Demam berdarah atau breakbone fever atau demam dengue adalah penyakit akut yang disebabkan oleh virus dengue yang ditularkan oleh nyamuk aedes aegpty. Penyakit demam berdarah memiliki memiliki gejala yang tidak sama atau beraneka ragam, mulai dari tanpa gejala, demam ringan yang tidak spesifik,demam dengue atau demam berdarah dengue sampai sindrom syok dengue. NS1 merupakan suatu glikoprotein yang muncul dengan konsentrasi tinggi pada pasien, ketika terinfeksi virus dengue pada tahap awal penyakit. NS1 merupakan gen esensial di dalam sel yang terinfeksi dan berfungsi sebagai kofaktor untuk replikasi virus. NS1 diperlukan untuk kelangsungan hidup virus namun tidak diketahui dengan pasti aktivitas biologisnya. Dari bukti yang sudah ada menunjukkan bahwa NS1 terlibat dalam proses replikasi virus. NS1 dengue diekskresikan ke dalam sistem darah pada individu individu yang terinfeksi dengan virus dengue. !ntigen NS1 dapat ditemukan pada hari pertama sampai hari ke sembilan sejak awal demam pada pasien dengue primer atau dengue sekunder. "ntuk "ntuk mempertahan mempertahankan kan hidup, hidup, virus dengue memerlukan memerlukan dukungan dari protein protein yang yang mempert mempertaha ahanka nkan n tubuhn tubuhnya ya,, teruta terutama ma untuk untuk memban membantu tu masuk masuk dalam dalam sel inang. inang. Protein ini disebut sebagai protein struktural yang berfungsi sebagai en#im dan katalis dalam upaya virus mempertahankan hidupnya. Pemeriksaan NS1 !g yang berarti nonstruktural 1 antigen adalah pemeriksaan yang mendeteksi bagian tubuh virus dengue sendiri. $arena mendeteksi bagian tubuh virus dan tidak menunggu respon tubuh terhadap infeksi maka pemeriksaan ini dilakukan paling baik saat panas hari ke% hingga hari ke &, karena itulah pemeriksaan ini dapat mendeteksi mendeteksi infeksi infeksi virus dengue bahkan bahkan sebelum sebelum terjadi penurunan penurunan trombosit. trombosit. !ngka sens sensit itiv ivit itas as dan dan spesi spesifi fisit sitas asny nyaa pun pun juga juga ting tinggi gi.. 'ila 'ila ada ada hasil hasil NS1 NS1 yang ang posit positif if menunjukk menunjukkan an kalau seseorang (hampir (hampir pasti) terkena terkena infeksi infeksi virus dengue. Sedangkan Sedangkan kalau hasil NS1 !g dengue menunjukkan hasil negatif tidak menghilangkan kemungkinan infeksi infeksi virus dengue dan masih perlu dilakukan dilakukan observasi serta pemeriksaan pemeriksaan lanjutan. lanjutan. *ni terjadi karena untuk mendeteksi virus dengue diperlukan kadar yang cukup dari jumlah virus dengue yang beredar, sedangkan pada fase awal mungkin belum terbentuk cukup banyak virus dengue tetapi apabila pengambilan dilakukan setelah munculnya antibodi maka kadar virus dengue juga akan turun.
Sebagian besar antigen secara teori seharusnya ada pada sel darah namun pada pengujian NS1 digunakan sampel serum atau plasma karena NS1 merupakan glikoprotein yang terekresi &+ k dalton yang tidak ada pada partikel virus yang terinfeksi tetapi terakumulasi di dalam membran plasma selama proses infeksi dengue. NS1 sendiri merupakan antigen non struktural dari virus dengue yang terakumulasi pada serum dan plasma selama infeksi dengue berlangsung. Pada praktikum kali ini dilakukan pengujian kualitatif NS1 dengan menggunakan pengujian immunokromatografi rapid tes dengan strip test SD '*-*N Dengue NS1 !g rapid test. SD '*-*N Dengue NS1 !g rapid test adalah immunochromatographic in vitro, salah satu langkah uji yang dirancang untuk penentuan kualitatif virus dengue antigen NS1 dalam serum, plasma, atau whole blood manusia untuk diagnosis awal infeksi demam berdarah akut. Perangkat tes ini berisi strip membran, yang sudah dilapisi dengan lapisan antibodi spesifik terhadap NS1 pada daerah uji pita. -apisan antibodi ini akan mendeteksi dan mengikat antigen NS1 yang ada pada. Sampel yang berupa serum maupun plasma akan bergerak sepanjang membran chromatographically /secara kapilaritas0 ke daerah tes /0 dan kontrol /20 membentuk garis merah sebagai indikator terbentuknya ikatan antibodiantigen partikel emas membentuk kompleks /tanda positif0. Dengan prinsip, SD '*-*N Dengue NS1 !g menghasilkan perangkat tes jendela yang memiliki 3 jalur pradilapisi, 44 / garis test0 dan 424 /garis 2ontrol0 $edua garis uji dan garis 2ontrol dalam hasil jendela tidak terlihat sebelum ditambahkan sampel . 5aris kontrol digunakan untuk kontrol prosedural dan harus selalu muncul jika prosedur tes dilakukan dengan benar. Dengue NS1 !g dapat mengidentifikasi virus dengue NS1 antigen dalam serum, plasma atau seluruh spesimen darah dengan tingkat tinggi sensitivitas dan spesifisitas Pada praktikum pemeriksaan NS1 digunakan sampel serum berkode NS1 6 . Sebelum memulai praktikum mulamula dipastikan tanggal kadaluwarsa dari strip test,bila reagen telah kadaluwarsa maka tidak dapat digunakan sebab sensitivitas reagen telah berkurang sehingga ditakutkan adanya positif maupun negatif palsu. Pada stript test yang digunakan memiliki tanggal kadaluwarsa tahun 3%17, sehingga aman digunakan. $emudian barulah stript test dikeluarkan dan sampel ditambahkan sebanyak 8 tetes pada sumur sampel strip test menggunakan pipet tetes disposable. "ntuk sampel yang berbeda maka digunakan pipet tetes dispossible yang berbeda pula untuk menghindari kerancuan hasil uji, lalu hasil dibaca setelah 19 menit dan tidak boleh lebih dari 3% menit sebab dapat
memberi hasil positif palsu. 'erdasarkan hasil uji pada sampel serum kode NS1 6 diperoleh hasil positif yang ditandai dengan munculnya garis berwarna merah pada area test #ona 2 dan #ona yang menunjukkan adanya ikatan antigen NS1 dan antibodi pada membran. Dengan adanya garis merah pada area test #ona 2 /kontrol0 menunjukkan hasil uji valid /tepat0. :adi sampel serum berkode NS1 6 positif dengue / memiliki antigen NS1 Dengue0. $euntungan mendeteksi antigen NS1 yaitu untuk mengetahui adanya infeksi dengue pada penderita tersebut pada fase awal demam, tanpa perlu menunggu terbentuknya antibodi. Dengan demikian kita dapat segera melakukan terapi suportif dan pemantauan pasien . ;al ini tentunya akan mengurangi risiko komplikasi seperti demam berdarah dengue dan dengue shock syndrome yang dapat berakibat kematian. Sedangkan keterbatasan dari tes yaitu hasil negatif dapat terjadi akibat dari jumlah virus dengue NS1 antigen yang ada dalam spesimen di bawah batas deteksi assay antigen. ;asil tes negatif tidak bisa mengecualikan infeksi baru, keberadaan virus dengue NS1 !g terdeteksi mungkin berarti positif untuk infeksi dengue awal. ;al yang perlu diperhatikan dalam pemeriksaan /NS1 !50
<
1. 3.
!ntikoagulan / D!, ;eparin, citrate0 tidak mempengaruhi hasil test Digunakan pipet tetes dan tip mikropipet dispossible yang berbeda untuk setiap
8. &.
sampel untuk menghindari kontaminasi silang Sampel yang ikterik, hemolysis dapat memberikan hasil uji yang tidak sesuai. Sampel serum dan strip uji harus pada kondisi suhu ruang sebelum digunakan untuk
pengujian. 9. Sampel yang mengandung rheumatoid faktor dapat memberi hasil positif palsu 7. Sampel dibaca tidak boleh dilakukan lebih atau kurang dari 198% menit. :ika dibaca kuranng dari 19 menit dapat menyebabkan hasil negatif palsu dan apabila dibaca lebih dari 8% menit maka akan dapat menyebabkan hasil yang didapat positif palsu
