CURVA ESPECTRAL DE LA AZOSULFAMIDA AZOSULFAMIDA MARCO TEORICO
La luz se puede explicar como un conjunto de radiaciones que se mueven por todo el espacio. Aquellas detectables por nuestro ojo corresponden a la luz visible, pero la mayoría son invisibles para nosotros. Estas radiaciones se pueden describir como partículas y como ondas. La descripción como onda se basa en que la luz consta de campos eléctricos y magnéticos que oscilan sinusoidalmente y en forma perpendicular a la dirección de traslación por el espacio.
En cada una de estas ondas, la distancia entre dos crestas (o valles) consecutivas es la longitud de onda, _. El producto de la longitud de onda por f recuencia (el número de ciclos por segundo en unidades Hertz, Hz), es la velocidad de la luz, c (esencialmente la velocidad de la luz en el vacío): c
λv
En cualquier medio material, la velocidad de propagación es inferior a ésta y queda dada por nc = 2.9979X1010 (cm/s), donde n es el índice de refracción del medio. La radiación sólo se absorbe o emite en unidades definidas llamadas fotones. La energía de los fotones es proporcional a la frecuencia de radiación: E = hv donde h es la constante de Planck. El conjunto de radiaciones electromagnéticas se llama espectro electromagnético y es conveniente agruparlas en regiones para poder conocer sus propiedades. En la figura se muestran las zonas del espectro según la clasificación más aceptada. Como se puede observar la zona del visible (radiaciones percibidas por nuestro ojo) es muy pequeña en comparación con la gran amplitud del espectro. Aunque hablamos de una radiación determinada (λ), físicamente es imposible aislar di cha radiación. Siempre podremos obtener un rango de radiaciones pequeño según la exactitud del dispositivo de selección (difractares de radiación y filtros), pero nunca una sola. De la misma manera que no podemos obtener o aislar un punto de una recta, sino un trozo pequeño (un conjunto de puntos).
La espectrofotometría es una técnica que mide la interacción de moléculas con la radiación electromagnética. La luz que se encuentra en la luz visible y la luz ultravioleta de los espectros electromagnéticos presenta una energía de 150- 400 kJmol-1. La energía de la luz es usada para promover electrones de un estado de excitación a otro. Un espectro es obtenido cuando la absorción de luz es medida en función de una frecuencia o longitud. Moléculas con electrones deslocalizados en sistemas aromáticos a menudo absorben la luz a 150-400 nm (ultravioleta) o en la región visible de 400-800 nm.
La espectrofotometría de absorción es usualmente usada con moléculas disueltas en un solvente transparente. La absorbancia de un soluto depende linealmente de la concentración y por consiguiente la espectrofotometría de absorción es ideal para hacer mediciones cuantitativas. La longitud de absorción y la fuerza de absorbancia de una molécula no sólo depende de la naturaleza química, si no del ambiente molecular en donde se encuentre el cromóforo. La espectrofotometría de absorción es por lo tanto una excelente técnica para seguir reacciones de unión a ligando, catálisis enzimáticas y transiciones conformacionales en proteínas y ácidos nucleicos. Las mediciones espectroscópicas son muy sensibles y se requieren pequeñas muestras de material para el análisis.
Ley de Lambert-Beer. La cantidad de radiación electromagnética absorbida por un analito se puede relacionar cuantitativamente con la concentración de dichas sustancias en solución. La transmitancia (T) se define como la fracción de radiación incidente trasmitida por la disolución. Si la potencia radiante que incide sobre la disolución es Po y P la potencia radiante que sale, entonces:
Además, se observa que la potencia de la energía trasmitida disminuye geométricamente (exponencialmente) con la concentración C y con la distancia b recorrida a través de la disolución.
donde k y k´ son constantes de proporcionalidad y combinando ambas y aplicando logaritmos
T=10-a*b*c -log T = a*b*c=A que es la expresión matemática de la Ley de Beer y que indica la relación directa entre la absorbancia de un analito y su concentración en disolución. MATERIALES
- Espectrofotómetro UV/VIS - Fiola 100ml - Pipetas volumétricas - Azosulfamida 1000 ug/ml - Hojas milimetradas
PROCEDIMIENTO
a) Se prepararon disoluciones de 2 ug/ml y 10 ug/ml a partir de una muestra estándar de 1000 ug/ml. 1) Se realizo la preparación de la disolución de 2 ug/ml: Tomando 4 ml de la solución patrón y luego llevado a una fiola de 100 ml se obtuvo una concentración de 4000 ug/ml.
4000 ug ------ 100 ml 200 ug ------ X ml X = 5 ml
Donde X se denota como el volumen necesario que al llevarlo a una fiola de 100 ml se obtiene la concentración de 2 ug/ml.
2) Se realizo la preparación de la disolución de 10 ug/ml: Tomando 10 ml de la solución patrón y luego llevado a una fiola de 100 ml se obtuvo una concentración de 10000 ug/ml.
10000 ug ------ 100 ml 1000 ug ------ X ml X = 10 ml
Donde X se denota como el volumen necesario que al llevarlo a una fiola de 100 ml se obtiene la concentración de 10 ug/ml.
b) Se realizo la medición del espectro de la azosulfamida para ello se utilizó el Espectrofotometro UV/VIS a una longitud de onda de 460 – 600 nm, respectivamente en 15 mediciones.
RESULTADOS
1) Resultados obtenidos por el espectrofotómetro UV/VIS para la dilución de 2 ug/ml en la escala de 460-600 nm Longitud de onda 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600
Absorbancia 0.060 0.066 0.074 0.082 0.089 0.094 0.097 0.098 0.092 0.084 0.073 0.061 0.050 0.042 0.036
Trazabilidad 87.096 85.090 84.918 82.794 81.470 80.537 79.983 79.799 80.909 82.413 84.527 86.896 89.125 90.782 92.044
1) Resultados obtenidos por el espectrofotómetro UV/VIS para la dilución de 10 ug/ml en la escala de 460-600 nm Longitud de onda 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600
Absorbancia 0.161 0.170 0.224 0.259 0.291 0.317 0.331 0.332 0.314 0.280 0.233 0.184 0.139 0.105 0.082
Trazabilidad 69.023 67.608 59.703 55.080 51.168 48.194 46.665 46.558 48.528 52.480 58.479 65.463 72.610 78.523 82.794
DISCUSIONES
Durante el preparado a la solución estándar de 1000 ug/ml no se realizó ningún proceso adicional durante la disolución a 2 ug/ml y 10 ug/ml, A menudo son necesarios pasos de separación (filtración, extracción con solventes, etc.) porque es posible la presencia de interferencias espectrales, difíciles de eliminar instrumentalmente, siendo necesario un pre tratamiento de la muestra.2 Trabajamos con una longitud de onda de 460-600 nm porque nuestra muestra presenta una coloración inicial azul oscuro por ello, Las mediciones de absorbancia se hacen en la zona de longitudes de onda donde se espera que absorba la sustancia problema. Si se trata de sustancias coloreadas, las mediciones se realizan en la zona visible del espectro electromagnético (380 a 800 nm). En el caso de sustancias no coloreadas, las mediciones se realizan en la región ultravioleta del espectro electromagnético (200 a 380 nm) 3 CONCLUSIONES
Durante el manejo de la práctica se obtuvieron los valores de absorbancia y trazabilidad del espectro de la azosulfamida. Se desarrollo la curva espectral de la azosulfamida para un rango de 460 -600 nm debido a que es una sustancia coloreada cuyo rango de medida ronda los 380-800 nm. BIBLIOGRAFIA
1.- Arenas I. Espectrofotometría de absorción. Universidad Nacional Autónoma de México. México. 2004. 2.- Alberto de J. Estudio por espectrofotometría uv-vis de la reacción entre los iones cianuro y picrato. un ejemplo práctico de aplicaciones analíticas y estudios cinético. Universidad de Los Andes Venezuela. 2009. .
3.- Martínez H. Técnica de Análisis Espectrofotométrica de Antocianinas en Materias P rimas de la Región de Ayacucho. Ayacucho. Perú. 2015.
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
EAP CIENCIA DE LOS ALIMENTOS
TEMA: Curva Espectral de la Azosulfamida (informe de practica)
CURSO: Catedra De Química Analítica Instrumental
Lima – Perú 2017
