triglic)ridos. 3ero% N#u) son los triglic)ridos. 0a"r$a #ue decir #ue los triglic)ridos es la &orma m's e&iciente #ue tiene el organismo de almacenar energ$a: esto es% en &orma de grasa. 3ues "ien% lo #ue almacenan las c)lulas constitu(entes del te+ido adioso% #ue son las #ue con&orman Lla grasa% son los triglic)ridos. Desde un unto de !ista "io#u$mico ser$a la ui1 #e "re! 6ci#+! gra!+! a ua glicerol/. 0+l5cula #e gliceria o 3ero ara #ue la grasa llegue a constituirse como deósito de energ$a es reciso su transorte re!io or la sangre. *a concentración de esos triglic)ridos #ue est'n siendo transortados or nuestra circulación son los Ltriglic)ridos #ue aarecen en nuestros an'lisis de sangre.
7De #1#e +("ee0+! l+! "riglic5ri#+!8
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En circunstancias normales% los triglic)ridos roceden de los 'cidos grasos #ue a"sor"emos a tra!)s del intestino rocedente de los alimentos ( de los #ue el ,$gado es caa4 de ela"orar. *os triglic)ridos asan a la sangre desde am"os órganos% siendo transortados or unas rote$nas esecialmente diseHadas ara ello: las liorote$nas. 5e denominan #uilomicrones a las liorote$nas ricas en triglic)ridos originadas en el intestino tras una comida% mientras #ue el ,$gado sinteti4a otras rote$nas ara transortar triglic)ridos denominadas 8*D*% #ue son las siglas en ingl)s Lde liorote$nas de mu( "a+a densidad. En el an'lisis de sangre aarece "a+o la denominación gen)rica de triglic)ridos la suma las concentraciones en lasma de los triglic)ridos aortados or los #uilomicrones ( or las 8*D*
7P+r 9u5 e! i0,+r"a"e 0a"eer u i*el a#ecua#+ #e "riglic5ri#+!8 undamentalmente or dos moti!os. El rimero es #ue ci&ras mu( altas de triglic)ridos en sangre ueden causar una ancreatitis aguda% #ue es una en&ermedad caracteri4ada or la in&lamación del 'ncreas% #ue cursa con dolor a"dominal imortante% ( #ue somete al su+eto #ue la adece a un alto riesgo de morir en oco tiemo si e-isten comlicaciones de este roceso% lo #ue ocurre en aro-imadamente uno de cada die4 acientes. *a segunda causa es #ue se sa"e actualmente #ue los triglic)ridos son un &actor indeendiente de riesgo cardio!ascular% si "ien en una magnitud in&erior a la #ue roduce el colesterol. 2o o"stante% aun manteniendo )ste en los l$mites adecuados% los triglic)ridos comortan lo #ue denominamos un riesgo li$dico residual o remanente% #ue no es otra cosa #ue la osi"ilidad comlementaria de su&rir una en&ermedad cardio!ascular ese a tener un ni!el Lnormal de colesterol.
7Cu6l e! el i*el #e "riglic5ri#+! a#ecua#+8 3odr$amos decir #ue deende del riesgo #ue #ueremos e!itar. As$% se sa"e #ue a artir de los G== mg@dl% ni!el considerado como mu( alto% el riesgo de desarrollar una ancreatitis se incrementa. 3or encima de >== mg@dl se consideran (a ele!ados ( constitu(en un &actor de riesgo cardio!ascular. El ni!el normal desea"le es a#uel
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7u5 ,+#e0+! hacer !i "ee0+! al"+! l+! "riglic5ri#+!8 Consulte con su m)dico de atención rimaria. Pl le orientar' so"re el ro"a"le origen de esa ele!ación e iniciar' el oortuno tratamiento diet)tico% #ue uede ser comlementado con &'rmacos. Tam"i)n +u4gar' si or su cuant$a% o or la necesidad de un diagnóstico de recisión% recisa ser remitido a nuestra Unidad de *$idos. En rinciio% dado #ue la causa m's &recuente es el so"reeso o la o"esidad% reducir eso mediante una dieta "a+a en calor$as es la medida m's e&ica4. Ba+ar un G7<=? del eso e#ui!ale a reducir un >=7 =?% ( en ocasiones normali4ar% los ni!eles altos de triglic)ridos. Es con!eniente #ue esa dieta no sea e-cesi!amente rica en ,idratos de car"ono ( de"e ser o"re en a4;cares re&inados ( &ructosa% ues el organismo tiende a con!ertirlos en triglic)ridos. Tam"i)n el alco,ol est' contraindicado en las ,iertrigliceridemias% or lo #ue ,a( #ue rescindir de )l si se tienen altos los triglic)ridos. 8alores ele!ados de triglic)ridos J==/ enmascaran en di&erentes grados los !alores de los dem's l$idos deendiendo de la metodolog$a utili4ada siendo oco con&ia"les los !alores o"tenidos de colesterol ( sus &racciones. En el caso de los triglic)ridos no se ,a encontrado relación directa como causa de roducción de ateroma% ero muc,as !eces los triglic)ridos ele!ados est'n acomaHadas de colesterol aumentado. 3or lo general se recomienda tratar la ,iertrigliceridemia ( cuando se "a+e a ni!eles normales !eri&icar los !alores de colesterol. Tam"i)n se uede recomendar en acientes de alto riesgo tratar al aciente como ,iercolesterol)mico% ues la ma(or$a de los trastornos de las grasas mane+an tanto !alores ele!ados de triglic)ridos ( de colesterol. Adem's !alores mu( ele!ados de triglic)ridos ueden roducir trastornos serios como una ancreatitis aguda.
Ni*ele! rec+0e#a#+! #e "riglic5ri#+! 2ormal
>== mg@dl
*$mite alto
>==7==
Alto
== 7 < ===
Mu( alto
J < ===
C+"r+l #e la hi,erc+le!"er+le0ia e i;+! y a#+le!ce"e! Es imortante identi&icar ( tratar niHos ( adolescentes con ni!eles aumentados del colesterol% con un antecedente &amiliar de en&ermedad cardio!ascular rematura o a cu(os adres se les ,a( detectado alg;n tio de ,iercolesterolemia. 3or lo tanto% se recomienda:
2
An'lisis del colesterol sangu$neo a a#uellos niHos ( adolescentes cu(os adres o a"uelos% a los GG aHos o antes% ,a(as su&rido de aterosclerosis coronaria% in&arto al miocardio% en&ermedad !ascular eri&)rica o en&ermedad cere"ro!ascular. An'lisis de todos los niHos ( adolescentes cu(os adres mane+en !alores ele!ados de colesterol suerior a >= mg@dl.
Val+re! #e c+le!"er+l !agu-e+ ,ara i;+! y a#+le!ce"e! Desea"l *im$tro& Alt e e a Colestero l total mg@dl/
==
*D*7 colesterol mg@dl/
<<=
<<= 7 J <> <=
MATERIAL
Tu"os de ensa(o de < - <==
3ietas de G ml
3ieta autom'tica de <= >== ul
3ieta autom'tica de <=== ul
2
Tu"os !acutainer con gel searador
Agu+as de do"le "isel <- ara !acutainer
*igadura
Alco,ol de K=S
2
EUIPOS:
BaHo Mar$a
Centri&uga
Esectro&otómetro
REACTIVOS:
Reacti!o de Colesterol en4im'tico.
2
Reacti!o de triglic)rido
3isceta m's agua destilada
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de orina
Muestra de sangre
2
PROCEDIMIENTO DE COLESTEROL TOTAL: <. E-traer una muestra de sangre del aciente con el tu"o amarillo% Centri&ugarlo or <= minutos. >. En tres tu"os o cu"etas esectro&otom)tricas marcadas B Blanco/% 5 5tandard/ ( D Desconocido/ colocar: . Me4clar ( eserar <= a : =.=< Est'ndar/ Tu"o : =.=<= muestra/ C. M- C. Est'ndar - A"s. M777777777777777777777777777777 A"s. 5t. >== @ =.=<
PROCEDIMIENTO DE TRIGLICERIDOS: <. 0omogenei4ar la muestra antes de usar% esecialmente &rente a sueros lec,osos. >. En tres cu"etas esectro&otom)tricas marcadas B Blanco/% 5 5tandard/ ( D Desconocido/ coloca B
5
D
<= ul
Muestra
7
7
5tandard
7
<= ul
7
Reacti!o A
< ml
< ml
< ml
. Me4clar% incu"ar G minutos a KoC o >= minutos a temeratura am"iente GoC/. En&riar ( leer en esectro&otómetro a G=G nm lle!ando el aarato a cero con agua destilada.
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CONCLUSIONES: 5e reali4a la determinación de colesterol en suero sangu$neo de una muestra normal ( otra atológica ( se o"ser!a la roorción del color con la concentración de la muestra% ( se conclu(ó #ue en el caso atológico las consecuencias #ue odr$an ocurrir si se mantienen los ni!eles ele!ados de colesterol.
5e conclu(e #ue la determinación de triglic)ridos nos !a a indicar el ni!el de triglic)ridos en el organismo
5e conclu(e #ue la determinación de triglic)ridos nos !a a indicar la concentración del analito siendo los !alores ele!ados cuando se erci"e en la muestra de suero un asecto lec,oso ( cuando se reali4a la lectura de la reacción #u$mica !a a tener un color &inal #ue es ro+o grocella cu(o color !a a estar en relación directa con la concentración de la muestra.
17
ANE
17
&I&LIOGRAF=A
htp://www.cunoc.edu.g/medicina/praccano8!io"ui.pd#
htp://www.wiener$%a!.com.ar/&ademecum'ocumeno(
htp(://e(.(%ide(hare.ne/.../deerminacion$de$%ipoproena($de$a%a$den(idad$ hd%$ en$(uer
www.odon.u!a.ar/uacad/!io"uimica/doc(/c%a(e17caa!o%i(modeacgra(o(20 12.pd#
www.(cien)cp(*chic.com/)ne((/aceie($gra(a(1.hm%
