Informe Drogas Con Taninos

IDENTIFICACIÓN DE TANINOS EN HOJAS SECAS DE TÉ NEGRO¨ Y HARINA DE Caesalpinia Camellia sinensis ¨ TÉ TARA¨ spinosa ¨ TARA Arroyo-Hernandez N.1; Bustamante-Peñaloza, L.E.1; Huaroc-Canchari, Y.1 Dra. Gorriti Gutiérrez, Arilmí2; Mg. Herrera Calderón, Calderón, Oscar; Mg. Mg. Retuerto Figueroa, Mónica2, Mg. Sixto González Elera2. 1 Alumnos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, UNMSM 2 Docentes de la cátedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional

RESUMEN Se identificó compuestos fenólicos en hojas secas de Camellia sinensis ¨ té té negro¨ negro¨ y harina de Caesalpinia spinosa ¨ tara¨ tara¨ por por medio de análisis cualitativos con reacciones de coloración y cromatografía en capa fina y análisis cuantitativos mediante yodometría. yodometría. Las muestras vegetales vegetales fueron proporcionadas proporcionadas por la cátedra de Farmacognosia Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica-UNMSM. Objetivos: Identificar taninos cuantitativa y cualitativamente en hojas secas de Camellia sinensis ¨ té té negro¨ negro¨ y harina de Caesalpinia spinosa ¨ tara¨ tara¨ y conocer la importancia de los taninos y las especies que lo contienen. Metodología: Se utilizó hojas secas de Camellia sinensis ¨ té té negro¨ negro¨ para ensayos cualitativos con tricloruro férrico al 10%, dicromato de potasio al 5%, acetato de plomo, agua de cal, cianuro de potasio, hipoclorito de sodio, ferrocianuro de potasio, gelatina, permanganato de potasio y quinina. Y harina de Caesalpinia spinosa ¨ tara¨ tara¨ para cromatografía en capa fina y el ensayo cuantitativo de yodometría. Resultados: Se obtuvieron reacciones positivas en todas las reacciones menos en las de cianuro de potasio e hipoclorito de sodio en la identificación de taninos en Camellia sinensis ¨ té té negro¨. negro¨. El porcentaje de taninos en Caesalpinia spinosa ¨ tara¨ tara¨ fue de 31,4 %.

Palabras clave: Taninos, yodometría, té negro, tara. ABSTRACT Phenolic compounds were identified in dry leaves of Camellia sinensis ¨té negro¨ and Caesalpinia spinosa ¨tara¨ flour by means of qualitative analysis with coloration reactions and thin layer chromatography and quantitative analysis by iodometry. The plant samples were provided by the Chair of Pharmacognosy of the Faculty of Pharmacy and Biochemistry-UNMSM. Objective: To identify tannins quantitatively and qualitatively in dry leaves of Camellia sinensis ¨té negro¨ and Caesalpinia spinosa ¨tara¨ flour and to know the importance of tannins and the species that contain it. Methodology: Dry leaves of Camellia sinensis ¨té negro¨ were used for qualitative tests with 10% ferric trichloride t richloride,, 5% potassium dichromate, lead acetate, lime water, potassium cyanide, sodium hypochlorite, potassium ferrocyanide, gelatin, potassium permanganate, quinine and thin layer chromatography. And flour of Caesalpinia spinosa ¨tara¨ for the quantitative assay of iodometry. Results: Positive reactions were obtained in all reactions except those of potassium cyanide and sodium hypochlorite in the identification of tannins in Camellia sinensis ¨té negro¨. The percentage of tannins in Caesalpinia spinosa ¨tara¨ was 31.4%.

Key words: Tannins, iodometry, black tea, tara.

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INTRODUCCIÓN: Los taninos son sustancias fenólicas naturales de origen vegetal que tienen la propiedad de curtir la piel transformándola en cuero y de dar con las sales de fierro coloraciones azul oscuras, negras o verdes Los taninos se caracterizan por ser sustancias amorfas, de sabor astringente, son solubles en agua, alcohol y acetona, insolubles en éter y éter de petróleo. Las soluciones acuosas de los taninos son de carácter coloidal y tienen reacción acida por la cual se les llama también ácidos tánicos. Producen coloraciones (tintas) con las sales férricas que varían del negro azulado al verde1. Las drogas que contienen taninos son muy empleadas en la industria para el curtido de pieles y, por lo tanto, su valor está en relación con la cantidad de taninos que contienen. Existen varios métodos para valorar taninos, solo nos ocuparemos de uno de ellos, que a pesar de su sencillez y de su rapidez, dan resultados satisfactorios. Las cortezas, hojas, frutos o las diferentes materias solidas en las cuales se propone la determinación del tanino, deben ser reducidas a polvo lo más fino posible. Para esto, después de haberlas dividido groseramente, se las pulveriza en un mortero 2.

MATERIALES Y MÉTODOS3 Materiales y Equipos: Equipos e instrumentos: 

Materiales de vidrio  estufa  Soporte silica gel Reactivos:              

FeCl3 10% K2CrO7 5% Pb(CH2COO)2 Agua de cal KCN 5% NaClO K4[Fe(CN)6] + NH4OH Gelatina KMnO4 Alcaloide (Quinina) Sistema solvente acetato de etilo etilo etanol etanol (1:3) Solución etanólica de cloruro férrico Yodo 2.5% NaHCO3

Material orgánico: 

Hojas secas de té negro (Camellia sinensis) sinensis ) spinosa )  Harina de Tara (Caesalpinia spinosa) Metodología:





1.1.

Extracción: Se pesó 3 g de hojas secas de té negro (Camellia sinensis) sinensis ) y se agregó 20 ml de agua destilada (1:4 p/v) y se calentó a baño maría a 65 oC por 30 min y por último se filtró f iltró (Fig.1).

(Fig.1) Filtrado de hojas secas de té negro (Camellia (Camellia sinensis) sinensis )

1.2.

Reacción de diferenciación: diferenciac ión: A 0.5 ml de muestra problema se agregó gotas de FeCl3 10% (Fig.2) y se observó si la solución se tornaba azul (taninos hidrolizables) hidrolizables) o verde (taninos condensados).

(Fig.2) Reacción de diferenciación. Se observo un pp azul oscuro indicativo para taninos hidrolizables.

1.3.

Reacciones de identificación: identificación:

a. Reacción con K2CrO7 5%: A 5ml de MP se agregó gotas de K 2CrO7 5% (Fig.3). b. Reacción con Pb(CH2COO)2: A 5ml de MP se agregó gotas de Pb(CH2COO)2 (Fig.4).





f.

Reacción con K4[Fe(CN)6] + NH4OH: A 5ml de MP se agregó gotas de K4[Fe(CN)6] más gotas de NH 4OH (Fig.8). g. Reacción con con gelatina: A 5ml de MP MP se agregó gotas de gelatina gelatina (Fig.9). h. Reacción con KMnO4: A 5ml de MP se agregó gotas de KMnO 4 (Fig.10). i. Reacción con Alcaloide (Quinina): A 5ml de MP se agregó gotas de quinina (Fig.11).

(Fig.3) Reacción de K2CrO7 5% y MP.

(Fig.4) Reacción de Pb(CH2COO)2 y MP.

(Fig.5) Reacción de agua de cal y MP.

(Fig.6) Reacción de KCN 5% y MP.

(Fig.7) Reacción de NaClO y MP.

(Fig.8) Reacción de K4[Fe(CN)6] + NH4OH y MP

(Fig.9) Reacción de gelatina y MP.

(Fig.10) Reacción de KMnO4 y MP

(Fig.11) Reacción con Alcaloide (Quinina) y MP.





1.4.

Análisis cromatográfico Se realizó la cromatografía capa fina utilizando el acetato de etilo y etanol (1:3) como sistema de solvente, soporte de sílica gel G F-254 y solución etanólica de cloruro férrico como revelador. Luego se observó la placa cromatográfica y se halló el RF del componente de la harina de Tara (Fig.12).

(Fig.12) Resultado de CCF de muestra disuelta en acetato de etilo y etanol (1:3) revelado con cloruro férrico.

2. Análisis cualitativo cualitati vo Se empleó el método volumétrico de la I odometría. Por ello se siguió los siguientes pasos. Y tomando como punto final de la valoración el viraje a violeta intenso en el punto de equivalencia del papel almidonado al sumergirlo en la solución titulada, 





Preparación Preparació n de de patrón: Se tituló con yodo 2.5% una solución de 10ml de ácido tánico con 2ml de NaHCO 3 con c.s.p. 20ml con agua destilada. Y se halló un gasto ¨A¨. Preparación Preparació n del blanco: Se tituló con yodo 2.5% una solución de 2ml de NaHCO3 con c.s.p. 20ml con agua destilada. Y se halló un gasto ¨B¨ Preparación Preparaci ón de la muestra: Se tituló con yodo 2.5% una solución de 10ml de muestra problema con 2ml de NaHCO 3 con c.s.p. 20ml con agua destilada. Y se halló un gasto ¨C¨.

RESULTADOS 1. Análisis cualitativo 2. NOTA: negativo negativo (-), positivo trazas (+), (+), abundante (++) (++)

Tabla NO1. Cuadro de los resultados de las reacciones realizada en ¨Camellia sinensis¨





Agua de cal KCN 5% NaClO K4[Fe(CN)6] + NH4OH Gelatina KMnO4 Alcaloide (Quinina) 

++ + + ++ +

Cromatografía

Tabla NO2. Cuadro de los resultados de la CCP realizada en spinosa ¨ ¨Caesalpinia spinosa¨

Descripción

Rf

Se utilizó como sistema de solventes (Fase móvil) acetato de etilo y etanol etanol (1:3)

Rf

Estándar :

Rf

MP :

,6 

,6  ,  ,6 

=1

= 0,97

3. Análisis cuantitativo

Tabla NO3. Cuadro de los cálculos y resultados de la valoración con yodo 2.5%

realizada

en ¨Caesalpinia spinosa¨ spinosa ¨

Cálculos Gasto patrón (A) = 7,4 ml Gasto blanco (B) = 0,2 ml Gasto muestra (C) = 11,5 ml (A - B) ---- 0,19 (C - B) --- X 7,2 --- 0,19 11,3 ---X X= 0,157 g/10 ml 100ml = 1,57 g

Resultados %    =

1,57  5

× 100% = 31,4%

g/10ml = 0,157 g g/100ml = 1,57 g

DISCUSIÓN Se realizó las reacciones de identificación identificaci ón en la especie Camellia sinensis (té sinensis (té negro) para los cuales dieron positivo en la mayoría de las reacciones como se aprecia en la tabla número 1 ,exceptuando ,exceptuan do para el reactivo cianuro de potasio (KCN) e hipoclorito hipoclorito de sodio. sodio. Con el tricloruro férrico se formó formó el complejo complejo azulado verduzco intenzo característico para compuestos compuestos fenólicos al que pertenecen pertenecen los los taninos; taninos; sin embargo, la reacción no es específica específic a ya que detecta una gran cantidad de diversos compuestos fenólicos, pero es un indicio de que pudieran haber taninos en el extracto de té. La reacción característica característ ica para saber si hay o no hay taninos, es la reacción que se realiza con la gelatina, un precipitado blanco me indica la presencia de este tipo de compuestos, para lo cual fue positiva en la reacción realizada, ya que los







de acomplejar fuertemente carbohidratos y proteínas formando precipitados 4, lo cual se pudo observar en la reacción de la gelatina .Los taninos condensados (proantocianidinas), (proantocianidinas), galotaninos y elagitaninos son los taninos mayormente encontrados en los alimento5 .Los taninos condensados son oligómeros o polímeros de unidades de flavonoides que se encuentran, en términos generales, en frutas y bebidas como el té, la cerveza y el vino 6.Además se encontró que el método seleccionado para medir taninos totales (Metil Celulosa Precipitable), es ampliamente utilizado en la producción de vinos por su sencillez y versatilidad. Este ensayo se basa en la capacidad que tienen los taninos de interactuar con polímeros y formar complejos tanino-polímero insoluble que luego precipita. El polímero utilizado es el polisacárido metil celulosa 7. Asimismo de encontró que según un estudio en el que se realiza la caracterización caracterización de la composición fenólica y capacidad antioxidante del té ( Camellia sinensis) sinensis ) en productos producto s de diferentes marcas comercializadas Chile, en el que se demuestra que la concentración de taninos totales presentes en las muestras estudiadas existe una baja correlación positiva de 0,46 entre el contenido de taninos y fenoles totales (p ≤ 0,05), dejando en evidencia que en algunas muestras, un elevado contenido de fenoles totales no refleja la presencia de un alto contenido de taninos. Esto se comprobó en la reacción del tricloruro férrico(FCl3 ) en que se pudo observar un azul intenso por la presencia de dicersas variedades de polifenoles , no siendo así para la reacción con la gelatina en el que el precipitado fue ligero .Estas diferencias diferencias se manifiestan, manifiestan, según según el estudio mencionado, tanto en té negro como en té verde, viéndose mayormente reflejado en este último. Esto se explica dado que el té verde, al ser un producto no fermentado contiene mayor número de catequinas monoméricas y oligoméricas que son los principales compuestos responsables del contenido de fenoles totales, existiendo pocos polímeros capaces de precipitar la metil celulosa, en comparación al té negro.En el estudio se menciona, además , que el ácido gálico es el ácido fenólico de mayor importancia en el té y que contenido es significativamente menor en el té verde que en el té rojo ello se debe a que el ácido gálico aumenta durante la fermentación debido a su liberación desde los galatos de catequinas. En relación al contenido promedio de ácido gálico en las distintas variedades analizadas, se aprecia que al té verde con el menor promedio8. De los resultados cualitativos cualitati vos obtenidos y con la literatura consultada se puede concluir que el e l té negro analizado en la práctica contiene taninos hidrolizable como el ácido gálico ,sin embargo , el precipitado en la reacción con gelatina fue pobre, pudiendo afirmar que el té negro era de mala calidad o estuvo probablemente adulterada.





3. Gorriti A., Retuerto Retuerto M., González., González., Herrera O. Manual de laboratorio laboratorio de Farmacognosia Farmacognosia I.1 Edición. Facultad de Farmacia y Bioquímica-UNMSM; Bioquímica-UNMSM; 2018. 4. Frazier, R., E. Deaville, Deaville, R. Green, E. Stringano, Stringano, I. Willoughby, Willoughby, J. Plant and I. MuellerHarvey. MuellerHarvey. Interactions of tea tannins and condensed tannins with proteins. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2009; 51(2): 490-495. 5. Friedman, M., K. Soo-Yeun, Soo-Yeun, L. Sin-Jung, Sin-Jung, H. Gyeong-Phil, Gyeong-Phil, H. Jae-Sook, L. L. KapRang and K. Nobuyuke.Distribution of catechins, theaflavins, caffeine, and theobromine in 77 teas consumed in the united states. Journal of Food Science.2005; 70: 550-559. 6. González de Mejia, E., M. Ramirez-Mares and S. Puangpraphant. Bioactive components of tea: Cancer, inflammation and behavior. Brain, Behavior, and Immunity. 2009; 23: 721-731. 7. Almajano, M. P., R. Carbo, J. López and M. Gordon. Antioxidant and antimicrobial activities of of tea infusions. Food Chemistry. Chemistry. 2008 108: 55 –63. –63. 8. Carde, F. Caracterización Caracterizació n de la composición fenólica y capacidad antioxidante del té (Camellia sinensis) sinensis ) en productos de diferentes marcas comercializadas en Chile [internet].2011.Disponible en: http://repositorio.uchile.cl/bitstrea http://repositorio.uchile.cl/bitstream/handle/2250 m/handle/2250/112291/Me /112291/Memoria%20de% moria%20de%20Tit 20Tit ulo%20Francisco%20De%20Feria.pdf?sequence=1

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