PENENTUAN KADAR FORMALIN DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL
I.
TUJUAN Menetapkan kadar formalin dengan metode spektrofotometri visibel.
II.
DASAR TE TEORI
2.1 Form ormalin alin Form Formal alin in atau atau laru laruta tan n form formal alde dehi hida da meru merupa paka kan n laru laruta tan n yang yang meng mengan andu dung ng
form formal alde dehi hida da
dan dan
meta metano noll
seba sebaga gaii
stab stabil ilis isat ator or..
Kada Kadar r
formaldehid formaldehidaa (CH2O tida tidak k kura kurang ng dari dari !"# !"# dan dan tida tidak k lebi lebih h dari dari !$#. !$#. Formalin berupa %airan &ernih' tidak berarna atau hampir tidak berarna' dan bau menusuk. Formalin dapat di%ampur dengan air dan dengan etanol ()*# + (,epkes -' 1)/). 0obot tiap milliliter adalah 1'$ gram. ,apat ber%ampur dengan air dan alkohol' tetapi tidak ber%ampur dengan kloroform dan eter. itik didih formalin adalah )3 oC (4indhol5' (4indhol5' 1)/3. 0erikut adalah gambar dari struktur kimia formalin yaitu6
1
ammoni ammoniaa untuk untuk membentu membentuk k hasil hasil arna kuning kuning dari dari
!'*;di !'*;diaset asetil;1 il;1'"; '";
dihidrolutidin (,,= (=i et al ' 2/. Formalin dapat bereaksi membentuk arna dengan pereaksi 9ash pada metode analisis formalin. :nalisis spektrofotometer visibel dapat di&adikan di&adikan sebagai metode metode standar standar untuk untuk pengu&ian pengu&ian formalin formalin (,olaria' (,olaria' dkk.' 2/.0erikut ini reaksi formalin dengan pereaksi nash 6
2.2 8pektr 8pektrofo ofotom tometri etri 7>;> 7>;>is is 8pekt ektrofotometri
7>;>i ;>is
adala alah
anggota
teknik
ana analisis sis
spektroskopik yang memakai sumber radiasi elektromagnetik 7> dekat (1); !$ !$ nm nm dan dan sinar sinar tamp tampak ak (!$ (!$;/ ;/$ $ nm nm deng dengan an mema memaka kaii inst instru rume men n spektrofoto spektrofotometer meter.. -adiasi -adiasi 7> &auh (1;1) (1;1) nm tidak digunakan' sebab pada
daerah
radiasi
tersebut
diabsorpsi
oleh
udara.
:dakalanya
spektrofoto spektrofotometer meter 7>;> 7>;>is is yang beredar beredar memberikan memberikan rentang rentang pengukura pengukuran n pan&ang gelombang 1);11 1);11 nm. Hal ini perlu diperhatikan sebab di atas pan&ang gelombang /$ nm merupakan daerah radiasi infra merah. Kare Karena nany nya' a' peng penguk ukur uran an di atas atas pan& pan&an ang g gelo gelomb mban ang g /$ /$ nm haru haruss menggunakan detektor dengan kualitas sensitif terhadap radiasi inframerah (Mul&a dan 8uharman' 1))*.
2
8pektr 8pektrofo ofotom tometri etri 7>;> 7>;>8 8 termas termasuk uk salah salah satu satu metode metode analisi analisiss instr instrum umen enta tall
yang yang
frek frekue uens nsii
peng penggu guna naan anny nyaa
pali paling ng
bany banyak ak
dala dalam m
laboratorium analisis. 8pektrofotometri 7>;>is melibatkan energi elektronik yang %ukup besar pada molekul yang dianalisis' sehingga spektrofotometri 7>;> 7>;>is is lebi lebih h bany banyak ak dipa dipaka kaii untu untuk k anal analisi isiss kuan kuanti tita tati tiff diba diband ndin ingk gkan an kualitatif (;> 7>;>is is adalah adalah aplika aplikasi si dari dari Hukum =ambert;0eer' yaitu6 A = - log T = - log It / Io = ? . b . C
,imana 6 : @ :bsorbansi :bsorbansi dari sampel yang akan diukur @ ransmitansi @ ntensitas sinar masuk t @ ntensitas sinar yang diteruskan ? @ Koefisien ekstingsi b @ ebal ebal kuvet yang digunakan C @ Konsentrasi dari sampel (;> 7>;>is is teruta terutama ma untuk untuk senya senyaaa yang yang semula semula tidak tidak
!
berarna yang akan dianalisis dengan spektrofotometri visible karena senya senyaaa tersebu tersebutt harus harus diubah diubah terlebi terlebih h dahulu dahulu men&ad men&adii senya senyaaa yang yang berarna (;> 7>;>is is Hal ini diperlukan bila senyaa yang dianalisis tidak menyerap pada daerah tersebut. 8enyaa harus diubah atau direaksikan dengan pereaksi tertentu dengan syarat reaksinya selektif dan sensitive' reaksinya %epat' kuantitatif' dan reprodusibel' serta hasil reaksi stabil dalam &angka aktu yang yang lama lama.. Kese Kesele lekt ktif ifan an dapa dapatt dina dinaik ikka kan n deng dengan an meng mengat atur ur pH' pH' pemakaian masking agent ' atau penggunaan teknik ekstraksi (
Masi Masing ng;ma ;masin sing g
abso absorb rban ansi si
laru laruta tan n
deng dengan an
berb berbag agai ai
konsentrasi diukur' kemudian dibuat kurva yang merupakan hubungan antara absorbansi absorbansi (y dengan konsentrasi konsentrasi (A. 0ila hukum =ambert;0eer =ambert;0eer terpenuhi' maka kurva baku berupa garis lurus (
"
:bsorb :bsorban an yang yang terba%a terba%a pada pada spektr spektrofo ofotom tometer eter hendak hendaknya nya antara antara '2 samp sampai ai '$ '$ atau atau 1*# 1*# samp sampai ai /# /# &ika &ika diba diba%a %a sebag sebagai ai tran transm smit itan an.. :n&uran ini berdasarkan anggapan baha kesalahan dalam pemba%aan adalah '* atau '*# (kesalahan fotometrik (
kesa kesala laha han n
sist sistem emat atik ik
yang yang
seri sering ng
ter& ter&ad adii
dala dalam m
anal analis isis is
menggunakan spektrofotometer adalah6 a. 8erapa 8erapan n oleh oleh pelaru pelarutt Hal ini dapat diatasi dengan penggunaan blangko' yaitu larutan yang berisi matrik selain komponen yang akan dianalisis. b. 8erapan oleh kuvet Kuv Kuvet yang ang biasa iasa dig digunak unakan an adal adalah ah dari ari bahan ahan gela gelass atau atau kuar kuarsa sa.. ,ibandingkan dengan kuvet dari bahan gelas' kuvet kuarsa memberikan kualitas yang lebih baik' namun tentu sa&a harganya &auh lebih mahal. 8erapan oleh kuvet ini diatasi dengan penggunaan &enis' ukuran' dan bahan kuvet yang sama untuk tempat blangko dan sampel (ahir' (ahir' 2$ . %. Kesalahan Kesalahan fotometrik fotometrik normal pada pada pengukuran pengukuran dengan dengan absorbansi absorbansi sangat rend rendah ah atau atau sanga sangatt ting tinggi gi'' hal hal ini ini dapa dapatt diat diatur ur deng dengan an peng pengat atur uran an konsentrasi' sesuai dengan kisaran sensitivitas dari alat yang digunakan. (melal (melalui ui pengen pengen%era %eran n atau atau pemeka pemekatan tan. . 8ama 8ama seperti seperti pHmeter pHmeter'' untuk untuk mengatasi kesalahan pada pemakaian spektrofotometer 7>;>is 7>;>is maka perlu dilakukan kalibrasi. Kalibrasi dalam spektrofotometer 7>;>is dilakukan dengan menggunakan blangko6 *
Sett!g !l" "b#o$b"!# = % Sett!g !l" t$"!#&t"!# = '%% (
+enentuan kalibrasi dilakukan dengan mengikuti prosedur sebagai berikut6 a. ,ila ,ilaku kuka kan n deng dengan an laru laruta tan n blan blangk gko o (ber (beris isii pela pelaru rutt murn murnii yang yang digunakan dalam sampel dengan kuvet yang sama. b. 8etiap perubahan pan&ang gelombang diusahakan dilakukan proses kalibrasi. %. +roses +roses kalibrasi kalibrasi pada pada penguk pengukuran uran dalam dalam aktu aktu yang yang lama untuk untuk satu ma%am pan&ang gelombang' dilakukan se%ara periodik selang aktu per ! menit. ,engan adanya proses kalibrasi pada spektrofotometer 7>;> 7>;>is is ini maka akan membantu pemakai untuk memperoleh hasil yang akurat dan presisi (ahir' 2$. III.
ALAT DAN BA)AN !.1 :lat a. +ipet uk ukur b. 7>;vis ;visib ibel el .20ahan a. =aru =arutan tan form formal alin in !/#b !/#bBv Bv b. :uadest %. :mon :moniu ium m ase aseta tatt ( NH ( NH 4CH 3COO COO d. :sam aset setat (CH (CH 3COOH e. :seti etil ase asetton
IV. IV. PER)I PER)ITUN TUNGA GAN N ".1 +erhitungan pembuatan pereaksi 9ash +ereaksi 9ash yang dibuat se¨ah * ml' sehingga ¨ah masing D
masing bahan adalah 6 a. :moniu :monium m asetat asetat
@
A 1* gr @ /'* gr
b. :sam :setat :setat
@
A '! ml @ '1* ml
3
%. :setil :setil :seton :seton
@
A '2 ml @ '1 ml
d. :uadest
@
A 1 ml @ add * ml
>.2 >.2 +embuatan 1 m= =arutan 8tok Formalin 2# bBv ,ik 6 =arutan formalin yang tersedia @ !/# bBv Konsentrasi yang diperlukan @ 2# bBv >olume larutan yang diperlukan @ 1 m= ,it 6 >olume >olume larutan formalin !/# bBv yang diambil @ E.. M1>1 @ M2>2 !/ # >1 @ 2 # . 1 ml
>1 @
>1 @ '*" m=
".! +embuatan 1 1 m= larutan Formalin 1 GgBm= dari larutan formalin 2# bBv ,ik 6 Konsentrasi formalin @ 2# bBv >olume larutan formalin f ormalin 1 GgBml yang diperlukan @ 1 m= 2 # bBv @ 2 gramB1 ml @ 2 A 1 " gBml ,it 6 >olume >olume larutan formalin 2# bBv yang diambil @ E.. aab 6 C1>1 @ C2>2 2 A 1 " GgBml >1 @ 1 GgBml A 1 ml
>1 @
>1 @ '* ml
"." +erhitunga +erhitungan n konsentras konsentrasii setiap larutan larutan standar standar
/
,iketa ,iketahui hui 6 >larutan stok formalin standar1 @ '1 m= >larutan stok formalin standar2 @ '2 m= >larutan stok formalin standar ! @ '! m= >larutan stok formalin standar " @ '" m= >larutan stok formalin standar * @ '* m= >masing;masing larutan @ * m= Clarutan stok formalin @ 1 GgBm= ,itan itanya ya 6 C (ko (konsen sentras trasi i masi masing ng;m ;mas asin ing g laru laruta tan n seri seri @ E aab 6 ; 7ntuk standar 1 Cstok formalin A >stok formalin @ Clarutan formalin A >larutan formalin 1 GgBm= A '1 m= @ C larutan formalin standar 1 A * m= Clarutan 1
standar formalin standar @
@ 2 GgBm= ;
7ntuk standar s tandar 2 Cstok formalin A >stok formalin 1 GgBm= A '2 m=
@ Clarutan formalin A >larutan formalin @ C larutan formalin standar 2 A * m=
Clarutanstanda r formalin standar 2
@
@ " GgBm= ;
;
I
7ntuk standar ! Cstok formalin A >stok formalin 1 GgBm= A '! m= Clarutanstandar formalin standar !
@ @ @
Clarutan formalin A >larutan formalin C larutan formalin standar ! A * m=
GgBm= 7ntuk standar " Cstok formalin A >stok formalin 1GgBm= A '" m=
@ @
Clarutan formalin A >larutan formalin C larutan formalin standar " A * m=
Clarutanstandar formalin standar "
@
@ 3
@ $ GgBm= ;
7ntuk standar * Cstok formalin A >stok formalin 1 GgBm= A '* m=
@ Clarutan formalin A >larutan formalin @ C larutanformalin standar * A * m=
Clarutan standar formalin standar *
@ @
1 GgBm=
".* +embua +embuatan tan =aruta =arutan n 8amp 8ampel el Form Formali alin n ,iketahui6 $
,itanya 6 aab 6
Clarutan stok formalin @ 1 GgBm= > larutan stok formalin yang digunakan @ '!* m= > larutan formalin yang ingin dibuat @ * m= C larutan stok formalin yang digunakan @ E
CstokFormalin A >stok Formalin @ ClarutanFormalin
A > larutanFormalin
1 GgBm= A '!* m=
A
@ ClarutanFormalin
* m=
CstokFormalin @ @ /GgBm= V. PELA PELAKS KSAN ANAA AAN N PER PERCO COBA BAAN AN *.1 *.1 +ros +rosed edur ur Ker& Ker&aa *.1.1 *.1.1 +embuatan +embuatan =arutan =arutan Formalin Formalin 2# bBv bBv dari dari larutan larutan Formalin Formalin !/# !/# bBv bBv ,iambil '*" m= larutan formalin 2# bBv dengan pipet volume.
,imasukkan kedalam labu ukur 1 m= dan ditambahkan auadest hingga tanda batas dan digo&og hingga homogen. *.1.2 *.1.2
+embua +embuatan tan =aru =arutan tan 8tok 8tok 0aku 0aku Form Formali alin n 1 GgBm= GgBm= =arutan formalin 2# bBv diambil sebanyak '* m= menggunakan pipet volume dan dimasukkan ke dalam labu ukur 1 m=. ,itambahkan akuades hingga tanda batas kemudian digo&og hingga homogen.
*.1.! +embuatan +ereaksi 9ash ,itimbang /'* gram :mmonium :setat (9H "CH!COO dan dimasukkan dalam beaker glass. ,itambahkan ,itambahkan '1* m= :sam :setat :setat (CH !COOH dan '1 '1 m= :set :setil il :seto :seton n ,ila ,ilaru rutk tkan an deng dengan an :ua :uade dest st hing hingga ga laru larutt dan dan dimasu dimasukka kkan n ke dalam dalam labu labu ukur ukur * m= ,itambahk ,itambahkan an akuade akuadess hingga hingga volume volume * m= dan digo&og hingga homogen. homogen. ,imasukkan ,imasukkan kedalam kedalam botol botol ka%a gelap serta dibungkus dengan aluminium foil . *.1." +embuatan =arutan 8tandar ,ipipet masing;masing '1 m=' '2 m=' '! m=' '" m= dan '* m= larutan larutan formalin formalin 1 GgBm= lalu dimasukkan dimasukkan ke dalam labu ukur * m=' ditamb ditambahk ahkan an akuade akuadess sampai sampai batas batas * m=. Kemudi Kemudian an masing; masing;mas masing ing laruta larutan n dimasu dimasukka kkan n ke dalam dalam * buah buah vial vial yang yang berbed berbeda. a. ,ari masing; masing;
)
masing vial tersebut dipipet 1 m=' dimasukkan ke dalam vial baru' dan ditambahkan dengan 2 m= pereaksi 9ash dan 2 m= akuades. ,idiamkan kurang lebih selama ! menit. *.1.* +embuatan =arutan 8ampel Formalin 8eba 8ebany nyak ak '!* '!* m= laru laruta tan n stok stok baku baku form formal alin in 1 1 GgBm GgBm= = dipi dipipe pet' t' kemudian ditempatkan pada labu ukur * m=. ,itambahkan akuades hingga tanda batas dan digo&og. =arutan sampel kemudian ditampung pada botol vial. ,iambil 1 ml larutan sampel dan ditambahkan 2 ml pereaksi 9ash dan 2 ml akuades. ,idiamkan kurang lebih selama ! menit. *.1.3 +enentuan Kadar Formalin ,iuk ,iukur ur abso absorb rban ansi si salah salah satu satu laru laruta tan n stan standa darr pada pada renta rentang ng pan& pan&an ang g gelombang
!*2
nm
;
"*1
nm'
ditentukan
pan&ang
gelombang
maksimumnya dan dilakukan pengukuran absorbansi masing;masing seri laruta larutan n standa standarr pada pada pan&an pan&ang g gelomb gelombang ang maksim maksimum um kemudi kemudian an dibuat dibuat kurva kalibrasi dan persamaan regresi liniernya. ,itetapkan kadar sampel formalin dengan mengukur absorbansinya se%ara spektrofotometri visibel. visibel. ,iu ,iukur kur
abso absorb rban ansi si
maks maksim imum umny nya. a.
sam sampel pel
,ite ,iteta tapk pkan an
form formal alin in kada kadarr
pada pada
form formal alin in
pan& pan&an ang g deng dengan an
gelom elomba ban ng
mema memanf nfaa aatk tkan an
persamaan regresi linear dari * variasi larutan standar dan dihitung persentase perolehan kembali.
*.2 *.2 8kem 8kemaa Ker& Ker&aa *.2.1 +embuatan =a =atutan Fo Formalin 2# 2# bB bBv dari la larutan !/ !/# bBv ,iambil '*" m= larutan formalin 2# bBv dengan pipet volume
,itambahkan akuades hingga 1 m= ke dalam labu ukur' digo&og *.2.2
+embuatan =arutan 8t 8tok 0asampai ku Form homogen alin 1 GgBm=
=arutan formalin 2# bBv diambil dia mbil sebanyak '* m= menggunakan pipet volume ,imasukkan ke dalam labu ukur 1 m=. ,itambahkan akuades hingga tanda batas kemudian digo&og hingga homogen.
1
*.2.!
+embuatan +ereaksi 9ash ,itimbang /'* gram ammonium :setat (9H "CH!COO' dimasukkan ke dalam beaker glass ,itambahkan '1* m= :sam :setat (CH !COOH ,:9 '1 m= :setil :seton ,ien%erkan dengan akuades hingga * m= dan digo&og
*.2."
+embuatan =arutan 8tandar sampai homogen
,ibuat * variasi kadar larutan standar
,iambil larutan stok baku sebanyak '1 m=J '2 m=J '! m=J '" m=J '* m= ,imasukkan ke dalam labu ukur * m=' ditambahkan dengan akuades hingga tanda batas
,iambil 1 ml larutan standar masing;masing ditambahkan 2 ml pereaksi 9ash dan 2 ml akuades. ,idiamkan kurang lebih selama ! menit.
*.2.*
+embuatan =arutan 8ampel Formalin ,ipipet sebanyak '!* m= larutan stok baku formalin 1 GgBm=
,itempatkan pada labu ukur * m=' ditambahkan akuades hingga tanda batas dan digo&og. =arutan ditampung pada vial 11
,ipipet 1 ml larutan sampel dan ditambahkan 2 ml pereaksi 9ash dan 2 ml akuades
,idiamkan kurang lebih selama ! menit.
*.2.3 +enentuan Kadar Kadar Formalin ,iukur absorbansi salah satu larutan standar pada rentang pan&ang gelombang !*2 nm ; "*1 nm dengan spektrofotometer 7>;>is 7>;>is
,itentukan pan&ang gelombang maksimumnya dan dilakukan pengukuran absorbansi masing;masing seri larutan standar pada pan&ang gelombang maksimum
,ibuat kurva kalibrasi larutan standar dan persamaan regresi liniernya
,ilakukan pengukuran absorbansi larutan sampel pada pan&ang gelombang maksimum dengan spektrofotometer 7>;> 7>;>is is
,ihitung kadar sampel berdasarkan nilai absorbansi sampel dan persamaan regresi linier larutan standar
12 ,ihitung nilai persentase perolehan kembali
DAFTAR PUSTAKA
1!
:min' :. 211. 211. dentifikasi Formalin ,alam +roduk Mie 0asah 0asa h ,an ahu ahu ,engan Metode Kualitatif =arutan KMnO". Jurnal Tasimak . >ol. (1. Hal. 1*; 2". 0udiart 0udiarti' i' : dkk . 2). 2). +engar +engaruh uh +erenda +erendaman man ,alam ,alam :ir Hangat Hangat erhada erhadap p Kandungan Formalin pada Mie 0asah dari iga +rodusen yang ,i&ual di +asar ohar 8emarang. Jurnal 8emarang. Jurnal Ilmu Farmasi dan Ilmu Klinik. >ol >(1. Hal 1;3. ,ep ,epkes kes -. -. 1)/). )/). Farmakope Indonesia Edisi Ketiga. Ketiga . akarta akarta66 ,epart ,eparteme emen n Kesehatan -epublik ndonesia. ,olaria' dkk. 2/. !i !i "alid alidas asii pada pada #nal #nalis isis is Form Formal alin in $e $eng nggu guna naka kan n %pektrofotometer %pektrofotometer "&" "&"is is.. (Cit (Cited ed66 1) :pri :prill 21" 21". . :vail vailab able le from from66 httpBB6.31/313/.pdf.
1"
4indhol5' Martha. 1)/3. T*e $er(k Inde0 - En(,(loped En(,(lopedia ia of C*emi(als C*emi(als 1rugs 1rugs and Biologi(als. 2t* edition. edition . 4hite house house 8tation' 8tation' 9' 78: 78: 6 Mer%k Mer%k Co.'n%.
1*
