LABORATORIUM MIKROBIOLOGI
JURUSAN FARMASI
POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES MAKASSAR
" INOKULASI MIKROORGANISME"
NAMA MAHASISWA/NIM :
Theresia Michelle Umkeketo PO 713251141048
Sri Wahyuni PO 713251141044
Sri Wahyuni Asri PO 713251141045
Suriani PO 713251141046
Tanti Irawanti PO 713251141047
Tria Riska Lestari PO 713251141049
Yuni Afsari PO 713251141050
Nur Ilmi PO 713251121030
KELOMPOK : III
KELAS : IA
HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : KAMIS,2 APRIL 2015
PEMBIMBING : Sesilia Rante Pakadang,S.Si,M.Si,Apt
JURUSAN FARMASI
POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES MAKASSAR
2015
BAB I
PENDAHULUAN
I.1 Latar Belakang
Untuk dapat meneliti mikroorganisme di laboratorium kita harus dapat menumbuhkan mikroorganisme tersebut . Mikroorganisme dapat berkembang secara alami ataupun buatan. Substrat yang digunakan manusia dalam dalam mengembangkan dan menumbuhkan mikroorganisme disebut media . Untuk itu harus dipahami jenis – jenis nutrien yang diisyaratkan oleh bakteri dan lingkungan fisik yang menyediakan kondisi optimum bagi pertumbuhannya. Alat – alat yang digunakan dalam perkembangbiakan ini harus disterilkan terlebih dulu , supaya mikroorganisme yang tidak diinginkan tidak tumbuh , sehingga menghambat pertumbuhan mikroorganisme .
Dalam teknik biakan murni tidak saja diperlukan bagaimana memperoleh suatu biakan yang murni, tetapi juga bagaimana memelihara serta mencegah pencemaran dari luar. Inokulasi dimaksudkan untuk menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni . Inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang lama dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi . Agar biakan bakteri dapat dibuat , maka alat – alat harus disterilisasi sebelum inokulasi. Sterilisasi merupakan suatu proses untuk mematikan semua organisme yang terdapat pada suatu benda . Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi tiga macam yaitu , penggunaan panas ( pemijaran dan udara panas ) , penyaringan , penggunaan bahan kimia ( etilena oksida , asam perasetat , formal dehida dan glutaraldehida alkalin ) .
Pencemaran biasanya berasal dari udara yang mengandung banyak mikroorganisme . Pemindahan biakan mikroba yang dibiakkan harus sangat hati-hati dan mematuhi prosedur laboratorium agar tidak terjadi kontaminasi . Pada praktikum ini akan dilakukan teknik inokulasi biakan mikroorganisme pada medium steril untuk mempelajari mikrobiologi dengan satu kultur murni saja . Identifikasi biakan mikroorganisme seringkali memerlukanpemindahan ke biakan segar tanpa terjadi pencemaran . Pemindahan mikroorganisme ini dilakukan dengan teknik aseptik untuk mempertahankan kemurnian biakan selama pemindahan berulangkali. Identifikasi biakan mikroorganisme seringkali memerlukan pemindahan ke biakan segar tanpa terjadi pencemaran. Pemindahan mikroorganisme ini dilakukan dengan teknik aseptik untuk mempertahankan kemurnian biakan selama pemindahan berulangkali.
I.2 Maksud dan Tujuan Percobaan
I.2.1 Maksud Percobaan
Adapun maksud percobaan ini adalah untuk mengetahui cara menginokulasi mikroorganisme.
I.2.2 Tujuan Percobaan
Tujuannya adalah agar praktikan dapat melakukan teknik inokulasi dan mengamati hasil inokulasi mikroorganisme.
I.3 Prinsip Percobaan
Mikroorganisme diambil menggunakan ose steril kemudian diinokulasi pada media dan selanjutnya diinkubasi pada suhu 37°C selama 1x24 jam.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
II.1 TEORI UMUM
Penanaman bakteri atau biasa disebut juga inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi. Untuk melakukan penanaman bakteri (inokulasi) terlebih dahulu diusakan agar semua alat yang ada dalam hubungannya dengan medium agar tetap steril, hal ini agar menghindari terjadinya kontaminasi (Dwijoseputro, 1998)
Teknik yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme pada media agar memungkinkannya tumbuh dengan agak berjauhan dari sesamanya, juga memungkinkan setiap selnya berhimpun membentuk koloni, yaitu sekelompok massa sel yang dapat dilihat dengan mata telanjang. Bahan yang diinokulasikan pada medium disebut inokulum, dengan menginokulasi medium agar nutrien (nutrien agar) dengan metode agar tuang atau media agar sebar, sel-sel mikroorganisme akan terpisah sendiri-sendiri. Setelah inkubasi, sel-sel mikroba individu memperbanyak diri secara cepat sehingga dalam waktu 18 sampai 24 jam terbentuklah massa sel yang dapat dilihat dan dinamakan koloni. Koloni dapat terlihat oleh mata telanjang. Setiap koloni merupakan biakan murni satu macam mikroorganisme (Pelczar dan Chan, 2007).
Suatu jenis koloni mikroba yang terpisah dari koloni campurannya akan lebih mudah untuk diamati. Selain itu teknik untuk memisahkan dan mendapatkan koloni tunggal serta pemeliharannya terdapat beberapa jenis. Teknik-teknik tersebut memiliki kelebihan dan kelemahan. Beberapa cara dapat dilakukan untuk menentukan jumlah bakteri yang terdapat pada bahan pemeriksaan. Cara yang paling sering digunakan adalah cara penghitungan koloni pada lempeng pembiakan (plate count) atau juga dapat dilakukan penghitungan langsung secara mikroskopis (Burrows, 2004).
Kemampuan mikroorganisme untuk tumbuh dan tetap hidup merupakan suatu hal yang penting untuk diketahui. Pengetahuan tentang faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan mikroba sangat penting di dalam mengendalikan mikroba. Berikut ini faktor-faktor penting yang mempengaruhi pertumbuhan mikroba, suplai energi, suhu/temperatur, keasaman atau kebasaan (ph), ketersediaan oksigen (Suriawiria, 2005).
A.TEKNIK INOKULASI DAN PEMURNIAN
Teknik inokulasi mikroba untuk memisahkan dan mengidentifikasi,jenis mikroba dari biakan dapat diklasifikasikan berdasarkan sifat pertumbuhan yang nampak pada media.(Buku Penuntun Mikrobiologi,2015)
Metode penanaman pada agar
Pada metode penanaman pada agar,jika sedikit saja sel diletakkan dalam medium agar,maka tiap sel akan tumbuh menjadi koloni yang terpisah.Jika suspensi sel cukup diencerkan,koloni akan terpisah dengan baik,sehingga masing-masing memiliki kemungkinan tinggi untuk diturunkan menjadi sel tunggal.Namun untuk membuat yang demikian,penting untuk mengambil satu tipe koloni yang diinginkan,memasukkan ke dalam air dan menanamnya kembali ke agar.Dengan mengulangi prosedur ini beberapa kali menjamin untuk memperoleh biakan murni.
Metode Pengenceran
Metode yang sedikit dapat dipercaya adalah pengenceran.Suspensi diencerkan seri dan contoh masing-masing pengenceran ditanam pada agar.Jika hanya sedikit contoh daripengenceran tertentu menunjukkan pertumbuhan ,diperkirakan bahwa beberapa dari biakan tadi dimulai dari sel tunggal.Metode ini tidak digunakan kecuali jika penanaman pada agar tidak dimungkinkan karena beberapa alas an.Gambaran yang tidak diinginkan dari metode ini adalah bahwa metode ini hanya dapat digunakan untuk isolasi tipe mikroorganisme yang dominan dalam populasi campuran.
B.TEKNIK PEMBIAKAN
Pembiakan adalah proses perbanyakan organisme melalui penyediaan kondisi lingkungan yang sesuai.Mikroorganisme yang sedang tumbuh membuat replica dirinya,membutuhkan adanya elemen-elemen dalam komposisi kimia mereka.Nutrisi harus menyediakan elemen ini dalam bentuk yang mudah dimetabolisme.Faktor-faktor yang harus dikontrol selama pertumbuhan meliputi nutrisi,pH,temperature,aerasi,konsentrasi garam,dan kekuatan ionic medium.
Teknik pembiakan dilakukan berdasarkan tujuan melakukan pembiakan mikroorganisme.Umumnya tiga situasi dapat ditemukan yaitu:
1.memperbanyak atau menumbuhkan spesies tertentu.
2.menentukan jumlah dan tipe organism yang ada pada sampel.
3. mengisolasi organism tertentu dari sumber alami.
Untuk memperbanyak spesies tertentu harus disiapkan media yang mengandung bahan dan kondisi yang sesuai untuk pertumbuhan spesie tersebut.Untuk hal ini cukup dibutuhkan satu jenis saja ,media tetapi bersifat selektif dan kaya akan nutrient sehingga pertumbuhan akan berjalan baik.
Teknik Penggoresam Agar
Agar Miring
Pembuatan agar miring tidak boleh menyentuh tutup tabung saat dimiringkan.Agar miring ini mempunyai permukaan luas sehingga sering digunakan untuk menumbuhkan atau menyimpan biakan murni.Beberapa teknik goresan yang digunakan : Goresan T,goresan kuadran,goresan radix dan goresan sinambung.
Agar Tegak
Tabung yang berisi agar dibiarkan tegak hingga beku.Agar tegak ini digunakan untuk membiakkan bakteri dengan cara menusuk.
Ada beberapa metode inokulasi,diantaranya :
Metode Gores
Teknik ini mempunyai dua keuntungan yaitu menghemat bahan dan waktu,tetapi memerlukan keterampilan-keterampilan.(Anonim,2014)
Prinsip dari metode ini,yaitu mendapatkan koloni yang benar-benar terpisah dari koloni yang lain,sehingga mempermudah proses inokulasi.(Anonim,2014)
Inokulum digoreskan di permukaan media agar nutrient dalam cawan petri dengan jarum pindah(lup inokulasi),diantara garis-garis goresan akan terdapat sel-sel yang cukup terpisah sehingga dapat tumbuh menjadi koloni.(Anonim,2014)
Metode Sebar
Setetes inokulum diletakkan dalam sebuah medium agar nutrient dalam cawan petri dan dengan menggunakan batang kaca yang bengkok dan steril.Inokulasi itu disebarkan dalam medium batang yang sama dapat digunakan untuk menginokulasi penyebaran mikroba yang merata dengan baik.Pada beberapa cawan petri akan muncul koloni-koloni yang terpisah.(Anonim,2014)
Metode Tuang
Inokulasi menggunakan media cair dengan cara pengenceran.Dasar melakukan pengenceran adalah penurunan jumlah mikroorganisme sehingga pada suatu saat hanya ditemukan satu sel di dalam tabung.(Anonim,2014)
Metode Tusuk
Metode Tusuk yaitu metode yang digunakan untuk medium tegak,yang dilakukan dengan cara menusukkan ujung jarum yang didalamnya terdapat inokulum dan dimasukkan ke dalam media .(Anonim,2014)
A.Bentuk-Bentuk Media Inokulasi
Plat Agar
Media yang berbentuk plat agar menggunakan metode gores untuk membiakkan bakterinya.Bentuk ini berfungsi untuk peremajaan mikroorganisme.(Anonim,2014)
Agar Miring
Untuk menanamkan biakan,agar miring juga menggunakan metode gores.Penanaman bakteri pada agar miring berfungsi untuk peremajaan dan pengamatan reaksi biokimia.(Anonim,2014)
Agar Tegak
Untuk menanamkan biakan pada agar tegak,digunakan metode tusuk (menggunakan jarum ose lurus). Pada agar tegak kita dapat mengamati berdasarkan kondisi oksigen yang dibutuhkan oleh biakan.(Anonim,2014)
Media Cair
Pada bentuk media cair,kita menggunakan metode tuang.Penanaman biakan pada media cair berfungsi untuk peremajaan dan pengenceran biakan mikroba.(Anonim,2014)
C. IDENTIFIKASI
Setelah diperoleh koloni yang terpisah,dapat dilakukan berbagai uji biokimia.Uji biokimia didasarkan pada berbagai hasil metabolism yang disebabkan oleh daya kerja enzim.Jarang sekali dapat ditentukan suatu genus berdasarkan sifat morfologi atau biakan saja.Karena uji biokimia memerlukan berbagai media,maka dari koloni yang terpisah perlu dibuat dahulu biakan harian dari koloni terpisah tersebut.(Buku Penuntun Mikrobiologi,2015)
II.2 URAIAN MIKROORGANISME
Bakteri
Bakteri adalah suatu mikroorganisme prokariot yang pada umumnya mempunyai ukuran generasi yaitu sel 0,5-1,0 µm kali 2,0-5,0 µm dan terdiri waktu yang dibutuhkan oleh sel dari tiga bentuk dasar yaitu : bentuk bulat atau kokus,bentuk batang atau basilus dan bentuk spiral.Bakteri tumbuh dengan cara pembelahan biner,yang berarti satu sel membelah menjadi dua sel.(Anonim,2014)
Jamur
Fungi atau cendawan adalah organism heterotrofik-mereka memerlukan senyawa organic untuk nutrisinya.Bila mereka hidup dari benda organic mati yang terlarut,mereka disebut saprofit.Saprofit menghancurkan sisa-sisa tumbuhan dan hewan yang kompleks,menguraikan menjadi zat-zat kimia yang lebih sederhana,yang kemudian dikembalkan ke dalam tanah, dan selanjutnya meningkatkan kesuburannya.Jadi mereka dapat menguntungkan bagi manusia.(Dr. Erwin F.Lesse,1986)
II.2.1 Klasifikasi
Bakteri Streptococcus mutan
Kingdom : Monera
Filum : Firmicutes
Kelas : Bacilli
Ordo : Lactobacilalles
Famili : Streptococcaceae
Genus : Streptococcus
Spesies : Streptococcus mutan
Jamur Trichophyton tonsurans
Kingdom : Fungi
Filum : Ascomycota
Kelas : Eurotiomycetes
Ordo : Onygenales
Famili : Arthrodermataceae
Genus : Trichophyton
Spesies : Trichophyton tonsurans
II.2.2 Morfologi
1.Morfologi Bakteri Streptococcus mutan
Streptococcus mutan merupakan bakteri gram positif(+),bersifat non motil(tidak bergerak) berdiameter 1-2 µm, bakteri anaerob fakultatif.Memiliki bentuk bulat atau bulat telur,tersusun seperti rantai dan tidak membentuk spora.(Samaranayake,2002;Regina,2007;Manton,2010).
Bakteri ini tumbuh secara optimal pada suhu sekitar 180°C-400°C. Streptococcus mutan biasanya ditemukan pada rongga gigi manusia yang luka dan menjadi bakteri yang paling kondusif menyebabkan karies untuk email gigi.(Ari,2008)
Streptococcus mutan adalah bersifat asidogenik,yaitu menghasilkan asam asidurik,mampu tinggal pada lingkungan asam,dan menghasilkan suatu polisakarida yang lengket yang disebut dextran.Oleh karena kemampuan ini, Streptococcus mutan bias menyebabkan lengket dan mendukung bakteri lain menuju ke email gigi,lengket mendukung bakteri-bakteri lain,pertumbuhan bakteri asidodurik yang lainnya,dan asam melarutkan email gigi(Willet dk,1991;Jawetz dkk,2004;Ari,2008;Maksum,2009)
2.Morfologi Jamur Trichophyton tonsurans
Jamur ini dapat menyerang beberapa bagian tubuh manusia terutama pada bagian kulit kepala dan rambut. Berbentuk pensil dengan ujung-ujung tumpul dan berdinding halus.Tiap-tiap spesies berbeda dalam morfologi dan pigmentasinya.
Trichophyton tonsurans ,memperbanyak diri dengan membelah,biasanya banyak juga cepat,dan memungkinkan untuk menghasilkan cabang-cabang yang pendek. Koloninya biasa dalam bentuk serbuk.
II.3 Uraian Bahan
Media PDA
Berdasarkan konsistensinya termasuk medium padat (solid medium),karena medium dipadatkan dengan agar.Medium PDA termasuk medium umum berfungsi untuk mengembangbiakkan jamur. Bahan-bahan serta fungsi yang terkandung dalam medium PDA yaitu :
Kentang : Berfungsi sebagai sumber vitamin , nitrogen organic,dan senyawa-senyawa karbon.
Dekstrose : Berfungsi sebagai karbon
Agar : Sebagai zat yang memadatkan medium.
Aquadest : Sebagai pelarut,sumber O2
Media NA
Nutrien Agar (NA) adalah suatu medium berbentuk padat yang merupakan perpaduan antara bahan alamiah dan senyawa-senyawa kimia.Berfungsi untuk mengembangbiakkan bakteri.Bahan-bahan serta fungsi yang terkandung dalam medium NA yaitu :
Daging : Berfungsi sebagai sumber vitamin B,mengandung nitrogen organic dan senyawa karbon.
Peptone : Sebagai sumber utama nitrogen organic dan sumber nutrisi
Agar : Sebagai zat yang memadatkan medium.
Aquadest : Sebagai pelarut,sumber O2.
Media PW
Peptone water merupakan media cair berwarna kuning,jernih.Pada media ini,beberapa bakteri menghasilkan enzim tryptohase yang dapat menghidrolisis tryptophan,menghasilkan Indol.Uji Indol positif ditandai dengan berubahnya warna pereaksi menjadi merah.Bahan-bahan serta fungsi yang terkandung dalam medium PW yaitu :
Peptone : Sebagai sumber utama nitrogen organic dan sumber nutrisi
NaCl :Sebagai pengatur tekanan osmotic pada media
Aquadest : Sebagai pelarut,sumber O2
BAB III
METODE KERJA
III.1 Alat dan Bahan
III.1.1 Alat yang digunakan
Cawan Petri
Tabung reaksi
Rak Tabung Reaksi
Pemanas Spiritus
Lamina Air Flow
Ose Bulat
Ose Lurus
Beaker Glass
Swab Steril
Pipet Tetes
Korek
Spoit
Erlenmeyer Tertutup
Tissue
III.1.2 Bahan yang digunakan
Media PDA (Potato Dextrose Agar)
Media NA (Nutrient Agar)
Media PW (Peptone Water)
III.2 Cara Kerja
Cara membuat preparat basah
Kaca obyek dibersihkan dengan kapas yang diberi alcohol.
Dipindahkan 2 mata ose suspense biakan ke kaca objek.Untuk preparat basah digunakan kaca objek biasa.
Ditutup dengan kaca penutup.
Diperiksa dengan pembesaran 10x atau 40x
Cara pemindahan suspense biakan
Digoyangkan tabung sehingga bakteri tercampur merata dalam suspense.
Dipijarkan ose sampai merah
Dibuka tutp tabung dan dipanaskan mulut tabung di atas apai.
Setelah ose dingin kembali,diambil 1 mata ose suspense bakteri
Dipanaskan mulut tabung dan diletakkan kembali pada tempatnya
Diletakkan ose yang berisi suspense biakan di atas kaca objek
Dipijarkan ose setiap kali mengambil suspense biakan
Cara kerja pada cawan petri
Disiapkan cawan petri yang bersih dan kering,diberi label pada tutup cawan petri sesuai dengan jenis media
Diambil ose tumpul ,ditunggu beberapa saat hingga agak dingin
Digoreskan ose pada permukaan agar,dimulai dari bagian pinggir cawan petri,secara tidak terputus digerakkan ke kiri dank e kanan sampai seluas seperempat luas permukaan agar.
Ditutup ulasan dan ditunggu hingga kering
Dibuka kembali lalu lakukan penggoresan kearah kanan
Diambil ose tumpul yang sudah digunakan agar steril kembali
Cara kerja pada tabung reaksi
Disiapkan tabung reaksi yang bersih dan kering,diberi label sesuai dengan jenis media
Dipanaskan mulut tabung reaksi dengan melewatkan sekilas melalui api
Diambil mikroba dari agar menggunakan ose tumpul
Digoreskan pada media dalam bentuk zigzag
Ditutup kembali tabung reaksi dengan kapas
Dipanaskan kembali ose tumpul setelah digunakan
Catatan :
Semua bakteri yang sudah diinokulasi diinkubasi pada incubator selama 24-48 jam
Diamati mikroba yang sudah diinkubasi
Diambil gambar dari setiap hasil pengamatan
Dicatat hasil pengamatan pada lembar kerja
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
IV.1 Hasil Pengamatan
Nama
Media
Metode
Inokulasi
Nama
Bakteri/Jamur
Gambar Hasil
Pengamatan
Bentuk Koloni
NA
Tuang
Bakteri Streptococcus mutan
Koloni bakteri banyak/tebal,berwarna kuning kecoklatan.
NA
Tusuk
Bakteri Streptococcus mutan
Koloni bakteri sedikit, berkumpul di atas permukaan agar.
NA
Gores
Bakteri Streptococcus mutan
Koloni bakteri berkumpul di atas permukaan agar, berwarna putih
NA
Miring
Bakteri Streptococcus mutan
Koloni bakteri banyak/tebal,berwarna kuning keemasan
PDA
Tuang
Jamur Trichophyton tonsurans
Koloninya banyak/tebal tersebar di seluruh permukaan agar,terpisah-pisah berwarna hitam
PDA
Tusuk
Jamur Trichophyton tonsurans
Koloninya tipis/sedikit berwarna putih terdapat di atas permukaan agar
PDA
Gores
Jamur Trichophyton tonsurans
Koloninya banyak/tebal berwarna putih,terdapat di atas permukaan
PDA
Miring
Jamur Trichophyton tonsurans
Koloni sedikit dan tidak tesebar merata pada agar, berwarna hitam.
PW
Bakteri
Bakteri Streptococcus mutan
Koloni sedikit/tipis,terdapat di atas permukaan agar
PW
Jamur
Jamur Trichophyton tonsurans
Koloni sedikit / hampir tidak ada ,terdapat di permukaan agar.
IV.2 Pembahasan
Pada percobaan inokulasi mikroorganisme menggunakan media padat dan cair ini,hal pertama yang harus dilakukan adalah mensterilkan alat-alat yang akan digunakan. Hal ini bertujuan agar pertumbuhan mikroorganisme yang akan diinokulasi tidak terkontaminasi mikroorganisme lain yang akan menganggu hasil pengamatan.Mikroorganisme memiliki ukuran yang sangat kecil dan terdapat dimana-mana sehingga kita harus menjaga kesterilan alat dan bahan yang akan digunakan . Semua pekerjaan pada praktikum ini harus memperhatikan prosedur teknik aseptis.
Alat-alat yang tahan akan pemanasan sebelum digunakan terlebih dahulu harus difalmbir(dipanaskan sampai pijar) untuk menjaga kesterilannya. Ujung jarum ose diflambir sampai membara.Untuk tabung reaksi,flambir hanya cukup dilakukan dengan melewatkan mulut tabung reaksi beberapa kali di atas spiritus.Kemudian, alat-alat tersebut didiamkan terlebih dahulu selama beberapa detik agar suhunya sedikit turun agar bakteri tidak mati akibat suhu yang terlalu tinggi .Apabila tidak digunakan , jarum ose harus disimpan terlebih dahulu di dalam alcohol 70% agar terhindar dari kontaminasi dan tetap dalam keadaan steril.Sedangkan untuk spoit yang telah selesai digunakan harus direndam di dalam desinfektan yang telah disediakan agar mikroorganisme yang tertinggal tidak berpindah ke tempat lain.
Pada percobaan ini,kita akan mengamati bakteri Streptococcus mutan dan jamur Trichophyton tonsurans. Ada 3 metode inokulasi yang akan digunakan yaitu metode tusuk,tuang,dan gores.Semua metode ini bertujuan untuk mengamati koloni mikroba. Sedangkan untuk bentuk dari media yang digunakan yaitu ada 4 bentuk,diantaranya plat agar ,agar miring,agar tegak,dan media cair.Masing-masing fungsi dari ke 4 bentuk media tersebut telah dijelaskan pada Bab II.
Bakteri Streptococcus mutan
Streptococcus mutan pada plat agar :
Streptococcus mutan merupakan bakteri gram positif(+),bersifat non motil(tidak bergerak),berdiameter 1-2 µm ,bakteri anaerob fakultatif.Memiliki bentuk bulat atau bulat telur,tersusun seperti rantai dan tidak membentuk spora.Karena sifat-sifat tersebut,bakteri ini dapat tumbuh baik di media padat,media miring,media tegak,dan media cair.
Streptococcus mutan pada agar miring :
Bakteri ini dapat tumbuh di atas permukaan agar sesuai dengan goresan yang diberikan di atas permukaan agar dan tidak ada bakteri yang tembus ke bawah permukaan agar. Karena itu bakteri ini bersifat aerob.
Streptococcus mutan pada agar tegak :
Bakteri ini tumbuh di atas oermukaan agar sampai ke dasar tabung sesuai dengan tusukan yang diberikan.Karena itu bakteri bersifat anaerob fakultatif.
Streptococcus mutan pada media cair :
Bakteri ini tumbuh hamper di seluruh media cair tetapi banyak koloni bakteri yang mengendap di bawah permukaan media.Ada juga yang menjulur seperti untaian benang halus.Warna media berubah menjadi biru akibat perubahan pH yang menandakan bahwa bakteri tumbuh di dalam media.Walaupun di media cair,bakteri ini tetap akan tumbuh karena bersifat anaerob fakultatif dan bakteri ini tidak bergerak mendekati permukaan media.
Jamur Trichophyton tonsurans
Trichophyton tonsurans pada plat agar :
Jamur ini bersifat aerob.Organisme aerob adalah organism yang memerlukan oksigen untuk memperoleh energy.Pada agar ini,terlihat bahwa koloni Trichophyton tonsurans tersebut merata pada permukaan agar.
Trichophyton tonsurans pada agar miring :
Terlihat pada gambar, Trichophyton tonsurans tumbuh pada permukaan agar dan tidak ada yang menembus ke bawah ini menandakan bahwa jamur Trichophyton tonsurans merupakan jamur yang bersifat aerob.
Trichophyton tonsurans pada agar tegak :
Jamur Trichophyton tonsurans pada jenis agar ini,terlihat lebih kecil bahkan hampir tidak ada .Hal ini dapat terjadi karena pembuatan sediaan yang tidak sesuai prosedur,dan factor-faktor dari luar seperti kelembapan,cahaya,dan suhu.
Trichophyton tonsurans pada media cair :
Terlihat bahwa media cair yang ditumbuhi jamur Trichophyton tonsurans ini berubah warna dari hijau tosca menjadi biru.Perubahan warna yang terjadi disebabkan karena perubahan pH . Ini menandakan bahwa jamur tumbuh pada media tersebut.
Dari hasil pengamatan yang dilakukan,tidak ada kontaminasi dalam hasil inokulasi.Ini disebabkan karena menggunakan teknik aseptis dengan benar sehingga tidak menimbulkan kontaminasi pada hasil inokulasi.
BAB V
PENUTUP
V.1 Kesimpulan
Inokulasi adalah kegiatan pemindahan mikroorganisme baik berupa bakteri maupun jamur dari tempat atau sumber asalnya ke medium baru yang telah dibuat dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi dan aseptis.(Wikipedia Bahasa Indonesia,2014)
Ada 4 metode inokulasi,yaitu metode gores,metode sebar,metode tuang,dan metode tusuk.Metode gores bertujuan untuk mangisolasi,mengidentifikasi,dan memurnikan mikroorganisme .Metode sebar bertujuan untuk meremajakan mikroorganisme dan menyimpan inokulum. Metode tuang bertujuan untuk menghitung jumlah koloni mikroorganisme dari sampel yang diinokulasi. Metode tusuk bertujuan untuk motilitas pertumbuhan mikroorganisme.Untuk bentuk bentuk media inokulasi juga ada 4 yaitu plat agar,agar tegak,agar miring,dan media cair.(Anonim,2014)
V.2 Saran
Sebaiknya alat-alat yang hendak digunakan disterilisasi terlebih dahulu agar tidak terkontaminasi mikroorganisme lain.
Diharapkan praktikan bekerja sesuai dengan prosedur aseptis.
DAFTAR PUSTAKA
Purwanto,Eko.2013.Makalah Praktikum Inokulasi Mikrobiologi. http://elpentom93.blogspot.com/. Diakses 2 April 2015
Pakadang,Sesilia.dkk.2015.Buku Penuntun Praktikum Mikrobiologi Parasitologi.Makassar:Tim Penyusun.
Unud.BAB II KAJIAN PUSTAKA . Streptococcus mutan. http://www.pps.unud.ac.id/thesis/pdf%E2%80%A6/unud-230-1484248120-bab%20ii.pdf. Diakses 2 April 2015
PutriRuga, Raisa Wanadri. Trichophyton tonsurans. https://mikrobia2.files.wordpress.com/2008/05/tinea-kapitis.pdf. Diakses 2 April 2015