DROGAS CON HETEROSIDOS FLAVONOIDES Condor-Ambulay, Pablo 1; León- Pomahuallcca, Elena 1; Saavedra-Mendoza, Jean 1; Tito-Pillaca, Nancy1 Gorriti-Gutiérrez, Arilmí2; Córdova-Rivera, Augusta 2; Retuerto-Figueroa, Mónica 2, Sixto González Elera 2, Soto Huaringa, Karina 2 1
Alumnos de la Facultad Facultad de Farmacia Farmacia y Bioquímica, Bioquímica, UNMSM UNMSM Docentes de la cátedra cátedra de Farmacognosia Farmacognosia y Medicina Tradicional Tradicional
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RESUMEN El presente estudio tuvo como objetivo la determinación de los heterósidos flavonoides (hesperidina, rutina, quercetina y antocianina) en distintas especies vegetales, tales como: naranja, ruda, cebolla y maíz morado. Se trabajó con muestras de las drogas de las especies vegetales mencionadas, otorgadas por la cátedra de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos (UNMSM) realizando así un análisis cualitativo específico para la naranja (reacción con H2SO4, HCl cc, HNO3 y NaOH 30%), determinando la presencia de hesperidina; para la ruda (reacción de Wilson, Shinoda y FeCl3) reconociendo el heterósido flavonoide rutina; para la cebolla (reacción de Pb(CH 3COO)2 y FeCl3) reconociendo reconociendo la presencia de quercetina y la de maíz morado (reacción con H 2SO4cc y NaOH 30%) determinando la presencia de antocianinas. En el análisis cromatógrafo, se obtuvieron los Rf para la cebolla (quercetina): 0.48 (M.P) y 0.96 (St.) Palabras clave: Heterósidos flavonoides, hesperidina, rutina, quercetina, antocianina, análisis cromatógrafo. ABSTRACT The present study aimed to determine the flavonoid heterosides (hesperidin, rutin, quercetin and anthocyanin) in different plant species, such as orange, rue, onion and purple corn. It was worked with samples of the drugs of the mentioned plant species, granted by the chair of Pharmacognosy of the Faculty of Pharmacy and Biochemistry of the National University of San Marcos (UNMSM) carrying out a specific qualitative analysis for the orange (reaction with H2SO4, HCl cc, HNO3 and 30% NaOH), determining the presence of hesperidin; For rue (reaction of Wilson, Wil son, Shinoda and FeCl 3) the routine was recognized; For the onion (reaction of Pb (CH 3COO)2 and FeCl 3) recognizing the presence of quercetin and that of purple corn (reaction with H 2SO4cc and NaOH 30%) determining determining the presence presence of anthocyanins. anthocyanins. In the chromatographic chromatographic analysis, Rf were obtained for onion (quercetin): 0.48 (M.P) and 0.96 (St.) Key words: Flavonoid heterosides, hesperidin, rutin, quercetin, anthocyanin, chromatographic chromatographic analysis.
I. INTRODUCCION Los flavonoides son pigmentos naturales presentes en los vegetales y que protegen al organismo del daño producido por agentes oxidantes, como los rayos ultravioletas, la polución ambiental, sustancias químicas presentes en los alimentos, etc. El organismo humano no puede producir estas sustancias químicas protectoras, por lo que deben obtenerse mediante la alimentación o en forma de suplementos. Están ampliamente distribuidos en plantas, frutas, verduras y en diversas bebidas y representan componentes sustanciales de la parte no energética de la dieta humana 1 Los flavonoides contienen en su estructura química un número variable de grupos hidroxilo fenólicos y excelentes propiedades de quelación del hierro y otros metales de transición, lo que les confiere una gran capacidad antioxidante. Tres características estructurales son importantes para su función: a) La presencia en el anillo B de la estructura catecol u O-dihidroxi; b) La presencia de un doble enlace en posición 2,3; c). La presencia de grupos hidroxilo en posición 3 y 514. La quercetina presenta las tres características mientras que la catequina solo presenta la segunda y la diosmetina la primera 2. II. OBJETIVOS -Reconocer cualitativamente flavonoides en el maíz morado. -Identificar cualitativamente flavonoides “cebolla”, Allium cepa L.
- Evaluar la presencia de flavonoides en “ruda”, Ruta graveolens.
III. MATERIAES Y MÉTODOS A) MATERIALES -Naranja -Ruda
-Cebolla -Maíz morado -Piseta -Beaker de 500 ml -Bagueta -Espátula -Tubos de ensayos -Pipeta Pasteur -Agua destilada -Baño maría -Reactivos B) MÉTODOS B.1 IDENTIFICACIÓN DE HETERÓSIDOS FLAVONOIDES Droga Naranja
Ruda
Cebolla
Maíz morado
Reacción H2SO4(C) HClcc HNO3
Reacción positiva Coloración naranja. Precipitado blanco. NaOH 30% Coloración pardo rojiza. Coloración amarillo naranja. Wilson Coloración A+B amarilla Shinoda Coloración rosada FeCl3 Coloración verde Pb(CH3OO Precipitado )2 amarillo FeCl3 Coloración verde en frio, rojo oscuro en caliente. H2SO4(C) Coloración roja. NaOH 30% Coloración verde.
B.2 ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO Sistema de solventes: Acetato de etilo: metanol: agua (100: 13.5:10). Revelador: Solución etanólica de cloruro férrico. Soporte: Sílica gel. Estándar: Solución de Quercetinósido. Muestra: Extracto de cebolla.
IV. RESULTADOS 4.1 ANALISIS CUALITATIVO
B) QUERCETINA Reacción
A) RUTINA Reacción Observación Resultado Coloración Positivo Wilson amarillo Coloración Positivo Shinoda rosada Coloración Positivo FeCl3 verde Tabla N°1: Reacción de coloración del
Observación
Resultado
FeCl3
Coloración Positivo verde Coloración Positivo Pb(CH3C amarilla OOH)2 Tabla N°2: Reacción de coloración del extracto de “cebolla
”
extracto de “ruda”
Fig.3. Reacciones decoloración:(D) extracto + FeCl3. (E) extracto+ Pb (CH3COOH)2
C) ANTOCIANINA Fig.1. Reacciones de coloración: extracto + la reacción de Wilson
Reacción H2SO4 cc
Observación Resultado Coloración Positivo roja Coloración Positivo NaOH verde 30% Tabla N°3: Reacción de coloración del extracto de “maíz morado”
Fig.2. Reacciones decoloración:(B) extracto + la reacción de Shinoda. (C) extracto + FeCl3 Fig, 4 reacciones decoloración:(F) extracto + H2SO4 .(G) extracto + NaOH 30%
4.2. ANALISIS CROMATOGRAFICO
en contacto con ácido clorhídrico y con virutas de magnesio metálico se genera hidrógeno, este último reduce al flavonoide (rutina), lo cual se reconoce por la coloración rosada. En la reacción de coloración con FeCl 3, la muestra de extracto de ruda cambio a una coloración verde. Esto se debe a que la naturaleza polifenólica de los flavonoides, específicamente compuestos con ortodifenoles,lleva a la formación de coloraciones variadas en presencia de FeCl3, que en este caso por presentar rutina, produce una coloración verde. 3
Fig.5. (H) recorrido del estándar de quercetina4.8 cm. (I).Recorrido de la muestra de cebolla: 2.4cm
=
2.4 5
= 0.48
=
4.8 5
= 0.96
Las antocianinas son más estables en un medio ácido que en un medio neutro o alcalino. En medio ácido a pH 1, la forma predominante es la del ión flavilio, el cual da el color rojo. Cuando esta es sometida a pH básico o alcalino, el ión flavilio es susceptible al ataque nucleofílico por parte del agua, produciéndose la pseudo base carbinol, esto es a pH 4.5. A un pH 7 se produce la base quinoidal, el cual da una coloración verde azulado debido a cambios conformacionales y a la estabilización de los electrones de valencia del catión flavilio y resonancia del anillo aromático B3 por lo cual explica que nuestra muestra problema de antocianina obtenida de la coronta de maíz cambió a color rojo al agregar ácido sulfúrico concentrado; y luego de agregar una base como el NaOH 30% cambió a color verdeazulado oscuro.4
V. DISCUSION La reacción del extracto de ruda con el reactivo de Wilson, presentó una coloración amarilla siendo esto positivo cuando el flavonoide posee un grupo carbonilo y un grupo oxhidrilo posición 5, dando complejos amarillos como tal es el caso de la rutina, En el caso de la reacción de Shinoda, el extracto de ruda
VI. CONCLUSIONES -Se reconoció la presencia de Antocianinas en el Maiz morado al observar las reacciones de coloracion cuando fue llevado la muestra en medio acido (color rojo) y alcalino (color verde azulado)
-Se identificó cualitativamente los flavonoides, de tipo quercetina en la cascara de cebolla por medio de la reacción de acetato de plomo y cloruro férrico. -Se evaluó la presencia de heterósidos flavonoides de tipo quercetín 3rutinóside (flavonol) en Ruta graveolens mediante análisis cualitativo. VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Martínez F., González G, Culebras J. Tuñón J. Los flavonoides: propiedades y acciones antioxidantes Nutr. Hosp. (2002) XVII (6) 271-278. 2. Rengifo P. Cuantificación de flavonoides en el extracto etanólico de propóleos. Revista Pharmaciencia. Perú - 2013 1(2). 3. Kuklinski C. Farmacognosia, Estudio delas drogas y sustancias medicamentosas origen natural. Barcelona: Ediciones Omega S.A; 2000. Pág. 106-108 4. Cuevas E., Antezana A. y Winterhalter P. Análisis y caracterización de antocianinas en diferentes variedades de maíz (Zea mays) Boliviano. Bolivia: Universidad Mayor San Simón Cochabamba, 2008. Pág. 83 -84
