UNIVERSIDAD NACIONAL “DANIEL ALCIDES CARRION” FILIAL LA MERCED E.F.P. DE ING. EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS La Merced – Chanchamay CURSO! ANALISIS DE LOS ALIMENTOS PROFESORA! M". SILVIA SILVIA MARIA MURILLO #ACA. $$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$ $ GUIA DE PRACTICA N% && DETERMINACI'N DE A(UCARES REDUCTORES ) TOTALES MEDIANTE EL METODO D.N.S. I. PRINCIPIO! El principio D.N.S., utiliza el ácido 3,5 dinitrosalicilico, hidróxido de sodio, fenol y tartrato de sodio y potasio, los que reaccionan con los grupos aldehdos y cetonas de los azuca azucares res reduc reductor tores, es, for!an for!ando do un co!pue co!puesto sto de color color !arró !arrónn cuy cuyaa intens intensida idadd es proporcional a la cantidad cantidad de azucares azucares reductores presentes presentes en la solución. solución. II. E*UIPO ) MATERIALES Espectrofoto!etro digital "alanza analtica #ornilla el$ctrica %asos de precipitación &iolas 'u(os de ensayo )ipetas )apel filtro *hat!an N+ Reac+,- cido dinitrosalicilico #idróxido de sodio &enol Sulfito de sodio 'artrato de sodio y potasio /gua destilada 0lucosa anhidra
III. PROCEDIMIENTO! Reac+,- D.N.S. )esar1 2,- g de ácido dinitrosalicilico, 2,2 g de hidróxido de sodio, -, g de fenol, -,-5 de sulfito de sodio. 4olocar en un aso y disoler con agua destilada ti(ia, luego enrasar en una fiola de 2-!l. Sa/ de rche//e a/ 012 )esar - g de tartrato de sodio y potasio, disoler con agua destilada y enrasar a 2-- !l.
Pre3arac,4n de /a c5r-a e+6ndar )esar 2 g de glucosa anhidra, !as -,- g de azida de sodio, diluir y enrasar en una fiola de 2-- !l. 'o!ar alcuotas de , , 6, 7, 2-, 2, 28.. !l, colocarlas en fiolas de 2-- !l, enu!eradas del 2 a la cantidad de alcuotas que se to!en y enrasarlas con agua destilada. De cada fiola to!ar 2 !l de estándar y colocarlas en tu(os de prue(a enu!eradas del 2 al 8 y a9adir 2 !l de agua destilada a cada tu(o. En un tu(o aparte a9adir !l de agua destilada :(lanco; / cada tu(o a9adir !l de reactio de D.N.S., incluido al (lanco y llear a un (a9o !ara en e(ullición durante 2- !inutos. /9adir 2 !l de sal de rochelle al -< a cada tu(o, ta!(i$n al (lanco. Enfriar en agua durante a 5 !inutos /9adir 2- !l de agua destilada a cada tu(o, igual al (lanco =ezclar co!pleta!ente inirtiendo el tu(o arias eces, haciendo que la solución se separe del fondo del tu(o en cada inersión :esto es i!portante; >eer la a(sor(ancia a 5- n!, preia!ente cali(rar el espectrofotó!etro a cero de a(sor(ancia con el (lanco 4onstruir la cura estándar entre !g de glucosa ? !l ersus a(sor(ancia.
DETERMINACI'N DE A(UCARES REDUCTORES
)esar 25 g de !uestra triturada o 25 !l de !uestra lquida, enrasar a 2-- !l y licuar por un !inuto :@; filtrar utilizando papel filtro Ahat!an N+ del filtrado to!ar, de 2 a 6 !l :dependiendo del tipo de !uestra o del contenido de azBcar reductor en la !uestra; y enrasar en una fiola de 2-- !l con agua destilada. 'o!ar 2 !l de !uestra, colocarla en un tu(o de ensayo, a9adir 2 !l de agua destilada, !ás !l de reactio D.N.S. preparar en otro tu(o el (lanco, : !l de agua destilada !as !l de D.N. S.; >lear los tu(os a (a9o !ara en e(ullición durante 2- !inutos. /9adir 2 !l de sal de rochelle al -<. Enfriar en agua durante a 5 !inutos. /9adir 2- !l de agua destilada. =ezclar co!pleta!ente inirtiendo el tu(o arias eces. >eer la a(sor(ancia a 5- n!, preia!ente cali(rar a cero de a(sor(ancia con el (lanco. Deter!inar la concentración de azucares reductores :!g de glucosa?!l; en la cura estándar.
DETERMINACI'N DE A(UCARES TOTALES
)esar 3- g de !uestra triturada o 3- !l de la !uestra liquida, enrasar a 2-- !l con agua destilada y licuar por un !inuto. Del licuado to!ar 5- !l, luego adicionar 5 !l de ácido clorhdrico concentrado y colocarlo en (a9o !ara de 65 o C-+ 4, durante 5 !inutos. Neutralizar hasta p# 6,5, pri!ero con # o Na# 5 N y luego con # o Na# -,2 N. Es necesario que no pase el p# de C para eitar la hidrólisis del al!idón.
>uego enrasar en una fiola de 2-- !l con agua destilada. 4ontinuar en :@;, lo !is!o que para azucares reductores. &inal!ente deter!inar la concentración de azBcar totales en :!g de glucosa?!l;, en la cura estándar.
N'/1 'odas las lecturas de(en ser realizadas durante los - !inutos, tie!po en que el color se !antiene esta(le.
C6/c5/! / partir del alor o(tenido de la cura estándar, calcular el contenido de azucare reductores en la !uestra. 25 g de !uestra888888..888. 2-- !l -,6 g de !uestra88888.88888.. !l -,6 g de !uestra 8888888882-- !l -,--6 g de !uestra88888888..8 2 !l. -,--6 g de !uestra88888888... x !g de glucosa?!l 2-- g de !uestra88888888.. F F G H !g de glucosa?2-- g de !uestra F G I g de azBcares reductores?2-- g de !uestra. 4alculo de azucares totales en la !uestra1 3- g de !uestra888888..888. 2-- !l 25 g de !uestra88888.8888. 5- !l 25 g de !uestra88888.88888 2-- !l -,6 g de !uestra8888888888. !l -,6 g de !uestra888888888 2-- !l -,--6 g de !uestra888888888 2 !l -,--6 g de !uestra?!l8888888 J !g de glucosa?!l 2-- g de !uestra88888888. F F G H !g de glucosa?2-- g de !uestra F G I g de azucares reductores?2-- g de !uestra Sacarosa aparente G :/zucare totales K azucares reductores; x -,L5.
IV.
RESULTADOS ) DISCUSIONES 4o!parar los resultados o(tenidos con los reportados en la (i(liografa
V.
CONCLUSIONES "rees y concisas de acuerdo a los o(Metios planteados y a los resultados o(tenidos
VI.
#I#LIOGRAF7A
