DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN SUERO 1.
OBJETIVO
Calcular la concentración del ácido úrico en suero, pero también podemos obtenerla de la orina.
2.
INTRO NTRODU DUC CCIÓ CIÓN
El ácido úrico es producto del metabolismo metabolismo de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas, valores valores elevados indican patologías que afectan dichos metabolismos, algunas de origen genético. Habitualmente la concentración del ácido úrico varía de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores tales como la edad, sexo, dieta, origen étnico, constitución genética, embarazo, etc.
3. MET METABOLIS ABOLISMO MO DEL ÁCIDO ÁCIDO ÚRIC ÚRICO O Ácidos nucleicos Enzimas nucleasas
Nucleótidos
Base nitrogenada + azúcar GMP + fósforo (Guanosín monofosfato) Nucleótido fosfatasa
Base nitrogenada + azúcar
Guanosina Nucleósido fosforilasa
Guanina Guanina desaminasa
Xantina
AMP
(Adenosín monofosfato) Nucleótido fosfatasa
Adenosina Adenosina desaminasa
Inosina Nucleósido fosforilasa
Hipoxantina
Xantina oxidasa
Ácido úrico
Xantina Xantina oxidasa
Ácido úrico Xantina.- Producto intermedio de gran importancia en el metabolismo de los ácidos nucleicos y las bases purínicas. Precursor del ácido úrico, formado por la acción de la xantinooxidasa. Precursor también de compuestos compuestos presentes presentes en los nucleósidos nucleósidos y los nucleótidos. nucleótidos. Los tres derivados derivados de xantina xantina de mayor interés en medicina son: cafeína, teobromina y teofilina. Hipoxantina.- Base purínica soluble en ácidos y álcalis que resulta del catabolismo de la adenina y de la inosina (hipoxantosina), y que, a través de la etapa de xantina, es oxidada a ácido úrico. Presente en forma libre libre (en la orina) o en combinación (en los nucleósidos) nucleósidos).. Factor de crecimiento crecimiento (factor X) para algunos microorganismos, antagoniza la acción inhibidora del crecimiento de las sulfamidas. Inosina (Hipoxantosina).- Nucleósido de purina; producto intermedio del metabolismo de las purinas.
4.
FUNDAMENTO
El ácido úrico es oxidado por la enzima específica uricasa generándose alantoína y H2O2, el cual en una reacció rea cción n mediad mediada a por la enzima enzima perox peroxida idasa sa (POD), (POD), reacci reacciona ona con el ácido ácido 3,5-Di 3,5-Diclo clororo-2-H 2-Hidr idrox oxiiBencensulfónico y 4-AAP produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de absorción a 520 nm., en cantidad proporcional a la cantidad de ácido úrico presente en la muestra.
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a.
Ácido úrico Complejo rosado
b.
H2O2 + 4-AAP + 3,5 DCBS Peroxidasa (reacción de oxidación)
Uricasa (reacción de oxidación)
Alantoína + H2O2 Alantoína.- Sustancia derivada de la oxidación del ácido úrico, que está presente en el alantoides, el líquido amniótico y la orina fetal. Se utiliza para estimular la regeneración epitelial de heridas y úlceras.
5.
PROCE ROCED DIMIE IMIENT NTO O Tubo Blanco
Suero (mL) Standard Rvo. de trabajo
----1,0
Tubo Standard --0,025 1,0
M.P. 0,025 --1,0
Mezclar e incubar por 5 minutos a 37ºC. Leer a 520 nm.
6.
CÁLCULOS
[Ácido úrico] = (ABS M.P / ABS STD) x 10
7. VALOR ALORES ES NOR NORMA MALE LES S Varones Varones Mujeres
3,4 mg/dL – 7,0 mg/dL 2,4 mg/dL – 5,7 mg/dL
8. IMPO IMPOR RTANCI ANCIA A CLÍN CLÍNIC ICA A Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el metabolismo de la sustancia que lo orig origin ina a o defec defecto toss de elim elimin inaci ación. ón. La hiperuricemia es típi típica, ca, aunqu aunque e no exclu exclusi siva va,, en la enfermedad de la gota; estudios epidemiológicos indican un alto porcentaje (alrededor del 83%) de pacient pacientes es con niveles niveles de ácido ácido úrico úrico mayore mayoress de 9,0 mg/dL mg/dL desarr desarroll ollan an artritis artritis gotosa gotosa. En tales pacientes, se observan cristalizaciones del ácido úrico y sus sales en las membranas sinoviales de las articulaciones y en los tendones, causantes de las manifestaciones reumatológicas características. En menos proporción (10% a 25% de los casos) es posible encontrar depósitos de uratos en los túbulos o en el tejido tejido inters interstic ticial ial del parénq parénquim uima a renal, renal, con el consec consecuent uente e riesg riesgo o de una insufic insuficienc iencia ia renal renal irreversible en caso de persistir la hiperuricemia. También existen otros desórdenes que transcurren acompañados de hiperuricemia, tales como leucemia, policitemia, mieloma múltiple, intoxicación plúmbica, incluyendo alteraciones medicamentosas en los tratamientos con citostáticos o con tiazidas, Mientras que otros medicamentos (drogas uricosúricas tales como salicilatos y la fenilbutazona) aumentan la excreción del ácido úrico, disminuyendo los niveles séricos del mismo.
