Arzate Guillen Adriana Lizeth
Grupo: 3FV2
Sección: II
López Hernández Jonatan David
REACCIONES ENZIMATICAS DE ÓXIDO REDUCCIÓN”
“
Objetivo
Discutir la importancia de los cofactores y el efecto de algunos inhibidores en la actividad de enzimas participantes en reacciones de óxido-reducción.
Nota: La cantidad de + representa la intensidad de coloración y el – es negativo
Resultados: Imagen 3: Deshidrogenasa Succínica a los 10 min
Imagen 1: LDH a los 15 min
Imagen 3: Deshidrogenasa Succínica a los 20 min Tabla 2: Actividad Deshidrogenasa Succínica Imagen 2: LDH a los 30 min Tabla 1: Actividad deshidrogenasa láctica Tubo 1 2 3 4 5
de
15 min
30 min
+++ +++ -
+++ ++++ +
la
Tubo 1 2 3 4 5 6 7
10 min ++++ + +
de
20 min ++++ + ++ +++ ++++
la
Nota: La cantidad de + representa la intensidad de coloración y el – es negativo
Tubo 3. En este tubo se agregó SDHCIT, agua, p-fenilén y KCN, el cual actúo como inhibidor y por eso es que la reacción no se llevó a cabo.
Tubo 4. Se le agregó agua y SDH-CIT. La reacción no se lleva a cabo por la ausencia de un donador de electrones que es la p-fenilén diamina.
Tubo 5. Al igual que en el tubo 1, la Imagen 4: Citocromos y citocromo oxidasa final Tabla 3: Actividad de citocromos y citocromo oxidasa
Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8
Resultado +++ +++ -
reacción se lleva a cabo porque hay enzima-sustrato. Se observa una coloración un tanto morada.
Tubo 6. En este se agregó agua y pfenilén diamina, al no contener SDHCIT, la reacción no se lleva a cabo ya que solo hay sustrato.
Tubo 7. La reacción no se lleva a cabo por la presencia del inhibidor.
Tubo 8. No se debe observar ningún cambio ya que no hay presencia de enzima (SDH-CIT), sin embargo si lo hay ya que la p-fenilen diamina se oxida en presencia de oxígeno.
Discusión:
citocromo oxidasa
Tubo 1. A este tubo, lo único que se le agrego fue SDH-CIT, agua y pfenilén diamina sin embrago eso basto para que la reacción natural enzimasustrato se llevara a cabo dando un color ligeramente morado.
Determinación de la actividad de deshidrogenasa succínica
Tubo 1.
Tubo 2. Este nos sirvió como un tubo
En este primer tubo se observa una decoloración total por la presencia de enzima y sustrato, así mismo nos indica que el azul de metileno se encuentra en su forma reducida.
testigo, ya que solo contenía agua y la p-fenilén diamina.
Tubo 2. No hay decoloración, por lo tanto, no hay reacción, esto se debe a
la usencia de la enzima SDH-CIT y de malonato de sodio.
Tubo 3. En este tubo se pudo observar un ligero cambio de color ya que a pesar de solo contener enzima puede que haya algunos residuos de sustrato proveniente de la rata dándonos este tipo de resultados.
Tubo 4. Al tener una concentración alta de inhibidor que es el malonato de sodio la reacción no se lleva a cabo.
Tubo
5.
Se adiciono una concentración menor de inhibidor por lo tanto la reacción se lleva a cabo de manera muy lenta.
Tubo 3. La reacción probablemente se lleve a cabo porque no hay sustrato, pero la enzima puede contener residuos del mismo a la hora de extraerse.
Tubo 4. La reacción no se lleva a cabo porque no hay enzima que pueda ser activada por el NAD+.
Tubo 5. La reacción se lleva a cabo hasta la formación de piruvato ya que no hay KCN para la formación de productos.
Conclusión:
Tubo 6. Se observar una decoloración mayor, lo que significa que la reacción de reducción se realiza de manera más eficiente al tener menor cantidad de inhibidor
Tubo 7. En este tubo se observa que se decoloro casi en su totalidad, asemejándose al tubo uno, esto debido a que existe una mayor concentración de sustrato el cual desplaza al inhibidor y favorece a la reacción de reducción del azul de metileno.
Determinación de la actividad de la deshidrogenasa láctica
Tubo 1. La reacción se lleva a cabo en condiciones normales porque no se alteró ningún parámetro.
Tubo 2. La reacción no se llevó a cabo porque no hay coenzima que active a la enzima para la formación de piruvato.
En las reacciones de la deshidrogenasa láctica como en la de deshidrogenasa succínica se ponen en manifiesto acoplándolas a la reducción de azul de metileno que en su forma reducida pierde el color. La deshidrogenasa láctica (DHL) cataliza la conversión del piruvato a lactato y viceversa.
Bibliografía:
Lehninger A.L. “Principios de bioquímica”. Editorial Omega, España. 5ta edición. Conn, E. E., Stump P. K., Doi R.H., “Bioquímica fundamental” (2004), editorial Limusa Wiley S.A., 4ta edición. Pp. 417-453