INDICE 1. 2. 3. 4. 5.
Intr Introd oduc ucci ción ón Generalidad Generalidades es de de los Lípidos: Lípidos: Clasi Clasificaci ficación ón Ácid Ácidos os gras grasos os Trigli iglicé céri rido doss Metabol Metabolism ismo o de lípido lípidoss 5.1. Síntesis de los ácidos grasos 5.2. Formación de triacilglicéridos 5.. Oxidación de los ácidos grasos !. Cole Colest ster erol ol ". Lipo Lipopr prot oteí eína nass ".1. Quilomicrones ".2. !"! ".. !"! ".#. #"! $. Determ Determina inació ción n del %erfil %erfil Lipíd Lipídico ico $.1. $ondiciones %reanalíticas $.2. "eterminación de Triglicéridos Total $.. "eterminación de $olesterol Total $.#. "eterminación de $olesterol #"!&directo' $.5. "eterminación de $olesterol #"! &(eacti)o %reci%itante' $.!. "eterminación de $olesterol !"! &directo' $.". "eterminación de !"!*colesterol de +orma indirecta $.$. "eterminación de !"!*$o de +orma indirecta ,. $alcul $alculo o del índice índice de -ter -terogen ogenici icidad dad de $astelli 1. "eterminación de !í%idos Totales 11. 11. alores alores re+erenciales del %er+il !i%ídico 1/.Trastornos li%ídicos 13.$aso 13. $aso clínico clínico
%E&'IL LI%IDIC( 1. Intr Introd od) )cc cció ión n 0l %er+il li%ídico lo constitue la cuanti+icación analítica de una serie de lí%idos 2ue son trans%ortados en la sangre %or los di+erentes ti%os de li%o%roteínas %lasmáticas. !a determinación de estos %arámetros es un %rocedimiento analítico ásico %ara el diagnóstico seguimiento de en+ermedades metaólicas %rimarias o secundarias. 0ntre estos %arámetros analíticos 2ue se %ueden determinar están5 • • •
Triglicéridos $olesterol total colesterol trans%ortado %or las !"!
Perfl Perfl Lipíd Lipídico ico-- Química Química Sangu Sanguíne ínea a Página ágina 1
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$olesterol trans%ortado %or las #"! $olesterol trans%ortado %or las !"! !í%idos totales
-ltos ni)eles de colesterol se asocian a riesgo de %adecer en+ermedades cardio)asculares en es%ecial a2uel unido a las !"! &colesterol malo'. 0l colesterol de las #"! &colesterol ueno' %uesto 2ue re%resenta a2uella +racción de colesterol 2ue se trans%orta al 6ígado %ara su metaoli7ación excreción %or )ía iliar no se asocia con riesgo de en+ermedad.
2. Generalidades de los Lípidos !os lí%idos constituen un gru%o com%le8o di)erso de moléculas 2ue tienen en com9n el ser insolules en agua %or lo cual necesitan de un sistema de trans%orte denominadas li%o%roteínas. !os lí%idos más im%ortantes 2ue se encuentran en el %lasma tenemos5 • • • •
Ácidos grasos lires Fos+olí%idos Triglicéridos $olesterol
0ntre las )ariadas +unciones de los lí%idos destacan las siguientes5 •
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Función de reser)a son la %rinci%al reser)a energética del organismo. :n gramo de grasa %roduce ,4;cal mientras 2ue los gl9cidos %roteínas %roducen cerca de 41;cal
a. Clasificación !í%idos Sim%les Ácidos grasos lires Triglicéridos $olesterol • • •
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!í%idos $om%uestos !i%o%roteínas Fos+olí%idos • •
. *cidos +rasos Perfl Lipídico- Química Sanguínea Página 2
0stán %resentes en el organismo en %e2ue=a %ro%orción son los 9nicos lí%idos 2ue circulan %or el %lasma sin estar unido a una li%o%roteína. Son ácidos de cadenas largas %ueden ser saturados e insaturados. 0stos ácidos grasos tienen como %rinci%al +unción la de ser)ir de +uente inmediata de energía. >ara ello los ácidos grasos son degradados en la matri7 mitocondrial %ara otener energía mediante un %roceso llamado ?*oxidación. O ser trans+ormados en triglicéridos. alores normales en %lasma oscilan entre 1 */mg
#. ,ri+lic-ridos Son com%uestos +ormados %or la esteri+icación de la glicerina con tres ácidos grasos son el %rinci%al ti%o de grasa trans%ortado %or el organismo. !os triglicéridos %resentes en el organismo %ueden tener un dole origen5 • •
!a asorción intestinal de las grasas digeridas &origen exógeno' !a síntesis en el 6ígado &origen endógeno'.
!a síntesis endógena de estos 9ltimos a su )e7 %uede llegarse a cao mediante dos mecanismos +undamentales5 • •
"irectamente a %artir de los ácidos grasos dis%oniles. - %artir del @licerol 3> &2ue %uede %ro)enir de la glucólisis' acetil*$o-.
!a maor %arte de los lí%idos 2ue se ingieren en la alimentación son triglicéridos en la lu7 intestinal se 6idroli7a %or la acción de la en7ima li%asa se asoren en la mucosa intestinal son re+ormados en triglicéridos son incor%orados en las li%o%roteínas son trans%ortados al torrente circulatorio %ara su distriución a la maoría de los te8idos donde se utili7an como energía o se almacenan en el te8ido adi%oso.
!os triglicéridos endógenos %rocedentes del 6ígado son la +uente %rinci%al de triglicéridos %lasmáticos o tamién se sinteti7an a %artir de los ácidos grasos lierados %or el 6ígado o %or el -cetil*$o- deri)ado del metaolismo de los gl9cidos.
5. Metabolismo de lípidos Perfl Lipídico- Química Sanguínea Página 3
!a maor %arte de los lí%idos 2ue se ingieren en la alimentación son triglicéridos. 0n el tuo digesti)o los enlaces ti%o AésterB de los ácidos grasos de los triglicéridos se rom%en %or acción de las li%asas es%ecialmente la li%asa %ancreática dando origen a ácidos grasos glicerol %asan a sangre %ueden ser utili7ados como +uente de energía o ser almacenados en +orma de triglicéridos.
a. íntesis de los /cidos +rasos5 !a !i%ogénesis es la reacción io2uímica %or la cual son sinteti7ados los ácidos grasos unidos al glicerol +orman triglicéridos o grasas de reser)a. 0l 6ígado el te8ido adi%oso la glándula mamaria son los tres sitios %rinci%ales donde se lle)a a cao la iosíntesis de los ácidos grasos los triglicéridos. !a síntesis de ácidos grasos se lle)a a cao en el citosol de las células el %roducto acti)o %ara la síntesis es el acetil $o- %ro)eniente de la glucólisis. "ado 2ue la acetil*$o- se genera en la matri7 mitocondrial dee de trans%ortarse 6asta el citosol %ara su uso en la síntesis de ácidos grasos. !a acetil*$o- no %uede atra)esar la memrana mitocondrial interna %or lo 2ue la acetil* $o- %or lo 2ue se condensa con el oxalacetato %ara +ormar citrato di+unde 6acia el citosol. !a acetil*$o- su+re una caroxilación irre)ersile catali7ada %or la acetil$o- caroxilasa %ara +ormar malonil*$o-. !a reacción de caroxilación del acetil $o- a malonil $o- es lo 2ue regula la )elocidad de la síntesis de los ácidos grasos. !a unión de un malonil*$o- &3$' a un acetil*$o- &/$' origina una molécula de cuatro caronos sale una de $O/. "es%ués se %roducen dos 6idrogenaciones mediantes gasto de C-">#. Se otienen así un acido graso acti)ado acilo*$o- de cuatro caronos. Todo este %roceso está catali7ado %or un con8unto de en7imas denominadas com%le8o ácido graso sintetasa &S-@'.
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b. 'ormación de triacil+lic-ridos !a síntesis de estas moléculas li%ídicas re2uiere las +ormas acti)adas de sus com%onentes5 •
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@licerol*3*+os+ato &se otiene a %artir de la di6idroxiacetona*3*+os+ato 2ue se +orma durante la glucólisis'. -cil*$o- &otenido a %artir del acido graso sinteti7ado'
!as moléculas de acido graso )an uniéndose mediante enlace ti%o éster +ormando %rimero un monoacilglicérido luego un diacilglicérido +inalmente triacilglicéridos. 0sto tiene lugar en las células 6e%áticas del te8ido adi%oso.
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c. (0idación de los /cidos +rasos 0l %rinci%al mecanismo de otención de energía de los lí%idos lo constitue la llamada ?eta*oxidación de los ácidos grasos 2ue se otienen de los triglicéridos mediante 6idrólisis catali7adas %or li%asas es%ecí+icas. •
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1. !os ácidos grasos se unirán a una molécula de coen7ima - &$o-' en el cito%lasma 2uedando acti)ados como acil*$o-. 2. 0l acil*$o- %enetra en la mitocondria gracias a un trans%ortador es%ecial la carnicitina. . 0l acil*$o- su+re la %rimera oxidación del carono D +ormándose un acil*$oinsaturado con dole enlace. #. 0l acil*$o- se 6idrata con lo 2ue se +orma un D* 6idroxiacil*$o- sin dole enlace. 5. 0l D*6idroxiacil*$o- su+re la oxidación del carono D +ormándose un D*cetoacil* $o-. !. 0l D*cetoacil*$o- interacciona con una molécula de $o- con lo 2ue se rom%e en dos moléculas un acetil*$o- de dos caronos un acil*$o- 2ue %osee dos caronos menos 2ue el 2ue inicio el ciclo de la D*oxidación.
!a acil*$o- %uede iniciar otro ciclo originar otro acil*$o- de dos caronos menos así sucesi)amente 6asta 2ue se otenga un acil*$o- de sólo dos caronos es decir un acetil*$o-. !as moléculas de acetil*$o- +ormadas en los ciclos de ?eta*oxidación %ueden seguir la ruta cataólica del ciclo de Eres degradarse totalmente %or res%iración .
!. Colesterol
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0l colesterol es un esterol de / carono el cuer%o 6umano %osee /gramo<;g %eso esta cantidad esta en intercamio constante con e l colesterol %lasmático. !as +unciones %rinci%ales del colesterol circulante son5 • •
$om%onente estructural esencial de las memranas. %recursor de los ácidos iliares %rimarios 6ormonas esteroideas %recursor de la )itamina "3 &colecalci+erol' "/ &orgocalci+erol'.
0l colesterol %resente en el organismo tiene un dole origen. $olesterol exógeno el 2ue %rocede de la alimentación se encuentra en su maor %arte en +orma lire. $olesterol endógeno aun2ue %uede ser sinteti7ado %or todas las células se +orma %rinci%almente a ni)el 6e%ático e intestinal es eliminado %or el 6ígado con la ilis o se utili7a %ara la síntesis de ácidos iliares.
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!a síntesis del colesterol se %roduce a %artir de su %recursor el acetato en su +orma acti)ada &acetil*$o-' en una )ía com%le8a con dos eta%as5 >rimera eta%a5 +ormación del iso%reno es la unidad ásica del colesterol se +orma el 3 6idroxi*3 metilglutarilG $o- %or medio de una en7ima #H@co- reductasa +ormándose me)alonato. Segunda eta%a5 la condensación %rogresi)a del iso%reno %ara +ormar un com%uesto de 3 caronos 2ue se cicla 6asta otener el colesterol en esta %arte inter)iene el sistema citocromo >4. Huc6as )eces el colesterol se esteri+ica con un -@ dando lugar a ésteres de colesterol.
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0l colesterol se trans%orta en el %lasma %redominante como ésteres del colesterol asociados a las li%o%roteínas. • • •
!as !"! trans%ortan el J del colesterol. !as #"! del 1 al /J 0l resto circula unido a las !"! a los Quilomicrones
0l mecanismo más im%ortante %ara degradar eliminar colesterol es la síntesis de ácidos iliares las cuales son secretadas en la ilis 6acia el intestino %ara desec6arse %or 6eces +ecales
". Lipoproteínas Perfl Lipídico- Química Sanguínea Página 7
Son com%le8os macromoléculas +ormados %or triglicéridos colesterol Fos+olí%idos constituen un sistema de trans%orte. Se %ueden clasi+icar tomando en cuenta su5 densidad migración electro+orética contenido de triglicéridos colesterol +lotación. • • • •
Quilomicrones !i%o%roteínas de mu a8a densidad &!"!' !i%o%roteínas de a8a densidad &!"!' !i%o%roteínas de alta densidad &#"!'
a. )ilomicrones Son moléculas grandes a%arecen en el %lasma tras la ingestión de grasas son sinteti7adas en las células intestinales. Son rico en triglicéridos su )ida media en sangre es mu corta &menos de 3minutos' su %rinci%al +unción es el trans%orte de los lí%idos exógenos sore todo de triglicéridos.
b. LDL Son li%o%roteínas de mu a8a densidad son sinteti7adas en el 6ígado tamién en el intestino a %artir de los lí%idos exógenos endógenos. Su +unción es la de trans%ortar los triglicéridos endógenos.
c. LDL !as li%o%roteínas de a8a densidad se originan como consecuencia de la degradación de las !"! en el torrente circulatorio. Su +unción esencial es la de trans%ortar el KJ del colesterol circulante 6acia las células de los te8idos %ara su utili7ación. 0ste es el colesterol 2ue en exceso %uede 2uedar ad6erido a las %aredes de los )asos sanguíneos %or lo 2ue es recomendale mantener a8os los ni)eles del colesterol !"!.
d. 3DL 0s la li%o%roteína de alta densidad tiene una densidad esto se dee a su alto contenido de %roteínas &/J %roteínas 4KJ lí%idos'. !i%o%roteínas de alta densidad o #"! recoge el colesterol sorante de los te8idos lo traslada 6asta el 6ígado donde será eliminado. >or tanto cuanto maor sean los ni)eles del colesterol #"! maor cantidad de colesterol será eliminado de la sangre.
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$. Determinación del %erfil Lipídico !a determinación de las concentraciones de lí%idos li%o%roteínas %roteínas relacionadas circulantes %ermite el diagnóstico el tratamiento el seguimiento de las di+erentes disli%emias. • • • • • •
Triglicéridos $olesterol total colesterol trans%ortado %or las !"! $olesterol trans%ortado %or las #"! $olesterol trans%ortado %or las !"! !í%idos totales
a. Condiciones preanalíticas 0s necesario estandari7ar todas las circunstancias 2ue rodean al análisis %ara e)itar todos los %osiles +actores 2ue in+luen en los ni)eles de lí%idos li%o%roteínas5 •
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Co se deen reali7ar estudios en %acientes 2ue están en+ermos tienen in+ecciones emara7adas o 6an tenido in+arto de miocardio %rocesos 2uir9rgicos dentro de los dos meses %re)ios al estudio. 0l %aciente dee mantener su dieta 6aitual el %eso %or lo menos / semanas antes de la extracción. 0l %aciente no dee reali7ar e8ercicios )igorosos durante /4 6s antes de la extracción. Oser)ar estrictamente las 1/ 6oras de auno. 0l %aciente dee %ermanecer sentado durante min. >re+erilemente reali7ar la determinación en suero. $olesterol total $olesterol #"! deen anali7arse lo antes %osile .
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b. Determinación de ,ri+lic-ridos ')ndamento del M-todo: En4im/tico colorim-trico !os triglicéridos son 6idroli7ados %or las li%o%roteín li%asa lierando glicerol ácidos grasos. 0l glicerol es +os+orilado %or glicerol+os+ato des6idrogenasa -T> en %resencia de glicerol 2uinasa %ara %roducir glicerol*3*+os+ato -">. 0l @3> es con)ertido a di6idroxiacetona +os+ato &"->' # /O/ %or la glicerol+os+ato des6idrogenasa &@O"'. -l +inal el # /O/ reacciona en %resencia de la %eroxidasa con 4*aminoanti%irina %* cloro+enol %ara dar origen a un com%uesto coloreado de color cere7a &Quinona' ca%a7 de asorer a nm. !a intensidad de color +ormado es %ro%orcional a la concentración de triglicéridos %resente en la muestra.
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M)estra Suero otenido lire de 6emólisis &%ara e)itar resultados +alsamente ele)ados' >lasma otenido con 0"T- o 6e%arina. 0l analito es estale durante 3 días entre / KL$ 3 días a * 1L$. !a sangre dee ser cogida luego de aunar de 1/ a 14 6oras.
c. Determinación de Colesterol ,otal $olesterol total es la suma de todas las +racciones &$o*#"! $o*!"! $o* !"!' ')ndamento del M-todo: en4im/tico colorim-trico 0l colesterol %resente en la muestra origina un com%uesto coloreado 2ue es ca%a7 de asorer a nm. Seg9n la siguiente reacción5
!a intensidad del color +ormado es %ro%orcional a la concentración de colesterol %resente en la muestra.
M)estra Suero otenido lire de 6emólisis o %lasma cogido con 6e%arina. 0l $olesterol es estale en el %lasma o en lo suero %or 6asta días entre / KL$ 6asta días entre 1 3M$.
%rocedimiento de Medida
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alores referenciales 3asta 2m+6dl
d. Determinación de Colesterol 3DL7directo8 ')ndamento del M-todo: 0n7imático G $olorimétrico. 0l #"! "irecto %ermite una determinación directa sin la necesidad de %reci%itación %re)ia ni tratamiento de la muestra. Son utili7ados reacti)os 2ue reali7an la dosi+icación selecti)a del colesterol conectado al #"!. !as su%er+icies de las li%o%roteínas de a8a densidad &!"!' mu a8a densidad &!"!' de los 2uilomicrones son estaili7ados %or la asorción del %olianión no su+ren la acción de las en7imas modi+icadas %resentes en el reacti)o. 0l #"! sin emargo se soluili7a %or la acción de un detergente %ermitiendo la acción en7imática sore el colesterol conectado a él. "e esta +orma el colesterol*#"! %resente en la muestra origina un com%uesto coloreado 2ue es ca%a7 de asorer a nm. !a intensidad de la coloración +ormada es %ro%orcional a la concentración de colesterol #"! en la muestra.
M)estra Suero otenido lire de 6emólisis %lasma cogido con 6e%arina. 0l $olesterol #"! es estale en el suero %or 6asta días entre / KL$.
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e. Determinación de Colesterol 3DL 7&eacti9o precipitante8 ')ndamento del M-todo !as li%o%roteínas de alta densidad &#"!' se se%aran %reci%itando selecti)amente las li%o%roteínas de a8a mu a8a densidad &!"! !"!' %resencia de +os+otungstato iones magnesio. !as #"! 2uedan en el sorenadante se%arado %or centri+ugación donde se reali7a la determinación del colesterol ligado a las mismas em%leando el sistema en7imático $olesterol oxidasa<>eroxidasa con colorimetría seg9n Trinder &Fenol<4*-F'. $uo colesterol se cuanti+ica es%ectro+otométricamente a nm.
M)estra: Suero o %lasma
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f. Determinación de Colesterol LDL 7directo8 ')ndamento del M-todo: 0l %resente método es un ensao 6omogéneo sin %reci%itación en dos %asos. 0n el %rimero se agrega un tensioacti)o &(eacti)o 1' 2ue soluili7a las %artículas li%o%roteicas no*!"!. 0l colesterol lierado es consumido %or el colesterol es* terasa el colesterol oxidasa en una reacción sin desarrollo de color. :n segundo tensioacti)o &(eacti)o /' soluili7a las %artículas de !"! +ormándose %or la %resencia de en7imas un (eacti)o cromogénico un color 2ue es ca%a7 de asorer a Nnm &,*nm'. !a intensidad de la coloración +ormada es %ro%orcional a la concentración de !"! colesterol. Perfl Lipídico- Química Sanguínea Página 14
M)estra : suero o %lasma %rocedimiento de medida
+. Determinación de LDLcolesterol de forma indirecta !a determinación de esta +racción tamién se %uede calcular de +orma indirecta mediante la +órmula de Friedeald solo es a%licale si los triglicéridos son ! 4mg
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;. Determinación de LDLCo de forma indirecta >ara la determinación de colesterol*!"! tamién se reali7a indirectamente mediante una +órmula matemática a%licale solo cuando la concentración de triglicéridos sea ! 4mg
!a segunda +orma de calcular el n9mero de !"! es5
<. Calc)lo del índice de =tero+enicidad de Castelli. 0l cociente o índice aterogénico es la relación matemática entre los ni)eles de colesterol total en el organismo colesterol #"! o li%o%roteínas de alta densidad. alores normales de este índice es menor a 4 mientras 2ue a maor índice aterogénico maores son las %roailidades de 2ue se +orme una %laca de ateroma en las arterias de origen a aterosclerosis.
1. Determinación de Lípidos ,otales ')ndamento del M-todo !os lí%idos insaturados reaccionan con el ácido sul+9rico en caliente con +ormación de iones caronio. 0n una segunda eta%a éstos en %resencia de +os+o)ainillina dan una coloración rosada. !a intensidad del color +ormado es %ro%orcional a la concentración de lí%idos totales %resente en la muestra.
M)estra Suero o %lasma. Perfl Lipídico- Química Sanguínea Página 16
0stailidad de la muestra5 !os lí%idos totales son estales /4 6 a tem%eratura amiente &1*/L$' o 3 días a /*KL$
%rocedimiento de medida
11. alores referenciales del perfil Lipídico
,ri+lic-ridos Colesterol total 3DL Co LDL Co LDLCo Perfl Lipídico- Química Sanguínea Página 17
alores referenciales 6asta 1 mg
Lípidos ,otales: >ndice de =tero+enicidad
4 G K mg
12. ,rastornos lipídicos @eneralmente se denominan trastornos li%ídicos a cual2uier alteración en los ni)eles normales de los lí%idos en sangre. "e +orma maoritaria nos )amos a re+erir al aumento de los ni)eles de $olesterol &#i%ercolesterolemia' de Triglicéridos &#i%ertriglicidemia' aun2ue 6a otras alteraciones a tener en cuenta como es la disminución del colesterol #"!. !a 9s2ueda acti)a de %acientes con 6i%erli%emia está 8usti+icada %or su gran im%ortancia como +actor de riesgo de en+ermedad cardio)ascular a 2ue es 8unto con la 6i%ertensión el taa2uismo uno de los %rinci%ales +actores 2ue %redis%onen a %adecer una cardio%atía coronaria. !a 6i%erli%emia es un estado io2uímico asintomático aun2ue %uede 6aer síntomas ines%ecí+icos como dolores adominales alteraciones 6e%áticas. Si %erdura en el tiem%o está asociado a la aterosclerosis sus com%licaciones. !a aterosclerosis es un trastorno com9n 2ue ocurre cuando en la ca%a íntima de las arteriolas arterias se acumulan grasa colesterol otras sustancias 0stos de%ósitos +orman estructuras duras llamadas de %lacas de ateroma 2ue con el tiem%o )an a %roducir ateroesclerosis es decir un estrec6amiento o endurecimiento de las arterias %or de%ósito de colesterol en sus %aredes. $omo %recaución se reali7a un estudio li%ídico a %ersonas con antecedentes +amiliares5 •
0n+ermedades cardio)asculares
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"iaetes mellitus
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>resencia de xantomas o turide7 en suero.
!os ni)eles %lasmáticos de lí%idos están alterados transitoriamente en5 emara7o cirugía traumatismo in+ecciones stress adelga7amiento rá%ido %or consumo de +ármacos.
1. Caso clínico >aciente de 3 a=os mu8er no +uma no es diaética es 6i%ertensa conocida desde 1 a=os 2ue trata con enala%ril / P 6idroclorotia7ida 1/. 1 com%
0xamen +ísico5
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>esoN4R talla1.3. IH$/,.3 >erímetro de cinturaKK cm -nálisis de laoratorio5 @lucemia asal5 K mg
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E0iste probabilidad de ?)e esta paciente pade4ca de enfermedad cardio9asc)lar@
&esp)esta:
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