LAPORAN PRAKTIKUM TOKSIKOLOGI Anestesi, Cara Mengorbankan Hewan, Cara Pengambilan Darah dan Pembedahan Hewan (disusun untuk memenuhi salah satu tugas praktikum toksikologi)
Disusun oleh: Kelompok 3 Farmasi 3B
1. Dede Daniati 2. Fitri Miftahul Janah 3. Neneng Mustikasari 4. Physca Fathiyatul A. 5. Yandy Zuliyandi
PROGRAM STUDI FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN BAKTI TUNAS HUSADA TASIKMALAYA 2014
I. Tujuan Praktikum
1. Mengenal tahap-tahap manifestasi anastesi umum terhadap hewan percobaan 2. Mampu menganalisa perbedaan anastesi oleh berbagai bahan 3. Mampu melakukan pembedahan pada hewan percobaan
II. Teori Dasar
Obat yang digunakan dalam menimbulkan anastesia disebut sebagai anestetik, dan kelompok obat ini dibedakan dalam anastetik umum dan anastetik lokal. Bergantung pada dalamnya pembiusan, anastetik umum dapat memberikan efek analgesia yaitu hilangnya sensasi nyeri atau efek anestesia yaitu analgesia yang disertai hilangnya kesadaran, sedangkan anestetik lokal hanya dapat menimbulkan efek analgesia. Anestetik umum bekerja di susunan saraf pusat sedangkan anesteti lokal bekerja langsung pada serabut saraf di perifer. Dasar saraf pusat sangat peka terhadap obat-obatan, akibatnya sebagian besar obat-obatan jika diberikan dalam dosis yang cukup besar menimbulkan efek yang mencolok terhadap neurotransmisi diberbagai sistem saraf pusat. Kerja
neurotransmitter
di
pascasinaps
akan
diikuti
dengan
pembentukan second messenger, dalam hal ini cAMP yang selanjutnya mengubah tansmisi di neuron. Disamping asetilkolin sebagai neurotransmitter klasik, dikenal juga katekolamin, serotonin, GABA, adenosine serta berbagai asam amino dan peptide endogen yang bertindak sebagai neurotransmitter atau yang memodulasi neurotransmitter di SSP, misalnya asam glutamate dengan mekanisme hambatan pada reseptor NMDA (N- metal-D- Aspartat) . Anastetik umum dikelompokkan berdasarkan bentuk fisiknya, tetapi pembagian ini tidak sejalan dengan penggunaan di klinik yang pada dasarnya dibedakan atas 2 cara, yaitu secara inhalasi atau intravena. Eter, halotan, enfluran, isofluran, metoksifluran, etiklorida, trikloretilen dan fluroksen merupakan cairan yang mudah menguap. Yang dieliminasi melalui saluran pernapasan meskipun zat-zat ini kontak dengan pasien hanya beberapa jam
saja, namun dapat menimbulkan aritmia pada jantung selama proses anastetika berlangsung. Terlepas dari cara penggunaannya suatu anestetik yang ideal sebenarnya harus memperlihatkan 3 efek utama yang dikenal sebagai “Trias Anastesia” yaitu efek hipnotik (menidurkan), efek analgesia dan efek relaksas i otot.
III. Metodologi
1. Alat dan Bahan a. Alat 1) Timbangan hewan 2) Kapas 3) Toples dengan tutup 4) Gunting bedah 5) Pinset 6) Jarum bedah 7) Alas bedah 8) Stopwatch b. Bahan 1) Mencit 2) Kloroform 2. Prosedur Kerja a. Cara Menganestesi Hewan Percobaan 1) Mencit a) Eter Eter digunakan untuk anestesi singkat. Caranya adalah obat diletakan dalam suatu wadah, kemudian hewan dimasukan dan wadah ditutup. Hewan sudah kehilangan kesadaran, hewan dikeluarkan
dan
siap
dibedah.
Penambahan
selanjutnya
diberikan dengan bantuan kapas yang dibasahi dengan obat tersebut.
b) Halotan Obat ini digunakan untuk anestesi lebih lama. Pentobarbital natrium dan heksobarbital natrium. Dosis pentobarbital natrium adalah 45-60 mg/kg untuk pemberian intraperitonial dan 35 mg/kg untuk cara pemberian intravena. Dosis hesoksobarbital adalah 75 mg/kg untuk intraperitonial dan 47 mg/kg untuk pemberian intravena. c) Uretan (etil karbamat) Uretan diberikan pada dosis 100-1250 mg/kg secara intraperitonial dalam bentuk larutan 25% dalam air. 2) Tikus Senyawa penganestesi yang digunakan dan cara melakukan anestesi pada tikus, umumnya sama seperti pada mencit. 3) Kelinci Obat anestetika yang paling banyak digunakan untuk kelinci adalah penobarbital natrium, dengan disuntikan secara perlahanlahan. Dosis untuk anestesi umum, biasanya sekitar 22 mg/kg bobot badan. Untuk anestesi singkat dapat digunakan setengah dosis atas, dengan ditambah eter agar pembiusan terja di sempurna. 4) Marmot Anestesi marmot biasanya dilakukan dengan menggunakan eter atau pentobarbital natrium. Eter digunakan untuk anestesi singkat, setelah dipuasakan selama 12 jam. Dosis pentobarbital natrium adalah 28 mg/kg bobot badan. b. Cara pengambilan darah Darah yang diambil tidak boleh terlalu besar volumenya supaya tidak terjadi syok hipovolemik, tetapi juga tidak boleh sedikit-sedikit tapi sering karena bisa menimbulkan anemia. Untuk mengatasi hal tersebut dapat diberikan cairan pengganti atau cairan exsanguinis. Misalnya: cairan fisiologis NaCl 0,9% / glukosa 5%.
Jumlah darah maksimal yang boleh diambil: 1) 10% total volume darah/2-4 minggu, atau 2) 1% total volume /24 jam. 1) Mencit Ada 4 lokasi tempat pengambilan darah: Sinus orbitalis mata, Vena lateral pada ekor, Vena saphena kaki, Intrakardial. 2) Tikus Tempat pengambilan sama dengan mencit. 3) Kelinci Ada 4 lokasi tempat pengambilan darah: Vena marginalis telinga, Vena jugularis, Vena saphena kaki, Intrakardial. c. Cara Mengorbankan Hewan Percobaan 1) Mencit a) Cara kimia antara lain dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. b) Cara fisik dilakukan dengan dislokasi leher. Proses dislokasi dilakukan dengan cara:
Ekor
mencit
dipegang
kemudian
ditempatkan
pada
permukaan ram kawat.
Mencit akan meregangkan badannya.
Saat
mencit
meregangkan
badannya,
pada
tengkuk
ditempatkan suatu penahan, misalnya pensil atau batang logam yang dipegang dengan tangan kiri.
Ekornya ditarik dengan tangan kanan dengan keras, sehingga lehernya akan terdislokasi dan mencit akan terbunuh.
2) Tikus a) Cara kimia dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. b) Cara fisik dilakukan dengan proses sebagai berikut:
Tikus diletakkan diatas sehelai kain, kemudian badan tikus dibungkus termasuk kedua kaki depannya dengan kain
tersebut. Tikus selanjutnya dibunuh dengan cara memeukul bagian belakang telinganya dengan tongkat. Tikus dipegang dengan perutnya menghadap ke atas,
kemudian bagian belakang kepalanya dipukulkan dengan keras para permukaan keras seperti meja. Ekor
tikus
dipegang,
kemudian
diayunkan
sampai
tengkuknya tepat mengenai permukaan benda keras seperti bagian pinggir meja. 3) Kelinci a) Cara kimia dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. b) Cara fisik dilakukan dengan proses:
Kaki belakang kelinci dipegang dengan tangan kiri sehingga
badan
dan
kepalanya
tergantung
kebawah
menghadap ke kiri.
Sisi telapak tangan kanan dipukulkan dengan keras pada tengkuk kelinci.
Pemukulan pada tengkuk kelinci dapat dilakukan dengan menggunakan alat misalnya tongkat.
4) Marmot a) Cara kimia dengan menggunakan eter atau pentobarbital-Na pada dosis yang mematikan. b) Cara fisik dilakukan dengan:
Tengkuk
marmot
dipukul
dengan
keras
dengan
menggunakan alat atau dengan memukul bagian belakang kepalanya pada permukaan keras.
Dilakukan dislokasi leher dengan tangan.
IV. Data Hasil Pengamatan
1. Hasil Pengamatan
2. Perhitungan Bobot badan mencit: 14,01 gram Panjang usus: 60 cm Indeks organ:
a. Lambung
b. Limfa
c. Jantung
d. Usus
e. Hati
f. Otak
g. Paru-paru
h. Ginjal
i.
Uterus
V. Pembahasan
Dalam hal ini kami melakukan uji coba anastesi umum dengan menggunakan hewan percobaan mencit, sesuai dengan langkah kerja kita memlih satu buah mencit. Seperti biasa sebelum dilakukan percobaan mencit di timbang terlebih dahulu, hal ini bertujuan untuk penghitungan indeks organ pada mencit setelah pembedahan nanti. Pengorbanan hewan sering dilakukan apabila keadaan rasa sakit yang hebat/ apabila mengalami kecelakaan, menderita sakit atau jumlahnya terlalu banyak dibandingkan dengan kebutuhan. Etanasi atau cara kematian tanpa rasa sakit perlu dilakukan sedemikian sehingga hewan akan mati dengan seminimal mungkin rasa sakit. Pada dasarnya cara fisik yaitu dislokasi leher adalah cara yang paling cepat, mudah dan berkeprimanusiaan. Tetapi cara perlakuan kematian juga perlu ditinjau bila ada tujuan dari pengorbanan hewan percobaan dalam rangkaian percobaan. Cara mengorbankan hewan lain adalah dengan menggunakan gas karbondioksida dalam wadah khusus atau dengan pemberian pentobarbital natrium pada takaran letalnya. Pada praktikum percobaan anastesi, mencit kita masukan dalam ruang tertutup yang berisi kloroform dalam kapas. Dalam jangka waktu 28,23 detik, mencit mulai memasuki fase anastesi disertai dengan gerak denyut jantung dan nafas yang semakin cepat. Kemudian pada detik ke 47,90 detik keseimbangan mencit mulai berkurang (jalan oleng). Pada saat percobaan memasuki waktu 1 menit 7 detik, mencit mengalami ataksia (kegagalan kontrol otot pada tangan dan kaki). Fase ini disebut dengan fase exitement. Pada menit ke 1 lebih 28 detik, mencit mengalami hilangnya kesadaran. Lalu mencit dikeluarkan dari ruang tertutup tadi, untuk mulai dilakukan pembedahan. Adapun mekanisme kerja dari kloroform ini adalah, kloroform merupakan anestesi yang sangat kuat, sifat analgesiknya kuat sekali, dengan kadar dalam darah arteri 10-15 mg% sudah terjadi analgesia tetapi pasien masih sadar.
Kloroform pada kadar tinggi dan sedang menimbulkan relaksasi otot serta hambatan neuromuscular yang tidak dapat dilawan oleh neostigmin. Kloroform menyebabkan iritasi saluran napas dan merangsang sekresi kelenjar bronkus. Pada induksi dan waktu pemulihan, kloroform menimbulkan salivasi, tetapi pada stadium yang lebih dalam, salivasi akan dihambat dan terjadi depresi napas. Kloroform menekan kontraktilitas otot jantung, tetapi in vivo efek ini dilawan oleh meningkatnya aktivitas simpatis sehingga curah jantung tidak berubah atau meninggi sedikit. Kloroform tidak menyebabkan sensitisasi jantung
terhadap
katekolamin.
Pada
anesthesia
ringan,
kloroform
menyebabkan dilatasi pembuluh darah kulit sehingga timbul kemerahan terutama di daerah muka, pada anesthesia yang lebih dalam kulit menjadi lembek, pucat dingin basah. Terhadap pembuluh darah ginjal, kloroform menyebabkan
vasokonstriksi
sehingga
terjadi
penurunan
laju
filtrasi
glomerulus dan produksi urin menurun secara reversibel. Sebaliknya pada pembuluh darah otak menyebakan vasodilatasi. Kloroform dieksresikan melalui paru, sebagian kecil di eksresikan juga melalui urin, air susu dan keringat serta melalui difusi kulit utuh. Penggunaan kloroform pada sistem semi tertutup dalam kombinasi dengan oksigen atau N2O tidak dianjurkan pada pembedahan dengan tindakan kauterisasi sebab ada bahaya timbulnya ledakan atau terbakar yang dapat mengakibatkan pecahnya paru-paru. Adapun efek anastetik inhalasi pada sistem organ, yaitu diantarnya terjadi pada: 1. Efek terhadap sitem kardiovaskular Anastetika inhalasi mengubah kecepatan jantung dengan jalan mengubah secara langsung kecepatan depolarisasi nodus sinus atau dengan menggeser keseimbangan aktifitas saraf otonomik. Semua anastetika inhalasi cenderung meningkatkan tekanan arteri kanan sesuai dengan hubungan dosis-efek yang kesemuanya menggambarkan adanya depresi fungsi miokardium. 2.
Efek terhadap sistem pernapasan
Semua anastetika inhalasi yang dipakai sekarang ini menimbulkan penurunan volume tidal dan meningkatkan kecepatan nafas sekalipun demikian,
meningkatnya
kecepatan
ini
tidaklah
cukup
untuk
mengkompensasi penurunan volume, yang menyebabkan penurunan ventilasi semenit. Semua anastetika inhalasi merupakan depresan nafas seperti yang ditujukan pada kasus berkurangnya respon terhadap berbagai kadar karbondioksida. 3. Efek terhadap otak Anastetika inhalasi mengurangi laju metabolise otak. Sekalipun demikian, sebagian besar anastetika inhalasi meningkatkan aliran darah menuju serebral karena mereka mengurangi resistensi pembuluh darah serebral. Peningkatan darah serebral sering kali tidak diinginkan secara klinis. 4. Efek terhadap ginjal Anestetika inhalasi menurunkan kecepatan filtrasi glomerulus dan aliran plasma efektif yang menuju ginjal, serta meningkatkan fraksi filtrasi. 5. Efek terhadap hati Semua anastetika inhalasi mempunyai efek menurunkan aliran darah menuju hati, berkisar antara 15%-45% dari aliran darah praanastesi.
VI. Kesimpulan
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa dalam mengorbankan hewan percobaan dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu dengan cara anastesi, dislokasi leher dan dengan cara dibanting.
VII. Daftar Pustaka
Thomson, E.B. 1985. Grug Bluscretening Fundamentals of Drug Evaluation Techniques in Pharmacology. New York: Graceway Publishing Company. Katzung, Bertram G. Farmakologi Dasar dan Klinik . Jakarta: Salemba Medika. Malole, M. M. B, Pramono, C. S. U. 1989. Penggunaan Hewan-hewan Percobaan Labolatorium. Bogor: IPB.
