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MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES FECALES (ESCHERICHIA COLI) 1.- Técnica De Diluciones En Tubo Múltiple (Número Más Probable O NMP) DETERMINACIÓN DEL NMP DE COLIFORMES EN AGUA POTABLE
PROCEDIMIENTO: Prueba Presuntiva
Agitar la muestra y transferir volúmenes, a cada uno de los tubos tubos con caldo lauril lauril sulfato de sodio que se hayan seleccionado. Agitar los tubos para homogeneizar la muestra.
Incubar los tubos a 35 35 ± 0,5°C. Examinar los tubos a las las 24 h. y observar si hay formación de gas (desplazamiento del medio en la campana de Durham); si no se observa producción de gas, incubar 24 h. más.
Prueba Confirmativa De Microorganismos Coliformes Totales
Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba presuntiva, a otro tubo de 16 x150 mm que contiene caldo de bilis bilis verde brillante (brila), con campana de Durham.
Agitar los tubos para su homogeneización.
Incubar a 35 ± 2°C durante 24 a 48 h
Registrar como positivos aquellos tubos en donde se observe turbidez (crecimiento) y producción de gas después de un período de incubación de de 24 a 48 h.
Consultar la tabla de NMP para conocer el número más probable de organismos coliformes totales/100 mL.
Prueba Confirmativa De Microorganismos Coliformes Fecales.
Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba presuntiva (caldo lauril sulfato de sodio) a un tubo de 16 x 150 mm, con caldo EC conteniendo campana de Durham. Agitar los tubos para su homogeneización.
Incubar a 44.5 ± 0.1°C en incubadora o un baño de agua durante 24 a 48 h.
Registrar como positivos todos los tubos en donde se observe crecimiento y producción de gas después de un período de incubación de 24 a 48 h.
Consultar la tabla 1 ó 2 de NMP para conocer el número más probable de organismos coliformes fecales/ 100 mL.