Microscopio Microscopio de contraste de fase Fundamento: Se basa fundamentalmente fundamentalmente en el retraso que se produce en las ondas de luz al atravesar objetos de distintos índices de refracción, aprovechando y amplificando dichos retrasos. Transforma las diferencias de fase, no visibles, en diferencias de amplitud, es decir, que las diferencias de refracción entre los componentes del tejido se transforman en diferencias de intensidad, que pueden ser captadas por el ojo humano.
Si la muestra no absorbe la luz, no habrá esencialmente contraste en la imagen visible (será toda blanca); por ejemplo, la mayoría de las células vivas absorben poca luz (a excepción de las células rojas de la sangre y los cloroplastos) y por lo tanto, son difíciles de visualizar a través de un microscopio convencional. Por otro lado, aunque las células absorben poca luz, tienen diversos espesores y diversos índices de refracción en sus partes, lo que conduce a las diferencias de fase de las ondas de luz que pasan a través de ellas. La fase de un haz de luz es inobservable a la vista (apenas se ve la intensidad, no la fase). Zernike calculó la manera de hacer que las diferencias de fase se observaran en la imagen como en la intensidad, logrando así, visualizar detalles que no eran posibles apreciar en un microscopio convencional.
ste aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una célula y en distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor índice de refracción experimenta una deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de luz que pasaron la muestra. Aparea otras longitudes l ongitudes de onda fuera de fase por medio de una serie de anillos ópticos del objetivo y del condensador, anula la amplitud de la porción fuera de fase inicial del haz de luz y produce un contraste útil sobre la imagen. E
Aditamentos: Anillo de contraste de fase, luz deflectada, objetivo, condensador, anillo anular, fuente de luz. Ventajas: permite realizar exámenes inmediatos y observar células vivas, sin necesidad de tinción Desventajas: el que los objetos se vean delimitados por un halo o aura brillante alrededor en el caso del contraste de fase positivo, o por una sombra en el caso del contraste negativo, defecto producido por la manera de que se producen las imagenes. ¿Qué se observa? l microscopio de contraste de fase permite observar células sin colorear y resulta especialmente útil para células vivas. E
Glosario: Refracción: cambio que experimenta la dirección de propagación de la luz cuando atraviesa oblicuamente la superficie de separación de dos medios transparentes de distinta naturaleza.
Indice
de refracción: Se denomina índice de refracción, al cociente entre la velocidad de la luz
el vacío y la velocidad de la luz en un medio material transparente. v
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