Objetivos:
Aprender morfología de bacterias bacterias Conocer las técnicas de siembra, medios medios de cultivo y las condiciones para el crecimiento las bacterias Conocer la pureza de las técnica t écnica de siembra de microorganismos por medio de tinciones diferenciales Estría ondulada
Diagrama de Trabajo
Semisólidos Picadura
Asa
Tubos de
Liquido
ensayo Pipeta Pasteur
M. luteus Solida Técnicas de Cultivo de Bacterias
Cuadrantes radial B. sutilis. Estriado continuo Cajas Petri Cuádrate simple
Resultados:
Siembra masiva
Imagen 1.- Siembra en las cajas de petri de X 1
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3
4
5
6
7
8
En los cajas 1 y 2 se utilizo la técnica de cuadrante simple, en los cajas 3 y4 se utilizo la técnica de cuadrante radial, en los cajas 5y6 se utilizo la siembra por estrías y en los cajas 7y 8 se utilizo siembra masiva. Las cajas 1, 3, 5,7 son de la bacteria B.
sutilis y las cajas 2,4,6,8 son de la bacteria M. l uteus.
En los tubos de ensaye de X Tabla 1.- crecimiento de bacterias. Tubo con M. luteus
B. sutilis.
Sin crecimiento Sin crecimiento
Con crecimiento Con crecimiento
Con crecimiento
Con crecimiento
Con crecimiento Con crecimiento
Con crecimiento Con crecimiento
Tubos de medio sólido inclinados Siembra por estría ondulada Siembra por estría recta Tubos de medio semi líquido Picadura Tubos de medio líquido Siembra con asa Siembra con pipeta pasteur
Imagen 2.- siembra en cajas de petri de y. 1
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En los caja 1 y 2 se utilizo la técnica de cuadrante simple, en los caja 3 y4 se utilizo la técnica de cuadrante radial, en los caja 5y6 se utilizo la siem bra por estrías y en los caja 7y 8 se utilizo siembra masiva. Las cajas 1, 3, 5, 7 son de la bacteria B.
sutilis y las cajas 2,4,6,8 son de la bacteria M. l uteus.
En los tubos de ensaye de y Tabla 2.- crecimiento de bacterias. Tubos de medio sólido inclinados Siembra por estría ondulada Siembra por estría recta Tubos de medio semi líquido Picadura Tubos de medio líquido Siembra con asa Siembra con pipeta pasteur
Tubo con M. luteus
B. sutilis.
Con crecimiento Con crecimiento
Con crecimiento Con crecimiento
Con crecimiento
Con crecimiento
Sin crecimiento Con crecimiento
Con crecimiento Con crecimiento
Observaciones Observaciones en el microscopio:
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: M. Luteus Aumento Total: 1000x Tinción: Tinción gram + Descripción: Se observa una morfología de cocos de coloración violeta en una agrupación de tétrada.
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: B. sutilis Aumento Total: 1000x Tinción: Tinción gram + Descripción: se observa una agrupación de cadena de bacilos largos en el cual pose bordes y tiene una coloración morada
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: B. sutilis en medio solido Aumento Total: 1000x Tinción: Tinción gram + Descripción: Se observa agrupaciones tetraédricas de coloración violeta
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: M. Luteus en colonia Aumento Total: 1000x Tinción: Tinción gram + Descripción: Se observa una morfología de cocos, con una agrupación de diplococos en la cual pose una coloración morada
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: M. Luteus en medio liquido Aumento Total: 1000x Tinción: Tinción gram + Descripción: Se observa una morfología de cocos con una agrupación de diplococos en la cual pose una coloración morada, en la parte inferior
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: B. sutilis en medio solido Aumento Total: 400x Tinción: Tinción gram + Descripción: se observa una agrupación de cadena de bacilos re ctos en el cual pose bordes y tiene una coloración morada
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Muestra: B. sutilis en medio liquido Aumento Total: 400x Tinción: Tinción gram + Descripción: Se observan estreptobacilos en la mayor parte de la muestra con una tinción morada
Microscopio: CZ-03 Fecha: 6/09/2012 Tinción: Tinción gram + Muestra: M. Luteus en medio liquido Aumento Total: 400x Descripción: Se observa a un estreptococo la tinción de dicho microorganismo se observación violeta
Análisis o interpretación de resultados: En las cajas de petri de X es posible ver que solo hay crecimiento en cuatro cajas en tres de B. sutilis y una de M. luteus en las de Lorena solo se ve crecimiento en las cajas de con la bacteria B. sutilis. La técnica de cuadrante simple que utilizamos no fue la adecuada, ya que que tomamos un exceso de prueba de microorganismos para se realizara la siembra lo que genero que no se pudieran ver colonias aisladas de microorganismos, solo si acaso se veían colonias en forma de círculos grandes juntos unos con otros y líneas continuas de colonias que crecieron, lo que se debía de observar era un mayor c recimiento en la parte de donde se comienza a sembrar y se tenían que ir difuminando formando pequeñas colonias de microorganismos que pudiéramos contar para reportar. La técnica de cuadrante radial de X fue fue mala ya que se observa una sola línea continua de microorganismos B. sutilus al igual que Lorena se ve una mala técnica de siembra pero al principio se ve una línea uniforme y después se ven colonias de microorganismos que se van haciendo cada vez más pequeñas, (estos errores en todas las siembras se puede deber a que las asas son grandes) se ven tres colonias bien definidas y alrededor de diez colonias se ven encimadas. Las siembras por estrías de X de B. sutilus, ni siquiera tienen forma, pero la siembra de M. luteus se alcanza a apreciar como las colonias se van difuminando y se ven diecisiete colonias lo que hace notable que mejoro la té cnica de siembra de microorganismos. La técnica de siembra de Lorena es mala ya que no se ven colonias aisladas únicamente una línea uniforme. La siembra masiva de X no obtuvo resultados y Y tuvo una mala téc nica de siembra ya que agrego demasiados microorganismos y no se vieron colonias aisladas, solo una gran mancha blanca. En los tubos los cuatro métodos por picadura fueron malos, porque hubo crec imiento en la parte superior de del tubo y no en línea recta como se esperaba. Los demás tubos tuvieron crecimiento de microorganismos adecuadamente las observaciones en el microscopio nos ayudaron a identificar si cada una de las siembra en t ubo resultaron exitosas. Conclusiones:
En esta práctica se aprendió lo que son los medio de cultivos en siembra y lo que son solido, liquido y semisólido, aprendiendo aprendiendo lo que es la morfología y su son la movilidad de 2 bacterias que son M. Luteus y B. sutilis aunque en la practica no tuvimos éxitos con el medio de c ultivo en las cajas petri debido a la exceso de microorganismos en el medio B. sutilis y a la ausencia M. Luteus esto provocado por mal funcionamientos de dicho manejo, pero pudimos comprara e n otras caja petri de otros compañero la morfología y las colonias aisladas que obtiene como resultado de una buena preparación, también pudimos a preciar que en la m ayoría de los siembra y un cultivos bien realizado se comprobó por medio de tinciones de gram que satisface una buena proporcionalidad de pureza debido a que en la tinciones se adquiere un gram desasado, pero no lo mas que hubiera esperado es de nuestro cultivo se hubiese hubiese observado un crecimiento tanto en las cajas como en los tubos. Bibliografía: Romero Cabello, R. Microbiología y Parasitologìa Humana: Bases etiológicas de las enfermedades infecciosas.Editorial Panamericana, México 2001. 2ºed. Pp.257 429. Brooks. Geo F. Microbiología médica. Mc Graw – Hill Interamericana, 2004 Rojas Alberto. 2011. Guía de laboratorio de m icrobiología. Tinciones simples, compuestas y observaciones microscópicas de bacterias. Curso de microbiología general. Universidad Nacional de Colombia sede Palmira. Pág 65
