UNIVERSIDAD VERACRUZANA
Facultad de Bioanálisis Región Veracruz
Determinación Cuantitativa de la Urea
Anabel Avalos Gómez
Fecha de la practica 4/05/2010
Fecha de entrega 11/05/2010
VoBo:___________________ Q.F.B Guadalupe Alvarado Castro.
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANÁLISIS REGION VERACRUZ
Determinación cuantitativa de Acido Úrico
Anabel Avalos Gomez
Fecha de la practica 11/05/2010 Fecha de entrega 18/05/2010
VoBo:___________________ Q.F.B Guadalupe Alvarado Castro.
Objetivos El alumno identificará identificará y llevará a cabo los procedimientos procedimientos correspondientes para llevar a cabo una determinación cuantitativa cuantitativa de acido acido urico de un paciente cualquiera, cualquiera, con lo cual se analizaran los resultados para llegar a una conclusión definitiva.
Generalidades La determinación de ácido úrico en suero se practica muy comúnmente para el diagnostico de gota. También se encuentran niveles altos de ácido úrico en leucemia, policitemia, hiperuricemia idiopática familiar y condiciones asociados con el decremento de la función renal. El ácido úrico es una sustancia que forma el hígado cuando ha procesado las purinas, es decir, compuestos que contienen ciertos alimentos, como carne, pescado, vísceras, mariscos, frutos secos, embutidos, principalmente. El referido ácido no tiene utilidad en el organismo, por lo cual se desecha a través de la orina, pero cuando la eliminación no es óptima, o si su producción es muy abundante, se acumula en las articulaciones con consecuencias que detallaremos más adelante. Hiperuricemia es la concentración elevada de ácido úrico en la sangre, que puede depositarse poco a poco en las articulaciones hasta formar cristales, provocando inflamación y dolor muy intenso, en otras palabras, la temible gota. La gota se produce cuando los cristales de urato mono-sódicos se forman en las articulaciones, en los tendones y en los tejidos circundantes. La metabolización de las purinas da lugar al ácido úrico, que normalmente se elimina por la orina. Es más probable que se formen cristales ante la presencia de ácido úrico, pero la presencia en exceso de éste no implica necesariamente que se padezca de gota. Las purinas pueden ser generadas por el cuerpo a través de las células de desecho o bien por la ingesta de alimentos ricos en purinas, como, por ejemplo, el marisco. Los riñones son los responsables de aproximadamente un tercio de la execreción de ácido úrico, mientras que el intestino es responsable del resto. Es posible que defectos hereditarios en el riñón sean responsables de la predisposición de las personas para el desarrollo de la gota. La gota es una forma de artritis que afecta principalmente a hombres entre los 40 y 50 años de edad. Los altos niveles de ácido úrico en la sangre son causados por alimentos ricos en proteínas. El consumo de alcohol a menudo causa ataques agudos de gota y factores hereditarios pueden contribuir a la elevación del ácido úrico. Normalmente, las personas con gota son obesos, con predisposición a la diabetes y a la hipertensión, y con riesgo alto de enfermedades del corazón. La gota es más común en las sociedades opulentas, debido a una dieta rica en proteínas, grasas, y alcohol. Cuando se produce como consecuencia de otras enfermedades, como la insuficiencia renal, es a menudo independientemente del estilo de vida de la persona.
Prin
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étodo
El ac úric es oxidado por la Uricasa a alantoina y peróxido de hidrog eno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminof enazona (4-AF) y 2-4 Diclorof enol Sulfonato (DCPS) forman un compuesto ros ceo: £
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A ido úri o + 2 H2 + 2 ©
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Al ntoin +C 2+ 2H2 2
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POD
2H2O2+ 4-A + DCPS
uinon Q uinon ¨
i ini +4 H2O ¨
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SIGNIFICADO CLINICO
El á cido úrico y sus sales son el producto final d el metabolismo d e las purina s En una insuficiencia renal progresiva ha h ay una retención en sangre de ur ea, creatinina y ácido úrico.
Niveles alto s de ácido úrico son indicativos de patología renal ygeneralmente se asocia con la gota. El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los dato s clínicos y de laboratorio.
Reactivos R1 Tampón
Fosfatos ph 7.4
50 mmol/L 4 mmol/L
R2 Enzimas
2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) Uricasa Peroxidasa (POD)
660 U/L
Ascorbato Oxidasa.
200 U/L
4-Aminofenazona 4-Aminofenazona (4-AF) (4-AF ) Patrón primario acuoso de acido úrico
1mmol/ 6 mg/dL
Uric Acid Cal
60 U/L
Preparación Reactivo de trabajo (RT) : Mezclar volúmenes iguales de R1 Tampón y de R2 Enzimas. Estabilidad Estabilidad del reactivo de trabajo: 1 semana en nev era (2 -8 °C) o 4 días en temperatura ambiente.
Indicadores de deterioro de los reactivos y
Presencia de par tículas y turbidez.
y
ue Q ue
presente una absorbancia del blanco a 520 nm 0.16
Material y
3 tubos
y
Gradilla
y
Pipetas automáticas
y
Espectrofotómetro Espectrofotómetro para lecturas de 520 nm.
Procedimiento Pipetear en una cubeta
Blanco 1.0 -
RT (mL) Patron (µl) Muestra (µl)
Patrón 1.0 25 -
Muestra 1.0 25
Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C ó 10 minutos 15-25°C. Leer la absorbancia ( ) del patrón y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color color es
estable como mínimo 30 minutos.
Cálculos Suero o plasma
( ) Muestra x6 (concentración del patrón)= patrón)= mg/dl de acido urico en la muestra.
( ) Patrón
Orina 24hrs ( ) Muestra X6 x Vol. (dL) orina /24hrs = mg /24 h de acido úrico.
( )P atrón
Factor de conversión : mg/dL x 59.5 = µmol/L
Blanco Patrón Muestra
0.092 0.105
0.00 0.105 0.092
X6 = 5. 25 mg/dl de acido úrico
Conclusión En esta practica se realizo la determinación de acido urico, es muy importante para el diagnostico de enfermedades como hiperuricemia (elevación de acido urico en sangre) y gota es muy importante mantener el nivel de acido urico, ya que estas enfermedades son muy molestas. Un rango normal es de 2,5 a 6 para mujeres, mujeres, hombre de 7,2, el resultado que nos dio fue de 5.25mg/dl quiere decir que se encuentra en un rango normal.
Bibliografía y
y y
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