INDICE
Contenido Introducción ................................. .................................................. ................................... ................................... .................................. .................1
.................................................. .................................. .................................. ....................... ...... 2 PERFIL LIPIDICO................................. Colesterol. .................................. ................................................... ................................... ................................... .................................. .................2 Lipoproteínas Lipoproteínas de baja densidad o LDL .................................. ............................................. ...........2
.............................................. ........... 2 Lipoproteínas Lipoproteínas de alta densidad o HDL ................................... Triglicéridos ................................. .................................................. .................................. .................................. ............................. ............ 3 Determinación colorimétrica de TAG y CHO:........................................... ........................................... 3
................................................. .................................. .................................. .................... ... 6 ENFERMEDADES: ................................ 1.
ARTERIOESCLEROSIS ................................. .................................................. .................................. .................6
2. ACCIDENTE CEREBROVASCULAR : ................................... ........................................... ........7 .................................................. ................................... ............................. ........... 8 3. DISLIPIDEMIAS: ................................. Diabetes mellitus : .................................. ................................................... .................................. .................................. .................... ... 8 Hipotiroidismo : .................................. ................................................... .................................. .................................. ....................... ...... 9 Obesidad patológica: .................................. .................................................. .................................. ................................ ..............9 Enfermedad renal: Síndrome nefrótico: ................................. .................................................. ................. 9 CONCLUSIONES : .................................. ................................................... .................................. .................................. ................... 10 .................................................. .................................. .................................. .................................. ................... 11 Bibliografía .................................
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Introducción El perfil lipídico lo constituye la cuantificación analítica de una serie de lípidos que son transportados en la sangre por los diferentes tipos de lipoproteínas plasmáticas. La determinación de estos parámetros es un procedimiento analítico básico para el diagnóstico y seguimiento de enfermedades metabólicas, primarias o secundarias. Entre estos parámetros analíticos que se pueden determinar están: el colesterol total, el colesterol transportado por las LDL, el colesterol transportado por las HDL, los triglicéridos totales, ciertas apoproteínas particulares etc. El perfil lipídico incluye el colesterol total, el HDL-colesterol, el LDL-colesterol y los triglicéridos. Algunas veces, el informe incluirá valores adicionales calculados como la relación HDL/colesterol o cálculos basados en los resultados del perfil lipídico, edad, sexo y otros factores de riesgo. La cuantificación de colesterol y triglicéridos en suero es un procedimiento analítico básico en el diagnóstico y seguimiento de enfermedades metabólicas, primarias o secundarias. Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares. En esta práctica se realizará la determinación en suero de colesterol total, colesterol-HDL y triglicéridos. Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo). El colesterol de las HDL (colesterol bueno), puesto que representa aquella fracción de colesterol que se transporta al hígado para su metabolización y excreción por vía biliar, no se asocia con riesgo de enfermedad.
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Farmacia y Bioquímica PERFIL LIPIDICO
El perfil lipídico es uno de los exámenes más solicitados en el laboratorio clínico. Incluye la cuantificación de los niveles de colesterol total, triglicéridos, lipoproteínas de alta densidad (HDL) y lipoproteínas de baja densidad (LDL). Los niveles elevados contribuyen a las afecciones cardíacas y los accidentes cerebrovasculares. Colesterol: Se trata de una molécula de carácter lipídico cuya función principal en nuestro organismo es la de formar parte de la estructura de las membranas de las células que conforman nuestros órganos y tejidos. Además interviene en la síntesis de otras moléculas, como las hormonas suprarrenales y sexuales. Principalmente, se produce en el hígado aunque también se realiza un aporte importante de colesterol a través de la dieta. Es por tanto una sustancia indispensable para la vida. Sin embargo, un incremento importante de colesterol en sangre conlleva a su depósito en las arterias. Este es el primer paso para la formación de placas de ateroma, que con el tiempo van a producir ateroesclerosis, es decir, un estrechamiento o endurecimiento de las arterias por depósito de colesterol en sus paredes. Si los depósitos de colesterol se producen sobre las arterias coronarias el riesgo de sufrir un accidente cardiovascular es mucho mayor. Las moléculas de colesterol viajan por el torrente sanguíneo unidas a dos tipos de lipoproteínas: Lipoproteínas de baja densidad o LDL: se encargan de transportar el colesterol a los tejidos para su utilización. Este es el colesterol que, en exceso, puede quedar adherido a las paredes de los vasos sanguíneos por lo que es recomendable mantener bajos los niveles del colesterol LDL. Lipoproteínas de alta densidad o HDL: Recoge el colesterol sobrante de los tejidos y lo traslada hasta el hígado, donde será eliminado. Por tanto, cuanto mayor sean los niveles del colesterol HDL, mayor cantidad de colesterol será eliminado de la sangre. En el Laboratorio de Análisis Clínicos han establecido los siguientes intervalos de normalidad: - Colesterol total
Límite superior deseable por debajo de 200 mg/dl (para menores de 18 años el límite superior óptimo deberá ser de 180 mg/dl)
Hipercolesterolemia límite: 200 – 250 mg/dl
Hipercolesterolemia definida cuando los valores de colesterol superan los 250 mg/dl 9
- Colesterol LDL
Límite superior deseable por debajo de 130 mg/dl
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Límite alto: 130 – 150 mg/dl
Por encima de 150 mg/dl se consideran resultados patológicos
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- Colesterol HDL
El intervalo de normalidad: 40 - 60 mg/dl
o Valores inferiores a 40 mg/dl indican un mayor riesgo de sufrir enfermedad cardiovascular
Triglicéridos: Son compuestos grasos cuya función principal es transportar energía hasta los órganos de depósito. Como el colesterol, los triglicéridos pueden ser producidos en el hígado o proceder de la dieta, y el interés de su medición viene dado por constituir uno de los factores de riesgo cardiovascular, aunque de menor importancia que el colesterol, la hipertensión arterial o el tabaquismo. Desde el punto de vista del laboratorio, se habla de hipertriglicidemia cuando se obtienen valores en sangre superiores a 150 mg/dl. El descenso de los niveles de Triglicéridos se consigue instaurando una dieta baja en hidratos de carbono evitando los azúcares refinados y las bebidas azucaradas. El tabaco, la ingesta de alcohol y el sedentarismo también están implicados en la hipertriglicidemia. Determinación colorimétrica de TAG y CHO: Se utilizan métodos enzimáticos específicos y sensibles, que se basan en la formación deperóxido de hidrógeno. Esta reacción se acopla con una reacción redox catalizada por una peroxidasa, de modo que se produce un sustrato coloreado. El sustrato coloreado presenta un máximo de absorbancia a
λ =
500 nm. Aplicando la ley de Beer-Lambert, y teniendo en cuenta que la
concentración de la cromobase es directamente proporcional a la concentración de sustrato inicial, es posible determinar la concentración inicial de TAG o de CHO en la muestra. Para ello es necesario determinar la absorbancia de una solución patrón (ó estandar), o bien realizar una recta patrón con diferentes concentraciones.
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REACTIVO 1 Tampón GOOD pH 7.5 50mmol/L Tampón p-clorofenol o HBA 2mmol/L REACTIVO 2 Lipoproteinlipasa 150000 U/L Vial enzimas Glicerol Kinasa 500 U/L Glicerol-P-oxidasa 2500 U/L Peroxidasa 440 U/L 4-Aminofenazona o 4- aminoantipirina 0.1 mmol/L ATP 0.1 mmol/L ESTÁNDAR Sol. Triglicéridos 200 mg/dL CONTROL NORMAL Spinreact. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA: 1. Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Estándar
Estándar 10 ul
Muestra Reactivo de trabajo
Muestra
10 ul 1 ml
1 ml
1 ml
2. Mezclar e incubar 5 min a 37ºC ó 10 min a temperatura ambiente. 3. Medir la densidad óptica a 505 nm (490-550), frente al blanco de reactivos. 4. El color será estable durante 30 min. CÁLCULOS Absorbancia de la muestra X Conc. Del estándar = Conc. Muestra Absorbancia del estándar Estándar: 200mg/dL.
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REACTIVO 1 Tampón pH 6.9 90mmol/L Fenol o HBA 26 mmol/L REACTIVO 2 Vial enzimas Peroxidasa 1250 U/L Colesterol esterasa Colesterol oxidasa 300 U/L 4Aminoantipirina 0.4 mmol/L ESTÁNDAR Solución Colesterol 200 mg/dL DESARROLLO DE LA PRÁCTICA: 1. Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Estándar
Estándar 10 ul
Muestra Reactivo de trabajo
Muestra
10 ul 1 ml
1 ml
1 ml
2. Mezclar e incubar 5 min a 37ºC ó 10 min a temperatura ambiente. 3. Medir la densidad óptica a 505 nm (490-550), frente al blanco de reactivos. 4. El color será estable durante 30 min. CÁLCULOS Absorbancia de la muestra X Conc. Del estándar = Conc. Muestra Absorbancia del estándar Estándar: 200mg/dL. DETERMINACION DE HDL: DESARROLLO DE LA PRÁCTICA: 1. Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Estándar
Estándar 10 ul
Muestra Reactivo de trabajo
Muestra
10 ul 1 ml
1 ml
1 ml
2. Mezclar e incubar 5 min a 37ºC ó 10 min a temperatura ambiente. 3. Medir la densidad óptica a 505 nm (490-550), frente al blanco de reactivos. 4. El color será estable durante 30 min. CÁLCULOS HDL COLESTEROL = D.O MURDTRA x F F=0.762/ABSORVANCIA ESTANDAR DETERMINACION DE LDL: 1. Pipetear en tubos de ensayo:
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Farmacia y Bioquímica Blanco
Estándar
Estándar 10 ul
Muestra Reactivo de trabajo
Muestra
10 ul 1 ml
1 ml
1 ml
2. Mezclar e incubar 5 min a 37ºC ó 10 min a temperatura ambiente. 3. Medir la densidad óptica a 505 nm (490-550), frente al blanco de reactivos. 4. El color será estable durante 30 min. CÁLCULOS LDL COLESTEROL= COLESTEROL TOTAL- (DxF) F= 0.624/ABSORVANCIA DEL ESTANDAR EJEMPLO DE ANALISIS LABORATORIAL:
ENFERMEDADES: 1. ARTERIOESCLEROSIS Es una afección, que ocurre cuando se acumulan grasa, colesterol y otras sustancias en las paredes de las arterias. Estos depósitos se denominan placas. Con el tiempo, estas placas pueden estrechar u obstruir completamente las arterias y causar problemas en todo el cuerpo. Eso limita el flujo de sangre rica en oxígeno. La arterioesclerosis puede llevar a problemas graves como:
Enfermedad de las arterias coronarias. Estas arterias llevan sangre a su corazón. Cuando se bloquean, usted puede sufrir una angina de pecho o un ataque cardíaco
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Enfermedades de las arterias carótidas. Estas arterias llevan sangre a su cerebro. Cuando se bloquean, usted puede sufrir un ataque cerebral
Enfermedad arterial periférica. Estas arterias están en sus brazos, piernas y pelvis. Cuando se bloquean, usted puede sufrir adormecimiento, dolor y a veces infecciones
En general, la arterioesclerosis no presenta síntomas hasta que una arteria se estrecha demasiado o por completo. Mucha gente no sabe que la sufre hasta que tiene una emergencia médica. Un examen físico, diagnóstico por imágenes y otro tipo de pruebas diagnósticas puede revelar si usted la sufre. Los tratamientos pueden desacelerar el avance de acumulación de placa. Su médico puede también recomendar procedimientos como la angioplastia para abrir las arterias o cirugía en las arterias coronarias o carótidas. Un cambio en el estilo de vida también puede ayudar. Esto incluye seguir una dieta sana, hacer ejercicio con regularidad, mantener un peso saludable, dejar de fumar y manejar el estrés. Tratamiento farmacológico: Ácido acetil salicílico: antiagregante plaquetario. Niacina:
Reduce TG 35-50%, LDL-C 25%
Aumento de HDL-C 15-30%
Estatinas: Atorvastatina, Paravastatina, Simbastatina.
Reduce LDL –C 35-45%, TG 25% Aumenta HDL –C 5-10%,
IECA: Captopril, enalapril lisinopril y ramipril.
Reducen niveles de Angiotensina II, aldosterona
Vasodilatación
Reducción de la retención de sodio
2. ACCIDENTE CEREBROVASCULAR: Un accidente cerebrovascular sucede cuando el flujo de sangre a una parte del cerebro se detiene. Algunas veces, se denomina "ataque cerebral". Si el flujo sanguíneo se detiene por más de pocos segundos, el cerebro no puede recibir nutrientes y oxígeno. Las células cerebrales pueden morir, lo que causa daño permanente. Hay dos tipos principales de accidente cerebrovascular:
Accidente cerebrovascular isquémico
Accidente cerebrovascular hemorrágico
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El accidente cerebrovascular isquémico ocurre cuando un vaso sanguíneo que irriga sangre al cerebro resulta bloqueado por un coágulo de sangre. Esto puede suceder de dos maneras:
Se puede formar un coágulo en una arteria que ya está muy estrecha. Esto se denomina accidente cerebrovascular trombótico.
Un coágulo se puede desprender de otro lugar de los vasos sanguíneos del cerebro, o de alguna parte en el cuerpo, y trasladarse hasta el cerebro. Esto se denomina embolia cerebral o accidente cerebrovascular embólico.
Los accidentes cerebrovasculares isquémicos también pueden ser causados por una sustancia pegajosa llamada placa que puede taponar las arterias. Tratamiento farmacológico:
Anticoagulantes, como heparina o warfarina (Coumadin), ácido acetilsalicílico (aspirin) o clopidogrel (Plavix).
3. DISLIPIDEMIAS: Las dislipidemias son un conjunto de enfermedades asintomáticas que tienen la característica común de tener concentraciones anormales de las lipoproteínas sanguíneas. Es la presencia de anormalidades en la concentración de lípidos en sangre (Colesterol, triglicéridos, colesterol HDL y LDL). Una primera forma de clasificarlas podría ser en: Primarias, es decir, no asociada a otras enfermedades. Generalmente de origen genético y transmisión familiar (hereditarias), es la forma menos frecuente. Secundarias, es decir vinculadas a otras entidades patológicas, como por ejemplo:1 Diabetes mellitus: •
Es la más frecuente
•
Dos de las complicaciones más importantes de la diabetes son la aterosclerosis y la cetoacidosis que son trastornos del metabolismo lipídico.
•
La insulina activa a la lipoproteinlipasa (LPL), por lo tanto un déficit de insulina pueden conducir a aumentos vertiginosos de los trigliceridos.
•
En la diabetes tipo I bien controlada los lipidos suelen ser normales, pero en una cetoacidosis diabética, la hipertrigliceridemia puede ser grave debida al aumento de VLDL y de quilomicrones.
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En la diabetes tipo II los pacientes son de mayor edad que el tipo I. En estos pacientes la combinación de varios factores como la resistencia a la insulina, la obesidad y la HTA hace que aparezca con frecuencia hipertrigliceridemia.
Hipotiroidismo: •
Es la segunda causa más frecuente de hiperlipidemia secundaria.
•
Hiperlipidemia en el 80-90% de los pacientes con hipotiroidismo.
•
Solo en 8.5% tiene un perfil lipídico normal
•
El fenotipo más frecuente es IIa.
•
El principal mecanismo fisiopatológico de la hiperlipidemia asociada al hipotiroidismo es la acumulación de colesterol LDL debido a una reducción en el número de receptores LDL ( modulado por HT)
•
Disminución en la acción de la LPL
Obesidad patológica: •
En pacientes obesos se encuentra con mucha frecuencia dislipidemias, hipertensión arterial etc.
•
Las alteraciones lipídicas que más frecuentemente aparecen en pacientes obesos son:
•
Hipertrigliceridemia: debido al aumento de partículas de VLDL.
•
Aumento del colesterol total y colesterol LDL.
•
Descenso del colesterol HDL
•
Este incremento es secundario a un aumento del flujo de ácidos grasos libres (AGL) hacia el hígado, a partir del depósito masivo de triglicéridos en el tejido adiposo y por un aumento del aporte exógeno de hidratos de carbono en la dieta.
Enfermedad renal: Síndrome nefrótico: •
Los pacientes afectados de síndrome nefrótico presentan una hipoproteinemia, debido a la proteinuria persistente en los afectados.
•
Como respuesta compensatoria a la hipoproteinemia, el hígado ejecuta una superproducción de VLDL, además se produce un descenso del catabolismo de las LDL y una disminución de la lipoproteinlipasa.
•
La gravedad de la hiperlipidemia es directamente proporcional a la intensidad de la hipoproteinemia del paciente.
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Tratamiento farmacológico: La prescripción del tratamiento farmacológico debe basarse en el análisis de riesgo cardiovascular, es decir, la instauración del tratamiento estará determinada por el riesgo coronario. La terapia farmacológica está justificada en pacientes que se benefician de ella. En la actualidad disponemos de los siguientes fármacos hipolipemiantes:
Estatinas
Resinas de intercambio iónico
Inhibidores selectivos de la absorción de colesterol Ezetimibe
Fibratos
Ácido nicotínico
Ácidos grasos omega-3
CONCLUSIONES:
La determinación de un perfil lipídico tiene gran importancia clínica ya que se puede emplear como un diagnostico primario de ciertas enfermedades, así como también en el seguimiento de algunas enfermedades como: diabetes mellitas, arterioesclerosis, dislipidemias, obesidad, etc.
Mediante esta técnica enzimática se puede determinar los valores de colesterol, HDL, LDL y triglicéridos de tal forma que podemos determinar los valores en cada caso para ver qué tipos de alteraciones existe y a que enfermedades está relacionado y hacer el respectivo tratamiento.
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Bibliografía 1. CANONG. Fisiologia Medica. 23rd ed. MEXICO: McGRAW-HILL; 2010. 2. HALL GY. Tratado de Fisiologia Medica,decimosegunda edicion ESPAÑA: S.A.ELSEVIER; 2011. 3. Mora SQ. manual de experimentos de laboratorio para bioquimica. primera edicion ed. Costa Rica: Universidad Estatal a distancia San Jose; 2007. 4. Gonzales JM. el laboratorio clinico y las dislipidemias. Elsevier. 2008 febrero; vol.55(Núm.2). 5. Cruz QCT. Guia de Practicas de Bioquimica II. cuantificacion de colesterol total y lipoproteina. CUSCO: UNSAAC, Departamento Academico de Quimica ; 2012. Report No.: practica N° 3. 6. Salgado QFRV. Manual de Practicas de Bioquimica Clinica. Determinacion de Colesterol, HDL, LDL y Trigliceridos Metodo Enzimatico. Mexico: Universidad Nacional Autonoma de Mexico, Departamento de Quimica; 2009. Report No.: Unidad II.
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