Guía de Practicas de Biología Celular y Molecular
Universidad Ricardo Palma
Biología Celular y Molecular Guía de Prácticas
Lima – Perú
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Guía de Practicas de Biología Celular y Molecular
Universidad Ricardo Palma
UNIVERSIDAD UNIVERSIDAD RICARDO RICARDO PAMA PAMA FAMURP
Dr! Elio I"á# Rodrígue$ C%á"e$ Rector
Dr! Dr! Ma#uel Ma#uel &ua'á# &ua'á# Guerrero Guerrero Decano de la Facultad de Medicina Medicina Humana Humana
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I#struccio#es Ge#erales ∗
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El estudiante ingresará al laboratorio vistiendo el mandil blanco manga larga (largo). Y a la ora indicada en la !u"a de Matricula. Está PRO&IBIDO Fumar# laboratorio.
$omer
%
&eber
dentro
del
Está PRO&IBIDO el uso de tel'ono celulares dentro del laboratorio. odo material biol*gico será mani+ulado con guantes % seg,n lo re-uiera la +ráctica se utiliará mascarilla. Está PRO&IBIDO +i+etear con la boca las soluciones -u"micas. /os alumnos +artici+arán activamente durante el desarrollo de cada +ráctica como +arte de su evaluaci*n. Antes de iniciar la +ractica corres+ondiente el alumno rendirá un test +ara veri0car -ue +osea los conocimientos básicos introductorios % conoca1 $once+tos te*ricos básicos +ara esa +ractica /os ob2etivos de cada +ráctica. El material % e-ui+o de laboratorio necesario +ara la realiaci*n de dica +ráctica.
Material de uso (er'a#e#te )o*ligatorio+ ∗
El material obligatorio % de uso +ermanente +ara cada +ractica constará de lo siguiente1 - Material indicado en la gu"a de +ráctica. - /aminas +orta ob2etos1 una ca2a +or mesa de traba2o. - /aminas cubreob2etos1 una ca2a +or mesa de traba2o. - !uantes descartables1 dos +ares +or alumno. - Mandil blanco largo (manga larga). - !u"a de +ráctica % colores. 3
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Prese#taci,# de resultados ∗
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/os resultados serán +resentados al 0naliar la +ráctica en el ormato res+ectivo. oda la gu"a de +ráctica será +resentada al 0naliar el semestre acad'mico (3+cional).
CRONOGRAMA DE PRACTCA! "#$%
!EMANA 23/3 al 27/3 30/03 al 03/4 06/4 al 10/4
13/04 al 17/4 20/4 al 24/4 27/4 al 01/) #'(% al #)(% 11/) al 1)/) 1,/) al 22/) 2)/) al 2/) 01/6 al 0)/6 0,/6 al 12/6 1)/6 al 1/6 22/6 al 26/6 2/6 al 03/7
TTU&O DE &A PRACTCA Microscopía Niveles de organización de los seres vivos Medición de poblaciones celulares Interacción de sisteas autopo!eticos eucariotas ulticelulares ! procariotes" #rganización celular$ %&lulas 'rocariotas ! (ucariotas *eceptores de Mebrana$ +ntígenos sanguíneos E*AMEN PRACA& 'ereabilidad de la Mebrana %elular Identi-icación de %itoes.ueleto ! #rganelas celulares %roatina eual$ %uerpo de arr Identi-icación del Ncleo Inter-sico 5ivisión %elular (tracción de +5N ! &cnicas en iología %elular ! Molecular aetog&nesis E*AMEN +NA&
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BIOSEGURIDAD DEN-RO DE ABORA-ORIO /as normas de bioseguridad adecuadas +ara la +ermanencia en el laboratorio son las siguientes1 4. El ingreso se realiará con el mandil +uesto. 5. El cabello se mantendrá recogido durante la +ermanencia en el laboratorio# evitando as" una +osible contaminaci*n. 6. No se (er'itirá el i#greso a las +ersonas -ue +resenten minialdas# sorts o bermudas# al igual -ue las +ersonas -ue +resenten sandalias o a+atos descubiertos. 7. 8obre las mesas de traba2o solo se +odrá colocar el material re-uerido +ara realiar las +rácticas % el material obligatorio.
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9. Antes de mani+ular las muestras biol*gicas el estudiante de*erá colocarse los gua#tes descarta*les. :. 8e utiliara mascarillas o gaas seg,n lo re-uiera la +ráctica. ;. 8e utiliaran +ro+i+etas +ara medir cual-uier soluci*n.
. Al t'rmino de la +ráctica se de2ara el material utiliado % el área de traba2o lim+io. 4?. Dura#te la (er'a#e#cia e# el la*oratorio está (ro%i*ido comer# umar o beber.
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RECONOCIMIEN-O DE MA-ERIAES . E/UIPOS DE ABORA-ORIO I#troducci,#0 En el laboratorio % en las +rácticas es esencial la utiliaci*n de instrumentos % materiales +ara el mane2o de los reactivos# colorantes % muestras. Ha% una serie de materiales -ue nos va a +ermitir el desarrollo de las +racticas# es +or eso necesario el reconocimiento de estos# cual % como es su uso# +or eso mu% im+ortante reconocerlos.
Material de "idrio1 Bagueta 1 se utilia +ara agitar sustancias.
Ca1a De Petri 1 E@isten de dierentes medidas es utiliada +ara +re+arar cultivos de ongos % bacterias# % tambi'n +ara seleccionar muestras de animales.
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2rasco Gotero0 8on de color blanco o ámbar. 8irven +ara guardar de una manera segura los reactivos# regularmente se administra con conteo de gotas.
-u*os de e#sayo1 Estos reci+ientes sirven +ara acer e@+erimentos o ensa%os# los a% en varias medidas % aun-ue generalmente son de vidrio tambi'n los a% de +lástico
Pi(etas0 Permiten medir vol,menes. /as a% en dos +resentaciones1 a+ Pi(etas graduada0 Es un elemento de vidrio -ue sirve +ara dar vol,menes e@actos# con esta +i+eta# se +ueden medir distintos vol,menes de l"-uido# %a -ue lleva una escala graduada.
*+ Pi(eta "olu'3trica0 Es un elemento de vidrio# -ue +osee un ,nico valor de medida# +or lo -ue s*lo +uede medir un volumen.
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c+ Pi(etas (asteur .
a'i#as e4ca"adas1 láminas de +orcelana con 45 +oos +ara observar reacciones de aglutinaci*n +ara determinar gru+o sangu"neo.
Mec%eros de "idrio (ara alco%ol
Otros 'ateriales1 Pro+i+eta1 este se utilia 2unto con la +i+eta +ara trasvasar l"-uidos de un reci+iente a otro.
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Ho2as de bistur".
!radilla +ara tubos de ensa%o. +i+etas.
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Pinas de madera
!radilla +ara
E5ui(os 1 Bncubadora
Microsco+io com+uesto de cam+o claro :?? grs.
$entr"uga
&alana de ? C
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PRAC-ICA N6 7 MICROSCOP8A El microsco+io es uno de los instrumentos más im+ortantes % versátiles usados +or la ciencia +ara la identi0caci*n % la com+resi*n de los +rinci+ios generales % las +articularidades es+eciales en lo -ue se re0ere a la estructura de las c'lulas# los te2idos % los *rganos. Es di"cil encontrar alg,n cam+o de la ciencia o de la industria donde no se utilia el microsco+io. Este es un instrumento -ue +ermite am+li0car la imagen de un ob2eto +e-ueo. /a imagen +uede ser observada directamente# otogra0ada o +ercibida +or otoc'lulas u otros rece+tores# de+endiendo de la naturalea % del uso -ue a%a de acerse de esta imagen.
2u#da'e#tos de la 'icrosco(ia /a microsco+ia tiene como base1
/a radiaci*n a+rovecable +or la longitud de onda# como uente de +oder# -ue +ermite usar la longitud de onda del es+ectro de lu# en la 11
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microsco+ia *+tica a las ondas electr*nicas en la microsco+ia electr*nica. El +oder de resoluci*n /a magni0caci*n.
Estas +ro+iedades undamentales de la microsco+ia# +ermiten e@aminar detalles m"nimos de la estructura % ultraestructura de la c'lula# de sus organelas# % de los microorganismos. As" mismo +ermite detectar im+erecciones en metales# cristales# cerámica# ti+o de rocas# minerales# *siles# etc.
Clases de 'icrosco(ios /os microsco+ios +ueden clasi0carse como1 Microsco+io sim+le# -ue esta com+uesto +or un lente. imagen virtual % dereca. E2em+lo la lu+a.
Estos orman una
Microsco+ios com+uestos# ormados +or varios lentes. Estos se caracterian +or ormar una imagen real e invertida % son de varios ti+os.
MICROSCOPIOS OP-ICOS1 El microsco+io *+tico com,n sigue siendo el instrumento más im+ortante +ara la enseana % la investigaci*n de mucas es+ecialidades como la biolog"a celular.
Entre los -ue +ertenecen a la 'icrosco(ia ,(tica tenemos1
Microsco(io Co'(uesto de Ca'(o Claro! &reve resea ist*rica1 En 49>? Hans % acar"as Ganssen (Middleburg# Holanda) constru%eron el +rimer microsco+io com+uesto. Este consist"a de un tubo con lentes en ambos e@tremos# cerca de uno de ellos se coloca el ob2eto (ob2etivo) % +or el otro e@tremo se observa (ocular). Este instrumento artesanal constitu%* la base conce+tual de la microsco+ia moderna. Antonio an /eeIenoeJ (4:;6) us* un magni0cador sim+le % un so+orte +ara el es+'cimen % observ* +rotooarios inusorios (ciliados) a una magni0caci*n de a+ro@imadamente 5;9 K. El descubri* microorganismos en agua % en 4:=6 +ublic* sus +rimeros dibu2os de bacterias# tambi'n descubri* el es+ermatooide umano.
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!iovanni &atista Amici (4=5;)# es amoso +or los microsco+ios de alta calidad# introdu2o un con2unto de sistemas acromático. El incidi* en la im+ortancia del es+esor del cubre % +orta ob2eto +ara la calidad de la imagen. Bnvent* el ob2etivo de inmersi*n. El traba2o de Amici sirvi* +ara -ue un gru+o de microsco+istas de $arl eiss# Ernst Abbe % 3tto 8cott# disearan el sistema de inmersi*n usando un aceite -ue tenga el mismo "ndice de reracci*n -ue el vidrio# incidieron en la im+ortancia de la a+ertura num'rica. Asimismo en 4==: introdu2eron los ob2etivos a+ocromáticos +ara el microsco+io. En los +rimeros aos del siglo KK# el +roesor Loler ide* el m'todo de iluminaci*n microsc*+ica# conocido universalmente como iluminaci*n Loler tambi'n diseo % +ereccion* el microsco+io de lu ultravioleta.
Partes0 A. El 8istema de 8o+orte $onsiste en1 /a &ase El &rao El Rev*lver /a Platina • • • •
&. El 8istema de Aumento. os O*1eti"os1 /entes donde se orma a la imagen real# invertida % aumentada del es+'cimen -ue se observa. Au'e#to1 El ob2etivo de 4?@ aumenta 4? veces. El ob2etivo de 7?@ aumenta 7? veces. El ob2etivo de 4??@ aumenta 4?? veces. /os ob2etivos secos son1 7K# 4?K# 7?K# El ob2etivo de 4??@ utilia como medio *+tico del aceite de inmersi*n. •
A(ertura #u'3rica )A!N+ Es la medida de la ca+acidad de un ob2etivo +ara colectar ra%os de lu diractados -ue +asen a trav's del es+'cimen. /a A< es calculada como el +roducto del seno. (Mitad del cono de lu -ue ace+ta el ob2etivo) % el "ndice de reracci*n (BR) del medio *+tico en el cual está traba2ando el ob2etivo A< N sen α (BR) El valor de la A<# está indicado en cada lente ob2etivo1 ?.6? en el 3b2etivo de 4?@ ?.:9 en el 3b2etivo de 7?@ 4.6? en el ob2etivo de 4??@ A medida -ue aumenta la a+ertura num'rica ma%or es el +oder de Resoluci*n. 13
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Resoluci,# Es la ca+acidad del microsco+io +ara discriminar dos +untos situados uno cerca de otro (+oder de resoluci*n). Esta ca+acidad se e@tienda asta una distancia m"nima -ue el instrumento es ca+a de distinguir (limite de resoluci*n). /a resoluci*n (r) tiene un valor dierente +ara cada ob2etivo % se calcula de la siguiente manera1 rN N 99? nm num'rica α
•
?.:4 . α A< ?#:4
N
constante
El 3cular1 son un con2unto de lentes -ue +ermiten magni0car la imagen aumentada +or el ob2etivo. Act,a como una lu+a es decir +ro%ecta una imagen virtual % dereca de la de0nida +or el ob2etivo. Por e2em+lo si la imagen del ob2etivo aumenta 7? veces (ob2etivo de 7?@) % enseguida de 4? veces mediante el ocular de 4?@# el aumento será de 7?? veces.
$. El 8istema de Bluminaci*n. •
•
•
2ue#te lu'i#osa! Mucos microsco+ios básicos# utilian es+e2os o ocos de ba2os volta2es. /a lu natural o arti0cial es ocaliada# v"a un sistema de lentes colectores en el condensador. Co#de#sador En los microsco+ios de lu transmitida# el condensador concentra un cono de lu de la misma a+ertura num'rica (A<) del ob2etivo con el -ue se observa la muestra. Dia9rag'a 8e encuentra dentro del condensador# se utilia +ara reducir o am+liar la cantidad de lu -ue ingresa al condensador.
D. El 8istema de A2uste o Eno-ue. ornillo Macrom'trico. ornillo Microm'trico. ornillo de a8uste del condensador 9eleva o ba8a el condensador: (levador del dia-raga 9cierra o abre el dia-raga: ornillos reguladores de la platina" • • • • •
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Fuente de luz
Para conseguir una ,uena iluminaci-n.
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En/o0ue
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%olocar la uestra sobre la platina ! su8etarla" irar el revólver =asta el ob8etivo de 10" ira el tornillo acro&trico ! lleva la platina a una distancia de 1 a 2 entre el ob8etivo ! la lina preparada (+ #'(*+%I>N 5(( ?+%(*@+ IN %#@#%+* < #A# #*( @# #%<@+*(" +=ora coloca abos o8os abiertos sobre los oculares" N# %#M(+ (@ (**#* 5( %(**+* # (MI%(**+* +@
&cnica de la inersión$ %onsiste en colocar una gota de aceite de inersión entre el cubreob8etos ! la lente -rontal del ob8etivo de io auento" 'ara elloB teniendo !a en-ocado el ob8eto a un auento enorB se gira leveente el revólverB se coloca una pe.ueEa gota de aceite de inersión sobre el 15
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cubreob8etosB luego se sigue girando =asta en-ocar con el ob8etivo de a!or auento ! se procede al a8uste con el tornillo icro&trico" erinada la observación se eleva el tubo o se ba8a platina ! se lipia el ob8etivo con papel de seda o lente suave .ue puede estar =uedecido en un detergente especial para lentes" 6 OB7ET8O!
1" 2"
Identi-icar los di-erentes coponentes del icroscopio" *ealizar el en-o.ue -ino ! observar detalles de la uestra"
6 MATERA&E!
5eben traer los estudiantes$ 1" Muestra$ 'ulga 9dentro de un -rasco con agua: por aluno" 2" Material #bligatorio" 3" @ancetas 901 por aluno: 4" 'apel toalla" (l laboratorio proporcionar$ 1"F Microscopios copuestos de capo claro" 2"F @inas patrón de corte de lirio" 3"F 'apel lente 86 PROCEDMENTO Pre3araci-n y O,servaci-n de la muestra.
; ; ; ; ; ; ;
oa una lina portaob8eto lipia" (stas linas ! los cubreob8etos siepre debes toarlo por los bordes usando tus dedos pulgar e índice" N
*ecoendaciones para el uso del Microscopio óptico$ 1" %oience siepre las observaciones con el ob8etivo de enor auento" (sto le dar una visión integral del preparado ! le peritir seleccionar las e8ores a&reas o las de especial inter&sB .ue luego observar con a!ores auentos" 2" @a iluinación debe ser =oog&nea ! de buena intensidad pero no ecesiva ! deber odi-icarla de acuerdo con el ob8etivo .ue est utilizando" 16
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3" iepre .ue se =aga una observaciónB a8uste el en-o.ue con el tornillo icro&trico aun cuando !a =a!a sido en-ocado por otra persona previaente" 4" *ecuerde .ue el icroscopio óptico otorga igenes invertidas del ob8etoB por lo tanto el oviiento .ue realice de la platina ser inverso al corriiento de la iagen" )" odo dibu8o .ue realice de la observación debe ser es.ueticoB respetando las proporciones de los eleentos .ue observa" 6" @os portaob8etos ! cubreob8etos deben estar lipios ! secos" 7" i el li.uido ecede la laina cubreob8etos utilizar papel -iltro" 86 CUE!TONARO
1" 2" 3" 4" )" 6" 7"
HDue di-erencias eisten entre un icroscopio copuesto de capo claro ! un icroscopio con-ocal" H'or .u& no puedes observar ebrana plastica ! ribosoas con un icroscopio óptico" %rees .ue pueda eistir algn organiso vivoB cu!o taaEo sea enor a 0"2 uB Hpor.ue no podeos observarlo HDue -unción cuple el tornillo icro&trico ! el tornillo acro&trico Mencione otros tipos de Microscopios electrónicos ! su aplicación en la edicina" 5e-ina 03 tipos de icroscopios ópticos" 5e-ina 02 tipos de icroscopios electrónicos"
86 RE+ERENCA! BB&OGR;+CA! •
•
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5??> Histolog"a. 5da edici*n. :elsc%;
Resultados de Laboratorio
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Muestra: ………………………………………………. Colorante o Coloración: ……………………………… Célula que observa: ……………………………………. Estructura: …………………………………………………
Muestra: ………………………………………………. Colorante o Coloración: ……………………………… Célula que observa: …………………………………… Estructura: ………………………………………………
V°B° ra. Carola C!ambers ……………………………
"ec!a:
PRAC-ICA N= > NIVEES DE ORGANI?ACI@N DE OS SIS-EMAS VIVIEN-ES
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I+ IN-RODUCCI@N Desde nuestros or"genes nos emos interesado +or conocer a los seres vivos -ue nos rodean nos emos +reocu+ado +or desentraar el misterio de la vida. Una de las +rimeras res+uestas a esta interrogante la dieron los vitalistas# -uienes sosten"an -ue los seres vivos +ose"an una uera vital -ue los ac"a distintos a los no vivos. /os mecanicistas# en cambio# +ensaban -ue los organismos eran algo es+ecial# +ero no radicalmente distinto de la materia inanimada# +or lo -ue +lantearon -ue uncionaban del mismo modo -ue una ma-uina. En la actualidad los bi*logos más -ue res+onder a la +regunta de -ue es la vida# se an enocado al estudio de lo -ue signi0ca ser vivo +ara ello se a +ro+uesto un nuevo eno-ue# denominado organicismo# -ue sostiene -ue los seres vivos se encuentran organiados en distintos niveles 2erár-uicos# -ue se caracterian +or +oseer +rogramas gen'ticos conormados a trav's del +roceso evolutivo % -ue son los -ue controlan los en*menos vitales. En la materia viva e@isten varios grados de com+le2idad# denominados #i"eles de orga#i$aci,#! Dentro de los mismos se +ueden dierenciar #i"eles a*i,ticos (materia no viva) % #i"eles *i,ticos ( materia viva). /os dierentes niveles son1 4. Ni"el su*at,'ico0 integrado +or las +art"culas subat*micas -ue orman los elementos -u"micos (+rotones# neutrones# electrones). 5. Ni"el at,'ico0 son los átomos -ue orman los seres vivos % -ue denominamos *ioele'e#tos . Del total de elementos -u"micos del sistema +eri*dico# a+ro@imadamente un ;?Q de los mismos los +odemos encontrar en la materia orgánica. Estos bioelementos los +odemos agru+ar en tres categor"as1
&ioelementos +rimarios1 unci*n estructural &ioelementos secundarios1 unci*n estructural % catal"tica. 3ligoelementos o elementos vestigiales 1 unci*n catal"tica.
6. Ni"el 'olecular0 En 'l se inclu%en las mol'culas# ormadas +or la agru+aci*n de átomos (bioelementos). A las mol'culas orgánicas se les denomina Bio'ol3culas o Pri#ci(ios i#'ediatos! Estos Princi+ios Bnmediatos los +odemos agru+ar en dos categor"as# inorgánicos (agua# sales minerales# iones# gases) % orgánicos (gl,cidos# l"+idos# +rote"nas % ácidos nucleicos). En este nivel tambi'n debemos agru+ar las macromol'culas % los virus. /as +rimeras resultan de la uni*n de mon*meros (aminoácidos# nucle*tidos# etc...) % los segundos son la uni*n de +rote"nas con ácidos nucleicos. 7. Ni"el celular0 donde nos encontramos a la c'lula (+rimer nivel con vida). Dos ti+os de organiaciones celulares# Eucariota (c'lulas animales % vegetales) % Procariota (la bacteria). /os organismos unicelulares (E2. Protooos) viven con +erecta autonom"a en el medio# +ero en ocasiones nos +odemos encontrar agru+aciones de c'lulas# las colo#ias# -ue no +odemos 19
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considerar como seres +luricelulares +or -ue a +esar de estar ormados +or miles de c'lulas cada una vive como un ser inde+endiente. 9. Ni"el (luricelular0 constituido +or a-uellos seres ormados +or más de una c'lula. 8urge de la dierenciaci*n % es+ecialiaci*n celular. En 'l encontramos distintos niveles de com+le2idad1 te2idos# *rganos# sistemas % a+aratos. Mientras los te1idos son con2untos de c'lulas de origen % orma +arecida -ue realian las mismas unciones# los ,rga#os son un con2unto de te2idos dierentes -ue realian actos concretos. /os siste'as son con2untos de *rganos +arecidos# al estar constituidos +or los mismos te2idos# +ero -ue realian actos com+letamente inde+endientes. /os a(aratos (E2. a+arato digestivo)# ormados +or *rganos -ue +ueden ser mu% dierentes entre s" (E2. dientes# lengua# est*mago# etc...)# realian actos coordinados +ara constituir lo -ue se llama una 9u#ci,# *iol,gica (E2. nutrici*n). :. Ni"el de (o*laci,#0 los individuos de la misma es+ecie (a-uellos -ue son ca+aces de re+roducirse entre s" % tener descendencia 'rtil) se agru+an en (individuos de la misma es+ecie -ue coinciden en (o*lacio#es el tiem+o % en el es+acio). ;. Ni"el de ecosiste'a0 las +oblaciones se asientan en una ona determinada donde se interrelacionan con otras +oblaciones ( COMUNIDAD O BIOCENOSIS+ % con el medio no orgánico ( Bioto(o ). Esta asociaci*n con0gura el llamado ECOSIS-EMA # ob2eto deestudio de los bi*logos. /os ecosistemas son tan grande o tan +e-ueo como -ueramos# sin embargo el gran ecosistema terrestre lo orman la &iosera (biocenosis) % el astro ierra (bioto+o).
Ni"eles de Orga#i$aci,# de los seres "i"os
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El atributo más sobresaliente de los seres vivos es# -uiá# su co'(le1idad % su alto grado de orga#i$aci,#. Poseen estructuras internas intrincadas -ue contienen mucas clases de mol'culas com+le2as. 8e +resentan# además# en una gran variedad de es+ecies dierentes. Por el contrario# la materia inanimada de su entorno (el agua# el suelo# las rocas) está abitualmente constituida +or meclas ortuitas de com+uestos -u"micos sencillos de escasa organiaci*n estructural. En segundo lugar# cada una de las +artes com+onentes de los seres vivos cu'(le u# (ro(,sito o 9u#ci,# es(ecícos. Esto es cierto no s*lo en lo reerente a estructuras visibles (alas# o2os# ores# etc.) como a estructuras microsc*+icas (el n,cleo o la membrana celular) o submicrosc*+icas (+rote"nas# a,cares# l"+idos# etc.). En los organismos vivos es com+letamente leg"timo +reguntarse cuál es la unci*n de una mol'cula determinada. /os organismos vivos tambi'n +resentan la ca+acidad de e@traer % transormar la energ"a de su entorno a +artir de materias +rimas sencillas# % de em+learla +ara edi0car % mantener sus +ro+ias e intrincadas estructuras. A esta ca+acidad es a lo -ue llamamos #utrici,#! ambi'n +resentan la ca+acidad de recibir est"mulos del e@terior % de elaborar una res+uesta ante los mismos# lo -ue se denomina unci*n de relaci,#! 8i seguimos nuestro análisis de los sistemas vivientes nos encontramos -ue están organiados +or multiniveles -ue van desde la c'lula a organismos o individuo# % -ue cuando los individuos se relacionan entre s" % con el ambiente -ue ocu+an# tambi'n de0nen niveles de organiaci*n su+eriores. En biolog"a las 2erar-u"as se establecen de acuerdo al siguiente orden1
BIOS2ERA . Ecosistemas . $omunidades . Poblaciones INDIVIDUO U ORGANISMO . 8istema de *rganos . Srganos . e2idos CUA . 3rganelas . Asociaciones su+ramoleculares . Macromol'culas o mol'culas biol*gicas . $om+onentes del entorno II+ OB
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III+ MA-ERIAES os alu'#os agru(ados (or (are1a de tra*a1o de*erá# traer lo siguie#te1 4. Estuce de disecci*n o las siguientes +ieas1 ti2era recta# +inas# mango de bistur" nT 7# estiletes# sonda acanalada. 5. Un rat*n blanco vivo (adulto). 6. Una tabla de disecci*n de es+uma tecJno+or# medida 5?@6? cm. 8in orrar. 7. 4 +ao %ess 9. Al0leres :. Una &olsa negra +ara eliminar los desecos. ;. Pa+el oalla. =. Material 3bligatorio. /ue (ro(orcio#a el la*oratorio1 4. Microsco+io com+uesto de cam+o claro 5. Distencil 6. Algod*n. 7. Geringa de tuberculina. 9. Pi+etas. :. Pro+i+etas. ;. Placas Petri =. ubos de ensa%o >. &aguetas de vidrio 4?. !radillas 44. $olorante rigt. 45. Agua 3@igenada. 46. Pa+el lente. IV+ PROCEDIMIEN-O Mor9ología e4ter#a del orga#is'o e# estudio! 4.
3bserve el rat*n de cabea a cola e identi0-ue los *rganos e@ternos -ue orman +arte de los sistemas1 digestivo# res+iratorio# e@cretor# re+roductor# auditivo % visual. 3bserva minuciosamente el sistema tegumentario e identi0-ue los *rganos -ue lo orman.
5.
Del orga#is'o a los ,rga#os! 4.
8acri0-ue el rat*n colocándolo en +osici*n dorso ventral (boca aba2o) sobre el +lano de la tabla de disecci*n. 5. $on a%uda del +ao %ess cubrir al rat*n de2ando una de las e@tremidades ineriores e@+uesta. 6. Estirar la e@tremidad inerior % colocarle ?.4ml. de distencil con a%uda de la 2eringa de tuberculina. Es+erar unos minutos. 7. $olo-ue el rat*n muerto en +osici*n ventro dorsal (boca arriba) % con a%uda de la +ina +elli-ue la +iel# en la l"nea medio ventral# tire en 22
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sentido contrario cuidadosamente % realice un +e-ueo corte con la ti2era. 9. Bntroduca la sonda acanalada# con el canal acia arriba asta la +arte donde inicia el estern*n % aga un corte longitudinal en la +ared del cuer+o siguiendo el canal de la sonda. enga cuidado de no +erorar *rganos de la regi*n abdominal. :. 3bserve % reconoca los *rganos -ue se encuentran dentro de la cavidad. ;. 3bserve en la cavidad torácica# la +resencia del m,sculo diaragma. =. Bntroduca la sonda acanalada rom+iendo el diaragma % corte el estern*n (la +iea es-uel'tica central# entre las e@tremidades anteriores). enga cuidado de no daar los *rganos -ue están en la cavidad torácica. >. Bdenti0-ue los *rganos -ue se encuentran en esta cavidad1 cora*n# los +lumones# la trá-uea. 4?. Bdenti0-ue el sistema re+roductor de su es+'cimen. Reconoca si es maco o embra. V-u' *rganos lo ormanW
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De los ,rga#os a las c3lulas! /a sangre es un te2ido -ue orma +arte del sistema circulatorio. 4 $on la tuberculina descartable +unce el cora*n % tome muestra de sangre. (con un Angulo de >?X)
5. $olo-ue una gota en el e@tremo de una lámina +orta ob2eto# luego con otra lámina aga una e@tensi*n o rotis (con un ángulo de 79X)
6. 7.
De2e secar % coloree con rigt /uego observe al microsco+io a menor aumento (l?) % mediano aumento (7?). Vu' nivel de organiaci*n biol*gica esta Ud. observandoW
De las c3lulas a las 'ol3culas! $omo +uede com+robar# los *rganos están ormados +or te2idos % las unidades estructurales de estos son las c'lulas. Estas# a su ve# contienen organelas % mol'culas biol*gicas1 +rote"nas +olisacáridos# l"+idos % ácidos nucleicos. /as enimas son +rote"nas cataliadores -ue se encuentran en todas las c'lulas. /os cataliadores tienen la caracter"stica de aumentar las velocidades de reacciones -ue %a son energ'ticamente avorables al disminuir la energ"a de activaci*n. /as enimas deben cataliar reacciones -u"micas en las a+acibles condiciones celulares1 6; Tc# +H :.9 C ;.9 % solventes acuosos. Para demostrar la actividad enimática se realiará lo siguiente1 4.
ome una +e-uea muestra de "gado# ri*n % m,sculo del rat*n# se coloca cada muestra en una +laca Petri % se cortan en +e-ueos cubitos# con a%uda de la ti2era o del bistur". 24
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5. 6. 7.
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$olo-ue los cubitos en tres tubos de ensa%o dierentes# un tubo +ara cada muestra. $on a%uda de la bagueta de vidrio triture los cubitos en los tubos -ue %a contienen 4 ml de +er*@ido de idr*geno. 3bserve % com+are los resultados obtenidos en los tres tubos.
En todos los te2idos vivos las c'lulas se encargan de +roducir la enima catalasa# la cual catalia la reacci*n -ue descom+one el +er*@ido de idr*geno# +roducto del metabolismo celular.
V+ CUES-IONARIO 4. Haga un cuadro donde considere Ud. los +rinci+ales sistemas % *rganos del rat*n. 5. E@+li-ue Ud. como está interrelacionado el sistema res+iratorio con el sistema digestivo. 6. VA -u' nivel de organiaci*n +ertenece la catalasaW Escriba la ecuaci*n de reacci*n de la catalasa. 7. $uál es el +a+el -ue desem+ea el diaragmaW 5. Mencione E2em+los de1 Asociaciones su+ramoleculares# Macromol'culas :. Mecione las unciones -ue cum+len los siguientes *rganos1 "gado % riones.
VI+ RE2ERENCIAS BIBIOGR2ICAS Audesir -! Audesir G! . 4>>:1 &iolog"a1 /a vida en la tierra. 7ta. Edici*n. PreticeHall His+anoamericana# 8.A. M'@ico# >:.&iologia Moderna . 4? a. Edicion. ed.rillias. Me@ico# Argentina # Es+aa. Rosaura Rui$ Guti3rre$ 5??:. 4ra edici*n. Editorial Pearson Education. Bm+reso en me@ico. tt+1OOIII.noticiasmvs.comOZ[OnoticiasOe@+licanlasdierenciasse@uales-ue +rovocanelcancerdeigado697.tml
&o1a de resultados Muestra0 \\\\\\\\\\\\\\\\\\. C3lula 5ue seFala el (u#tero1 \\\\..\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\.\
Colora#te1 \\\\\\\\\\\\\.\\\\\\.. 25
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-3c#ica 5ue se utili$o (ara o*te#er la 'uestra0 \\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\
Bdenti0car las estructuras internas1
(seale con una eca las
estructuras).
Dibu2e la reacci*n enimática +ara cada una de las muestras1
Músculo
Hí ado
Riñón
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