Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
I PENDAHULUAN
Bab ini ini akan meng mengur urai aika kan n meng menge enai nai : (1) (1) Latar atar Bela Belaka kang ng Perc Percob obaa aan, n, (2) (2) Tujua ujuan n Perc Percob obaa aan, n, (3) (3) Prin Prinsi sip p Percobaan, dan (4) eaksi Percobaan! 1.1. Latar Belakang Belakang Percobaan Percobaan
"ata "ata prot protei ein n bera berasa sall dari dari prot protos os atau atau prot proteo eoss #ang #ang berart berartii pertam pertama a atau atau utama! utama! Protei Protein n merupa merupakan kan kompo komponen nen penting atau komponen utama sel $e%an atau manusia! &le$ karena sel itu merupakan pembentuk tubu$ kita, maka protein #ang terdapat dalam makanan ber'ungsi sebagai at utama dala dalam m pembe pembent ntuk ukan an dan dan pert pertum umbu$ bu$an an tubu tubu$ $ (Poe (Poedj djia iadi di,, 21)! *ole *oleku kull prot protei ein n adal adala$ a$ sebu sebuag ag poli polime merr dari dari asam asam + asam asam amin amino o #ang #ang diga digabu bung ngka kan n dneg dnegan an ikat ikatan an + ikat ikatan an pept peptid ide! e! sam sam amin amino o merup merupak akan an unit unit dasa dasarr dari dari stru strukt ktur ur protein! -emua asam + asam amino mempun#ai sekurang + kura kurang ngn# n#a a satu satu gugu guguss amin amino o (./0 (./0 2) pada pada posi posisi si al'a al'a dari dari rabtai karbon dari suatu gugusan karboksil (.&&0) menurut Tilman, (1)! 1.2. Tujuan Tujuan Percobaan
Tujua Tujuan n perco percobaa baan n dari dari uji 5antop 5antoprot rotein ein #aitu #aitu untuk untuk mengeta$ui adan#a asam amino aromatic dalam protein 1.3. Prinsi Percobaan
Prinsip percobaan dari 6ji 5antoprotein #aitu berdasarkan adan#a reaksi nitrasi intiii benene #ang terdapat pada pada mole moleku kull prot protei ein n se$i se$ing ngga ga meng meng$a $asi silk lkan an sen# sen#a% a%a a kompleks ber%arna kuning jingga!
1.!. "eaksi Percobaan
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
#a$bar 1. "eaksi Percobaan Uji %antorotein
II &ET'DE PE"('BAAN
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Ba$an #ang digunakan, (2) Pereaksi #ang digunakan, (3) lat #ang digunakan, dan (4) *etode Percobaan! 2.1. Ba)an *ang +igunakan
Ba$an #ang digunakan untuk percobaan 6ji 5antoprotein adala$ sampel B ('enol), 7 (a8uadest), dan (telur pu#u$)! 2.2. Pereaksi *ang +igunakan
Pereaksi #ang digunkan 5antoprotein adala$ 0/& 3 pekat!
untuk
percobaan
6ji
2.3. Alat *ang +igunakan
lat #ang digunakan pada percobaan 6ji 5antoprotein adala$ tabung reaksi, pipet tetes, gelas kimia, penjepit tabung reaksi, dan waterbath! 2.!. &eto+e Percobaan
#a$bar 2. &eto+e Percobaan Uji %antorotein
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
III HA,IL PEN#A&ATAN
Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) 0asil Pengamatan, dan (2) Pemba$asan! 3.1. Hasil Penga$atan Tabel 1. Hasil Penga$atan Uji %antorotein
-ampe l
Pereaks i
B
0/&3 pekat
-ampel
Bening
9arna -etela$ dipanaska n &ran#e
Bening
Tidak ber%arna
7
Puti$ kekuninga n
"uning
; /a&0
Larutan coklat bagian atas oran#e Tidak ber%arn a Larutan kuning, gumpala n kuning
0asi l
0asi l
;
;
.
.
;
;
-umber : 0asil : /imas dan ose, "elompok 7, *eja 13, 21
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
#a$bar 3. Hasil Penga$atan Uji %antorotein
3.2. Pe$ba)asan
=ari $asil percobaan uji 5antoprotein ter$adap sampel B ('enol), 7 (a8uadest), dan (telur pu#u$) sampel #ang mengandung asam amino aromatic adala$ sampel B ('enol) dan (telur pu#u$)! 6ji >antoprotein merupakan uji kualitati' pada protein #ang digunakan untuk menunjukkan keberadaan gugus benene (-umardjo, 2)! *etode analisis protein ini menggunakan larutan asam nitrat pekat, #ang merupakan sala$ satu asam pekat! Larutan asam nitrat ini ditamba$kan dengan ke dalam larutan protein! -etela$ kedua larutan tersebut tercampur maka akan terjadi reaksi ini se$ingga terbentuk endapan ber%arnaputi$! Langka$ selanjutn#a dilakukan pemanaskan ter$adap larutan tersebut, pada ta$apan ini endapan ber%arna puti$ akan beruba$ %arna menjadi kuning! eaksi peruba$an #ang terjadi tersebut disebut nitrasi pada inti dari benena #ang terdapat pada molekul dari protein! 0asil positi' pada uji >antoprotein adala$ munculn#a gumpalanatau cincin %arna kuning (-umardjo, 2)!
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
Pada uji ini, digunakan larutan asam nitrat #ang ber'ungsi untuk memeca$ protein menjadi gugus benena! sam amino #ang menunjukkan reaksi positi' untuk uji ini, #aitu t#rosin, p$enilalanin dan tr#ptop$an!Protein #ang mengandung residu asam amino dengan radikal 'enil dalam struktur kimian#a (protein #ang mengandung asam amino 'enilalanin atau tirosin) jika ditamba$kan dengan asam nitrat pekat akan terbentuk gunpalan %arna puti$ (-umardjo, 2)! Pada pemanasan, %arna gumpalan puti$ tersebut akan beruba$ menjadi kuning #ang ak$irn#a beruba$ menjadi jingga jika ditamba$ dengan larutan basa! -ebenarn#a, proses ini dapat terjadi jika kulit terkena asam nitrat pekat, #ang segera menjadi kuning karena terjadin#a proses nitrasi inti benena pada asam amino pen#usun kulit! Pada sen#a%a #ang bukan asam amino akan memberikan $asil negati', seperti kolagen dan gelatin (-umardjo, 2)! /itrasi adala$ reaksi substitusi atom 0 pada gugusbenena ole$ gugus nitro (/& 2)! Pereaksi #ang digunakanadala$ asam nitrat pekat (0/& 3)! -en#a%a #ang terbentukmemiliki nama nitrobenena (Pudjaatmaka,22)! sam amino aromatik adala$ asam amino #ang mempun#ai gugus benena, suatu sen#a%a dikatakan aromatik apabila memenu$i aturan 0?"7L! sam amino aromatik terdiri dari 'enilalanin, tirosin dan tripto'an! "etiga asam amino ini disebut asam amino esensial #aitu, asam amino #ang $arus didatangkan dari luar tubu$ dan diperlukan ole$ mak$luk $idup sebagai pen#usun protein atau sebagai kerangka molekul.molekul penting! a disebut esensial bagi suatu spesies organisme apabila spesies tersebut memerlukann#a tetapi tidak mampu memproduksi dan mesintesin#a sendiri atau selalu kekurangan asam amino #ang bersangkutan! -ebagian besar asam amino ini $an#a
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
dapat disintesis ole$ sel tumbu$an, sebab untuk sintesisn#a memerlukan sen#a%a nitrat anorganik (*arl#a,212)! *enurut (=a%n,2) Berdasarkan rantai sisi (gugus . n#a), asam amino dapat dikelompokkan menjadi beberapa bagian, #aitu : 1! @olongan sam mino dengan @ugus /on Polar dan li'atik Termasuk dalam golongan non polar karena asam. asam amino ini membentuk suatu kelompok di dalam air untuk meng$indari terjadin#a kontak dengan air ($idro'obik)! onto$n#a : @lisin, lanin, Prolin, Aalin, Leusin, soleusin 2! @olongan sam mino dengan @ugus romatik -emua golongan asam amino ini memiliki cincin pada rantai sampingn#a! onto$n#a : P$enilalanin, T#rosin, Tr#ptop$an 3! @olongan asam amino dengan gugus Polar, Tidak Bermuatan sparagin merupakan deriat dari asam aspartat dan @lutamin adala$ deriat dari asam glutamat! @ugus karboksil pada asam.asam amino tersebut digantikan ole$ gugus terminal amida #ang tidak bermuatan pada p0 C! -erin dan treonin mempun#ai gugus $idroksil ali'atik #ang juga tidak bermuatan! onto$n#a : sparagine, @lutamin, -erine, T$reonine 4! @olongan asam amino dengan gugus mengandung -ul'ur *eit$ionine dan #stein merupakan anggota dari golongan ini, karena keduan#a memiliki atom belerang (-) pada rantai sampingn#a! Pada #stein terdapat gugus sul'$idril sedangkan pada *eit$ionin atom - berikatan dengan +03! onto$n#a adala$ *eit$ionine, #stein
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
=ua asam amino #ang mengandung gugus #ang bermuatan negati' pada p0 C #aitu asam aspartat dan asam glutamat #ang keduan#a mempun#ai dua gugus karboksilat! onto$n#a adala$ spartate, @lutamate ! @olongan asam amino dengan gugus bermuatan Positi' (basa) sam.asam amino #ang termasuk dalam golongan ini adala$ lisin, arginin, dan $istidin #ang bersi'at sangat polar! Lisin mengandung tamba$an gugus amino kedua (. /03;) pada rantai ali'atikn#a! rginin mengandung gugus guanidine bermuatan positi'! 0istidin mengandung gugus imidaol #ang mengion sedikit! onto$n#a adala$ rginin, Lisine, 0istidine!
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
I- E,I&PULAN DAN ,A"AN
Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) "esimpulan, dan (2) -aran! !.1. esi$ulan
=ari $asil percobaan uji 5antoprotein ter$adap sampel B ('enol), 7 (a8uadest), dan (telur pu#u$) sampel #ang mengandung asam amino aromatic adala$ sampel B ('enol) dan (telur pu#u$)! !.2. ,aran
Praktikan dapat melakukan uji ini dengan penu$ ke$ati. $atian dan ketelitian, karena keduan#a sangat penting apabila ingin $asil #ang sesuai!
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
DA/TA" PU,TAA
=a%n, *ark!, (2)! Bioki$ia ke+okteran +asar 0 ,ebua) en+ekatan klini. 7@ : Dakarta! Asa$ A$ino ! *arl#a, ita! (212)! $ttp:EEritamarli#a22'kipuns#ia$!blogspot!comE212E11E asamamino.aromatik!$tml! =iakses : 2.4.21
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
LA&PI"AN
-oal "uis 1! Tujuan prinsip uji millon 2! Tujuan prinsip uji biuret 3! sam amino aromatic dan gugus aromatic adala$ 4! Tujuan prinsip >ant$oprotein
Laboratorium Biokimia Pangan Xantoprotein)
Protein I (Uji
Tujuan percobaan dari uji 5antoprotein #aitu untuk mengeta$ui adan#a asam amino aromatic dalam protein Prinsip percobaan dari 6ji 5antoprotein #aitu berdasarkan adan#a reaksi nitrasi intiii benene #ang terdapat pada molekul protein se$ingga meng$asilkan sen#a%a kompleks ber%arna kuning jingga!
