Jaminan Mutu Laboratorium Mikrobiologi merupakan bagian atau penerapan dari ISO 17025 jaminan mutu laboratorium yang dikhususkan untuk laboratorium mikrobiologi
1. Personil
11 pengujian mikrobiologi harus dilakukan dan dia!asi oleh orang yang berpengalaman" berkuali#ikasi dalam mikrobiologi atau setara Sta# harus memiliki pelatihan dasar mikro mikrobiol biologi ogi dan pengal pengalama aman n prakti praktiss yang yang rele$an rele$an sebelum sebelum diperb diperbole olehkan hkan untuk untuk melakukan pekerjaan yang ter%akup dalam ruang lingkup pengujian 12 deskripsi pekerjaan saat ini untuk semua personil yang terlibat dalam pengujian dan & atau atau kali kalibr bras asi" i" $ali $alida dasi si dan $eri $eri#i #ikas kasii haru haruss dipel dipelih ihara ara Labo Labora rato tori rium um juga juga harus harus mempertahankan %atatan dari semua tenaga teknis" yang menjelaskan kuali#ikasi mereka" pelatihan dan pengalaman 1' Jika laboratorium menyertakan pendapat dan interpretasi hasil tes dalam laporan" ini harus harus dilakuk dilakukan an oleh oleh petuga petugass yang ber!en ber!enang ang dengan dengan pengala pengalaman man yang yang sesuai sesuai dan pengetahuan yang rele$an dari aplikasi spesi#ik termasuk" misalnya" persyaratan peraturan dan teknologi dan kriteria penerimaan 1( 1( Mana Manaje jeme men n labo labora rato tori rium um harus harus mema memast stik ikan an bah! bah!aa semu semuaa pers persone onell memi memili liki ki kompet kompetens ensii penguji pengujian an dan pengope pengoperas rasian ian perala peralatan tan Serta Serta mendap mendapat at pelati pelatihan han yang yang memadai"men%akup pelatihan teknik dasar misalnya analisa metode tuang" menghitung koloni" teknik aseptik" pembuatan media"membuat serial pengen%eran " dan teknik dasar dalam diidenti#ikasi" dengan penerimaan ditentukan berdasarkan kriteria objekti# yang rele$an )ersonil hanya dapat melakukan tes pada sampel sesuai dengan kompetensinya" atau atau jika jika tidak tidak sesuai sesuai mereka mereka melaku melakukann kannya ya di ba!ah ba!ah penga!a penga!asan san yang memadai memadai *ompet *ompetens ensii harus harus dipant dipantau au se%ara se%ara kontin kontinyu yu untuk untuk menetu menetukan kan pelati pelatihan han apa yang diperlukan +pabila suatu metode atau teknik yang digunakan buka metode rutin,metode baru-" komp kompet etens ensii pers personi onill untuk untuk mela melaku kukan kan tes tes haru haruss di$er di$eri# i#ik ikas asii sebel sebelum um pengu penguji jian an dilaku dilakukan kan .alam .alam beberap beberapaa kasus kasus dapat dapat diteri diterima ma untuk untuk berkai berkaitan tan kompet kompetens ensii untuk untuk teknik umum atau instrumen yang digunakan daripada metode tertentu 15 )ersonil harus dilatih prosedur yang diperlukan untuk penyimpanan mikroorganisme dalam #asilitas laboratorium
1/ )ersonil harus dilatih penanganan mikroorganisme yang aman
2. Lingkungan 2.1 Bangunan/Gedung
211 laboratorium Mikrobiologi dan peralatan pendukun g tertentu ,misalnya autokla# dan peralatan gelas- harus disediakan khusus dan dipisahkan dari area lain" terutama dari area produksi 212 Mikrobiologi laboratorium harus diran%ang agar sesuai dengan *egiatan yang akan dilakukan di dalamnya arus ada ruang yang %ukup untuk semua kegiatan untuk menghindari men%ampur" kontaminasi dan kontaminasi silang arus ada ruang yang %o%ok %ukup untuk sampel" organisme a%uan" media ,jika perlu" dengan pendinginan-" pengujian dan %atatan .ikarenakan si#at dari beberapa bahan ,misalnya" media steril terhadap organisme a%uan atau budaya diinkubasi-" lokasi penyimpanan terpisah mungkin diperlukan 21' Laboratorium harus tepat diran%ang dan harus mempertimbangkan kesesuaian bahanbahan konstruksi untuk memungkinkan pembersihan yang sesuai" desin#eksi dan meminimalkan risiko kontaminasi 21( arus ada pasokan udara terpisah ke laboratorium dan area produksi nit penanganan udara terpisah dan ketentuan lainnya" termasuk kontrol suhu dan kelembaban di mana diperlukan" harus di tempat untuk laboratorium mikrobiologi dara disuplai ke laboratorium harus berkualitas yang tepat dan seharusnya tidak menjadi sumber kontaminasi 215 +kses ke laboratorium mikrobiologi harus dibatasi hanya ke petugas yang ber!enang )ersonil harus dibuat mengetahui3 +kses yang sesuai dan prosedur memasuki dan keluar lab4 ujuan penggunaan daerah tertentu4 )embatasan yang diberlakukan area kerja dalam bidangbidang tertentu4 +lasan untuk menerapkan pembatasan tersebut" dan ingkat isolasi yang layak 21/ kegiatan laboratorium" seperti persiapan sampel" media dan persiapan peralatan dan
penghitungan mikroorganisme" harus dipisahkan oleh ruang atau setidaknya jeda !aktu" sehingga dapat meminimalkan risiko kontaminasi silang" hasil positi# palsu dan hasil negati# palsu .imana daerah non dedi%ated digunakan" prinsipprinsip manajemen risiko harus diterapkan )engujian sterilitas harus selalu dilakukan di tempat khusus 217 )ertimbangan harus diberikan untuk desain sesuai diklasi#ikasikan daerah untuk operasi yang akan dilakukan dalam laboratorium mikrobiologi klasi#ikasi harus didasarkan pada kekritisan produk dan operasi yang dilaksanakan di daerah )engujian sterilitas harus dilakukan di ba!ah kelas yang sama seperti yang digunakan untuk operasi manu#aktur steril & aseptik 216 Se%ara umum" peralatan laboratorium seharusnya tidak rutin dipindahkan antara daerah kelas kebersihan yang berbeda" untuk menghindari kontaminasi silang tidak disengaja )eralatan laboratorium yang digunakan di laboratorium mikrobiologi tidak boleh digunakan di luar !ilayah mikrobiologi" ke%uali ada tindakan pen%egahan khusus di tempat untuk men%egah kontaminasi silang 2.2 Pemantauan lingkungan di laboratorium.
221 +pabila diperlukan dan sesuai ,misalnya di daerah untuk pengujian sterilitas program pemantauan lingkungan harus di tempat yang meliputi" misalnya" menggunakan pemantauan udara akti#" settling udara atau pelat kontak" suhu dan perbedaan tekanan )emberitahuan serta tindakan batasan harus dide#inisikan ren hasil pemantauan lingkungan harus dilaksanakan 2.3 Pembersihan, disinfeksi dan kebersihan.
2'1 arus ada dokumentasi pembersihan dan )rogram desin#eksi asil pemantauan lingkungan harus diperhatikan 2'2 arus ada prosedur untuk menangani tumpahan 2'' arus tersedia #asititas %i%i tanagn dan desin#eksi untuk tangan yang memadai 2.4 Fasilitas Ui sterilitas
2(1 asilitas ji sterilitas memiliki persyaratan lingkungan yang spesi#ik untuk memastikan integritas tes yang dilakukan 8O good manu#a%turing pra%ti%es ,9M)-
untuk produk #armasi steril mengharuskan pengujian sterilitas harus dilakukan dan menentukan persyaratan untuk pengujian sterilitas :agian ini menjelaskan persyaratan %leanroom untuk #asilitas uji sterilitas 2(2 pengujian sterilitas harus dilakukan dalam kondisi aseptik" yang harus setara dengan standar kualitas udara yang dibutuhkan untuk pembuatan aseptik produk #armasi empat" layanan dan peralatan harus tunduk pada proses kuali#ikasi yang sesuai 2(' pengujian sterilitas harus dilakukan dalam *elas + dengan aliran udara satu arah pada ;ona proteksi ataumenggunakan
lemari biosa#ety ,jika diperlukan- yang
ditempatkan dalam ruang bersih dengan latar belakang kelas : +tau pengujian dapat dilakukan dalam ruang isolasi )era!atan harus dilakukan sesuai desain tata letak #asilitas dan pola aliran udara ruang" untuk memastikan bah!a pola aliran udara searah tidak terganggu 2(( klasi#ikasi %leanroom dan peralatan pengendalian udara untuk #asilitas uji sterilitas harus dikaji ulang setidaknya setahun sekali oleh orang yang kompeten atau kontraktor Lingkungan harus sesuai dengan batas kelayakan&bakumutu dengan melakukan $eri#ikasi <)+ #ilter dan pola aliran udara ruang rekuensi pemantauan dapat ditentukan berdasarkan manajemen risiko mutu& =uality risk management ,>?M- Lokasi )emetaan untuk titik sampel untuk pemantauan rutin harus didokumentasikan" serta lamanya paparan" dan #rekuensi semua jenis pemantauan lingkungan mikrobiologi harus ditentukan dalam prosedur tertulis 2(5 dara yang disuplai ke ;ona kelas + dan : harus melalui terminal <)+ #ilter 2(/ alarm untuk aliran udara yang tidak sesuai juga perbedaan tekanan dan instrumen tertentu harus disediakan ,9M)3 )emanasan" $entilasi dan sistem )enyejuk untuk bentuk sediaan #armasi yang tidak steril ,6-" dan 9M) untuk produk #armasi steril ,6- 2(7 )emba%aan tekanan ?uangan harus diamati dan di%atat dari alat pengukur yang dipasang dari luar ke%uali sistem pemantauan berkelanjutan ter$alidasi telah diinstal Minimal" pemba%aan harus diambil sebelum masuknya operator untuk melakukan pengujian )engukur tekanan harus diberi label untuk menunjukkan area yang diperikasa dan dengan spesi#ikasi dapat diterima 2(6 Masuk ke ruangan yang bersih ,%leanroom- harus melalui sistem airlo%ks dan ruang 9anti di mana operator di!ajibkan untuk mengenakan pakaian yang sesuai untuk
area bersih ,%leanroom- ?uang ganti diperbolehkan seperti kondisi kelas yang sama dengan ruang pelayanan ,ser$es room- ?uang ganti harus memiliki ukuran yang memadai untuk kemudahan saat mengganti pakaian arus ada pembatas yang jelas dari ;ona yang berbeda 2(@ pemantauan mikrobiologi lingkungan harus men%erminkan #asilitas yang digunakan ,ruang atau isolator- dan termasuk kombinasi metode pengambilan sampel udara dan permukaan yang sesuai dengan #asilitas" seperti3
3. !alidasi metode ui
'1 Metode uji standar tetap harus di$alidasi Selain itu" metode tes khusus yang digunakan oleh laboratorium untuk pengujian produk tertentu harus terbukti %o%ok untuk digunakan dalam memulihkan&re%o$ery bakteri" jamur dan kapang yang terdapat pada produk tertentu tersebut Laboratorium harus menun jukkan bah!a unjuk kerja metode uji standar dapat dipenuhi oleh laboratorium sebelum menggunakan metode tersebut untuk pengujian rutin ,metode ter$eri#ikasi- dan juga metode tes ,khusus untuk produk tertenutelah memperlihatkan hasil uji yang sama dengan uji pada positi# dan negati# kontrol '2 Metode pengujian tidak berdasarkan metode standar atau re#erensi lain yang diakui harus di$alidasi sebelum digunakan Balidasi harus terdiri" dimana tepat" menentukan akurasi" presisi" spesi#isitas" batas deteksi" batas kuantitasi" linieritas dan ketahanan )otensi dampak penghambatan dari sampel harus diperhitungkan ketika menguji berbagai jenis sampel asil harus die$aluasi dengan metode statistik yang sesuai" misalnya seperti yang dijelaskan dalam #armakope nasional" regional maupun internasional
4. Peralatan
Setiap item peralatan" instrumen atau perangkat yang digunakan untuk pengujian" $eri#ikasi dan kalibrasi harus diidenti#ikasi se%ara unik Sebagai bagian dari sistem mutu" laboratorium harus memiliki program terdokumentasi untuk kuali#ikasi" kalibrasi" $eri#ikasi kinerja" pemeliharaan dan sistem untuk memantau penggunaan peralatannya (1 )emeliharaan peralatan (11 )emeliharaan peralatan yang sangat penting harus dilakukan se%ara berkala sesuai dengan prosedur yang terdokumentasi Catatan rin%i harus disimpan (2 *alibrasi" $eri#ikasi dan pemantauan penggunaan (21 anggal kalibrasi dan ser$is dan tanggal kalibrasi ulang harus jelas ditunjukkan pada label yang melekat pada instrumen (22 rekuensi kalibrasi dan $eri#ikasi kinerja peralatan akan ditentukan dari unjukkerja yang terdokumentasi dan akan didasarkan pada kebutuhan" jenis dan kinerja sebelumnya Inter$al antara kalibrasi dan $eri#ikasi harus lebih pendek daripada !aktu peralatan telah ditemukan untuk mengambil melayang di luar batas yang dapat diterima *inerja peralatan harus sesuai dengan kriteria penerimaan yang telah ditetapkan (2' perangkat pengukuran Suhu (2'1 +pabila suhu memiliki e#ek langsung pada hasil an alisis atau sangat penting untuk kinerja yang benar dari peralatan" alat ukur suhu harus kualitas yang tepat untuk men%apai akurasi yang diperlukan ,misalnya termometer %air di ka%a" termokopel dan platinum termometer resistensi ,)?- yang digunakan dalam inkubator dan otokla#- (2'2 *alibrasi perangkat harus sesuai dengan standar nasional atau internasional untuk suhu (2( Inkubator" !ater bath dan o$en Stabilitas suhu" keseragaman distribusi suhu dan !aktu yang dibutuhkan untuk men%apai kondisi kesetimbangan dalam inkubator" !ater bath" dan suhu bagian dalam o$en harus dikontrol )erlakuan khusus sehubungan dengan penggunaan khas ,misalnya" posisi" ruang antara" dan
tinggi"
tumpukan
%a!an
)etri- ditetapkan
dari
a!al dan
didokumentasikan kesetabilan karakteristik a!al peralatan di%atat selama $alidasi dan harus diperiksa juga di%atat setelah setiap kali terjadi perbaikan yang signi#ikan atau modi#ikasi Suhu operasi jenis peralatan harus dipantau dan %atatan disimpan )enggunaan peralatan harus dipertimbangkan ketika menentukan apakah kontrol
temperatur diperlukan ('51 +utokla# harus mampu memenuhistandar !aktu dan temperatur sterilisasi" pemantauan tekanan saja tidak dapat diterima Sensor yang digunakan untuk mengontrol atau memantau siklus operasi memerlukan kalibrasi dan kinerja timer harus di$eri#ikasi ('52 $alidasi a!al harus men%akup studi kinerja ,sur$ei distribusi temperatur ruang autokla#- untuk setiap siklus operasi dan setiap kon#igurasi beban yang digunakan dalam praktek )roses ini harus diulang setelah setiap ada perbaikan yang signi#ikan atau modi#ikasi ,misalnya penggantian penyetelan&setting thermoregulator atau programmer" mengubah beban muat atau pengaturan siklus operasi Balidasi dan re$alidasi harus mempertimbangkan kesesuaian datang dan turun kali serta !aktu pada suhu sterilisasi ('5' Instruksi kerja yang jelas harus ditetapkan berdasarkan pro#il pemanasan yang ditentukan untuk keperluan khusus selama $alidasi & re$alidasi *riteria penerimaan & penolakan harus dibuat dan %atatan operasi auto%la$e" termasuk suhu dan !aktu" disimpan untuk setiap siklus ('5( )emantauan bisa diperoleh misalnya dengan salah satu %ara berikut3 Menggunakan termokopel dan perekam untuk menghasilkan gra#ik atau %etakan4 )engamatan langsung dan pen%atatan suhu maksimum di%apai dan !aktu pada suhu tersebut Selain se%ara langsung memonitor suhu auto%la$e" e#ekti$itas operasi selama setiap siklus dapat diperiksa dengan menggunakan indikator kimia atau biologis untuk tujuan sterilisasi atau dekontaminasi +uto%la$e tape atau Indikator harus digunakan hanya untuk menunjukkan bah!a muatan telah diproses" tidak untuk menunjukkan penyelesaian siklus diterima Laboratorium harus memiliki auto%la$e terpisah untuk dekontaminasi&destruksi Damun" dalam kasus luar biasa satu auto%la$e dapat diterima asalkan tindakan pen%egahan dekontaminasi terpisah dan saat sterilisasi" dan program pembersihan didokumentasikan meliputi lingkungan internal dan eksternal dari autokla# ('/ Dera%a dan anak timbang harus dikalibrasi se%ara berkala dan tertelusur ,sesuai dengan tujuan penggunaannya- menggunakan anak timbang sesuai standar yang tertelusur ke anak timbang standar berserti#ikat ('71 Laboratorium Mikrobiologi harus melakukan $eri#ikasi a!al peralatan $olumetrik
,dispenser otomatis" dispenser & pengen%er" pipet tangan mekanik dan pipet sekali pakai- Melakukan pemeriksaan rutin untuk memastikan bah!a peralatan ini dalam kondisi sesuai spesi#ikasi yang dibutuhkan Beri#ikasi a!al seharusnya tidak perlu untuk alat gelas yang telah diserti#ikasi untuk toleransi tertentu misal gelas piala,ba%ker glass- )eralatan harus diperiksa adalah peralatan yang menggunakan pengaturan $olume" untuk memastikan $olume yang dipindahkan&dipiipet telah sesuai ('72 ntuk peralatan $olumetrik Esekali pakaiF" laboratorium harus mendapatkan pasokan dari supplier dengan sistem mutu yang diakui dan rele$an Setelah melakuakn $alidasi a!al terhadap kesesuaian peralatan" dianjurkan untuk melakukan pemeriksaan a%ak untuk memastikan akurasi Jika supplier tidak memiliki sistem mutu yang diakui" laboratorium harus memeriksa setiap bat%h peralatan untuk kesesuaian ('6 )eralatan lainnya" Condu%ti$ity meter" oAygen meter" p meters dan instrumen serupa lainnya harus di$eri#ikasi se%ara berkala atau sebelum setiap kali digunakan :u##er digunakan untuk keperluan $eri#ikasi harus disimpan dalam kondisi yang sesuai dan harus ditandai dengan tanggal kadalu!arsa Jika kelembaban berpengaruh terhadap hasil tes" hygrometers harus dikalibrasi" kalibrasi yang tertelusur ke standar nasional atau internasional imer" termasuk timer auto%la$e" harus di$eri#ikasi menggunakan dikalibrasi !aktu atau sinyal !aktu nasional *etika sentri#ugal digunakan dalam prosedur pengujian" penilaian terhadap rotasi per menit ,?)M- harus dibuat jika hasil sentri#ge berpengaruh terhadap hasil pengujian maka %entri#uge harus dikalibrasi
". #eagen dan media kultur
Laboratorium harus memastikan bah!a kualitas reagen dan media yang digunakan sesuai untuk pengujian yang bersangkutan ".1 #eagen
511 Laboratorium harus memeriksa kesesuaian setiap bat%h reagen penting untuk tes" sejak a!al dan selama umur simpan ".2 $edia
521 Media dapat dibuat sendiri atau dibeli baik sebagian atau sepenuhnya siap Bendor media dibeli harus disetujui dan berkualitas Bendor yang berkualitas dapat mengesahkan beberapa parameter kualitas yang ter%antum selanjutnya )romosi )ertumbuhan dan" jika sesuai" tes kinerja lain yang sesuai ,lihat bagian 522- harus dilakukan pada semua media pada setiap bat%h dan pada setiap pengiriman .imana pemasok media sepenuhnya siap memenuhi syarat dan memberikan serti#ikasi promosi pertumbuhan per bat%h media dan kondisi transportasi telah memenuhi syarat" pengguna dapat mengandalkan serti#ikat produsen dengan $eri#ikasi periodik nya atau hasil nya 522 *inerja media kultur yang sesuai" pengen%er dan %airan suspensi lainnya harus diperiksa" bila rele$an" berkaitan dengan3 )emulihan&re%o$ery atau pemeliharaan kelangsungan hidup organisme sasaran )emulihan 50200G ,setelah inokulasi tidak lebih dari 100 unit pembentuk koloni ,C atau %#u- harus dibuktikan4 )enghambatan atau penekanan organisme nontarget4 :iokimia ,di#erensial dan diagnostik- si#at" dan Si#at lain yang sesuai ,misalnya p" $olume dan sterilitas- )rosedur kuantitati# untuk e$aluasi pemulihan atau kelangsungan hidup lebih diutamakan 52' :ahan baku ,kedua #ormulasi kering komersial dan konstituen se%ara indi$idu- dan media harus disimpan dalam kondisi yang sesuai yang direkomendasikan oleh produsen" misalnya sejuk" kering dan gelap Semua !adah" terutama untuk media kering" harus tertutup rapat Media *ering yang menggumpal atau retak atau menunjukkan perubahan !arna tidak boleh digunakan 52( *ualitas air mikrobiologi yang tepat dan yang bebas dari bakterisida" ;at penghambat atau mengganggu" harus digunakan untuk persiapan ke%uali metode pengujian ditentukan lain 525 Media yang mengandung antimetabolites atau inhibitor harus disusun dengan menggunakan peralatan gelas khusus" sebagai akumulasi dari agen tersebut ke media lain bisa menghambat pertumbuhan dan deteksi mikroorganisme yang ada dalam sampel yang diuji Jika peralatan gelas khusus tidak digunakan" prosedur %u%i peralatan gelas harus di$alidasi
52/ Menuangkan media setelah sterilisasi harus dilakukan di ba!ah aliran udara searah ,.+- untuk meminimalkan potensi kontaminasi lingkungan Ini harus dianggap sebagai persyaratan minimum untuk media yang akan digunakan dalam kaitannya dengan pengujian produk steril Ini termasuk pendinginan media" tutup !adah perlu dilepaskan selama pendinginan untuk men%egah penumpukan kondensasi 527 Media tuang yang diradiasikan mungkin memerlukan penambahan antioksidan dan s%a$enger radikal bebas untuk memberikan perlindungan dari e#ek dari proses iradiasi Media iradiasi harus di$alidasi dengan melakukan pengujian pertumbuhan promosi kuantitati# pada kedua media iradiasi dan nonradiasi 526 umur simpan media disiapkan dalam kondisi penyimpanan yang ditentukan harus ditetapkan dan di$eri#ikasi 52@ :at%h media harus diidenti#ikasi dan kesesuaian dengan spesi#ikasi kualitas yang didokumentasikan ntuk media dibeli laboratorium pengguna harus memastikan bah!a ia akan diberitahu oleh produsen setiap perubahan spesi#ikasi kualitas 5210 Media harus disiapkan sesuai dengan instruksi pabrik" dengan spesi#ikasi seperti !aktu dan suhu untuk sterilisasi 5211 perangkat Mi%ro!a$e tidak boleh digunakan untuk pen%airan media karena distribusi yang tidak konsisten dari proses pemanasan ".3 Pelabelan
5'1 Laboratorium harus memastikan bah!a semua reagen ,termasuk larutan stok-" media" dan %airan pengen%er pensuspensi lainnya %ukup diberi label untuk menunjukkan" sesuai" identitas" konsentrasi" kondisi penyimpanan" tanggal persiapan"
tanggal
kadalu!arsa di$alidasi dan & atau periode penyimpanan yang dianjurkan )enanggung ja!ab untuk pembuatan harus diidenti#ikasi dari %atatan 5( ?esusitasi Organisme 5(1
?esusitasi Organisme
diperlukan
di
mana
metodologi pengujian
dapat
menimbulkan sel %edera Misalnya" paparan3 <#ek merugikan pengolahan" misalnya panas4 +gen antimikroba4 )enga!et4 ekanan osmotik
%. Bahan a&uan dan kultur a&uan %.1 'tandar internasional
/11 :ahan a%uan dan bahan a%uan berserti#ikat umumnya digunakan di laboratorium mikrobiologi untuk memenuhi syarat" $eri#ikasi dan kalibrasi peralatan :ila mungkin bahanbahan re#erensi harus digunakan dalam matriks yang sesuai %.2 (ultur )&uan
/21 *ultur +%uan yang diperlukan untuk menetapkan kinerja yang bisa diterima media ,termasuk alat tes-" untuk mem$alidasi metode" untuk mem$eri#ikasi kesesuaian metode pengujian dan untuk menilai atau menge$aluasi kinerja yang sedang berlangsung *etertelusuran diperlukan" misalnya" saat membuat per#orma media test kit dan metode $alidasi ntuk menunjukkan ketertelusuran" laboratorium harus menggunakan strain mikroorganisme a%uan yang diperoleh langsung dari koleksi nasional atau internasional yang diakui" bila ada +tau" turunan komersial yang semua si#at yang rele$an telah ditunjukkan oleh laboratorium untuk menjadi setara pada titik penggunaan dapat digunakan /22 strain +%uan dapat disubkultur sekali untuk menyediakan stok a%uan *emurnian dan pemeriksaan biokimia harus dilakukan se%ara paralel se%ara tepat .isarankan untuk menyimpan stok a%uan dalam ali=uot baik dibekukan atau lio#ilisasi kultur kerja untuk penggunaan rutin harus subkultur utama dari stok a%uan ,lihat Lampiran 5 pada penggunaan umum dari kultur a%uan- Jika stok re#erensi telah di%airkan" mereka tidak boleh dibekukan kembali dan digunakan kembali /2' Stok *erja sebaiknya tidak disubkultur :iasanya tidak lebih dari lima generasi
,atau bagian- dari strain re#erensi asli dapat disubkultur jika ditentukan dengan metode standar atau laboratorium dapat memberikan bukti dokumen bah!a telah ada perubahan dalam setiap properti yang rele$an urunan *omersial strain a%uan hanya dapat digunakan sebagai kultur kerja
*. Pengambilan &ontoh/sam+ling
71 .imana laboratorium pengujian bertanggung ja!ab untuk sampling primer untuk mendapatkan item tes" sangat disarankan bah!a pengambilan sampel ini dilindungi oleh sistem jaminan mutu dan harus tunduk pada audit reguler 72 Setiap desin#eksi proses yang digunakan untuk memperoleh sampel ,misalnya disin#eksi titik sampel- tidak harus berkompromi tingkat mikroba dalam sampel 7' ransportasi dan penyimpanan sampel harus di ba!ah kondisi yang menjaga integritas sampel ,misalnya dingin atau beku jika perlu- )engujian sampel harus dilakukan sesegera mungkin setelah pengambilan sampel ntuk sampel di mana pertumbuhan populasi mikroba selama transportasi dan penyimpanan mungkin harus menunjukkan bah!a kondisi penyimpanan" !aktu dan suhu" tidak akan mempengaruhi keakuratan hasil pengujian *ondisi penyimpanan harus dipantau dan %atatan disimpan anggung ja!ab untuk transportasi" penyimpanan antara pengambilan sampel dan tiba di laboratorium pengujian harus didokumentasikan se%ara jelas 7( Sampling sebaiknya hanya dilakukan oleh petugas terlatih Ini harus dilakukan se%ara aseptik menggunakan peralatan steril indakan pen%egahan yang tepat harus diambil untuk memastikan bah!a integritas sampel dipertahankan melalui penggunaan !adah tertutup steril untuk pengumpulan sampel mana yang sesuai Mungkin perlu untuk memantau kondisi lingkungan" misalnya" pen%emaran udara dan suhu" di lokasi pengambilan sampel 8aktu pengambilan sampel harus di%atat" jika sesuai
. Penanganan dan identifikasi sam+el
61 Laboratorium harus memiliki prosedur yang men%akup pengiriman dan penerimaan
sampel dan identi#ikasi sampel Jika kuantitas sampel tidak memadai atau sampel dalam kondisi yang buruk karena kerusakan #isik" suhu yang salah" kemasan robek atau pelabelan kurang" laboratorium harus berkonsultasi dengan klien sebelum memutuskan apakah akan menguji atau menolak sampel 62 Laboratorium harus merekam semua in#ormasi yang rele$an" misalnya tanggal yang rele$an" dan !aktu penerimaan4 *ondisi sampel pada penerimaan dan" bila perlu suhu" dan *arakteristik pelaksanaan sampling ,termasuk tingkat sampling dan kondisi sampel- 6' Sampel menunggu pengujian harus disimpan dalam kondisi yang sesuai untuk meminimalkan perubahan apapun terhadap populasi mikroba pada sample *ondisi penyimpanan harus di$alidasi" dide#inisikan dan di%atat 6( kemasan dan label sampel dapat sangat terkontaminasi sehingga harus ditangani dan disimpan dengan hatihati untuk menghindari penyebaran kontaminasi )roses desin#eksi diterapkan pada !adah luar seharusnya tidak mempengaruhi integritas sampel )erlu di%atat bah!a alkohol tidak bersi#at spori%idal,menghan%urkan spora- 6"5 Subsampling oleh laboratorium segera sebelum pengujian mungkin diperlukan sebagai bagian dari metode pengujian Mungkin tepat bah!a itu dilakukan sesuai dengan standar nasional atau internasional" yang ada" atau dengan inhouse methods yang telah di$alidasi )rosedur Subsampling harus diran%ang untuk mengumpulkan sampel yang representati# 6/ arus ada prosedur tertulis untuk penyimpanan dan pembuangan sampel Jika integritas sampel dapat dipertahankan mungkin tepat bah!a sampel yang disimpan sampai hasil tes diperoleh" atau lebih lama jika diperlukan )orsi sampel laboratorium yang diketahui terkontaminasi harus didekontaminasi,destruksi- sebelum dibuang
-. Pembuangan limbah terkontaminasi
@1 )rosedur untuk pembuangan bahan yang terkontaminasi harus diran%ang untuk meminimalkan kemungkinan men%emari lingkungan pengujian atau bahan Ini adalah
masalah manajemen laboratorium yang baik dan harus sesuai dengan standar nasional & internasional lingkungan atau kesehatan dan peraturan keselamatan
1. aminan kualitas hasil dan kontrol kualitas kinera
101 *ontrol kualitas internal 1011 Laboratorium harus memiliki sistem penjaminan mutu internal atau kontrol kualitas ,misalnya penyimpangan penanganan" penggunaan sampel spiked" replikasi pengujian dan partisipasi dalam uji pro#isiensi" mana yang sesuai- untuk menjamin konsistensi hasil dari hari ke hari dan kesesuaian dengan kriteria yang ditetapkan
11. Prosedur +enguian
111 )engujian sebaiknya dapat dilakukan menurut prosedur yang dijelaskan dalam Standar nasional" regional dan internasional 112 prosedur pengujian alternati# dapat digunakan jika mereka sudah di$alidasi dan setara dengan metode resmi&standar
12. La+oran Penguian
121 Jika hasil enumerasi adalah negati#" hal itu harus dilaporkan sebagai Etidak terdeteksi untuk unit dide#inisikanE atau Ekurang dari batas deteksi untuk unit dide#inisikanE asilnya tidak harus diberikan sebagai Enol untuk unit dide#inisikanE ke%uali itu adalah persyaratan peraturan asil uji kualitati# harus dilaporkan sebagai Eterdeteksi & tidak terdeteksi dalam jumlah atau $olume yang ditetapkanE Mereka juga dapat dinyatakan sebagai Ekurang dari jumlah tertentu dari organisme untuk unit dide#inisikanE di mana jumlah tertentu dari organisme melebihi batas deteksi metode dan ini telah disepakati dengan klien .alam data mentah hasilnya tidak harus diberikan sebagai nol untuk unit dide#inisikan ke%uali itu adalah persyaratan peraturan Sebuah nilai yang dilaporkan E0E dapat digunakan untuk entri data dan perhitungan atau analisis ke%enderungan dalam
database elektronik 122 +pabila estimasi ketidakpastian hasil tes dinyatakan pada laporan pengujian" batasan ,terutama jika estimasi tidak termasuk komponen disumbangkan oleh distribusi mikroorganisme dalam sampel- harus dibuat jelas kepada klien
