TITULO: AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS MICROORGANISMOS AMILOLÍTICOS Y CELULOLÍTICOS OBJETIVOS
Aislar y cuantificar microorganismos con actividad celulolítica y amilolítica.
RESULTADOS EQUI EQ UIPO PO ES ESTA TACI CI N 1 2 3 4 5 6 7
1 2 3 5 6 7 8
# DE COLONIAS 5 12 60 4 23 13 11
DILU DI LUCI CI N
10101010101010-
UFC/ UF C/g gB H 5 x 10 1.2 x 10 6 x 10 4 x 10 2.3 2.3 x 10 1.3 x 10 1.1 1.1 x 10
# DE COLONIAS 20 20.5 20.5 40 8 20 68.5 68.5 34
DILU DI LUCI CI N
10101010101010-
UFC/ UF C/g gB H 2 x 10 2.05 x 10 4 x 10 8 x 10 2 x 10 6.85 x 10 3.4 x 10
Tabla 1. Numero de colonias desarrolladas de Microorganismos Amilolíticos y Celulolíticos en UFC/g (Base Húmeda).
EQUIPO
ESTACIÓN
PESO INICIAL
PESO FINAL
DIFERENCIA
% HUMEDAD
1 2 3 4 5 6 7
1
88.7
87.6
1.1
11
2
98.4
97.1
3.4
13
3
109.9
106
3.9
39
5
87
85.5
1.5
15
6
97
93.6
3.4
34
7
96.3
95.5
0.8
8
8
103.6
101.4
2.2
22
Tabla 2. Determinación de Humedad de las muestra de Suelo de las diferentes estaciones.
Registrar los resultados en UFC/g de suelo en base seca de la muestra. EQUIPO
ESTACIÓN
UFC/g (Base Seca) Amilolíticos
1 2 3 4 5 6 7
1 2 3 5 6 7 8
5.61 x 10 6 1.37 x 10 6 9.83 x 10 6 4.70 x 10 6 3.48 x 10 5 1.41 x 10 6 1.41 x 10
UFC/g (Base Seca) Celulolíticos 6
6
2.24 x 10 6 2.35 x 10 6 6.55 x 10 6 9.41 x 10 6 3.03 x 10 5 7.44 x 10 6 4.35 x 10
Tabla 3. Numero de colonias desarrolladas de Microorganismos Amilolíticos y Celulolíticos en UFC/g (Base Seca).
Unidades Formadoras de Colonias (UFC/g) Base Seca de Amilolíticos y Celulolíticos 12000000
10000000 ) a c e 8000000 S e s a 6000000 B (
UFC/g (Base Seca) Amilolíticos UFC/g (Base Seca) Celulolíticos
/ C F 4000000 U
2000000
0
1
2
3
5
Estación
6
7
8
Grafico 1.Se analiza el comportamiento de las UFC/g de suelo en base seca de la muestra para microorganismos Celulolíticos y Amilolíticos.
DISCUSION La presencia de microorganismos celulolíticos y amilolíticos en las muestras de suelo dependen en gran medida a diferentes factores ambientales, entre uno de ellos, la presencia de humedad que contenía el suelo en el momento del muestreo, ya que cada equipo se ubico en una zona distintas del área de muestreo; la diferencia entre ellas puede ser debido al contenido de materia orgánica, que es el principal determinante de la distribución microbiana. La celulosa es un importante constituyente carbonatado de las plantas superiores y probablemente el compuesto orgánico más abundante en la naturaleza; debido a que gran parte de la vegetación que pasa a formar parte del suelo es celulósica. Tanto el almidón como la celulosa son polímeros de la misma unidad constitutiva, la glucosa, pero las peculiaridades individuales de las dos moléculas permiten un ataque microbiano más fácil hacia la primera sustancia mientras que la otra es más resistente a la descomposición microbiana y enzimática. Más aún, a causa de sus diferencias estructurales, los dos carbohidratos estimulan dos poblaciones completamente diferentes. La tasa a la cual se metaboliza los dos carbohidratos está dada por varios factores del medio ambiente, y en los suelos que varían en sus características físicas y químicas poseen marcadas diferencias en su capacidad celulolítica y amilolítica aun en los mismos grupo. En cada una de las estaciones de trabajo de acuerdo a sus modificaciones en sus características físicas y químicas del hábitat puede alterar la composición de la microflora así como la actividad degradadora de la celulosa y el almidón por parte de los microorganismos. Los principales factores del medio ambiente que afectan la transformación de estos dos carbohidratos son: la temperatura, aireación, humedad, pH y la presencia de otros carbohidratos Los medios de cultivo que se utilizaron específicamente para el aislamiento de microorganismos celulolíticos tuvieron una respuesta de crecimiento de microorganismos que son capaces de asimilar y transformar la celulosa en las muestras de cada uno de los equipos, presentándose una mayor UFC/g (Base seca) en la estación 5 donde probablemente se encuentre una mayor población de microorganismos celulolíticos que le son favorables las condiciones ambientales de la zona para poder llevar a cabo la reincorporación de sus unidades constitutivas (glucosa) al reciclaje en el ecosistema, las demás estaciones también
se lleva a cabo solo que cuentan con menor UFC/g (base seca); algunos autores mencionan que los principales géneros microbianos que utilizan la celulosa son: Alternaria, Verticillum, Cellulomonas, Pseudomonas, Nocardia, Micromonospora,
entre otros (Alexander, 1980). En el caso de los medios de cultivo para el aislamiento de microorganismos amilolíticos de acuerdo a los resultados obtenidos se observo crecimiento de colonias que presentaban una zona clara a su alrededor, lo que solemos considerar que estas colonias existen microorganismos que poseen la capacidad de hidrolizar almidón, especialmente aquellos que contienen amilasas (enzimas que hidrolizan almidón), son extracelulares. En cada una de las placas de las diferentes estaciones se observo tal crecimiento de colonias, presentándose una mayor UFC/g (Base seca) en la estación 3, en las demás estaciones también se presentó el aislamiento de microorganismos amilolíticos pero presentando una menor UFC/g (Base seca), donde algunos autores mencionan que los principales géneros microbianos que utilizan almidón son Bacillus, Micrococcus, Streptomyces, Aspergillus,Fusarium entre otros (Alexander, 1980). Resultados finales de análisis microbianos dependen de su expresión a base de peso seco de suelo, esto debido a la importancia a que en el suelo el contenido de humedad puede variar ampliamente en función de tiempo mientras que en el peso seco es constante a través del tiempo. De esta manera se aprecia el gradiente de distribución de los microorganismos en el suelo de las diferentes estaciones. Las muestras se tomaron en días lluviosos, por lo que la humedad en el ambiente era mayor y las condiciones favorables para los microorganismos que transforman a estos dos importantes carbohidratos marcaban diferencias respecto a factores ambientales ya que una de las estaciones que reportaron una mayor densidad microbiana de amilolíticos que es la 3; y cerca de ahí la estación 5 que de acuerdo a los resultados es la que cuenta con mayor densidad microbiana de celulolíticos pero con un porcentaje menor de humedad; corresponden a las estaciones donde se encontraban cerca a las cascadas. La caída del agua generaba brisa que aumentaba la humedad del aire y directamente del suelo, beneficiando las transformaciones de diferentes carbohidratos en especial las con son llevadas por celulolíticos y amilolíticos.
CONCLUSIÓN Los organismo celulolíticos y amilolíticos fueron encontrados en las 7 estaciones que fueron analizadas en mayor o menos U UFC/g (Base Seca), como se observa en la grafica la estación que más organismos celulolíticos obtuvo fue la 5, con 9.41 x 106 UFC/g (Base Seca) y en el caso de los Amilolíticos la estación fue la 3 con 9.83 x 106 UFC/g (Base Seca), si nos vamos a las tablas observaremos que la estación 3 fue la que presento el mayor porcentaje de humedad lo que nos hace pensar que la zona donde recolecto el suelo estaba muy humedecida. En cuanto la zona de colecta de la estación 5 esta colindando con la 3 pero esta presenta menor porcentaje de humedad ambos equipos recolectaron cerca de la cascada, aunque la estación 3 presente un porcentaje alto en humedad se podría tomar en cuenta el día de la colecta en temporada de lluvias. Las muestras de suelo de las diferentes estaciones tienen microorganismos capaces de degradar estos dos carbohidratos importantes en el ambiente, y de esa manera reincorporación de sus elementos constituyentes al reciclaje de nutrientes.
BIBLIOGRAFIA
ALEXANDER, M. 1980. Introducción a la Microbiología del Suelo . AGR EDITOR, S.A. Mexico, D.F.
ATLAS, R., y BARTHA, R. (2008). Ecología microbiana y Microbiología
ambiental . 4ª Edic. Ed. PEARSON Educación, Madrid, España.
CAMPELL, R. 1987. Ecología Microbiana. Ed. LIMUSA. México, D.F.
Henry, Glynn. J., y Heinke, Gary, W. (1999). Ingeniería Ambiental . 2da. Ed.
Ed. PRENTICE HALL HISPANOAMERICANA, S.A. México, D.F.
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS CARRERA: BIÓLOGO
ASIGNATURA:
BACTERIAS Y VIRUS
PRACTICA: “
AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS AMILOLÍTICOS Y CELULOLÍTICOS ”
EQUIPO # 3 : ROJAS CANO ADRIANA CRUZ ESQUIVEL JUAN CANDIDO SIXTOS GUILLERMO JOSÉ ALFREDO
PROFESORA: NORMA LETICIA PESCADOR ELIZONDO
GRUPO 5BV1
México D.F.; Octubre de 2011.
