LAPORAN RESMI PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI
UJI
POTENSI ANTIBIOTIK
DOSEN PENGAMPU PENGAMPU Ganet Eko P. M.Si., Apt
Kelompok
: V (Lima)
Anggota
: 1. Ayesha Zulkha
(21154645A)
2. Kris Ayu i!aya i!ayaningr ningrum um (211546 (2115466"A 6"A)) #. $. %kh&an %kh&anu'i u'in n Ala Alaris ris
(2115 (2115466 466*A *A))
4. +en'ri ,-antrio
(21154664A)
PROGRAM STUDI S-1 FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SETIA BUDI SURAKARTA UJI POTENSI ANTIBIOTIK
I. TUJUAN
Suatu uji untuk mengetahui potensi atau kekuatan dari suatu antibiotik
II. DASAR TEORI
Antibiotika adalah zat-zat kimia yang dihasilkan mikroorganisme hidup terutama fungi dan bakteri tanah, yang memiliki khasiat mematikan atau menghambat pertumbuhan banyak bakteri dan beberapa virus besar, sedangkan toksisitasnya bagi manusia relatif kecil. Kegiatan antibiotika untuk pertama kalinya ditemukan oleh sarjana Inggris dr.Aleander !lemming pada tahun "#$% &penisilin'. (etapi penemuan ini baru diperkembangkan dan dipergunakan dalam terapi di tahun "#)" oleh dr.!lorey &*ford'. Kemudian banyak zat lain dengan khasita antibiotik diisolir oleh penyelidik-penyelidik di seluruh dunia, akan tetapi berhubung dengan sifat toksisnya hanya beberapa saja yang dapat digunakan sebagai obat. +etode penetapan potensi antibiotik dengan cara difusi agar merupakan cara yang sederhana dan hasil yang sederhana yang diperoleh cukup teliti, prinsip penetapannya yaitu mengukur luas hambatan pertumbuhan mikroba uji yang disebabkan zat baku standar zat yang diuji. alam range konsentrasi tertentu, terdapat hubungan yang linier antara peningkatan konsentrasi dengan luas daerah hambatan pertumbuhan mikroba uji. +etode difusi, metode ini menggunakan piringan yang berisi cairan antibiotik diletakkan pada media Agar yang telah ditanami mikroorganisme yang akan berdifusi pada media Agar tersebut. Area jernih
mengindikasikan
adanya
hambatan
pertumbuhan
mikroorganisme oleh antibiotik pada permukaan media Agar. !aktor-faktor yang dapat mempengaruhi luas daerah hambatan dengan cara difusi ini adalah sebagai berikut a. Ingredient medium pertumbuhan b. emilihan medium pertumbuhan c. engaruh p/ d. 0kuran inokulum
e. Stabilitas mikroorganisme f. Aktivitas antibiotik g. 1aktu inkubasi h. (eknik dan keterampilan analis Sebagai pencandang larutan antibiotik pada cara difusi agar, dapat digunakan silinder gelas2logam, kertas cakram, dan cetak lobang.
III. ALAT DAN BAHAN ALAT
BAHAN
". 3nkas
". +edia +/A &+ueller-/inton Agar'
$. 4oor prop
$. Antibiotik 5hroramfenikol
6. 5a7an petri steril
6. 4iakan bakteri &3.5oli'
). (abung reaksi 8. ipet ukur 9. :ampu spirtus ;. enggaris %. Kalkulator
IV. CARA KERJA
". Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan. $. Ambil ca7an petri bagi menjadi 9 daerah. 6. Semua alat dan bahan dimasukkan ke dalam 3nkas. ). sebelum digunakan. ;. 4uat lubang dengan =boor prop> masing-masing di 9 daerah. %. ipet masing-masing antibiotik sebanyak 8?@l masukkan pada tiap lubang. #. ibungkus, lalu inkubasi pada suhu 6; ?5 selama $) jam. V. HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL:
Kelompok &5a7an petri' " $ 6 ) 8 9 D
Sampel S II
S III
&$??'
&)??'
)?? $9? 68? 66? 6?? 66? "#;?
)8? 6)? 6?? 6;? 6)? )"? $$"?
S I
Std I
Standar Std II
Std III
&9??'
&$??'
&)??'
&9??'
)8? $%? )?? 6%? 6?? 6$? $"6?
68? $9? 6?? 6)? $$? 69? "%6?
6%? "?? 6?? 66? )?? 6?? "%"?
6#? $)? 68? 68? 66? 6)? $???
PERHITUNGAN RUMUS
a.' B :og potensi B b.' otensi antibiotik B antilog "??C c.'
b=
d.' e.'
Lsp − Lstd × n× h (d − 1) ×∑ I std Ystd = n×d std Ystd = ∑ n× d
Keterangan Sp sampel Std standar D
sigma jumlah
n
jumlah ca7an petri
d
jumlah pengenceran
I
log tingkat dosis log $B ?.6?"?
/
jumlah jenis antibiotik
PENYELESIAN
∑ sp = ∑ spI + ∑ spII + ∑ spIII + ∑ stdIII std stdI ++ + 21# sp==∑ 1"/ 221 ∑∑ ∑ stdII ==1*# + 1*1 std sp Lsp 6#1 ∑∑ =∑ spIII +−2 ∑ spI = 564 ∑ std Lstd = 21# + 1"/ Lsp = ∑ stdIII − ∑ stdI a.' b.'
Lsp = 16 − 1*# Lstd = Lsp 2 − Lstd b= =− Lstd ( d 1/ 1) × I × sp n×h ∑ = Ysp16. n+×1/. d b= (# − 1) × .6#1 0#.1. × 6 × 2 Ysp = b = 4506* 6×# Ysp = #5055
c.'
∑ std Ystd = d.' n × d Ysp − Ystd R = b 564 Ystd = # 0## e.' otensi antibiotik B R = #50556−×#1# Ystd =45 #1# 0## 06* antilog "?? C R = 0*14* B antilog &?,%")%' "??C B 98$,%6C
PEMBAHASAN
ercobaan ini bertujuan untuk menentukan besarnya potensi antibiotik
sampelterhadap
antibiotika
standar.
Suatu
antibiotika
memerlukan konsentrasi tertentu agar dapat menjalankan fungsinya yaitu sebagai bakteriostatik atau bakteriosida. otensi yang diberikan menurut farmakope haruslah #8C - "?8C, di luar itu berarti antibiotik sampel tidak memenuhi syarat untuk dapat diedarkan di pasaran. Syarat penggunaan biakan bakteri yang dipakai adalah harus biakan murni &pure straired'. +aksud dari biakan murni adalah bakteri yang diambil dari alam secara langsung kemudian dibiakkan, bukan dari bakteri yang diisolasi dari laboratorium klinis &sampel darah, feses, urin, dan sebagainya'. Suspensi bakterinya adalah Escherichia coli karena menurut farmakope dan literatur yang ada antibiotik kloramfenikol sensitif terhadap bakteri Escherichia coli. engisian antibiotik dilakukan di dekat api, agar tetap aseptis. (etapi jangan sampai tip pada mikropipet ikut terbakar karena akan mempengaruhi jumlah larutan yang diambil. engisian antibiotik juga harus dengan hati-hati, jangan sampai antibiotik keluar dari lubang reservoir agar hasil yang diperoleh maksimal. ada saat meneteskan antibiotik harus tepat pada lubang, dan lubang yang dibentuk harus bulat agar antibiotik berdifusi sempurna dan zona yang dihasilkan juga bulat &diameter yang dihitung mudah'. Setelah semua lubang terisi, ca7an petri harus dibungkus dengan koran dalam keadaan tidak dibalik,kemudian diinkubasikan pada suhu 6; ?5 yang merupakan suhu optimum pertumbuhan bakteri dengan 7aktu selama $) jam dimana pada 7aktu ini pertumbuhan bateri sedang dalam fase log dan terjadi
pertumbuhan yang optimal. ada saat inkubasi, ca7an petri tidak boleh dibalik karena antibiotik yang ada di dalamnya bisa tumpah sehingga tidak terdifusi sempurna pada daerahnya. otensi B antilog + "??C otensi antibotik kloramfenikol, dan diperolehlah nilai potensi antibiotika
tersebut
98$,%6
ari
besar
potensi
antibiotika
kloramfenikol ini menurut literatur pada farmakope belumlah layak untuk dijual di pasaran karena potensinya lebih dari syarat yang brlaku yaitu #8C-"?8C.
VI. KESIMPULAN
4esarnya potensi
antibiotika
kloramfenikol
dapat
ditentukan
dengan mebandingkannya dengan larutan antibiotika standar 2 baku, sehingga diperolehlah nilai potensi antibiotik kloramfenikol tersebut sebesar 98$,%6C. DAFTAR PUSTAKA
7idjoseputro,. $??8. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Eakarta jambatan. itjen *+."#;#.!armakope Indonesia.3disi III.ep.Kes.I.Eakarta. Subandi. $??#. Dasar-Dasar Mikrobiologi. 4andung
