aerobios mesofilos

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA, UNAN- MANAGUA INSTITUTO POLITÉCNICO DE LA SALUD “LUIS FELIPE MONCADA” DEPARTAMENTO DE BIONALISIS CLÍNICO Y MICROBIOOLOGIA LICENCIATURA LICENCIATURA EN MICROBIOLOGIA

ASIGNATURA: Microbiología ambiental e industrial

TEMA: Recuento de aerobios mesófilos

DOCENTE: María Inés Jirón

ELABORADO POR : -Mabel Hernández Pilarte -Álaro !bando "rizuela -#ran$ %antamaría &ezama -'arlos Medrano (uido

Managua) *icaragua +, de mao del ./+0

OBJETIVOS

•

1eterminar la 2resencia de microorganismos iables en su2erficies inertes  ambiente con o sin tratamiento de 3igiene4

•

1etectar la 2resencia de aerobios mesófilos en las mesas) 2uertas) gabac3as  aire del ambiente en el laboratorio4

•

52licar los métodos de recuento 2ara aerobios mesófilos más adecuados) seg6n la su2erficie o ambiente 7ue se aa a analizar4

•

Realizar la estimación de la cifra de microorganismos 2resentes en la su2erficie o ambiente analizada4

INTRODUCCION

8l control microbiológico de su2erficies  del ambiente 3a tomado gran im2ortancia en los 6ltimos tiem2os 3asta llegar a ser un re7uisito obligatorio en los diferentes sectores de la industria  2roducción de alimentos) 8sta tiene como finalidad la identificación de microorganismos 7ue 2odrían alterar las 2ro2iedades del 2roducto final al estar 2resentes en maores cantidades delas 2ermitidas) eitando así 7ue este 2ueda causar un da9o a las  2ersonas 7ue trabaan en estas instalaciones  al P6blico en general4 &a contaminación de su2erficies  del ambiente a 2artir del aire) es im2ortante tanto 2or  razones sanitarias como económicas4 5lgunos organismos 2atógenos es2ecialmente los causantes de infecciones res2iratorias) 2ueden llegar 2or medio del aire a los em2leados de industrias alimenticias  a los mismos alimentos4 8l n6mero total de microorganismos en áreas como industrias de alimentos) zonas de 2roducción  de gran afluencia de 26blico) son las más im2ortantes dado el 2otencial de riesgo 2or la alta 2resencia de microorganismos en el ambiente4

PRACTICA DE LABORATORIO

8n la 2ráctica de laboratorio se realizó el recuento de aerobios mesófilos 2resentes en el ambiente  en las su2erficies de mesas) 2uertas  gabac3as de los estudiantes 2resentes en la 2ráctica utilizando el método de sedimentación 2or graedad  el metodo del 3iso2o en  2lacas de agar 2late count4

Rece!"# $e %e&#'(#) *e)+(#) .RAM/ e! e %*'(e!"e, *e$(%!"e % "0c!(c% $e )e$(*e!"%c(+! 1#& 2&%3e$%$4 8l método de sedimentación en 2laca Petri 3a sido el más am2liamente utilizado las 2lacas con medio de cultio estéril) 2ermanecen abiertas durante determinados 2eriodo de tiem2o)  2ermitiendo la sedimentación de los microorganismos4 8ste método es sencillo  económico4 ;ienen la entaa de 7ue se 2ueden identificar de los cultios los microorganismos iables) 2ero su inter2retación es difícil 2or7ue no 2ueden relacionarse con el olumen del aire muestreado4 &a de2osición aría con el tama9o  forma de microorganismo) la elocidad  la turbulencia del aire4 1urante la 2ráctica se utilizaron < 2lacas de agar 2late count) las cuales fueron colocadas en dos 2untos diferentes del laboratorio4 ;res de las 2lacas fueron colocadas frente a la corriente del aire acondicionado) con tiem2os diferentes de e=2osición) +/) ./  >/ minutos res2ectiamente4 &as dos 2lacas restantes fueron colocadas bao los dos laamanos del laboratorio con un tiem2o de e=2osición de ./ minutos4 ?na ez transcurrido el tiem2o de e=2osición las 2lacas fueron incubadas a >< /' durante .@ 3oras 2ara luego realizar el conteo corres2ondiente4

-

A!5()() $e #) &e)"%$#):

;ranscurridas las .@ 3oras de incubación se realizó el conteo de las unidades formadoras de colonias4

#rente a la corriente de entilación) en tres tiem2os diferentes de e=2osición +/) ./) >/ minutos se obtuieron los siguientes resultados:

67 *(!"#): +/ ?fc4 87 *(!"#): .. ?fc4 97 *(!"#): >, ?fc4

"ao los laamanos A5-"B en un tiem2o de e=2osición de +< minutos se obtuieron los siguientes resultados:

6 *(!"#) A: +. ?fc 6 *(!"#) B: .< ?fc

'on res2ecto a la inter2retación de los resultados) se encontró en la bibliografía 7ue no es correcto establecer un rango en donde se afirme 7ue un ambiente está lim2io o contaminado) 2or7ue el método de sedimentación es un claro método cualitatio) a lo sumo semicuantitatio  no es 2osible com2arar resultados entre diferentes salas o con análisis 7ue difieren en la fec3a de su realización) inclusie en una misma áreaC 2or lo 7ue no es estandarizable  las arianzas son tan altas 7ue desirt6an cual7uier correlación4 ?n claro eem2lo de esto son unos alores de referencia encontrados en la Deb) en donde se sugiere 7ue un ambiente mu lim2io 2ara una sala de 7uirófanos de tener alores menores a +/ ?#' E 2laca) un ambiente lim2io +/ F +// ?#'E 2laca  un ambiente ace2table entre +//- .// ?#'E 2laca4 %e cree 7ue no es correcto emitir este ti2o de resultados) 2uesto 7ue se 2uede obtener un crecimiento) 2or eem2lo menor a +/ ?#'E2laca) 2ero con 2resencia de un 2atógeno 2eligroso) desirtuando así el 3ec3o de 7ue

este sea un ambiente mu lim2io4 Para establecer estos criterios se debe realizar un conteo en medios diferenciales 7ue auden a la identificación de los microorganismos) 2ara así determinar el grado de contaminación del ambiente4 Para 2oder emitir un uicio sobre la calidad microbiológica del aire o ambiente de una sala) se re7uiere tener en cuenta el lugar de donde 2roienen las muestras  el riesgo 7ue im2lica la 2resencia de determinados microorganismos) de2endido de las actiidades 7ue allí se realicen4

Rece!"# $e %e&#'(#) *e)+(#) .RAM/ e! )1e&(c(e) ; 2%'%c<%), *e$(%!"e % "0c!(c% $e <()#1#4 8sta técnica se 2uede utilizar en su2erficies 7ue sean regulares) lisas) 2ulidas etc4 'onsiste en frotar un a2licador de madera u otro material de algodón A3iso2oB estéril) 3umedecido con la solución diluente 7ue recoge la flora microbiana en un área determinada 2ara finalmente sus2enderla en el diluente4 1e inmediato se coloca el 3iso2o en un tubo 7ue contiene una cantidad conocida de diluente con neutralizante) si se re7uiere4 %e usa neutralizante cuando la su2erficie a controlar 2osee alg6n desinfectante4 &os diluentes usuales sonC agua 2e2tonada al /) + G) solución salina 2e2tonada) solución reguladora de fosfatos) etc4 %i es necesario se realizan diluciones decimales  la siembra en 2lacas será a 2artir de estas AI%!) .//@B4 8l método del 3iso2o tiene mu baa re2roducibilidad4 %in embargo) estos ensaos) realizados en forma reiterada) siguiendo las instrucciones del método  contando con un alor normatio) es 2osible decidir sobre el niel de contaminación 7ue 2realece sobre una su2erficie  son mu 6tiles 2ara conocer cuando se está trabaando normalmente  2ara eentualmente 2oder detectar desíos  establecer meoras) si es necesario) al  2rocedimiento de lim2ieza  desinfección4 %eg6n la *orma !ficial Me=icana *!M-/,>-%%5+-+,,@) el rango ace2table 2ara aerobios mesófilos es  @// ?#'Ecm. o unidad4

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MATERIALES

;ubos con ta2ón de rosca conteniendo +/)/ m& de solución diluente4 Hiso2os estériles en sobres de 2a2el manila o tubos de ensao4 %e 2ueden conseguir en forma comercial4 Plantillas de 2a2el aluminio de +.)/ cm 2or lado con un cuadro de <)/ = <)/ cm recontado en el centro  esterilizadas dentro de 2a2el manila4

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TOMA DE LA MUESTRA

Muestreo de su2erficies4 'olocar la 2lantilla o bien delimitar un área a2ro=imada de <)/ = <)/ cm ó +/)/ = +/)/ cm sobre la su2erficie 7ue se a a muestrear4 %acar el 3iso2o asé2ticamente4 %i la su2erficie está seca) 3umedecer  el 3iso2o en la solución diluente  2resionar contra la 2ared del frasco o tubo con un moimiento de rotación 2ara 7uitar el e=ceso de lí7uido) en caso contrario no es necesario 3acer esto4 'on el 3iso2o inclinado) frotar la su2erficie delimitada 2or la 2lantilla en > sentidos diferentes A3orizontal) ertical  oblicuoB4 Regresar el 3iso2o al tubo o frasco  rom2er  la 2arte 7ue estuo en contacto con los dedos4 8ste método también 2uede utilizarse 2ara buscar 2atógenos) substituendo la solución diluente 2or el caldo de cultio adecuado4

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C=LCULO Y E>PRESIÓN DE RESULTADOS

S1e&(c(e): 'ontar todas las colonias 7ue se desarrollen en las caas) 3acer el cálculo de las colonias 2or m&) multi2licar 2or el olumen de diluente em2leado  diidirlo entre cm. de la su2erficie4 &os resultados se e=2resan como ?#'Ecm.4

8n la 2ráctica del laboratorio se tomó muestra de las mesas de trabao) las 2uertas del laboratorio  las gabac3as de los estudiantes 7ue asistieron a la 2ráctica4 &a muestra se sus2endió en +/ ml de diluente)  se 2rocedió a sembrar 2or du2licado en agar Plate 'ount) los 2latos fueron incubados a >< /' 2or .@ 3oras 2ara 2osteriormente realizar el conteo4 %e obtuieron los siguientes resultados:

G%'%c<%: Resultado del conteo 2or du2licado @.@
Pe&"%: Resultado del conteo 2or du2licado +@>+L
Me?%: Resultado del conteo 2or du2licado .+.+,LE. ./@ ?fc4 ./@ ?fc K +/ ml E .< cm.  . ?fcEcm.

%eg6n la *orma !ficial Me=icana *!M-/,>-%%5+-+,,@) todos los conteos realizados 2ara  2ara aerobios mesófilos en mesa) 2uerta  gabac3a están dentro del rango de ace2tación cuos conteos fueron  @// ?#'Ecm.4